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みいかたもん
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1 ワムシの効果的な栄養強化方法井上顕 1. 目的種苗生産に使用するワムシの効果的な必須脂肪酸強化方法を検討する ( V, ホンフ *1, ドコサ *1.5) のように記載したこの例では日目朝に規定量の V を, 日目方に定量ポンプで朝まで規定量のを, 1 日目朝に規定量の 1.5 倍のドコサを投餌したことを示している 2. 方法なお V は常に規定量なので投餌量を省いた規定投ワムシは型岡山株 Branchionu rotundiformis( クロ餌量は, ワムシ 1 億個体当たり, V とを.1 リッレラ工業由来 ),L 型近代株 B. plicatilis ( 本センタトル, ドコサを 2g としたー由来 ), 型タイ株 B. rotundiformis-sp の 3 種類をサンプリングは, 2,~5, 万個体のワムシをプ使用した L 型, 型は, 2 年 7 月, 3 年月 ~ 8 月, T 株は 4 年 3 月 1 日にサンプリングし, 水温 29 ~ 31 で培養した一次培養のエサは, 濃縮淡水クロレラ ( クロレラランクトンネットで回収し, 水道水で洗浄後凍結保存した脂肪酸分析は, クロレラ工業に依頼した本稿では3 種のn -3HUFA 脂肪酸 ( 以下, HUFA), の分析結果について検討した工業社製 : 生クロレラ V12, 以下, V), 濃縮ナンノクロロプシス ( 以下, CN), 原液ナンノクロロプシス ( 以下, 原液ナンノ ) およびパン酵母 ( 鐘淵化学工業社製 : グリーンイースト) を適宜使用した表 1 に, 一次培養のワムシの培養環境を示した二次培養で使用する強化剤は, スーパー生クロレ 3. 結果と考察型ワムシ (1) 強化剤の特性 a)12 表 2 に投餌時間後を 1% としたときの脂肪ラ V12( クロレラ工業社製 : 以下, ), ドコサ酸含有量比率を示した各脂肪酸含有量は, 投餌ユーグレナドライ ( 秋田十篠化成社製 : 以下, ドコ時間後がピークとなり, メーカーの使用説明と一致サ ), CN を使用した一次培養から二次培養へ植えしたそれ以降の減少量は, が最大で, 次に継いだ日を日目とした強化剤投餌時刻は, 日目朝 1: ~ 11:, 日目方 1:3 ~, 1 日の順になったこの傾向は, 異なった投餌量でも同じであった目朝 8: ~ 8:3 とした二次培養の餌料系列は, 投餌時刻毎の種類と量及び定量ポンプ使用の有無を表 1 ワムシの培養環境ワムシ水槽培養方法エサ図表型 1kLポリカーボネート荏原式連続培養 V 1 5kL 円形バッチ式原液ナンノ CN V パン酵母 1 5kL 円形バッチ式 V 2~4 2~4 L 型 1kLアルテミアふ化漕バッチ式 V 5~9 5, 5kL 円形バッチ式原液ナンノ CN V パン酵母 5,,8 5, T 株 5kL 円形バッチ式原液ナンノ CN V パン酵母

2 表 2 投餌時間後を 1% としたときの脂肪酸含有に,2 次培養の餌料系列 (V, ドコサ *1+*.3) で行量比率投餌量規定量.7 倍経過時間 3 時間時間 15 時間時間 15 時間 2 時間 24 時間 78% 1% 57% 1% 53% 44% 4% 78% 1% 85% 1% 8% 82% 88% 78% 1% 79% 1% 84% 75% 79% b) ドコサ表 3 と表 4 に, ドコサ投餌を1% としたとったときの翌朝のワムシ両試験区の脂肪酸含有量は, ほぼ同じレベルだった一次培養で得たナンノ由来の高い含有量は, 3 日間でほぼ保有していない可能性が示唆された (2) 栄養強化方法 a) 朝に使用するワムシ二次培養最初のエサとして V,, ドコサを投餌きの時間後,15 時間後の各脂肪酸含有量比率を示ししたときの朝の脂肪酸含有量状態を図 2 に示したた各脂肪酸含有量は, 時間後でそ参考までに, 二次培養最初のエサ投餌時間後 ( れぞれ平均 78% 84% 99%,15 時間後では,54% 74% 方 ) の脂肪酸含有量をとドコサについて同図に 95% と投餌にピークになったそれ以降の減少量は, が最大で, 次にの順になったこの傾向は, 異なった投餌量でも同じであった c) ナンノ以下の 2 種類の方法で培養したワムシの脂肪酸含有量を図 1 に示した記載した二次培養最初のエサを強化剤にすることで, 翌朝の脂肪酸含有量はで 2.5 倍, で 1.5 倍, で 3.5 倍に増加した最も脂肪酸含有量が高かったものは,( *1, *1) と,( *1, ドコサ *1.5) の餌料系列であったこれらは,( V, ドコサ *5) よりも脂肪酸含有量が高かった方の栄養強化剤を定量ポンプで給餌したときの 15kL 水槽で頻繁に原液ナンノと CN を給餌し,2 朝の脂肪酸含有量を図 3 に示した参考までに, 二次培養で V のみ 2 日間培養したワムシに方ドコサ *1 次培養最初のエサ投餌時間後 ( 方 ) の脂肪酸含と *.2 を添加したときの翌朝のワムシ有量をについて同図に記載した定量ポンプを 2V のみを添加した連続培養装置で培養したワムシ使用したときは, 使用しなかったときと比較して, 表 3 ドコサ投餌を 1% としたときの時間後の脂肪酸含有量比率経過時間 8:3 平均投餌量規定量規定量 1.5 倍 1.5 倍 1.5 倍 5 倍等倍 5 倍 7% 75% 74% 83% 75% 82% 8% 91% 78% 77% 79% 87% 83% 8% 82% 8% 94% 84% 85% 83% 97% 13% 1% 18% 9% 12% 99% 表 4 ドコサ投餌を1% としたときの 15 時間後の脂肪酸含有量比率投餌時刻投餌量規定量 5 倍平均 58% 5% 54% 79% 9% 74% 89% 12% 95% 2 日目方 5kL 水槽培養トコサ *1+*.2 3 日目朝連続培養 (V, トコサ *1+*.3) 1 日目朝図 1 3 日後のナンノ由来の含有量

3 脂肪酸含有量 mg/1g 朝ト (V *1) (V トコサ *1) (V トコサ *1.5) (V トコサ *5) (*1) 方サンフル (*1 *1) (*1 トコサ *1) (*1 トコサ *1.5) ( トコサ *1) 方サンフル ( トコサ *1 トコサ *1.5) (V,*1) (V, ホンフ *1) (V, ホンフ *2) 抜いた後ホンフ *1 - 朝 *1 (*1, *1) ( *1, ホンフ *1) 図 2 二次培養最初のエサと 1 日目朝の脂肪酸含有量図 3 方 ~ 朝の定量給餌と 1 日目朝の脂肪酸含有量では 1.5 ~ 2.8 倍, では 1.3 ~ 1.7 倍, では 3.2 ~ 5.2 倍になったた餌料系列 1: 日目で種苗生産水槽へ給餌する方以上の結果から, 脂肪酸含有量 ( 特にと ) は, 二次培養最初の餌を V から強化剤にすることで増加し ( 図 2), 前日方のエサを定量ポンプで給餌することで, さらに高くなることが分かった ( 図 3) 定量ポンプによるドコサ強化は行っていないが, 法, 試験区は ( *1 ), ( ドコサ *1) の2 区餌料系列 2: 日目朝 V 使用し, 日目方と 1 日目朝強化剤を添加する方法, 試験区は ( V, V, ドコサ*1),( V, *1, *1),( V, *1, ドコサ*1.5), ( V, ドコサ *1.5, ドコサ *1.5) の4 区と比較して大きな差はないと推定され, 経費が餌料系列 3: 日目から 1 日目朝まで強化剤を添の 2 倍かかるので, 朝に投餌するワムシには,( *1, ホンフ *1) が最も経済的かつ効果的な栄養強化方法だと考えられる b) 方使用するワムシ以下の 3 グループの餌料系列で培養を行い, 餌料添加完了と時間後の脂肪酸含有量を調べ加する方法, 試験区は ( *1, *1, ドコサ *1), ( *1, *1, ドコサ *1.5), ( *1, ドコサ *1.5, ドコサ *1) の3 区結果を図 4 に示した時間後の HUFA が最も高いのは( *1, ドコサ*1.5, ドコサ*1) であっただけをみると ( *1) が最も高く, この値は朝試験脂肪酸含有量 mg/1g 1, (*1) 餌料系列 1 餌料系列 2 餌料系列 3 ( 推定 ) 時間後 ( トコサ *1) ( 推定 ) 時間後 (V,V, トコサ *1) ( 推定 ) 時間後 (V,*1,*1) (V,*1, トコサ *1.5) 時間後 (V, トコサ *1.5, トコサ *1.5) 時間後 (*1,*1, トコサ *1) 時間後 (*1,*1, トコサ *1.5) 時間後 (*1, トコサ *1.5, トコサ *1) 時間後図 4 型における強化剤添加方法別に分けた餌料系列と脂肪酸含有量の経時変化 ( 推定 ): は表 2, ドコサは表 3 より求めた

4 表 5 栄養強化剤投餌を 1% としたときの時間後の各脂肪酸含有量比率強化剤トコサ投餌時刻 8:3 8:3 一次培養のエサ V12 CN V12 CN 平均 V12 CN V12 CN 平均投餌量等倍 3 倍 5 倍 3 倍 3 倍等倍 3 倍 5 倍 3 倍 3 倍 2 倍 2 倍 2 倍 2 倍 82% 77% 75% 8% 54% 7% 92% 74% 7% 72% 75% 18% 8% 92% 7% 89% 95% 81% 8% 77% 3% 8% 88% 78% 7% 78% 79% 11% 5% 88% 7% 8% 111% 85% 1% 8% 72% 99% 113% 13% 85% 88% 94% 111% 74% 113% 85% 9% 表栄養強化剤投餌を 1% としたときの 15 時間後の各脂肪酸含有量比率強化剤投餌時刻ドコサ一次培養のエサ V12 CN 平均 V12 CN 投餌量等倍 3 倍 5 倍 3 倍 3 倍 2 倍 2 倍 87% 5% 3% 71% 49% 59% 72% 5% 1% 7% 47% 52% 9% 7% 19% 41% 19% 71% 4% 82% 92% 84% 9% 2% 区の ( *1, ホンフ *1) ( 図 3) とほとんど変わらと 8:3), 一次培養の餌 ( V と CN), 投餌量 ( 規定なかった後で述べるタイ株では方試験区 ( *1, 量等倍 ~ 5 倍 ) を変え, 脂肪酸含有量を調べた栄ホンフ *1, *1) の HUFA が極端に多くならなかったことを考慮すると,( *1), つまり日目で種苗生産水槽へ給餌する方法が, 細菌増殖軽減や経済的な面から優れた方法と考えられる養強化剤投餌を 1% としたときの時間後, 15 時間後の比率をそれぞれ, 表 5, 表に示したドコサ試験区では, 投餌時刻一次培養のエサ投餌量に関係なく,, 含有量ピークが 3 c) 昼使用するワムシ時間後にあり, 時間後でそれぞれピークの平均昼に使用するワムシは, 種苗生産水槽への添加時 75%, 79%, 15 時間後で平均 59%, 7% であった刻, 2 次培養への植え継ぎ時刻によって, 強化方法規定投餌量だった 15 時間後の含有量は時間後よりを選択する必要があるしかし, 昼使用するワムシ高かったが, それは 3時間後のはともにを, 全く異なった餌料系列で強化することは大きな 79.4mg/1g とかなり低いためと思われた含作業量の増加となる a) 朝使用するワムシで提案した餌料系列 ( *1, ホンフ *1) と, b) 方使用するワムシで提案した餌料系列 ( *1) の作業線上に次の 2 つ強化方法が考えられる一つは, ( *1, ホンフ *1) のワムシ全体量を増やし, 1 日目の朝再強化剤を添加する方法で, もう一つは, ( *1, ホンフ *1.5 ~ 2) で方から翌日までポンプ給餌して 18 ~ 24 時間強化を行う方法である有量はばらつきがあった試験区では, はっきりとしたピークがみられなかった b) ナンノ 1kL アルテミアふ化漕で V を投餌した L 型と, 5kL 水槽で CN を投餌した L 型を使用し, 二次培養の餌料系列 ( V ドコサ*3 ドコサ*3) と( V *1 ドコサ*3) 2 種類の脂肪酸含有量をそれぞれ図 5 と図に示した CN で一次培養したワムシの含有量は, V で一次培養したワムシより低くなった L 型ワムシ (1) 強化剤の特性 a) ドコサまた, 一次培養で得られたとが減少していくことがわかった吉松ら 1) は, 型ワムシをイカ肝油で栄養強化し, 同様な結果を得ている栄養強化剤の種類 ( ドコサ ), 投餌時刻 (

5 1 L 型アルテミアふ化槽 V12 培養トコサ *3 昼 L 型大型池 CN 培養トコサ *3 昼 1 L 型アルテミアふ化槽 V12 培養 *2 昼 L 型大型池 CN 培養 *2 昼図 5 VあるいはCNで培養したL 型ワムシ二次培養の餌料系列 (V, ドコサ *3, ドコサ *3) と脂肪酸含有量図 VあるいはCNで培養したL 型ワムシ二次培養の餌料系列 (V,*1, ドコサ *3) と脂肪酸含有量 (2) 栄養強化方法 a) 朝使用するワムシ図 7 に,( V, ドコサ*1.5 ~ 5) としたときの1 日り,( *2, ドコサ *3) の 1 日目朝の脂肪酸含有量は, 型 ( *1, ドコサ *1.5) と同レベルであった ( 図 2, 8) この結果から L 型ワムシの 1 日目朝の目朝の脂肪酸含有量を示した脂肪酸含有量は, 規脂肪酸含有量を型と同レベルまで栄養強化するた定量と 3 倍量では大きな違いはなく, 5 倍量が最もめには, 給餌量が 2 倍以上必要であると考えられる高い値を示したまた型ワムシの同じ餌料系列の給餌量の増加は経済的なデメリットである定量ポ脂肪酸含有量と比較すると, 型 ( V, ドコサ *1.5) ンプを使用したとき, 型の脂肪酸含有量が大きくと L 型 ( V, ドコサ *3) は同レベル, 型 ( V, ドコ変化したことを考えると, 今後 L 型でも同様な方法サ *5) と L 型 ( V, ドコサ *5) は型の方が多かった ( 図 2, 7) 餌料系列 ( V, ドコサ*3) と( *2, ドコサ*3) の 1 日目朝の脂肪酸含有量は,,, それぞれで, 後者は前者の 35%, 23%, 421% を試験し, 効果的な強化方法を模索する必要がある b) 方に使用するワムシ図 9 に, 餌料系列 ( *2), ( V, *2), ( V, トコサ *3, トコサ *3), ( V, トコサ *5, トコサ *5) の投餌完了 3 となった ( 図 8) 日目朝にを添加することで, 時間後と時間後の脂肪酸含有量を示した餌料系脂肪酸含有量が増加することは型と同じ結果にな列 ( *2), ( V, *2), ( V, V, *2) の間で比 1 L 型アルテミアふ化槽 V12 培養トコサ *1 23 時朝トコサ * 時朝トコサ *5 23 時朝図 7 ドコサの投餌量別脂肪酸含有量の経時変化

6 HUFA 脂肪酸 mg/1 朝 *2 トコサ *3 昼図 8 餌料系列 ( *2, ドコサ *3) における脂肪酸含有量の経時変化脂肪酸含有量 mg/1g 1, (*2) 時間後 (V,*2) 時間後 (V,V,*2) 時間後 (*2, トコサ *3, トコサ *3) 時間後 (V,*2, トコサ *3) 時間後 (V, トコサ *3, トコサ *3) 時間後 (V, コサ *5, トコサ *5) 時間後図 9 L 型の強化剤添加方法別に分けた餌料系列と脂肪酸含有量の経時変化較すると, 強化剤添加までに V を入れる培養時間がいないため, 今後の検討課題として残ったまた昼長くなるほど, HUFA 量が低下したまた最も高い使用するワムシの強化方法は, 型ワムシ c) 昼使脂肪酸含有量を示した餌料系列は,( *2, トコサ*3, 用するワムシと同じ方法が考えられるトコサ *3) であったしかし, 時間後の脂肪酸含有量を餌料系列 ( *2, トコサ *3, トコサ *3) と ( *2) で比較したとき, 前者の方が 2 倍の量が得られた以外は, ほぼ同じであったこのの増加は, がへ短鎖化 ( retroconversion) した結果とタイ株図 1 に 3 年の型および L 型の栄養強化方法の結果を受けて行ったタイ株の脂肪酸含有量の経時変化を示した定量ポンプを使用することで朝の脂考えられる餌料コストは, 前者は後者の 4 倍であ肪酸含有量が高く維持でき, そのレベルは型岡山り, 強化を目的にしないのであれば, 餌料系列株と同じであることがわかったまた, 一次培養で ( *2), つまり日目朝を規定量 2 倍添加し, 時間後に種苗生産水槽へ給餌する方法が, 細菌増殖軽減や経済的な面から優れた方法と考えられたた得られたナンノ由来のがしだいに減少するという特性は, 株に留まらず, 種超えても同じ傾向にあると考えられただし, 定量ポンプによる夜間の強化剤添加を行って

7 1, 1, 一次培養朝 *1 昼時間後ホンフ *1 朝朝 *1 昼時間後図 1 タイ株の脂肪酸含有量の経時変化 4. 参考文献 1 ) 吉松隆夫, 林雅弘. 高密度ワムシの栄養強化技術. 養殖 ; 1997,( 5);

島根県水産技術センター研究報告第3号

島根県水産技術センター研究報告第3号島根水技セ研報 3, 33 ~ 40 頁 (2011 年 3 月 ) マダイ種苗生産におけるほっとけ飼育技術の有効性の検討 - 島根県水産技術センター栽培漁業部での事例 - 栗田守人 1 2 近藤徹郎 Study for availability of Hottoke breeding system to seed production of red sea bream Pagrus major a