系 統 保 存 を 行 っている( 図 1) 本 課 題 では 遺 伝 的 劣 化 を 生 じない 系 統 保 存 技 術 の 確 立 に 向 けた 知 見 の 収 集 を 目 的 として 両 系 統 について 遺 伝 的 特 性 調 査 を 行 った 本 年 度 は 矢 掛 高 校 においてこれま

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1 スイゲンゼニタナゴ Rhodeus atremius suigenis (Mori) 河 村 功 一 三 宅 琢 也 三 重 大 学 大 学 院 生 物 資 源 学 研 究 科 ( 三 重 県 津 市 三 重 県 津 市 栗 真 町 屋 町 1577, TEL , kawa-k@bio.mie-u.ac.jp) 緒 言 スイゲンゼニタナゴ(Rhodeus atremius suigensis)は 岡 山 平 野 を 中 心 とする 特 定 の 水 域 にのみ 限 定 的 に 生 息 するコイ 目 コイ 科 タナゴ 亜 科 の 一 種 である( 河 村, 2003) 本 種 は 亜 種 であるカゼトゲタナゴ(R. a. atremius)と 共 に 染 色 体 数 が 2n =46 とタナ ゴ 亜 科 において 特 異 な 核 型 を 持 つだけでなく( 小 島 ほか, 1973) 系 統 発 生 的 にも 特 化 的 な 種 である 事 が 判 っている(Okazaki et al., 2001) この 事 からスイゲンゼニタナ ゴはタナゴ 亜 科 の 進 化 だけでなく 日 本 列 島 の 成 立 を 考 える 上 でも 貴 重 な 種 であると 言 うことができる しかしながら 本 種 は 近 年 の 圃 場 整 備 宅 地 開 発 等 の 影 響 により 生 息 地 個 体 数 共 に 著 しく 激 減 し 1999 年 には 環 境 省 により 絶 滅 危 惧 IA に 更 に 2002 年 には 国 内 希 少 野 生 動 植 物 種 に 指 定 されている こうした 中 で スイゲンゼニタナゴ の 保 護 対 策 は 急 務 の 課 題 とされている( 河 村, 2003) 昨 年 度 は 長 期 の 継 代 においてしばしば 見 られる 骨 格 異 常 についてその 出 現 様 式 を 明 らかにするため 継 代 個 体 と 野 外 個 体 の 間 での 交 配 試 験 とマイクロサテライトマー カー(MS)を 用 いた 集 団 解 析 を 行 った その 結 果 1) 骨 格 異 常 の 出 現 が 必 ずしも 近 交 と 関 係 したものではなく 小 数 の 遺 伝 子 座 に 支 配 されている 可 能 性 が 高 い 2) 正 常 個 体 との 交 配 により 改 善 可 能 である 事 を 明 らかとした また 野 外 集 団 において 最 も 遺 伝 的 多 様 性 が 低 い 吉 井 川 集 団 について 遺 伝 的 多 様 性 の 改 善 に 向 けた 対 策 の 一 歩 とし て 広 範 囲 に 渡 る 生 息 実 態 調 査 と 集 団 解 析 を 行 った その 結 果 遺 伝 的 多 様 性 の 低 さ は 局 所 的 な 現 象 ではなく 吉 井 川 水 域 全 体 の 特 徴 である 可 能 性 が 高 い 事 が 示 唆 された 本 年 度 はこれまでに 得 られた 知 見 を 踏 まえ 1) 既 存 飼 育 系 統 ( 矢 掛 高 校 総 社 東 小 学 校 )における 遺 伝 的 特 性 評 価 と 遺 伝 的 改 善 に 向 けた 知 見 の 収 集 2) 遺 伝 的 多 様 性 の 低 い 野 外 集 団 ( 吉 井 川 集 団 )における 遺 伝 的 改 善 に 向 けた 知 見 の 収 集 に 加 え 今 年 度 新 たに 芦 田 川 で 発 見 された 集 団 について 3) 野 外 集 団 の 遺 伝 的 特 徴 の 解 明 を 中 心 とす る 系 統 保 存 に 向 けた 情 報 収 集 を 行 った なお 本 事 業 の 実 施 に 当 たり 野 外 集 団 の 採 捕 ならびに DNA 資 料 の 採 集 については 事 前 に 中 国 四 国 環 境 事 務 所 の 承 諾 を 取 ってあ る 事 を 記 しておく 材 料 と 方 法 1) 既 存 飼 育 系 統 における 遺 伝 的 特 性 評 価 と 遺 伝 的 改 善 に 向 けた 知 見 の 収 集 矢 掛 高 校 と 総 社 東 小 学 校 ではそれぞれ 高 梁 川 と 足 守 川 の 個 体 を 用 いて 2008 年 から 31

2 系 統 保 存 を 行 っている( 図 1) 本 課 題 では 遺 伝 的 劣 化 を 生 じない 系 統 保 存 技 術 の 確 立 に 向 けた 知 見 の 収 集 を 目 的 として 両 系 統 について 遺 伝 的 特 性 調 査 を 行 った 本 年 度 は 矢 掛 高 校 においてこれまで 追 跡 踏 査 を 行 ってきた1 号 ( 分 析 個 体 数 :11 個 体 ) に 加 え 平 成 22 年 に 1 号 の 50 個 体 を 新 たに 移 植 する 事 により 創 設 した 2 号 の 個 体 ( 分 析 個 体 数 :7 個 体 )についても 同 様 の 調 査 分 析 を 行 った また 総 社 東 小 学 校 の 保 存 系 統 については 平 成 23 年 の 親 魚 ( 分 析 個 体 数 :9 個 体 )と 稚 魚 ( 分 析 個 体 数 :17 個 体 )について 矢 掛 高 校 と 同 様 の 調 査 を 行 った 分 析 方 法 としてはこれまで 同 様 MS7 座 と MHC class IIB 遺 伝 子 (Exon II 領 域 )に ついて 平 均 へテロ 接 合 度 (He: 期 待 値 ; Ho: 観 察 値 )とアリルリッチネス(Ar)を 求 め る 事 により 行 った( 河 村 ら, 2010) これら 遺 伝 的 多 様 性 のパラメーターの 計 算 には FSTAT (Goudet, 2001)を 用 いた 矢 掛 高 校 の 系 統 については MS データーか ら 血 縁 度 (r)と 有 効 集 団 サイズ(Ne)を 推 定 した 血 縁 度 は Microsatellite Toolkit v3.1 (Park, 2001)の allele sharing estimator(blouin et al., 1996)により 有 効 集 団 サイズ(Ne)は NeEstimator v1.3 (Peel et al., 2004)の Temporal 法 (Waples, 1989)によりそれぞれ 推 定 した また 遺 伝 的 ボトルネックの 有 無 を 見 るため Bottleneck ver (Piry et al., 1999) の Wilcocon s test と Mode shift test による 検 定 を 行 い Wilcocon s test においては TPM model(smm 90%; multiple mutations 10%; variance 10) (Garza and Williamson, 2001) を 用 いた なお 継 代 に 伴 う 遺 伝 的 特 徴 の 変 化 を 見 るため 全 ての 系 統 について PCA-GEN ver1.2(goudet, 1999)に よる 主 成 分 分 析 も 併 せて 行 った 2) 遺 伝 的 多 様 性 の 低 い 野 外 集 団 における 遺 伝 的 改 善 に 向 けた 知 見 の 収 集 昨 年 度 の 調 査 において 吉 井 川 は 水 系 全 体 として 遺 伝 的 多 様 性 が 低 い 集 団 であること が 明 らかとなり 現 在 岡 山 理 科 大 学 において 吉 井 川 集 団 の 遺 伝 的 改 善 のための 知 見 収 集 を 目 的 として 飼 育 実 験 を 行 っている( 河 村 三 宅 2011) 吉 井 川 集 団 は 遺 伝 的 多 様 性 が 低 いことに 加 え 昨 年 度 の 調 査 においては 骨 格 異 常 個 体 が 確 認 されるなど 近 親 交 配 が 集 団 の 適 応 度 に 与 える 影 響 が 危 惧 されている こうした 事 から 本 年 度 は 骨 格 異 常 個 体 の 出 現 率 を 推 定 するため 飼 育 個 体 を 用 いた 繁 殖 実 験 を 岡 山 理 科 大 学 にて 行 っ た また 継 代 に 伴 う 遺 伝 的 特 徴 の 変 化 を 見 るため 実 験 に 用 いた 親 魚 と 繁 殖 個 体 に ついて 1)と 同 じく MS7 座 について 多 型 解 析 を 行 った 32

3 3) 野 外 集 団 の 遺 伝 的 特 徴 の 解 明 を 中 心 とする 系 統 保 存 に 向 けた 情 報 収 集 芦 田 川 はスイゲンゼニタナゴの 分 布 の 西 限 であると 共 に 最 も 絶 滅 が 危 惧 されてい る 生 息 地 でもある 本 年 度 は 平 成 21 年 秋 に 新 たに 見 つかった 集 団 B( 分 析 個 体 数 :29 個 体 )について 保 全 に 向 けた 知 見 の 収 集 として mtdna MS MHC の 3 分 子 マーカーを 用 いた 遺 伝 的 特 性 調 査 を 行 った mtdna については 河 村 三 宅 (2010)の 方 法 に 従 い ND1 領 域 (975bp)の 配 列 決 定 を 行 い Miyake et al.(2010)により 報 告 されている 既 知 のハプロタイプとの 比 較 を 行 った MS と MHC については1)と 同 様 の 解 析 を 行 い 遺 伝 的 多 様 性 の 程 度 と 集 団 A との 遺 伝 的 関 係 について 調 べた また 遺 伝 的 ボトルネッ クの 有 無 を 見 るため 1)と 同 様 ボトルネックテストを 行 った なお 芦 田 川 の 集 団 A( 盈 進 高 校 の 保 存 系 統 の 起 源 )については 調 査 において 採 集 された 個 体 が 仔 魚 4 個 体 であったことから 分 析 は 行 わなかった 結 果 1) 既 存 飼 育 系 統 における 遺 伝 的 特 性 評 価 と 遺 伝 的 改 善 に 向 けた 知 見 の 収 集 遺 伝 的 多 様 性 について 見 ると 矢 掛 高 校 の1 号 (F4)はMHCでアリルD3が 観 察 され なかったものの MSとMHCの 何 れの 遺 伝 的 多 様 性 においても 前 年 度 との 間 に 殆 ど 差 は 見 られなか った( 図 2-3) 2 号 はMSの 遺 伝 的 多 様 性 におい て1 号 よりも 若 干 低 かったが MHCにおいて は1 号 よりも 高 い 結 果 となった 血 縁 度 につい て 見 ると1 号 は 前 年 度 よりも 低 い 値 を 示 した のに 対 し 2 号 は1 号 よりも 約 10% 高 い 値 を 示 した( 図 4) 主 成 分 分 析 において1 号 2 号 は 共 に 高 梁 川 集 団 の 近 傍 に 位 置 し 対 立 遺 伝 子 組 成 に 殆 ど 変 化 が 無 いことが 明 らかとなった ( 図 5) また 1 号 において 有 効 集 団 サイズ は 過 去 3 年 間 とほぼ 同 じく6 個 体 であった( 表 1) 遺 伝 的 ボトルネックの 有 無 について 見 ると 2 号 表 1 矢 掛 高 校 の 保 存 系 統 における 有 効 集 団 サイズの 変 化 の 集 団 ではMode shift testにおいてボト Ne 信 頼 範 囲 ルネックの 存 在 が 示 唆 された Founder ( 梁 川 ) - W 1 号 (F1) - 1 号 (F2) 総 社 東 小 学 校 の 保 存 系 統 について 見 ると 1 号 (F2) - 1 号 (F3) 親 魚 (H22)と 稚 魚 (H23)のMSの 遺 伝 的 多 1 号 (F3) - 1 号 (F4) 号 (F3) - 2 号 (F1) 様 性 は 共 に 足 守 川 集 団 よりも 約 30% 低 い 値 Temporal 法 による 推 定 ( aples, 199 を 示 したのに 対 し( 図 2) MHCにおいてはAr ヘテロ 接 合 度 の 何 れにおいても 足 守 川 集 団 よりも 高 い 値 を 示 した 血 縁 度 は 親 子 共 に 足 守 川 集 団 よりも 約 30% 高 い 値 を 示 し( 図 6) 主 成 分 分 析 においては 足 守 川 集 団 との 1 号 (F 1) ) 33

4 間 に 顕 著 な 遺 伝 的 差 異 が 認 められた( 図 6) なお 遺 伝 的 ボトルネックの 有 無 についてみると 親 子 共 にMode shift testにおい て ボトルネックの 存 在 が 示 唆 された 2) 遺 伝 的 多 様 性 の 低 い 野 外 集 団 における 遺 伝 的 改 善 に 向 けた 知 見 の 収 集 繁 殖 試 験 において 4 個 体 の 稚 魚 が 得 られ たが いずれの 個 体 においても 骨 格 異 常 は 認 められな かった MS の 遺 伝 的 多 様 性 について みると 親 集 団 ((H22)と 子 集 団 (H23)は 何 れも 母 集 団 である 吉 井 川 (Y3)に 近 い 特 徴 を 示 し 遺 伝 的 多 様 性 の 低 下 は 見 られなかった( 図 2) ま た 主 成 分 分 析 において 何 れの 集 団 も 吉 井 川 集 団 の 近 傍 に 位 置 し 遺 伝 的 特 徴 がほとんど 変 化 していないことが 判 った 3) 野 外 集 団 の 遺 伝 的 特 徴 の 解 明 を 中 心 とする 系 統 保 存 に 向 けた 情 報 収 集 mtdnaの 分 析 において 集 団 Bにおい ては2つのハプロタイプ(S13, S14)が 観 察 された( 図 7) S1Sはスイゲンゼニ タナゴにおいて 広 く 見 られるハプロタ イプであったのに 対 し S14は 集 団 B 固 有 であることがわかった( 図 78) MSの アリル 組 成 について 見 ると ほぼ 全 ての 座 において 集 団 Aに 近 い 組 成 を 示 し 遺 伝 的 多 34

5 様 性 においても 集 団 Aとほぼ 同 レベルであった( 図 2,9) MHCにおいてアリル 組 成 は 若 干 異 なったが 遺 伝 的 多 様 性 においては 集 団 Aとの 間 にほとんど 違 いは 見 られなかった ( 図 3) また 主 成 分 分 析 においては 集 団 Aに 遺 伝 的 に 最 も 近 い 事 が 明 らかとなった ( 図 6) 遺 伝 的 ボトルネックの 有 無 についてみるとMode shift testにおいてボトルネ ックの 存 在 が 示 唆 された 考 察 1) 既 存 飼 育 系 統 における 遺 伝 的 特 性 評 価 と 遺 伝 的 改 善 に 向 けた 知 見 の 収 集 矢 掛 高 校 の 結 果 は MS MHC の 何 れにおいても 遺 伝 的 多 様 性 だけで 無 く rare allele もよく 保 持 されている 事 を 示 している( 図 2,3,9) また 主 成 分 分 析 の 結 果 から 遺 伝 子 組 成 にほとんど 変 化 が 生 じていないことも 明 らかとなった( 図 6) 矢 掛 高 校 の 系 統 において 遺 伝 的 特 徴 がよく 保 持 されている 一 番 の 理 由 として 保 存 の 状 態 を 挙 げ る 事 ができる( 図 10) 当 施 設 は 設 置 面 積 が 広 いだけでなく( 約 2a) 環 境 の 自 然 度 が 高 く 水 量 水 質 水 温 も 年 間 を 通 してほぼ 安 定 している 実 際 有 効 集 団 サイズが 約 6 個 体 とほぼほぼ 一 定 である 事 は 個 体 数 がほぼ 環 境 収 容 力 に 達 し 安 定 している 可 能 性 を 示 している 生 息 個 体 数 は 約 150 個 体 と 推 定 されており( 平 成 23 年 11 月 推 35

6 定 ) 生 息 世 代 数 が 3 世 代 であるとされる 事 から 年 当 たりの 繁 殖 個 体 数 は 50 個 体 以 上 と 考 えられる スイゲンゼニタナゴの 雌 の1 繁 殖 期 における 産 卵 数 は 100 程 度 とさ れており( 鈴 木, 1995) 卵 稚 仔 の 死 亡 率 などを 考 慮 すると 雌 の 有 効 集 団 サイズが 約 3 個 体 というのは 比 較 的 妥 当 な 値 であると 考 えられる なお 2 号 においては Mode shift test において 遺 伝 的 ボトルネックの 存 在 が 示 唆 されたが これについては 遺 伝 的 多 様 度 に 加 え 生 息 個 体 数 と 有 効 集 団 サイズについて 次 年 度 以 降 も 継 続 してモニ タリングを 行 う 必 用 がある 矢 掛 高 校 とは 対 称 的 に 総 社 東 小 学 校 の 保 存 系 統 においては 顕 著 な 遺 伝 的 多 様 性 の 低 下 だけでなく( 図 2) 母 集 団 である 足 守 川 集 団 との 間 で 顕 著 な 遺 伝 的 差 異 が 認 められ た( 図 6) この 理 由 として 総 社 東 小 学 校 では 1t タンクを 2 台 繋 ぎ 合 わせた 環 境 で 系 統 保 存 を 行 っている 事 から 環 境 収 容 力 の 低 さが 予 想 される タナゴ 類 は 繁 殖 時 に 雄 がイシガイ 科 の 二 枚 貝 を 中 心 とする 縄 張 りを 形 成 することから その 環 境 における 繁 殖 個 体 数 は 形 成 可 能 な 縄 張 りの 数 に 大 きく 左 右 されることが 知 られている (Przybylski et al., 2007) したがって 系 統 の 作 出 に 用 いた 親 魚 の 数 (40 個 体 を 使 用 )が 十 分 であっても 実 際 に 繁 殖 を 行 っている 個 体 数 は 極 めて 少 ないと 考 えられ る この 系 統 の 今 後 の 継 代 に 当 たっては 野 外 個 体 ないしは 同 一 水 系 の 他 の 系 統 保 存 個 体 の 導 入 による 遺 伝 的 改 善 と 飼 育 環 境 のスペースの 拡 大 が 検 討 課 題 であると 考 えら れる 2) 遺 伝 的 多 様 性 の 低 い 野 外 集 団 における 遺 伝 的 改 善 に 向 けた 知 見 の 収 集 吉 井 川 集 団 はスイゲンゼニタナゴの 野 外 集 団 の 中 では 最 も 遺 伝 的 多 様 性 が 低 く( 河 村 ら, 2010) MHC においては 対 立 遺 伝 子 が 単 型 的 であることが 判 っている( 河 村 三 宅, 2011) また 当 水 系 においては 骨 格 異 常 個 体 の 出 現 頻 度 が 高 いとされ 昨 年 度 の 調 査 においても 実 際 に 確 認 されている これらの 事 から 吉 井 川 集 団 においては 遺 伝 的 多 様 性 の 低 下 と 近 親 交 配 により 遺 伝 的 劣 化 が 生 じている 可 能 性 が 考 えられる(Höglund, 2009) 今 回 この 事 を 確 かめるため 昨 年 度 吉 井 川 Y3 地 点 において 採 集 した 個 体 を 用 い 自 然 繁 殖 による 交 配 試 験 を 行 ったが 骨 格 異 常 個 体 は 確 認 されなかった 昨 年 度 高 松 農 業 高 校 の 飼 育 系 統 において 生 じた 骨 格 異 常 個 体 を 用 いた 交 配 試 験 におい ても 今 回 と 同 様 の 結 果 が 得 られている( 河 村 三 宅, 2011) これらの 結 果 から 骨 格 36

7 異 常 の 要 因 として 遺 伝 的 要 因 だけでなく 環 境 要 因 の 存 在 も 否 定 できないと 思 われる 吉 井 川 集 団 の 保 護 における 課 題 は 遺 伝 的 多 様 性 の 低 さが 適 応 度 の 及 ぼす 影 響 であり これについては 野 外 調 査 による 個 体 群 動 態 の 追 跡 ならびに 遺 伝 的 多 様 性 の 高 い 他 水 系 の 集 団 との 間 で 適 応 度 についての 比 較 が 必 要 と 思 われる もし こうした 調 査 におい て 明 らかに 適 応 度 の 低 下 が 見 られる 場 合 は 近 隣 の 旭 川 などから 個 体 導 入 による 遺 伝 的 改 善 が 必 要 と 考 えられる 3) 野 外 集 団 の 遺 伝 的 特 徴 の 解 明 を 中 心 とする 系 統 保 存 に 向 けた 情 報 収 集 スイゲンゼニタナゴの 野 外 集 団 の 中 で 芦 田 川 集 団 は 現 在 最 も 厳 しい 生 息 状 況 に 置 かれているとされている( 河 村, 未 発 表 ) 今 回 平 成 21 年 秋 に 発 見 された 集 団 B に ついて 遺 伝 的 特 性 調 査 を 行 った 所 当 集 団 は 遺 伝 的 には 同 一 水 系 内 の 集 団 A に 近 く( 図 6) 遺 伝 的 多 様 性 においてもほぼ 同 水 準 であることが 明 らかとなった( 図 2, 3) し かしながら mtdna においては 他 の 集 団 では 見 られないハプロタイプが 確 認 されるなど 僅 かではあるものの 集 団 A との 遺 伝 的 相 違 も 確 認 された( 図 7) 現 在 集 団 A は 絶 滅 寸 前 (H23 の 調 査 での 採 集 個 体 数 は 稚 魚 4 匹 )であるのに 対 し 集 団 B の 個 体 数 は 比 較 的 多 いと 考 えられている この 事 から 絶 滅 寸 前 である 集 団 A の 保 全 に 向 けた 選 択 肢 として 1) 集 団 B からの 個 体 の 移 植 ないしは 2) 盈 進 高 校 の 系 統 保 存 個 体 の 移 植 が あげられる しかしながら 集 団 A における 個 体 数 の 著 しい 減 少 は 生 息 環 境 の 生 息 環 境 の 悪 化 が 主 要 因 であることから 当 集 団 における 保 全 策 は 環 境 の 改 善 が 最 優 先 課 題 であり その 次 に 個 体 移 植 による 繁 殖 のサポートが 必 要 であると 考 えられる 謝 辞 野 外 調 査 ならびに 飼 育 実 験 においては 青 江 洋 氏 ( 倉 敷 水 辺 の 環 境 を 考 える 会 ) 室 貴 由 輝 氏 ( 岡 山 県 立 矢 掛 高 校 ) 古 本 哲 史 ( 盈 進 学 園 高 校 ) 小 林 秀 司 氏 ( 岡 山 理 科 大 学 動 物 学 科 ) 最 上 祥 成 氏 ( 中 国 四 国 地 方 環 境 事 務 所 ) 吉 郷 英 範 氏 ( 中 外 テクノス) に 大 変 お 世 話 になった これらの 方 々にこの 場 を 借 りて 厚 く 御 礼 申 し 上 げる 業 績 河 村 功 一 三 宅 琢 也 山 田 充 哉 ( 三 重 大 院 生 資 ) 本 茂 豊 ( 岡 山 県 ) 室 貴 由 輝 ( 矢 掛 高 校 ) 青 江 洋 ( 倉 敷 市 ) 小 林 秀 司 ( 岡 山 理 大 ) スイゲンゼニタナゴの 保 全 に 向 けた 遺 伝 情 報 の 収 集. 平 成 23 年 度 日 本 水 産 学 会 秋 期 大 会 口 頭 発 表 ( 於 長 崎 大 学 ). 引 用 文 献 Blouin, M. S., M. Parsons, V. Lacaille and S. Lotz Use of microsatellite loci to classify individuals by relatedness. Mol. Ecol., 5:

8 Garza, J. C. and E. G. Williamson Detection of reduction in population size using data from microsatellite loci. Mol. Ecol., 10: Goudet, J PCAGEN Version 1.2. Available from Goudet, J FSTAT, Version 2.9.3: a program to estimate and test gene diversities and fixation indices. Available at Höglund, J Evolutionary conservation genetics. Oxford University Press, Oxford 189 pp. Miyake, T., J. Nakajima, N. Onikura, S. Ikemoto, K. Iguchi, A. Komaru and K. Kawamura The genetic status of two subspecies of Rhodeus atremius, an endangered bitterling in Japan. Conserv. Genet.: Okazaki, M., K. Naruse, A. Shima and R. Arai Phylogenetic relationships of bitterlings based on mitochondrial 12S ribosomal DNA sequences. J. Fish Biol., 58: Park, S. D. E Trypanotolerance in West African Cattle and the Population Genetic Effects of Selection. Ph.D. thesis, University of Dublin. Available at Peel, D., J. R. Ovenden and S. L. Peel NeEstimator: software for estimating effective population size, Version 1.3. Brisbane, Queensland. Available at Piry, S., G. Luikart and J.-M. Cornuet BOTTLENECK: a computer program for detecting recent reductions in the effective size using allele frequency data. J. Hered., 90: Przybylski, M., M. Reichard, R. Spence and C. Smith Spatial distribution of oviposition sites determines variance in the reproductive rate of European bitterling (Rhodeus amarus). Behaviour, 144: Waples, R A generalized approach for estimating effective population size from temporal changes in allele frequency. Genetics, 121: 379. 河 村 功 一 スイゲンゼニタナゴ. 環 境 省 自 然 環 境 局 野 生 生 物 課 ( 編 ), pp 改 訂 日 本 の 絶 滅 のおそれのある 野 生 生 物 ーレッドデーターブックー 4 汽 水 淡 水 魚 類. 自 然 環 境 研 究 センター, 東 京. 河 村 功 一 三 宅 琢 也 スイゲンゼニタナゴの 保 全 技 術 の 開 発 ー 保 全 単 位 の 推 定 と 遺 伝 的 多 様 性 保 全 技 術 の 開 発 ー. pp 漁 場 環 境 生 物 多 様 性 保 全 総 合 対 策 事 業 ( 希 少 水 生 生 物 保 全 事 業 ) 平 成 20 年 度 報 告 書. 独 立 行 政 法 人 水 産 総 合 研 究 セン ター, 上 田. 河 村 功 一 三 宅 琢 也 スイゲンゼニタナゴの 保 全 技 術 の 開 発 ー 保 全 単 位 の 推 定 と 遺 伝 的 多 様 性 保 全 技 術 の 開 発 ー. pp 漁 場 環 境 生 物 多 様 性 保 全 総 合 対 策 事 業 ( 希 少 水 生 生 物 保 全 事 業 ) 平 成 22 年 度 報 告 書. 独 立 行 政 法 人 水 産 総 合 研 究 セン 38

9 ター, 上 田. 河 村 功 一 三 宅 琢 也 山 田 充 哉 スイゲンゼニタナゴの 保 全 技 術 の 開 発 ー 保 全 単 位 の 推 定 と 遺 伝 的 多 様 性 保 全 技 術 の 開 発 ー. pp 漁 場 環 境 生 物 多 様 性 保 全 総 合 対 策 事 業 ( 希 少 水 生 生 物 保 全 事 業 ) 平 成 21 年 度 報 告 書. 独 立 行 政 法 人 水 産 総 合 研 究 センター, 上 田. 小 島 吉 雄 上 野 紘 一 林 真 日 本 産 タナゴ 亜 科 魚 類 の 核 型 と 系 統 的 類 縁 との 関 係. 動 物 学 雑 誌, 82: 鈴 木 伸 洋 スイゲンゼニタナゴ. 水 産 庁 ( 編 ), pp 日 本 の 希 少 な 野 生 水 生 生 物 に 関 する 基 礎 資 料 (). 社 団 法 人 日 本 水 産 資 源 保 護 協 会, 東 京. 39