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2 Aqua Way Philic Aqua Way Cation

3

4 Technology platform Cell-sheet engineering (1)

5 Technology platform Cell-sheet engineering (2) 1) Collection of cells in a form of thin film 2) o suture required for transplantation 3) Creation of 3D tissue by piling up cell-sheets

6 Technology platform Cell-sheet engineering (3)

7 Aqua Way Philic Aqua Way Cation

8 Poly(-isopropylacrylamide) ydration n polymer solution Dehydration 2 Lower Critical Solution Temperature (LCST) at 32 C 2 C C C 3 C C 3 n Poly(-isopropylacrylamide (PIPAAm)

9 Poly(-isopropylacrylamide):PIPAAm; LCST = 32C 2 Lower Critical Solution Temperature (LCST) 10C 37C /

10 Aqua Way Philic Aqua Way Cation

11 Aqua Way Philic

12 Column: AquaWay "Philic" 150 mm4.6 mm I.D. Mobile phasewater Flow rate1.0 ml/min DetectionUV 254 nm Sample hydrocortisone, testosterone 0 Uracil

13 Aqua Way Philic

14

15 40 Column: Aqua Way Philic 150mm4.6mm I.D. Mobile phase66.7mm phosphate buffer (p7.0) Flow rate1.0ml/min DetectionUV 220nm Temperature40 Sample Serum (20µl) 10

16 2 Carbamazepine

17 C 2 5 primidone

18 3 C C 3 theophylline

19 3 C 3 C C C Propofol (2,6-di-isopropylphenol) logp=3.579 C 3 C 3 38g/mL

20 Absorbance µg/ml) Column : PIPAAm hydrogel modified Retention Time(min) Eluent: 2 UV:263nm (5µg/mL) Injection volume :10µL column(4.6mm 50mm) Flow-rate : 1.0mL/min Temp : 15

21 67 mm 1 ml/min 40 pump LC column 20l 10 UV 1 BCA ( micro BCA Protein Assay )

22

23

24 2 Column: Aqua Way Philic 150mm4.6mm I.D. Mobile phase 66.7mM phosphate buffer (p7.0) Flow rate1.0ml/min Temperature40 DetectionUV 220nm Samplecarbamazepine

25 1 2 CYPcytochrome P450 2 C 3 3 C phenacetin 1 olumn: Aqua Way Philic 150mm4.6mm I.D. obile phase66.7mm phosphate buffer (p7.0) low rate1.0ml/min etectionuv 220nm emperature40 ample 1 acetaminophen 2 phenacetin drug-metabolizing enzyme CYP1A2 3 C acetaminophen metabolism

26 C C 3 C C 3 C 3 C C 3 anhydrous caffeine ibuprofen C CCCC 2 3 C Br bromvarerylurea 2 C 3 ethenzamide Column: AquaWay "Philic" 150mm4.6mm I.D. Mobile phase 66.7mM phosphate buffer (p7.0) Flow rate1.0ml/min DetectionUV 230nm Temperature40 Sample 1 anhydrous caffeine 2 ibuprofen 3 bromovalerylurea 4 ethenzamide

27 C 3 4 C 3 C 3 C 3 C hydrocortisone logp C 3 C 3 prednisolone acetate logp 2.40 testosterone logp 3.32 Column: AquaWay "Philic" 2/min 150 mm4.6 mm I.D. 40 Mobile phase water Flow rate1.0 ml/min DetectionUV 254 nm Sample 1 hydrocortisone 10 2 cortisone 3 prednisolone 4 prednisolone acetate 5 testosterone

28 1,2 3 PLC conditions Detection: UV (210 nm) Eluent: 0.9 w/v% acl solution Flow rate: 1.0 ml/min Retention time (min) 1.Insulin chain A µg/ml 2.β-Endorphin fragment 1-27 (60.44 µg/ml) 3.Insulin chain B µg/ml Retention time (min) Kanazawa, et al. Anal. Bioanal. Chem. 378, 46 (2004)

29 37

30 Aqua Way Philic Aqua Way Cation

31 Poly(IPAAm-co-BMA-co-DMAPAA) IPAAm/BMA=95/5, DMAPAA 7.5 mol% 9.5 LCST of terpolymer in distilled water pka 8.5 pk a / Temperature ( C) Kikuchi, kano

32 Aqua Way Cation

33 Aqua Way Cation

34 -P -2C AMP 2 2 -P--P-2C ADP 2 -P--P--P-2C ATP Table Some properties of solutes M.W. pka log P* AMP ADP ATP * P ; Partition coefficient of n-octanol/water system. Kikuchi, kano

35 ATP PIPAAm Kikuchi, kano

36 ADP / ADP 2 2 P P ADP P 2 P ADP + P 2 P

37 ADP + +ADP ADP ADP

38

39 10, 40 UV 97.2 (kda) (0.3) Western blotting albumi microbca

40

41 Aqua Way Cation Aqua Way Philic

42 Aqua Way Aqua Way Philic Aqua Way Cation

43 Aqua Way Aqua Way Philic vs DS Aqua Way Cation vs

44 Aqua Way ydrophobicity neutral ydrophilicity

45 Aqua Way

46

xxxxEN.qxd

xxxxEN.qxd Ultron ES-VM : HPLC HPLC 28,000, 1-120Å 5-µm Ultron ES-VM [1-] Ultron ES-VM HPLC ph pi 3.8 4.3 Ultron ES-VM ph pi ph pka = 4.4 ph 3.0 6.0 pka = 4.0 9.2 k' 1 αph 1 Ibuprofen H3 C CHCH 2 CH CH H 3 C Chlorpheniramine

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