固相抽出 ビギナー ズ ガイ ド 日本ウォーターズ株式会社 日本ウォーターズ株式会社 東京本社 東京都品川区北品川 第 5 小池ビル TEL FAX 大阪支社 大阪市淀

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3 Copyright 2012 Waters Corporation All rights reserved. No part of this book may be reproduced or transmitted in any form by any means, electronic or mechanical, including photocopying, recording, or by any other information storage and retrieval system, without permission from the Publisher. Waters Corporation 34 Maple Street Milford, MA Library of Congress Control Number: Printed in the USA 2012 Waters Corporation. Waters, Sep-Pak, Oasis, UPLC, Nova-Pak, PoraPak, ACQUITY UPLC, ACQUITY, Atlantis, Xevo, and Alliance are registered trademarks of Waters Corporation. XPoSure, DisQuE, AccQ Tag, Quattro micro GC, and SunFire are trademarks of Waters Corporation. Luer is a registered trademark of Becton Dickinson. Teflon is a registered trademark of E. I. du Pont de Nemours and Company. Kool-Aid is a registered trademark of Kraft Foods Global Brands, LLC. Rxni is a registered trademark of Rxi Pharmaceuticals Corporation. October V W-FP

4 SPE SPE SPE SPE SPE 30 SPE SPE

5 Sep-Pak Oasis 34 S P E Dr. Patrick McDonald Dr. Mc Donald SPE Dr. Uwe Neue 1 Dr. Neue 2010 Ann Marie Christine Joseph Dr. Diane Diehl Dr. Mark Baynham Kathy Coffey Jessalynn Wheaton John Martin Dr. Nebila Idris Damian Morrison Erin Chambers Dr. Michael S. Young Dr. James Teuscher Dr. Ben Yong Xin Zhang Nicole Cotta Gary Mantha Natalie Crosier Vicki Walton Ian Hanslope 4

6 SPE MS SPE LC SPE SPE SPE SPE ph I EC SPE

7 SPE Sep-Pak DNPH Waters XPoSure PoraPak Rdx Sep-Pak Sep-Pak Dry SPE Vac RC µelution Classic Plus Light

8 SPE SPE SPE SPE SPE SPE / SPE

9 / ph SPE & LC SPE Oasis Oasis Oasis HLB C SPE

10 PAH Melamine Cyanuric Acid Amyloid PEG PCB

11 1 SPE SPE SPE SPE SPE / SPE LC SPE De-Wetting Oasis HLB

12 28 ph Oasis RP Oasis MCX Oasis MAX Oasis WCX Oasis WAX Oasis ph Oasis MCX Oasis WAX Oasis MAX Oasis WCX Oasis MCX Sep-Pak DNPH DNPH HPLC DNPH Waters XPoSure XPoSure PoraPak Rdx E PA 8330 PoraPak Rdx Sep-Pak Dry SPE SPE

13 57 SPE SPE Vac RC Oasis Waters Oasis µelution µelution Classic Plus Light SPE SPE SPE SPE QuEChERS DisQuE DisQuE 1 QuEChERS DisQuE 2 QuEChERS /

14 S P E S P E :

15 SPE Plus k k SPE ph C

16 ph N SPE N Oasis HLB Oasis Oasis HLB Oasis HLB Oasis Oasis96 Cephalexin Oasis

17 1 / Oasis ID Oasis SPE 1-D

18 17

19 SPE SPE 1 S P E 18

20 ロードサンプル 黒色 脱離 ステップ 1 脱離 ステップ 2 SPE の4つの主要な恩恵 脱離 ステップ 3 注 色素を分画する ために脱離力の 異なる溶媒を使用 固定相 1 本のカートリッジで 3 種類の色素すべてを分画可能 図 1. S P E メソッドの例 クロマトグラフィー充塡剤を用いてサンプル中の異なる成分を分離し その後の分析試験の精度をより高めること ができます 例えば SPE は 分析の妨害成分の選択的な除去によく使われます SPE は クロマトグラフィーの充塡剤は固体であり サンプルは液体の状態であるため 技術的には 液 - 固相抽出 と呼ぶのが正しい名称ということになります HPLC に使用されている液体クロマトグラフィーと同じ基本原理が S P E に適用されていますが 形状と使用目的が異なり 分析試験の前にサンプルをより分析しやすい状態にする ために用いられます サンプル前処理では 血漿や唾液 尿など生体試料 水や空気 あるいは土などの環境サンプル 穀物 肉 魚介類といっ た食品や 医薬品 栄養補助食品 飲料 工業製品など幅広い種類のサンプルを取り扱います 蚊の頭部をサンプル として扱うこともあります 蚊の脳から抽出した神経ペプチドの分析に用いられたサンプル前処理手法が SPE でした Waters Applications Database, 1983 SPEの4つの主要な恩恵 SPE によって得られる多くの恩恵の中から 特に有用な 4 つを紹介します 1. 複雑なサンプルマトリックスの単純化 分析化学者にとって最も難しい問題の 1 つに 分析種が複雑なサンプルマトリックス中に含まれている問題が あります 例えば 穀物中に含まれるマイコトキシンや エビ中に含まれる抗生物質 あるいは血漿 血清 尿中 の薬物代謝物などを分析する場合です サンプルマトリックス中には 分析種のほかに多くの分析を妨害する 分析妨害成分が含まれており 分析を著しく困難にします 19

21 SPE AU SPE 0.08 MS 0.06 AU AU

22 SPE S P E AU AU S P E SPE 1 2 PDA (0.01 AUFS) SPE SPE

23 SPE 4 2. MS 2 LC/MS LC/MS/MS MS % /50 /ACN Scan ES % 0 50/50 /ACN Scan ES m/z % % % % % % % % MS terfenadine 80 SPE 22

24 SPE MRM PPT > e6 % % SPE (Oasis MCX) 1.91 MRM > e SPE SPE S P E 3. S PE 23

25 SPE 4 S PE IPA 3 35 IPA 4 70 IPA 8. SPE SPE

26 SPE ppt 9 SPE SPE * *SPE SPE 25

27 SPE の4つの主要な恩恵 まとめ これまで見てきた通り S P E がもたらす 4 つの主要な恩恵により サンプル分析の成功率を向上させることができ ます 図 10 を参照してください 逆相クロマトグラフィー サンプルロード 黒色 脱離 1 脱離 2 脱離 3 S P E の4つの主要な恩恵 1. サンプルの単純化 2. マトリックス効果の軽減 3. 分画 4. 微量成分の濃縮 図 10. S P E の力 1 本のカートリッジで 3 種の色素すべてが分離 本書では SPE の基本の全てと 過去 30 年間にこのテクノロジーに携わった世界中の科学者から得られた成功の テクニックをご紹介します 今日 科学者は難しいサンプル前処理や分析上の課題を克服するための手法と して S PE が役立つ手法であることをこれまで以上に見出しています 本書を通して SPE が持つ能力を理解しマスターすることにより このテクノロジーの持つ力をラボで活用できるように なることを願っています 26

28 固相抽出 ビギナー ズ ガイ ド 日本ウォーターズ株式会社 日本ウォーターズ株式会社 東京本社 東京都品川区北品川 第 5 小池ビル TEL FAX 大阪支社 大阪市淀川区西中島 サムティ新大阪フロントビル 11F TEL FAX ショールーム 東京 大阪 テクニカルセンター 東京 大阪 名古屋 福岡 札幌 J LC

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