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4 468 羽 表1 全 症 例 の 血 中HBV関 田 元 連 マー カー と肝 組 織 中HBVDNAの 関係 * 非 癌 部 に つ い て も検 討 制限酵素未処理 右 端 の 数 字 はsize 図1 代 表 的 オ ー トラ ジオ グラ ム Hind markerを 示 す(単 位Kbp) IIIに 上 る 切 断

5 肝 細 胞 癌 に お け るHBVDNAの 組 込み HBV関 (症 例7) も,肝 469 連 マ ー カー は 全 て 陰 性 で あ っ た. 2例 と 転移 巣 及 び転移 のな い部分 の両方 に つ い て 検 討 した が,肝 組 織 中HBVDNAは 検 出 され な か っ た. 4.健 常肝 血 中HBV関 連 マ ー カー 陰 性 で,肝 疾 患 以 外 の 疾 患 で 死 亡 した 患 者4例 て 使 用 した.全 の 肝 組 織 を健 常 肝 と し 例, HBVDNAは 認め られ なか っ た. 考 案 検 討 した14例 のHCC患 男 女 比,及 才, 3.7:1,及 を,日 者 に お け る平 均 年 令, び 血 中HBsAg陽 び21%で 性 率 は,各 あ っ た.こ 本 肝 癌 研 究 会 に よ る 第5回 果13)と 比 較 す る と, 以 外 は,よ HBsAg陽 々57.9 れ らの 数 字 全 国集 計 の結 性 率 がやや 低 い く一 致 し て お り,症 例 に 大 きな 偏 り は な い もの と思 わ れ る. HCC14例 中, HBVDNAの た の は5例(36%)で のHCCに U: た.現 制 限 酵素 未処 理 H: Hind IIIに よ る 切 断 E: EcoRlに 1, 3, 5: 癌 部 2, 6: 4, HBsAg陽 性 例 に お け る 組 込 み の 陽 性 率 は, 分 布 し,平 性 のHCCに HBVDNAの 図2 性 在 までに 報告 されて い る他施 設 の成績 で %に 非癌 部 あ っ た が,血 中HBsAg陽 限 れ ば, 3例 全 例 が 組 込 み 陽 性 で あ っ も, HBsAg陽 よ る切 断 組 込 み が 認 め られ 均92%で は,か あ る3) 8). な りの 高 頻 度 で, 組 込 み が 見 られ る とい う点 で,諸 癌 部 と非 癌 部 の 比 較 家 の 成 績 は 一 致 し て い る, られ る組 込 み の バ ン ドの パ ター ン は,症 例 ごと に 異 な っ て い た. の み 陽 性 のHCCで また, 14例 中10例 で は,癌 部 だ け で な く,非 癌 部 肝 組 織 に つ い て も検 討 し た が,癌 部 で, HBVDNAの 部 と非 癌 存 在 様 式 に ちが い の あ る症 例 は 存 在 し な か っ た.し か し,癌 部 に 組 込 み の 見 られ た 症 例 の 非 癌 部 に お け るHBVDNAの は,癌 部 に 比 べ て,か 2.慢 量 な り 少 な か っ た.(図2) 3例 と も, freeのhbvdnaの の検 討 で は み 存 在 し,組 込 込 み は 全 く見 られ な か っ た とす る報 告 か ら,全 例 に組 込み が見 られ た とす る報 告 ま で 存 在 し,一 定 の 成 績 は 得 ら れ て い な い3) 8).著者 は4例 中2例(50%)に を検 出 し て お り, HBsAg陰 抗 体 陽 性,即 ち,過 組込 み 性 で も, HBV関 去 にHBV感 転 移 性 肝 癌2例 ま た,血 れ ず,現 ら5)は, の う ち,症 中HBsAg陰 例19は,大 中 にHBV関 連 染 の既 往 が あ 肝細 胞 ゲノム中 に組 例18は,肺 性, anti-hbs陽 癌の肝 性で 腸 癌 の 肝 転 移 例 で,血 中 連 マ ー カー が 全 く検 出 さ 在 及 び 過 去 を通 じてHBV感 っ た と考 え られ るHCC例 移性 肝癌 あ っ た.症 は,組 連 抗体 込 まれ た形 で 存 在 し得 る こ とが 示 さ れ た. 性 の 慢 性 肝 炎3例 み は 認 め ら れ なか っ た. 転 移 例 で,血 性 で, HBV関 れ ば, HBVDNAはhostの 性 肝炎 血 中HBsAg陽 3.転 こ れ に 対 し, HBsAg陰 7例 に お い て, HBVDNAの 検 出 さ れ た と報 告 して い る,一 血 中HBV関 染 は なか の 場 合 に もBrechot 方,樋 組 込 みが 野 ら8)は, 連 マ ー カ ー 陰 性 のHCC44例 に 組 込 み が 認 め ら れ た が,そ の う ち2例 中3例 は 肝組

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7 1. Szmuness, W.: Hepatocellular carcinoma and hepatitis B virus: Evidence for a causal associa tion. Prog. Med. Virol. 24, 40-69, Beasley, R. P.: Hepatitis B virus as the etiologic agent in hepatocellular carcinoma - Epidemiologic considerations. Hepatology 2, 21 S-26 S, Shafritz, D. A., Shouval, D., Sherman, H. I., Hadziyannis, S. J. and Kew, A. C.: Integration of hepatitis B virus DNA into the genome of liver cells in chronic liver disease and hepatocellular carcinoma. N. Engl. J. Med. 305, , Koshy, R., Maupas, R., Muller, R. and Hofschneider, P. H.: Detection of hepatitis B virus-specific DNA in the genomes of human hepatocellular carcinoma and liver cirrhosis tissues. J. Gen. Virol. 57, , Brechot, C., Pourcel, C., Hadchouel, M., Dejean, A., Louise, A., Scotto, C. and Tiollais, P.: State of hepatitis B virus DNA in liver diseases. Hepatology 2, 27 S-34 S, Chen, D. S., Hoyer, H., Nelson, J., Purcell, R. H. and Gerin, J. L.: Detection and properties of hepatitis B viral DNA in liver tissues from patients with hepatocellular carcinoma. Hepatology 2, 42 S-46 S, Hino, O., Kitagawa, T. and Sugano, H.: Relationship between serum and histochemical markers for hepatitis B virus and rate of viral integration in hepatocellular carcinomas in Japan. Int. J. Cancer 35, 5-10, Southern, E. M.: Detection of specific sequences among DNA fragments separated by gel electrophoresis. J. Molec. Biol. 98, , Rigby, P. W., Dieckman, M. A., Rhodes, C. and Berg, P.: Labelling of deoxyribonucleic acid to high specific activity in vitro by nick translation with DNA polymerase I. J. Molec. Biol. 113, , Fujiyama, A., Miyanohara, A., Nozaki, C., Yoneyama, T., Ohtomo, N. and Matsubara, K.: Cloning and structural analyses of hepatitis B virus DNAs, subtype adr. Nucleic Acids Res. 11, , Shafritz, D. A.: Integration of HBV-DNA into liver and hepatocellular carcinoma cells during persistent HBV infection. J. Cell. Biochem. 20, , Brechot, C., Hadchouel, M., Scotto, J., Fonck, M., Potet, F., Vyas, G. N. and Tiollais, P.: State of hepatitis B virus DNA in hepatocytes of patients with hepatitis B surface antigen-positive and-negative liver diseases. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78, , 1981.

8 15. Kam, W., Rall, L. B., Smuckler, E. A., Schmid, R. and Rutter, W. J.: Hepatitis B viral DNA in liver and serum of assymptomatic carriers. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 79, , 1982.

9 Integration of HBV DNA in hepatocellular carcinoma Hajime HADA First Department of Internal Medicine, Okayama University Medical School (Director: Prof. H. Nagashima) In order to clarify the relationship between hepatocellular carcinoma (HCC) and integration of hepatitis B virus (HBV) DNA into the host hepatocyte genome, the states of HBV DNA in 14 cases of HCC, 3 cases of chronic hepatitis, 2 cases of metastatic hepatic carcinoma and 4 normal livers were examined by the Southern blot hybridization technique. All 3 cases of HCC positive for serum HBsAg had both free and integrated HBV DNA. Integration of HBV DNA without free HBV DNA was detected in 2 cut of 4 HCC cases negative for serum HBsAg but positive for more than one of the HBV-related antibodies. Only free HBV DNA was observed in all 3 cases of chronic hepatitis positive for serum HBsAg. The remaining cases had no HBV DNA in their liver tissues.

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