API実用講座 Analyst AAOを使った各種HPLCの制御  と 知っておくと便利なAnalystの機能

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1 API 実用講座 Analyst AAO を使った各種 HPLC の制御 & 知っておくと便利な Analyst の機能 タカラバイオ株式会社 API テクニカルサポートライン渡辺淳 Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

2 Analyst AAO を使った各種 HPLC の制御 AAO って何??? AAO は Analyst Access Object の略です HPLC メーカーが Analyst 向けに開発した Add On タイプの Driver です この Driver により Analyst ではもともと制御できなかった HPLC の各デバイスが制御できるようになります Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

3 Analyst AAO を使った各種 HPLC の制御 どんなメーカーのAAOがあるの?? 例えば NANOSPACE HPLC ( 資生堂 ) Ultimate3000 HPLC ( ダイオネクス ) Acquity UPLC ( ウォーターズ ) Rheos Allegro 超高圧ポンプ ( エーエムアール ) Prominence UFLC ( 島津製作所 ) Symbiosis System ( ジーエルサイエンス ) など Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

4 Analyst AAO を使った各種 HPLC の制御 Analyst でどのように設定するの? メーカーによりかなり違いがあります 代表的なメーカーの AAO に関して ざっと紹介します Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

5 Analyst AAO を使った各種 HPLC の制御 ~ Prominence UFLC ~ Shimadzu HPLC Control 島津 HPLC を含む Profile を Activate すると この Shimadzu HPLC Control 画面が表示されます Configure:HPLC の構成についての初期設定を行います PDA Detector も制御可能になりました Setup:Method の作成 Pump などの On/ Off を行います Status:HPLC 各デバイスのステイタスを表示します Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

6 Analyst AAO を使った各種 HPLC の制御 ~ Prominence UFLC ~ Shimadzu を含む Acquisition Method を保存しようとすると Shimadzu の Method を追加してください というメッセージが表示されます Shimadzu の Method の追加は Shimadzu HPLC Control の Setup から行います Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

7 Analyst AAO を使った各種 HPLC の制御 ~ Prominence UFLC ~ Method の設定内容は従来とさほど変わりません 最後に File/Save To から 保存しておいた Acquisition Method に LC 条件の追加を行います Pump 設定画面 Autosampler 設定画面 注入量の設定は Batch から行います Method では行いません Setup 画面から Method の Download Pump の On/Off Autosampler の Rinse などを行うことができます Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

8 Analyst AAO を使った各種 HPLC の制御 ~ Prominence UFLC ~ Batch の Locations において コントロールラックを使用できるようになりました FIA Quantitative Optimization において Total Sample Volume が計算され 表示されるようになりました Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

9 Analyst AAO を使った各種 HPLC の制御 ~ Acquity UPLC ~ ACQUITY Console ACQUITY UPLC Console 画面を表示し 各デバイスのステイタスを表示したり コミニケーションのリセットを行ったりします ACQUITY Method Editor ACQUITY の Method を作成します ここで作成した Method と Analyst Acquisition Method で作成した Mass の Method をあわせて LC/MS の Method ができあがります ACQUITY Console をダブルクリックすると この ACQUITY UPLC Control 画面が表示されます ACQUITY Method Editor をダブルクリックすると この Waters Method Editor 画面が表示されます LC の Method を作成し File/Save method as により保存します Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

10 Analyst AAO を使った各種 HPLC の制御 ~ Acquity UPLC ~ 1Acquisition Method を作成します Mass など UPLC 以外の設定を行います 2ACQUITY UPLC System をクリックし Filename: の をクリックします 3LC の Method を選択し Open をクリックします 4Path: に 3 で選択した Method の階層 Filename: に LC の Method 名が表示されます この状態で Acquisition Method を保存します Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

11 Analyst AAO を使った各種 HPLC の制御 ~ Acquity UPLC ~ Injection volume は Batch で設定します Sample Organizer も制御可能です Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

12 Analyst AAO を使った各種 HPLC の制御 ~ Rheos Allegro 超高圧ポンプ ~ Virtual Instrument Configuration Allegro Pump の初期設定を行います Virtual Instrument Direct Control Allegro Pump を Analyst を介さず 直接制御します パージ 溶媒置換などを行います Virtual Instrument Method Editor Allegro Pump の Method を作成します ここで作成した Method と Analyst Acquisition Method で作成した Mass の Method をあわせて LC/MS の Method ができあがります Virtual Instrument Status Allegro Pump のステイタス ( 流量 圧力 ランタイムなど ) を表示します Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

13 Analyst AAO を使った各種 HPLC の制御 ~ Rheos Allegro 超高圧ポンプ ~ Method Editor 1 Method Editor をダブルクリックすると Method 作成画面が表示されます まず Pump General の画面で設定を行います 2Gradient Program のタブをクリックし グラジエントの設定を行います 3File/Save as より Method を保存します Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

14 Analyst AAO を使った各種 HPLC の制御 ~ Rheos Allegro 超高圧ポンプ ~ 1Acquisition Method を作成します Mass CTC PAL など Pump 以外の設定を行います 2Janeiro CNS をクリックし Filename: の をクリックします 3LC の Method を選択し Open をクリックします 4Path: に 3 で選択した Method の階層 Filename: に LC の Method 名が表示されます この状態で Acquisition Method を保存します Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

15 Analyst AAO を使った各種 HPLC の制御 ~ Ultimate3000~ ここから Purge などのダイレクトコントロールも可能 DC MS Link メインコンソール Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

16 Analyst AAO を使った各種 HPLC の制御 ~ Ultimate3000 メソッドの作成 ~ ポンプ圧等の取り込み設定オートサンプラーの設定カラムオーブンの設定 Pump2 Pump1 Add Remove Device にて Ultimate3000 をメソッドに追加して保存 Finish でメソッド作成終了 Ultimate3000 を含むメソッドを Analyst 上で保存すると 自動的に Ultimate3000 の設定を行う Wizard が起動 Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

17 Analyst AAO を使った各種 HPLC の制御 ~ Ultimate3000 メソッドの編集 ~ メソッド編集用タブテキストベースでの編集 Deviceごとでの編集 編集するメソッドを選択 Analyst 上での Ultimate3000 の設定表示 DC MS Link を呼び出して編集 Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

18 Analyst AAO を使った各種 HPLC の制御 ~ NANOSPACE ~ Activate Profile を行うと Shiseido NANOSPACE on Analyst と LC Status が表示されます LC Status には 圧力 ランタイム グラジエント組成などが表示されます また Show Monitor により NANOSPACE Monitor 画面が表示され 圧力をモニターすることができます Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

19 Analyst AAO を使った各種 HPLC の制御 ~ NANOSPACE ~ Shiseido NANOSPACE on Analyst では Configuration では 初期のハードウエアの構成の設定を行います Status では 現在のステイタスが表示されます また Direct Control により NANOSPACE を Analyst を介さず 直接制御することができます Method では Acquisition Method を作成します ここでは HPLC 側の Method のみならず Sync の設定や ガス量 電圧など Mass 側の諸条件設定を行うことも可能です Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

20 Analyst AAO を使った各種 HPLC の制御 ~ NANOSPACE ~ プルダウンから Method を選択します Injection 超音波洗浄の設定 Volumeで注入量の設定ができます Use Gradient Pumps にチェックを入れ Gradient Pumps をクリックすることでグラジエントの設定を行います Advanced をクリックし Autosampler の設定などを行います Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

21 Analyst AAO を使った各種 HPLC の制御 ~ NANOSPACE ~ Save Method で保存します もとの Method が MS Only の場合 Device を追加しますか? とメッセージが出ます Yes とクリックすると Save Method 画面が表示されます MS Detail>> をクリックすると MS の条件設定を行う画面が表示されます Ion Source からイオン源の条件設定を行います そのほか Duration の設定や Sync の設定を行うこともできます 最後に OK をクリックし Method が保存されます Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

22 Analyst AAO を使った各種 HPLC の制御 問合せ先は? AAO に関しては 基本的には ドライバーを開発した HPLC 各社が ドライバーの提供 ( インストール ) 取り扱い説明などを行います Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

23 知っておくと便利な Analyst の機能 普段テクニカルサポートあてにいただいておりますお客様からのご質問から これは便利だ とコメントをもらったものを中心に いくつか Analyst 便利機能を紹介いたします Batch のインポート Queue Manager でできる操作 Quantitate Table Setting の設定 画像のコピー ペーストなど Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

24 Batch のインポート 連続測定に使用する Acquisition Batch を あらかじめ Excel などで作成しておき そのファイルをインポートして使用することができます Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

25 Batch のインポート 1 適当な Batch を作成します 2 File/Export により Batch を Text 形式で保存します Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

26 Batch のインポート 3 Text 形式で保存した File を Excel で開きます 4 Excel 上で Acquisition Method の変更 バイアルポジションの修正 行の追加 など編集を行った後 形式を変えずに保存します Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

27 Batch のインポート 5 Analyst 上で Batch Editor を開き 右クリックメニューから Import From File を選択します 6 Excel で編集して作成した Text ファイルを選択します File of type は *.txt を選択します Open をクリックします Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

28 Batch のインポート 7 Select Autosampler の画面が表示されますので 測定に使用する Autosampler を選択し OK をクリックします Batch がインポートできました Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

29 Queue Manager でできる操作 測定履歴を表示する Queue Manager ここにもいくつか便利な機能があります Reacquire Insert Pause Delete Move Batch Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

30 Queue Manager でできる操作 Reacquire 測定をすでに行ったデータの再測定を行います 1 再測定したいサンプルを選択し 右クリックから Reacquire を選択します 3Queue にサンプルが追加されます 2Yes をクリックします Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

31 Queue Manager でできる操作 Insert Pause 測定の前に待ち時間を指定して入れることができます 1 待ち時間を入れたいサンプルを選択し 右クリックから Insert Pause を選択します 2Insert Pause(Sec) に待ち時間 ( 秒 ) を入力し OK をクリックします 指定時間が経過するまで測定は開始されません Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

32 Queue Manager でできる操作 Delete Submit したサンプルの削除を行います 1 削除したいサンプルを選択し 右クリックから Delete を選択します 2Delete Batch か Delete Sample かを選択し OK をクリックします 指定したサンプルが削除されました 測定中の Sample Batch の削除はできません Analyst1.2 までのバージョンでは うまく機能しませんので 使用しないでください Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

33 Queue Manager でできる操作 Move Batch 測定の順序をバッチ単位で入れ替えることができます 2Move Batch 画面での Batch List から 移動したい Batch の順序をドラッグ & ドロップにより変更します OK をクリックします 1 右クリックから Move Batch を選択します 測定の順序が入れ替わりました Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

34 Quantitate Table Setting の設定 Quantitate で Results Table を作成するときにそのフォーマットとして使用する Table Setting ここでは その設定について説明します Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

35 Quantitate Table Setting の設定 新しい Setting の作り方その 1 1Results Table 上で右クリックします 2Table Settings Export To New Table Settings を選択します 3New Title 画面が表示されますので 新しい Setting の名前を入力し OK をクリックします Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

36 Quantitate Table Setting の設定 新しい Setting の作り方その 2 1Analyst トップメニューの Tools/Settings New Quantitation Results Table Settings を選択します 2Table Settings 画面が表示されます 雛形となる Setting をクリックし New をクリックします 3New Title 画面が表示されますので 新しい Setting の名前を入力し OK をクリックします 4 新しく作成された Setting について Columns > Edit から編集を行い Done を押します ちなみに この Table Settings の画面で 削除したい Setting を選択し Remove をクリックすることで Setting を削除できます Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

37 Quantitate Table Setting の設定 Table Settings のコピー Setting は Project ごとに保存されます でも お気に入りの Setting ができたので 別の Project でも使いたい そんなときには Setting のコピーを行います 1Tools/Project Copy Data をクリックします 2Copy Data 画面が表示されます コピー元 Project コピーしたい Project をプルダウンから選択し Directories から Table Settings にチェックを入れ Copyをクリックします Acquisition Method や Report Templates Quantitation Method もコピーできます Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

38 Quantitate Table Setting の設定 Table Settings の初期設定 新しく Project を作るときに毎回 Copy Data をするのも手間です いっそのこと Table Settings の初期設定を作り変えましょう Table Settings の初期設定は Default という Project にあります この Project で Tools/Settings New Quantitation Results Table Settings をクリックし Table Settings 画面から お好みの Table Setting を作成します Default 自身をカスタマイズしてもよいです これで出来上がりです 新規に Project を作ってみましょう Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

39 Quantitate Table Setting の設定 Table Settings の初期設定 新しく Project を作りました DefaultのProjectと同じSettingになっていました! Tools/Settings New Quantitation Results Table Settings をクリックし 設定を確認してみると Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

40 画像のコピー ペースト クロマトや Results Table を画像としてワードやパワーポイントに貼り付けるときのポイントをいくつか紹介します 主に Analyst1.4.1 以降でできる操作になります Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

41 画像のコピー ペースト コピー ペーストの基本操作 1 コピーしたい画面を表示させ Print Preview からプレビュー画面を表示させます 2Next Page Prev Page からコピーしたい画面を選択し 表示させ Copy をクリックします Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

42 画像のコピー ペースト コピー ペーストの基本操作 3 画面を取り込みたいソフトで Paste Special を行います Picture (Enhanced Metafile) を選択し OK をクリックします 画面が取り込まれました Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

43 画像のコピー ペースト Paste SpecialでPicture (Enhanced Metafile) を選択しないと 軸の単位がきれいに表示されません XIC of +MRM (2 pairs): 400.0/200.0 amu from Sample 7 (API3-018) of QuanData.Wiff (Unknown Ion Source) 1.20e4 1.15e4 1.10e4 1.05e4 1.00e Paste Picture Max. 1.2e4 cps. I n t e n s i t y, c p s XIC of +MRM (2 pairs): 400.0/200.0 amu from Sample 7 (API3-018) of QuanData.Wiff (Unknown Ion Source) e4 1.15e4 1.10e4 1.05e4 1.00e Max. 1.2e4 cps Time, min I n t e n s i t y, c p s Paste Picture (Enhanced Metafile) Time, min Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

44 画像のコピー ペースト プリントアウトすると線が細い 字が小さく見えにくい 字の大きさ フォントはここで変更します Analyst の Appearance Options の設定により 線の太さ 字の大きさを設定できます ここにチェックを入れると 線が太くなります Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

45 DiscoveryQuant Software Automaton の次世代ソフトとして DiscoveryQuant TM Software がリリースされました Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

46 DiscoveryQuant Software DiscoveryQuant を使用する前に 1 化合物の情報ファイル (.txt) 2 雛形となるMS scanなどのmethod Batchを作成しておきます MS Method MS/MS Method MS Batch DiscoveryQuant を起動します Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

47 DiscoveryQuant Software 作成しておいた.txt ファイルを選択し 選択された.txt ファイルをロードします Edit をクリックすると条件設定画面が現れます DiscoveryQuant 起動画面 Setup タブの画面では 1 化合物情報の読み込みを行います 2MS MS/MS の測定条件の設定を行います 3 最後に Update Batch Entry をクリックします.txt ファイルが読み込まれました Autosampler ピーク検出などの条件設定 MS scan の条件設定 MS/MS scan の条件設定 OK をクリックし 設定を保存します Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

48 DiscoveryQuant Software Status タブの画面では Start Scan をクリックします あとは全自動で MS MS/MS 測定が行われ Q1 Q3 DP CE の最適化が行われます 測定の進行状況や 現在測定している TIC クロマトの画面が随時更新され 表示されます Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

49 DiscoveryQuant Software ワンクリックで確認したい化合物の測定結果が表示されます 最適化されたパラメータが表示されます Review タブの画面では 測定結果を確認することができます 最適値として採用されたクロマトは色つきで表示されます スクロールにより全検討条件でのスペクトルを確認することができます Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

50 DiscoveryQuant Software Add されました MRM の Method や Batch( テキストファイル ) を作成することもできます File > Create MRM Methods を選択すると Create MRM Methods 画面が表示されます Get Compounds から化合物リストを作成します Method を作りたい化合物を Add します Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

51 DiscoveryQuant Software MRM の Method や Batch( テキストファイル ) を作成することもできます File > Create MRM Methods を選択すると Create MRM Methods 画面が表示されます Get Compounds から化合物リストを作成します Edit では Method や Batch のフォーマットを設定します Load Compound(s) to Table により Batch Table が作成されます Generate により Method や Batch( テキストファイル ) が作成されます Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

52 DiscoveryQuant Software Automaton の次世代ソフトとして DiscoveryQuant Software をよろしくお願いします Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

53 本内容に関するお問い合わせは タカラバイオ API テクニカルサポートライン TEL; FAX; web : Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting

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