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1 タンパク質電気泳動 ウエスタンブロッティング関連試薬 ver.3 1. プレキャストゲル 電気泳動装置 2. りん酸化タンパク質研究試薬 3. SDS-PAGE 関連化合物 ゲル作製試薬 還元剤など 4. ランニングバッファー / サンプルバッファー 5. タンパク質分子量マーカー 6. ゲル染色用試薬 7. ブロッティング用メンブレン 8. 転写バッファー ブロッキング試薬 緩衝液 洗浄液 9. 抗体関連試薬 10. 発色試薬 11. 化学発光試薬 イメージャー 12. タンパク質抽出試薬 13. レドックス応答性タンパク質解析キット

2 1 2 Phos-tag 3 SDSTEMEDAPS CBB MS TMB POD ABC 28 BCIP/NBT LD

3 ウェル数 ウェル容積 (μ) プレートサイズ (mm) ゲルサイズ (mm) 1

4 スーパーセップ エース,6%, 13 ウェル 品名規格コード No. 容量希望納入価格 ( 円 ) 枚 18,000 スーパーセップ エース,7.5%, 13 ウェル 枚 14,000 スーパーセップ エース,7.5%, 17 ウェル 枚 14,000 スーパーセップ エース,10%, 13 ウェル 枚 14,000 スーパーセップ エース,10%, 17 ウェル 枚 14,000 スーパーセップ エース,12.5%, 13 ウェル 枚 14,000 スーパーセップ エース,12.5%, 17 ウェル 枚 14,000 スーパーセップ エース,15%, 13 ウェル 枚 14,000 スーパーセップ エース,15%, 17 ウェル 枚 14,000 スーパーセップ エース,5-12%, 13 ウェル 枚 18,000 スーパーセップ エース,5-12%, 17 ウェル 電気泳動用 枚 18,000 スーパーセップ エース,5-20%, 13 ウェル 枚 14,000 スーパーセップ エース,5-20%, 17 ウェル 枚 14,000 スーパーセップ エース,10-20%, 13 ウェル 枚 14,000 スーパーセップ エース,10-20%, 17 ウェル 枚 14,000 スーパーセップ エース,15-20%, 13 ウェル ( トリシンゲル ) 枚 20,000 スーパーセップ エース,15-20%, 17 ウェル ( トリシンゲル ) 枚 20,000 スーパーセップ 12.5%, 2D 2 次元電気泳動用 ( ウェルなし ) ゲルです スーパーセップ 5 ~ 20%, 2D 2 次元電気泳動用 ( ウェルなし ) ゲルです 枚 22, 枚 18,000 品名規格コード No. 容量希望納入価格 ( 円 ) イージーセパレーター電気泳動用 セット 52,000 2

5 SDS-PAGE ゲルに混ぜるだけ プレキャスト Phos-tag R 入りゲル 実験操作は生理的条件下 (ph 7.5) Ready-to-use のりん酸化ペプチド精製チップ りん酸化分子のみを高感度に検出 PVDF 膜上の全りん酸化タンパク質を検出 3

6 このような場合におすすめです各りん酸化フォームを同時に見たい 定量したい total 抗体 / 抗りん酸化抗体でそれぞれ検出するのが面倒目的のりん酸化部位の抗りん酸化抗体がない目的タンパク質がりん酸化しているかどうか調べたい各りん酸化フォームのりん酸化部位を突き止めたい 解析法 WB WB WB WB MS 検索 Phos-tag ガイドブック pdf Phos-tag アクリルアミド AAL-107 品名 Phos-tag アクリルアミド AAL-107 5mM 水溶液 メーカー ナード研 コード No. 容量 ( メーカーコード ) 希望納入価格 ( 円 ) (AAL-107M) 2mg 25, (AAL-107) 10mg 60, m (AAL-107S1) 15,000 4

7 製品仕様 ウェル数 ウェル容積 30 μ 25 μ プレートサイズ mm ゲルサイズ mm 品名 規格 コード No. 容量 ( メーカーコード ) 希望納入価格 ( 円 ) スーパーセップ Phos-tag R (50 μmol/l),6%, 13 ウェル 枚 30,000 スーパーセップ Phos-tag R (50 μmol/l),6%, 17 ウェル 枚 30,000 スーパーセップ Phos-tag R (50 μmol/l),7.5%, 13 ウェル 枚 30,000 スーパーセップ Phos-tag R (50 μmol/l),7.5%, 17 ウェル 枚 30,000 スーパーセップ Phos-tag R (50 μmol/l),10%, 13 ウェル 枚 30,000 スーパーセップ Phos-tag R (50 μmol/l),10%, 17 ウェル 枚 30,000 電気泳動用スーパーセップ Phos-tag R (50 μmol/l),12.5%, 13 ウェル 枚 30,000 スーパーセップ Phos-tag R (50 μmol/l),12.5%, 17 ウェル 枚 30,000 スーパーセップ Phos-tag R (50 μmol/l),15%, 13 ウェル 枚 30,000 スーパーセップ Phos-tag R (50 μmol/l),15%, 17 ウェル 枚 30,000 スーパーセップ Phos-tag R (50 μmol/l),17.5%, 13 ウェル 枚 30,000 スーパーセップ Phos-tag R (50 μmol/l),17.5%, 17 ウェル 枚 30,000 5

8 品名 メーカー コード No. ( メーカーコード ) 容量希望納入価格 ( 円 ) Phos-tag アガロース マナック (AG-501) (AG-503) 0.5m 20,000 3m 98,000 品名 メーカー コード No. ( メーカーコード ) 容量希望納入価格 ( 円 ) Phos-tag チップ ナード研 (AG2-103) 8 本 39,000 6

9 Phos-tag R との結合によりイオン化効率が増大し りん酸化 LPA の検出感度が向上した キット内容 分子式 分子量 容量 Phos-tag R MS-101L [( C 27 H 29 N 6 O 64 Zn 2 ] mg Phos-tag R MS-101H[( C 27 H 29 N 6 O 68 Zn 2 ] mg Phos-tag R MS-101N[( C 27 H 29 N 6 OZn 2 ] mg 品名 メーカー コード No. ( メーカーコード ) 容量希望納入価格 ( 円 ) Phos-tag 質量分析用キット ナード研 (MS-101KIT) 1 セット 100,000 品名 メーカー コード No. ( メーカーコード ) 容量希望納入価格 ( 円 ) Phos-tag ヒ オチン BTL-104 Phos-tag ビオチン BTL-111 1mM 水溶液 ナード研 (BTL-104) (BTL-111S1) 10mg 70, m 20,000 7

10 Phos-tag R 濃度 0.3 m 包装 2 mg 包装 10 mg 包装 20 μ 約 9 枚約 20 枚約 100 枚 50 μ 約 4 枚約 8 枚約 40 枚 100 μ 約 2 枚約 4 枚約 20 枚 8

11 DTT 0.1M 程度は問題ありません 尿素 8 M で使用しても問題ありません SDS 0.5 % 以上で結合に影響があります デオキシコール酸ナトリウム 0.25 % 以上で結合に影響があります Nonidet P40 1 % までは問題ありません Tween 20 1% までは問題ありません CHAPS 0.2% までは問題ありません β-グリセロりん酸塩 使用しないでください ピロりん酸塩 使用しないでください EDTA 高濃度だと影響があります 9

12 項目 品名 コード No. 規格 / メーカー ( メーカーコード ) 容量 希望納入価格 ( 円 ) 30w/v% アクリルアミド / ビス混合液 (37.5:1) m 8,400 30w/v% アクリルアミド / ビス混合液 (29:1) m 8,600 アクリルアミド 30w/v% アクリルアミド / ビス混合液 (19:1) m 12,000 電気泳動用 / ビス混合液 40w/v% アクリルアミド / ビス混合液 (37.5:1) m 12,000 40w/v% アクリルアミド / ビス混合液 (29:1) m 12,000 40w/v% アクリルアミド / ビス混合液 (19:1) m 12, g 1,650 アクリルアミド 99.0% 電気泳動用 g 2, g 4,100 アクリルアミド g 2,700 アクリルアミド g 5,000 プロテオミクス用 99.9%, Protease, Nuclease-free g 14, kg 25,000 ビス N,N'- メチレンビス ( アクリルアミド ) g 3,100 電気泳動用 99.0% g 7,900 N,N'- メチレンビス ( アクリルアミド )-HG g 5,600 分子生物学用 99.0%, Nuclease-free g 10,500 ゲルバッファー 分離ゲル用緩衝液 ( 4) 組成 :0.4w/v% SDS in 1.5mol/l Tris-HCl ph8.8 電気泳動用 m 4,200 濃縮ゲル用緩衝液 ( 4) 組成 :0.4w/v% SDS in 0.5mol/l Tris-HCl ph6.8 電気泳動用 m 4,200 TEMED APS SDS Tris-HCl N,N,N',N'- テトラメチルエチレンジアミン 99.0% 電気泳動用 m 1,900 N,N,N',N'- テトラメチルエチレンジアミン m 4,000 プロテオミクス用 98.0%, Protease, Nuclease-free m 12,000 ペルオキソ二硫酸アンモニウム g 1,700 電気泳動用 99% g 2,200 ペルオキソ二硫酸アンモニウム g 2,000 分子生物学用 99.0%, Nuclease-free g 2,800 10w/v% ペルオキソ二硫酸アンモニウム溶液 [10w/v% APS] 電気泳動用 m 4, g 2,300 ドデシル硫酸ナトリウム 95.0%(capillary GC), 98.0%(Titration) 生化学用 g 4, g 13, g 2,800 ドデシル硫酸ナトリウム 95.0%(capillary GC), 98.0%(Titration), Nuclease-free 分子生物学用 g 5, g 16, (20765) 100g 5,100 ドデシル硫酸ナトリウム塩, ペレット > 99%(GC) SERVA 10% SDS 溶液ニッポンジーン 2- アミノ -2- ヒドロキシメチル -1,3- プロパンジオール塩酸塩 99.0% 生化学用 (20765) 250g 7, (20765) 1kg 20, m 5, m 9, g 4, g 15, kg 25,000 10

13 コード No. 項目品名規格 / メーカー ( メーカーコード ) Tris-HCl Tris 塩酸 グリシン トリシン 還元剤 2- アミノ -2- ヒドロキシメチル -1,3- プロパンジオール塩酸塩 99.0%, Nuclease-free 1M Tris-HCl(pH7.0) オートクレーブ済み, Nuclease-free 1M Tris-HCl(pH7.5) オートクレーブ済み, Nuclease-free 1M Tris-HCl(pH8.0) オートクレーブ済み, Nuclease-free 1M Tris-HCl(pH8.5) オートクレーブ済み, Nuclease-free 1M Tris-HCl(pH8.8) オートクレーブ済み, Nuclease-free 1M Tris-HCl(pH9.0) オートクレーブ済み, Nuclease-free 2- アミノ -2- ヒドロキシメチル -1,3- プロパンジオール 99.0% 2- アミノ -2- ヒドロキシメチル -1,3- プロパンジオール 99.0%, Nuclease-free 容量希望納入価格 ( 円 ) 分子生物学用 g 16,000 ニッポンジーン ニッポンジーン ニッポンジーン ニッポンジーン ニッポンジーン ニッポンジーン 生化学用 分子生物学用 m 5, m 9, m 5, m 9, m 5, m 9, m 5, m 9, m 5, m 9, m 5, m 9, g 3, g 8, kg 32, g 3, g 9, kg 15,000 塩酸和光一級 m 740 塩酸 Protease, Nuclease-free グリシン 99.0% グリシン 99.0%, Nuclease-free トリシン 99.0% 2- メルカプトエタノール 98.5% 2- メルカプトエタノール 98.5%, Nuclease-free (±)- ジチオトレイトール [DTT] 97.0% (±)- ジチオトレイトール [DTT] 97.0%, Nuclease-free 3- メルカプト -1,2- プロパンジオール 98.0% 3- メルカプト -1,2- プロパンジオール 98.0%, Nuclease-free TCEP 塩酸塩 98.0% プロテオミクス用 m 3, m 5, g 1,250 試薬特級 g 1, g 2,400 分子生物学用 g 2, g 3,700 同仁化学 (GB19) 25g 3, (GB19) 100g 8, g 2,100 生化学用 g 5, m 5 5,200 分子生物学用 m 2, m 5, mg 2, g 3,600 SH 基酸化防止用 g 9, g 17, g 33, mg 2,800 分子生物学用 g 4, g 10, g 35,000 和光特級 m 2, m 13,000 分子生物学用 m 5, m 14, g 6,000 生化学用 g 35, g 140,000 11

14 項目 品名 コード No. 規格 / メーカー ( メーカーコード ) 容量 希望納入価格 ( 円 ) m 1,100 グリセリン 99.0% 試薬特級 m 1, L 6,650 グリセリン m 3,000 分子生物学用 99.0%, Nuclease-free m 6, g 2,400 ブロモフェノールブルー試薬特級その他 g 6, m 960 蒸留水 L 2, L 6 12, m 4,000 脱イオン蒸留水, 無菌 ニッポンジーン m 6 15, m 9,000 品名 規格 コード No. 容量 希望納入価格 ( 円 ) 泳動用緩衝液 ( 10) 組成 :250mmol/l Tris, 1.92mol/l Glycine, 1w/v% SDS L 5,200 SDS-PAGE バッファー, ph8.5 組成 :25mmol/l Tris, 192mmol/l Glycine, 0.1w/v% SDS L 13,000 コック付きキャップ付属, 希釈不要 電気泳動用 10 トリス - グリシンバッファー組成 :250mmol/l Tris, 1.92mol/l Glycine L 7,200 トリシン泳動用緩衝液 ( 10) 組成 :0.5mol/l Tris, 0.5mol/l Tricine, 1w/v%SDS L 14, 項目品名規格コード No. 容量希望納入価格 ( 円 ) サンプルバッファー ( 還元剤不含 ) サンプルバッファー ( 還元剤含有 ) 試料用緩衝液 (2-ME -)( 2) 組成 : mol/l Tris-HCl, 4w/v% SDS, 20w/v% Glycerol, 0.002w/v% BPB. 試料用緩衝液 (2-ME -)( 4) 組成 : 0.25mol/l Tris-HCl, 8w/v% SDS, 40w/v% Glycerol, 0.02w/ v% BPB 試料用緩衝液 (2-ME +)( 2) 組成 : mol/l Tris-HCl, 4w/v% SDS, 20w/v% Glycerol, 0.002w/v% BPB, 10v/v% 2-Mercaptoethanol. 試料用緩衝液 (2-ME +)( 4) 組成 : 0.25mol/l Tris-HCl, 8w/v% SDS, 40w/v% Glycerol, 0.02w/ v% BPB, 20v/v% 2-Mercaptoethanol. 試料用緩衝液 (3- メルカプト -1,2- プロパンジオール含有 )( 2) 組成 : mol/l Tris-HCl, 4w/v% SDS, 20w/v% Glycerol, 0.01w/v% BPB,10v/v% 3-mercapto-1,2-propandiol. 試料用緩衝液 (3- メルカプト -1,2- プロパンジオール含有 )( 4) 組成 : 0.25 mol/l Tris-HCl, 8w/v% SDS, 40w/v% Glycerol, 0.02w/v% BPB, 20v/v% 3-mercapto-1,2-propandiol. 電気泳動用 m 4,500 電気泳動用 m 6,800 電気泳動用 m 4,900 電気泳動用 m 7,600 電気泳動用 m 7,500 電気泳動用 m 10,000

15 13

16 項目 品名 規格 / メーカー コード No. 容量 希望納入価格 ( 円 ) ワイドビュー プレステインタンパク質サイズマーカー Ⅲ 500 μ 電気泳動用 仕様 :3 カラー, 12 バンド, kDa ( 約 100 回用 ) 22,000 プレステインワイドビュー プレステインタンパク質サイズマーカー 500 μ 電気泳動用 マーカー仕様 :2 カラー, 8 バンド, kDa ( 回用 ) 18,000 マルチカラープロテインラダー ( kda) 500 μ ニッポンジーン 仕様 :3 カラー, 12 バンド, kDa ( 約 100 回用 ) 22,000 14

17 免疫動物マウスタイプモノクローナル交差種プレステインタンパク質分子量マーカーに使用されている青色色素と特異的に反応する ヒト, マウス, ラット, トリ, ハムスター, サル, 酵母, 大腸菌のタンパク質には反応しない 純度プロテイン G 精製済み形状 0.5 PBS,50% Glycerol 用途ウェスタンブロッティング推奨希釈率 (1:1000 ー 1:5000) コード No. 項目品名規格 / メーカー ( メーカーコード ) ウエスタン用マーカー ウェスタンセブンプロテインラダー仕様 :16 バンド, kDa ドクターウエスタン仕様 :6 バンド, 15-82kDa ニッポンジーン μ 2l ( 約 100 回用 ) μ ( ) ( 約 20 回用 ) オリエンタル酵母 μ 5 ( ) ( 約 100 回用 ) 容量希望納入価格 ( 円 ) 12,000 5,000 20,000 ブルーラダー -HRP モノクローナル抗体ニッポンジーン μ 65,000 15

18 項目品名規格コード No. 容量希望納入価格 ( 円 ) 2L 用クイック -CBB 電気泳動用 ,000 (A 液 :1L, B 液 :1L) CBB 染色 m 4,200 クイック CBB プラス電気泳動用 L 11,000 16

19 項目品名規格コード No. 容量希望納入価格 ( 円 ) 銀染色 銀染色 Ⅱ キットワコー電気泳動用 枚用 12,000 銀染色 MS キット電気泳動用 回用 19,000 17

20 項目品名規格コード No. 容量希望納入価格 ( 円 ) ネガティブゲル染色 ネガティブゲル染色 MS キット電気泳動用 回用 28,000 18

21 銀染色キットネガティブゲル染色組成操作手順 Ⅱ MS MS キット グルタルアルデヒド 含 不含 不含 (SDS) ポリアクリルアミドゲル電気泳動後のゲル 1. 固定 -1 固定液 分 ( 注 1) 20 分 ( 注 1) 省略 ( 注 1) 2. 固定 -2 固定液 分 10 分 ( 注 1) 3. 水洗 ( 脱イオン水 ) 10 分 4. 増感 増感液 10 分 1 分 5. 水洗 ( 脱イオン水 ) 5 分 1 分 2 回 6. 銀染色 染色液 15 分 20 分 染色液 A 5 ~ 10 分 7. 水洗 ( 脱イオン水 ) 2~5 分 3 回 1 分 2 回 洗浄 5 ~ 10 秒 3 回 8. 現像 現像液 5 分 3~10 分 染色液 B 10 ~ 60 秒 9. 現像停止 停止液 2~3 分 1 分 10. 水洗 ( 脱イオン水 ) 2 分 3 回 1 分 3 回 洗浄 1 分 3 回 ( 約 70 分 ) ( 約 70 分 ) ( 約 10 分 ) ゲルの切り出し ( 目的タンパクの切り出し ) ( 注 2) ( 注 2) 11. 脱色 15 分 5 分 ( 注 3) ゲル内消化 ( 注 4) 質量分析 固定液 固定原液 100m 1 増感液 増感原液 100m 1 増感原液 200m 1 構成試薬 ( 注 5) 染色液 染色液 A 100m 1 染色液 B 100m 1 染色原液 200m 1 染色液 A 500m 1 染色液 B 500m 1 現像原液 100m 1 現像液現像原液 100m 1 現像粉末 20g 1 停止液停止液 100m 1 停止液 200m 1 脱色液 A 50m 1 脱色液 脱色液 500m 1 脱色液 B 50m 1 19

22 Lane No. FLAG-BAP(ng) クリアトランス SP PVDF メンブレン, 疎水性, 0.2 μm 品名規格コード No. 容量希望納入価格 ( 円 ) ブロッティング用 クリアトランス ニトロセルロースメンブレン, 0.2 μm クリアトランス ナイロンメンブレン, 0.45 μm クリアトランス ナイロンメンブレン, プラスチャージ, 0.45 μm 巻 (26cm 3.3m) 1 巻 (30cm 3m) 1 巻 (30cm 3m) 1 巻 (30cm 3m) 37,000 28,500 45,000 38,000 20

23 調製例 :1 転写バッファー, 20% メタノール含有 (100mL) アクアブロット 10 トリス - グリシン転写バッファーメタノール脱イオン水計 10m 20m 70m 100m 品名 規格 コード No. 容量 希望納入価格 ( 円 ) アクアブロット 10 トリス - グリシン転写バッファー組成 :250mmol/l Tris,1.92mol/l Glycine. ブロッティング用 L 7,200 アクアブロット 10 トリス - グリシン -SDS 転写バッファー組成 :250mmol/l Tris,1.92mol/l Glycine, 0.5w/v% SDS. ブロッティング用 L 7,800 品名 規格 コード No. 容量 希望納入価格 ( 円 ) スキムブロッカー ブロッティング用 m 7,000 10w/v% BSA ブロッカー ブロッティング用 m 15,000 スキムミルク粉末 ブロッティング用 g 4,000 アルブミン, ウシ血清由来 (BSA), 脂肪酸 /IgG/ プロテアーゼ不含 生化学用 g 15, g 40,000 21

24 略称品名規格 / メーカーコード No. 容量希望納入価格 ( 円 ) 10 PBS りん酸緩衝生理食塩液 10 (ph7.4)[pbs(-)] 組成 : 1,370mmol/l NaCl, 81mmol/l Na 2 HPO 4, 268mmol/l KCl, 14.7mmol/l KH 2 PO 4. 滅菌済み, Nuclease-free. ニッポンジーン m 9,000 1 PBS 1 PBS(-) 組成 : 137mmol/l NaCl, 8.1mmol/l Na 2 HPO 4, 2.68mmol/l KCl, 1.47mmol/l KH 2 PO 4, 滅菌済み. 生化学用 L 12, PBS-T PBS-T, ph7.4( 10) 組成 : 1,370mmol/l NaCl, 81mmol/l Na 2 HPO 4, 27mmol/l KCl, 15mmol/l KH 2 PO 4, 1w/v% Tween 20. ブロッティング用 L 9,000 1 PBS-T 1 PBS(-)-T 組成 : 137mmol/l NaCl, 8.1mmol/l Na 2 HPO 4, 2.68mmol/l KCl, 1.47mmol/l KH 2 PO 4, 0.1w/v% Tween 20. 滅菌済み. 生化学用 L 13, TBS 10 TBS(pH 7.4) 組成 : 1,370mmol/l NaCl, 26.8mmol/l KCl, 250mmol/l Tris. 滅菌済み, Nuclease-free. ニッポンジーン m 9, TBS 20 TBS(pH7.4) 組成 : 400mmol/l Tris-HCl, 3mol/l NaCl. Nuclease-free. ニッポンジーン m 9,000 1 TBS 1 TBS 組成 : 137mmol/l NaCl, 2.68mmol/l KCl, 25mmol/l Tris. 滅菌済み. 生化学用 L 12, TBS-T TBS-T, ph7.4( 10) 組成 : 1,370mmol/l NaCl, 27mmol/l KCl, 250mmol/l Tris, 1w/v% Tween 20. 滅菌済み. ブロッティング用 L 9,000 1 TBS-T 1 TBS-T 組成 : 137mmol/l NaCl, 2.68mmol/l KCl, 25mmol/l Tris, 0.1w/v% Tween 20. 滅菌済み. 生化学用 L 13,000 22

25 品名抗 β- アクチン, モノクローナル抗体抗 β- アクチン, モノクローナル抗体, ペルオキシダーゼ結合 濃度 0.5mg/m 約 1.0mg/m 組成 クローン No. 10mmol/ sodium phosphate, 150mmol/ sodium chloride, ph7.4, 50w/v% glycerol 抗体サブクラス IgG 1 免疫動物 抗原 交差性 ( 確認済み ) 2F3 マウス KLH を結合させた β- アクチン合成ペプチド ヒト マウス アフリカミドリザル アプリケーションウエスタンブロッティング 免疫沈降ウエスタンブロッティング 推奨使用濃度 ( 推奨希釈倍率 ) 0.1 ~ 1 μg/m(wb) (500 ~ 5,000 倍希釈 ) 62.5 ~ 250ng/m(WB) (4,000 ~ 16,000 倍希釈 ) 品名抗 α- チューブリン, モノクローナル抗体抗 β- チューブリン, モノクローナル抗体 濃度 0.5mg/m 0.5mg/m 組成 10mmol/ sodium phosphate, 150mmol/ sodium chloride, ph7.4, 50w/v% glycerol クローン No. 10G G10 1 抗体サブクラス IgG 1 IgG 1 免疫動物マウスマウス 抗原 KLH を結合させた α- チューブリン合成ペプチド KLH を結合させた β- チューブリン合成ペプチド 交差性 ( 確認済み ) ヒト マウス アフリカミドリザル アプリケーションウエスタンブロッティング 細胞免疫染色ウエスタンブロッティング 推奨使用濃度 ( 推奨希釈倍率 ) 1 μg/m(wb) (500 倍希釈 ) 0.5 μg/m(wb) (1,000 倍希釈 ) 23

26 品名 抗 GAPDH, モノクローナル抗体 抗 GAPDH, モノクローナル抗体, ペルオキシダーゼ結合 濃度 0.5mg/m 約 1.0mg/m 組成 10mmol/ sodium phosphate, 150mmol/ sodium chloride, ph7.4, 50w/v% glycerol クローン No. 5A12 抗体サブクラス IgG 1 免疫動物 抗原 交差性 ( 確認済み ) マウス KLH を結合させた GAPDH 合成ペプチド ヒト マウス アフリカミドリザル アプリケーションウエスタンブロッティング 免疫沈降ウエスタンブロッティング 推奨使用濃度 ( 推奨希釈倍率 ) 0.05 ~ 1 μg/m(wb) (500 ~ 10,000 倍希釈 ) 62.5 ~ 250ng/m(WB) (4,000 ~ 16,000 倍希釈 ) 24

27 項目品名規格コード No. 容量希望納入価格 ( 円 ) ローディングコントロール用抗体 μg 25,000 抗 β- アクチン, モノクローナル抗体 mg 100, mg 照会 抗 β- アクチン, モノクローナル抗体, ペルオキシダーゼ結合 μ 33, μg 14,000 抗 α - チューブリン, モノクローナル抗体 mg 56,000 免疫化学用 μg 18,000 抗 β- チューブリン, モノクローナル抗体 mg 72, μg 25,000 抗 GAPDH, モノクローナル抗体 mg 100, mg 照会 抗 GAPDH, モノクローナル抗体, ペルオキシダーゼ結合 μ 20,000 項目 品名 規格 コード No. 容量 希望納入価格 ( 円 ) 正常ヒト IgG, 全分子, 精製品 mg 8,500 精製 :Protein A mg 5 28,000 正常マウス IgG, 全分子, 精製品精製 :Protein A mg 20,000 正常ラット IgG, 全分子, 精製品 mg 15,000 精製 :Protein G mg 5 50,000 正常ウシ IgG, 全分子, 精製品 mg 8,000 精製 :Protein A mg 5 27,000 コントロール免疫化学用 IgG, 全分子正常ウサギ IgG, 全分子, 精製品 mg 8,500 精製 :Protein A 正常シリアンハムスター IgG, 全分子, 精製品精製 :Protein G mg 20,000 正常ヒツジ IgG, 全分子, 精製品精製 :Protein A mg 9,200 正常モルモット IgG, 全分子, 精製品精製 :Protein G mg 20,000 正常ヤギ IgG, 全分子, 精製品精製 :Protein A mg 9,500 25

28 (10 回用 ) (40 回用 ) 1 キャプチャー試薬 50 μ 200 μ 2 20 反応バッファー 10m 40m 3 増感試薬 ( マウス用 ) 50 μ 200 μ マルチキャプチャー HRP 品名規格コード No. 容量希望納入価格 ( 円 ) 回用 16,000 ブロッティング用 回用 36,000 2 回用 10 回用 40 回用 Reagent A 10m 50m 200m Reagent B 10m 50m 200m 26

29 品名 規格 コード No. 容量 希望納入価格 ( 円 ) 回用 ( 試薬 A:10m, 試薬 B:10m) 4,800 イムノ - エンハンサー 回用 ( 試薬 A:50m, 試薬 B:50m) 11,000 ブロッティング用 40 回用 ( 試薬 A:200m, 試薬 B:200m) 28,400 イムノ - エンハンサー試薬 A m 18,000 イムノ - エンハンサー試薬 B m 18,000 品名規格コード No. 容量希望納入価格 ( 円 ) ストリッピング溶液ブロッティング用 m 13,000 27

30 品名規格コード No. 容量希望納入価格 ( 円 ) TMB 溶液 ( メンブレン用 ) ブロッティング用 m 18, L 60,000 品名規格コード No. 容量希望納入価格 ( 円 ) POD イムノステインセット POD 染色用 m 12 39,000 品名規格コード No. 容量希望納入価格 ( 円 ) ABC 溶液免疫組織染色用 m 33,000 品名規格コード No. 容量希望納入価格 ( 円 ) BCIP/NBT 溶液生化学用 m 12,500 品名規格コード No. 容量希望納入価格 ( 円 ) ポンソー 3R 電気泳動用 g 5, g 16,000 ポンソー 3R 染色液電気泳動用 m 11,000 28

31 品名 ImmunoStar Basic ImmunoStar Zeta ImmunoStar LD タイプコスト, 発光安定性重視型バランス型発光強度重視型 発光強度 ( 感度の目安 ) 中感度品ピコ (10-12 ) グラムオーダーのタンパク質を検出可能 高感度品ベーシックに対して 4 ~ 20 倍の発光強度 超高感度品ゼータに対して 20 ~ 100 倍の発光強度 発光安定性 コスト メンブレン 検出方法 リプロービング 特長 1. 発光安定性が最も優れている 2. 定量性が最も優れている 3. コストパフォーマンスが優れている PVDF, ニトロセルロース CCD イメージャー,X 線フィルム 可能 1. 発光安定性が優れている 2. 定量性が優れている 1. シリーズ最高感度 Lane No. FLAG-BAP(ng)

32 Lane No. FLAG-BAP(ng) Lane No. FLAG-BAP(ng) 品名 規格 コード No. 容量 希望納入価格 ( 円 ) cm 2 ( 発光液 A : 10m, 発光液 B : 10m) 6,000 イムノスター ベーシック ブロッティング用 ,000cm 2 ( 発光液 A : 100m, 発光液 B : 100m) 17, ,000cm 2 ( 発光液 A : 250m, 発光液 B : 250m) 30,000 Lane No. FLAG-BAP(ng)

33 Lane No. FLAG-BAP(ng) Lane No. FLAG-BAP(ng) Lane No. FLAG-BAP(ng) イムノスター ゼータ 品名規格コード No. 容量希望納入価格 ( 円 ) ブロッティング用 cm 2 ( 発光液 A : 10m, 発光液 B : 10m) 1,000cm 2 ( 発光液 A : 50m, 発光液 B : 50m) 2,000cm 2 ( 発光液 A : 100m, 発光液 B : 100m) 8,000 30,000 48,000 31

34 Lane No. FLAG-BAP(ng) Lane No. FLAG-BAP(ng) イムノスター LD 品名 規格 コード No. 容量 希望納入価格 ( 円 ) cm 2 ( 発光液 A : 10m, 発光液 B : 10m) 8,000 ブロッティング用 ,000cm 2 ( 発光液 A : 50m, 発光液 B : 50m) 30, ,000cm 2 ( 発光液 A : 100m, 発光液 B : 100m) 48,000 32

35 Lane No. FLAG-BAP(ng) 問題 原因 解決方法 ゲルにアプライするタンパク質の量が不十分 アプライするタンパク質の量を増やしてください シグナルが弱い 転写効率が低い ゲルと膜を染色するなどして転写効率を確認してください もしくは検出されない 抗体濃度が低い 使用する抗体量を増やしてください 混合発光液が失活している 混合発光液を調製後はなるべく早くご使用ください シグナルが強すぎる ゲルにアプライするタンパク質の量が多すぎるアプライするタンパク質の量を減らしてください 抗体濃度が高すぎる使用する抗体量を減らしてください バンドにスポットが生じる バックグラウンドが高い タンパク質の量が多すぎる あるいは抗体濃度が高すぎる露光時間が長すぎる抗体濃度が高すぎる 膜のブロッキングが不十分 タンパク質の量を減らすか あるいは抗体量を減らしてください ブロット解析などを行い 適切な条件を検討してください 露光時間を短くしてください 使用する抗体量を減らしてください ブロッキングの時間を長くする ブロッキング回数を増やす ブロッキング剤の量を増やすなどしてください ブロッキング剤を変更してください 33

36 Lane No. 希釈 1. 2 倍希釈 2. 4 倍希釈 3. 8 倍希釈 倍希釈 倍希釈 倍希釈 Lane No. rgfp 1. 8ng 2. 1ng ng ng このようなとき推奨発光試薬推奨理由 コストパフォーマンスを重視したい イムノスター ベーシック安価 よく使用される発光強度域のものがよい まずどれかひとつ試したい イムノスター ゼータバランス型 発光強度 発光安定性 定量性いずれも欠かせない イムノスター ゼータバランス型 ウエスタンブロッティングで定量したい イムノスター ベーシック イムノスター ゼータ ダイナミックレンジが広い 露光時間をなるべく短くしたい イムノスター LD シリーズ最高発光強度 バックグラウンドを下げたい イムノスター ベーシック 中発光強度タイプ 多検体で実験を行うため 発光が安定して持続するものがいい イムノスター ベーシック操作時間によって発光強度が変わってしまう イムノスター ゼータ 安定発光型 サンプル量 抗体量を減らしたい イムノスター LD シリーズ最高発光強度 発光強度を強くしたい バンドがうっすらとしか検出されない もしくは検出されない イムノスター LD シリーズ最高発光強度 34

37 品名 OptimaShot CL-420 α 画像サイズ 85mm 85mm ~ 140mm 140mm(4 段階 ) 画素数 420 万画素 落射白色 ( 標準装備 ) ゲルみえーる( オプション ) CCD カメラ 階調数 16 bit 光源 UV トランスイルミネーター ( オプション ) 温度制御 室温時ー 30 ( 最大冷却温度 : ー 40 ) 白色 LED トランスイルミネーター ( オプション ) レンズ 50mm F 0.95 本体サイズ 350 W 330 D 750 H(mm) ソフトウェア 撮影 CL-420 α 撮影ソフトウェア ( 簡易定量解析機能付 ) 装置本体 パソコン 撮影ソフトウェア 解析ソフト商品構成解析 Basic Quantifier ウェア ゲルみえーる用フィルター 品名コード No. 容量希望納入価格 ( 円 ) OptimaShot CL-420 α 台 2,400,000 35

38 細胞数 (cells) Nuclear Fractionation buffer(μ) Nuclear Extraction buffer(μ) SDS Lysis buffer(μ) 組織量 (mg) Nuclear Fractionation buffer(μ) Nuclear Extraction buffer(μ) SDS Lysis buffer(μ) ,

39 37

40 1st Antibody (Dilution rate) 2nd Antibody (Dilution rate) Molecular Weight (kda) α-tubulin(1:3,000) Mouse(1:10,000) 50 Histone H1(1:2,000) Histone H3(1:2,000) Nup98(1:1,000) 98 Rabbit(10,000) Lamin B1(1:3,000) 70 COX Ⅳ(1:2,000) 品名 規格 コード No. 容量 希望納入価格 ( 円 ) リソピュア 核 細胞質タンパク質エキストラクターキット プロテオーム研究用 回用 30,000 品名規格コード No. 容量希望納入価格 ( 円 ) m 10,000 RIPA バッファー m 20,000 遺伝子研究用 m 10,000 細胞溶解バッファー M m 20, 品名規格コード No. 用途容量希望納入価格 ( 円 ) m 7,000 汎用 m 5 23, m 11,000 動物細胞 m 5 42,000 細胞生物学用 m 11,000 動物細胞 m 5 42, m 9,500 * His タグ精製 m 5 33,000 プロテアーゼ阻害剤カクテルセット Ⅰ 動物由来物フリー ( 汎用 )( 100) 凍結乾燥品 プロテアーゼ阻害剤カクテルセット Ⅲ DMSO 溶液 (EDTA 不含 )( 100) プロテアーゼ阻害剤カクテルセット Ⅲ DMSO 溶液, 動物由来物フリー (EDTA 不含 )( 100) プロテアーゼ阻害剤カクテルセット Ⅶ DMSO 溶液 ( ヒスタグ用 )( 100)

41 品名メーカーコード No. 容量希望納入価格 ( 円 ) SulfoBiotics- Protein Redox State Monitoring Kit 5 回用 18,000 (SB11) 同仁化学 SulfoBiotics- Protein Redox State Monitoring Kit Plus 5 回用 23,000 (SB12) 39

42

43

44 15405 開 01K

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