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2 Table 1 Cases with EHEC infection * Y: Years old M : age of the month ** M : male F: Female HUS: hemolytic uremic syndrome

3 埼 玉 県 で分 離 され たEHECの 薬 剤 感 受 性 試 験 は,セ 用 い て,aminobenzylpenicillin kanamycin (KM), cin (SM), (TC), (CP), 剤 に つ い て,NCCLS 2 EHEC (ABPC), tetracycline chloramphenicol (NA)の6薬 Table ン シ デ ィ ス ク(BBL)を 1453 性状 Detection of Verotoxin and serotypes of strains streptomy- nalidixic acid 9)に 準 拠 し て 実 施 し た. 6.プ ラ ス ミ ドプ ロ フ ァ イ ル 供 試 菌16株 and Liuの か ら の プ ラ ス ミ ドDNAは,Kado 変 法10)に よ り抽 出 し,0.7%ア ガロース ゲ ル 電 気 泳 動 に よ りそ の プ ロ フ ァ イ ル を観 察 し た.分 子 量 はE. coli V517株 お よ びE. coli NR1 株 を マ ー カ ー と し て 推 定 し た. 成 1.病 供 試 菌16株 0128: 績 原大腸菌 血清型別 の 血 清 型 別 は,0157:H7が14株, H2が1株,0111: 血 清 型 別 で は,す H-が1株 で あ っ た.O べ て の株 が 生 菌 お よ び加 熱 菌 の 両 方 で 凝 集 を 認 め た.ま た,H血 PCRに 清型別 で はク レ 以 上 通 過 さ せ た 後 に 凝 集 が 認 め ら れ た. 素 産 生性 各 供 試 菌16株 のVero毒 べ ての株 が3日 素 産生 能 以 内 に 細 胞 変 性 を 示 し,Vero毒 中,VT1,VT2両 毒 素 遺 伝 子 保 有 株 は9株,VT2 単 独 保 有 株 は5株 で あ り,VT1遺 に よ るVT1,VT2遺 Fig. 1 伝 子 保 有 株 で あ り,Ol11:H-の1株 VT1遺 伝 子 の 単 独 保 有 株 で あ っ た(Fig.1). 4.生 1.5% agarose gel electrophoresis size marker Strain 平 成6年12月20日 of PCR amplification (123bpDNA Number は 化学的性状 供 試 菌 株 は い ず れ もIndole, 伝子 の確認 M: molecular はVT1, VT2遺 の あ る こ と が 確 認 さ れ た(Table2). 3.PCR法 伝 伝子単独 保有株 は 認 め ら れ な か っ た.0128:H2の1株 素 の 産 生 性 をVero細 胞 を 用 い た 培 養 細 胞 法 で 行 っ た 結 果,す よ びVT2遺 子 の 保 有 状 況 を 確 認 し た と こ ろ,0157:H714株 イ ギ ー 管 の 入 っ た ト リ プ ト ソ イ 半 流 動 培 地 を3回 2.Vero毒 よ る 供 試 菌 株 のVT1お Ladder: GIBCO products BRL) Methylred陽 性

4 * 1454 山田 Fig % agarose gel electrophoresis 文也 他 of plasmid DNAs detected in enterohemorrhagic E. coli Ml: molecular Strain size marker (E. coli V517), M2 : molecular Number size marker Strain Table 3 Biochemical characteristics (E. coli NR1) Number of EFIEC strains : positive after 3 days Table S: Sensitive ABPC: phenicol, R: Drug resistance of EJIEC strains Resistant Aminobenzylpenicillin NA: 4 Nalidixic, KM : Kanamaycin, TC: Tetracycline, SM: Streptomycin, CP: Chloram- acid. 感 染 症 学 雑誌 第68巻 第12号

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6 Table 5 Serotype, VT genes by PCR, Drugresistance and Biotype of 16 EHEC strains, Plasmid profile, Biochemical character

7 7) Pollard, D.R., Johnson, W.M., Lior, H., Tayler, S.D. & Rozee, K.R.: Rapid and specific detec- of verotoxin genes in Escherichia coli by tion the polymerase chain reaction. J. Clin. Mi- 28 : , crobiol., 8) Ewing, W.H. : Edwards and Ewing's Identification of Enterobacteriaceae 4th ed., Elsevier Science Pub. Co., New York, ) National Committee for Clinical Laboratory Standrds : Performance Standrds for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests, 3rd Ed., 4(16), NCCLS, Villanava, ) Kado, C.I. & Liu, S.T.: Rapid procedure for detection and isolation of large and small plasmids. J. Bacteriol., 145 : , ) Riley, L.W., Remis, R.S., Helgerson, H.B., McGee, J.G., Wells, B.R., Davis, R.J., Hebert, E. S., Olcott, R.N., Linda, L.M., Johnson, N.T., Hargrett, P.A., & Blake, M.L. Cohen : Hemorrhagic colitis associated with a rare Escherichia coli serotype. N. Engl. J. Med., 308 : , ) Karmali, M.A.: Infection by verocytotoxinproducing Escherichia coli. Clin. Microbiol. Rev., 2 : 15-38, 1989.

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