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1 Specialized Cell Culture Media APPLICATION CATALOG STEMCELL Technologies 社 培 地 Specialized Media for Hematopoietic, Mesenchymal and Neural Stem Cells Hybridoma Generation and Transfected Cell Selection A Global Biotechnology Marketing Company

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3 Contents 造 血 コロニーアッセイ 用 メチルセルロース 培 地 神 経 幹 細 胞 研 究 用 培 地 MethoCult- ヒト 細 胞 用 コロニーアッセイ 培 地... 4 MethoCult- ヒト 細 胞 用 スターターキット... 7 MethoCult Express- 7 日 間 での 総 コロニー 数 カウント 用 培 地... 8 MethoCult- マウス 細 胞 用 コロニーアッセイ 培 地... 9 MethoCult- ラット 細 胞 用 コロニーアッセイ 培 地 MethoCult 用 サポート 試 薬 器 具...10 コロニー 判 定 自 動 化 装 置 STEMvision TM コロニー 判 定 自 動 化 装 置...11 造 血 コロニーアッセイ 用 コラーゲン 培 地 MegaCult-C ヒト 巨 核 球 前 駆 細 胞 アッセイキット MegaCult-C ヒト 染 色 キット MegaCult-C マウス 巨 核 球 前 駆 細 胞 アッセイキット MegaCult 用 サポート 試 薬 造 血 前 駆 細 胞 長 期 培 養 培 地 MyeloCult ヒト&マウス 長 期 培 養 用 培 地 造 血 幹 / 前 駆 細 胞 増 殖 用 無 血 清 培 地 StemSpan Serum Free Expansion Media ALDH 活 性 に 基 づく 幹 細 胞 / 前 駆 細 胞 同 定 キット ALDEFLUOR- ALDH 活 性 に 基 づく 幹 細 胞 / 前 駆 細 胞 同 定 キット Neurospheres- マウス ラット 凍 結 神 経 幹 細 胞 NeuroFluor CDr3 神 経 前 駆 細 胞 検 出 用 蛍 光 プローブ NeuroCult- マウス 神 経 幹 細 胞 培 養 培 地 NeuroCult- ラット 神 経 幹 細 胞 培 養 培 地 NeuroCult- ヒト 神 経 幹 細 胞 培 養 培 地 NeuroCult NCFC Assay Kit NeuroCult Chemical Dissociation Kit NeuroCult Enzymatic Dissociation Kit NeuroCult SM Neuronal Supplement...28 神 経 生 理 学 用 無 血 清 培 地 BrainPhys TM...29 上 皮 細 胞 研 究 用 培 地 EpiCult- 乳 腺 上 皮 細 胞 培 養 培 地 MammoCult- Mammosphere アッセイ 用 培 地 ProstaCult マウス 前 立 腺 上 皮 前 駆 細 胞 の 増 殖 用 培 地 PneumaCult- Ex&ALI ヒト 気 管 支 上 皮 細 胞 用 培 地 IntestiCult マウス 腸 管 オルガノイド 形 成 維 持 用 培 地 ハイブリドーマおよびトランスフェクトした 細 胞 のための 選 択 &クローニング 培 地 ClonaCell-HY ハイブリドーマクローニングキット ClonaCell-TCS トランスフェクトセルクローニング 培 地 ClonaCell-CHO CHO 細 胞 用 クローニング 培 地 ClonaCell-FLEX クローニング 向 けメチルセルロース 間 葉 系 幹 細 胞 研 究 用 培 地 マウス 間 葉 系 幹 細 胞 培 養 用 関 連 ( 注 )ヒト 用 はES/iPS& 間 葉 系 幹 細 胞 研 究 用 試 薬 カタログに 掲 載 エリスロポ エチン 測 定 キット EPO ELISA EPO イムノアフィニティー 精 製 用 プレート ES/iPS 細 胞 研 究 用 培 地 ES-Cult マウスES/iPS 細 胞 の 維 持 培 養 ES-Cult- マウスES/iPS 細 胞 から 造 血 系 細 胞 への 分 化 価 格 表 価 格 表 ES-Cult- マウスES/iPS 細 胞 から 内 皮 系 細 胞 への 分 化 ( 注 )ヒト 用 はES/iPS& 間 葉 系 幹 細 胞 研 究 用 試 薬 カタログに 掲 載 血 管 内 皮 細 胞 CFU-HILLアッセイ 用 培 地 研 究 用 培 地 ( ) 本 カタログに 掲 載 の は 研 究 用 です 研 究 目 的 にのみ 使 用 し 人 や 動 物 の 医 療 用 臨 床 診 断 用 食 品 用 としては 使 用 しないようにご 注 意 ください

4 造 血 コロニーアッセイ 用 メチルセルロース 培 地 造 血 コロニーアッセイ 用 メチルセルロース 培 地 STEMCELL Technologies 社 の MethoCult は Terry Fox Laboratory の 研 究 者 により 開 発 された 製 法 に 従 って 造 血 系 細 胞 の 成 育 が 最 適 になるように 調 製 されたメチルセルロースベースの 造 血 前 駆 細 胞 コロニーアッセイ 用 培 地 で す メチルセルロースは 培 地 を 固 まらせずに 粘 稠 性 を 増 大 させる 性 質 があり 寒 天 のような 半 固 体 状 サポートシステ ムよりも 赤 血 球 系 コロニーをより 良 く 成 長 させるとともに 最 適 な 顆 粒 球 コロニーを 形 成 させるため ゲル 化 剤 として 広 く 用 いられています MethoCult のすべては Terry Fox Laboratory の 規 格 に 準 拠 した 厳 重 な 品 質 管 理 のもとに 調 製 されており ロッ ト 間 の 品 質 差 がありません それぞれ 目 的 別 の がありますので 用 途 に 合 わせてご 利 用 下 さい 細 胞 の 準 備 2. MethoCult に 細 胞 を 加 えボルテックス 3. Blue-End needle とシリンジを 用 いてディッシュに 分 注 し 37 5% CO 2 下 で 湿 度 を 保 って 培 養 (ヒト 日 間 マウス 7-14 日 間 ) 4. コロニーの 観 察 およびカウント (コロニーをピックアップして 染 色 PCR 染 色 体 解 析 などを 行 うこともできます) MethoCult - ヒト 細 胞 用 コロニーアッセイ 培 地 ヒト 造 血 前 駆 細 胞 コロニー 測 定 用 の 培 地 です 使 用 量 通 常 完 全 培 地 及 び EPO 抜 き 培 地 においては Culture Dish 1 枚 当 たり MethoCult 1mL に 細 胞 溶 液 0.1mL を 加 え 使 用 します その 他 不 完 全 培 地 においては 添 加 成 分 を 液 状 メディウムに 溶 解 し 所 定 の 割 合 で 混 合 したものを Culture Dish 1 枚 当 たり 1mL 使 用 します 例 えば MethoCult H4230 を 使 用 する 場 合 は Culture Dish 1 枚 当 たり MethoCult H4230 の 0.8mL に 液 状 培 地 中 CSF 及 び EPO の 0.2mL を 混 合 したものに 細 胞 溶 液 0.1mL を 加 えて 使 用 します 保 存 法 -20 に 保 存 凍 結 融 解 を 繰 り 返 さないで 下 さい 4 本 カタログに 掲 載 の は 研 究 用 です 研 究 目 的 にのみ 使 用 し 人 や 動 物 の 医 療 用 臨 床 診 断 用 食 品 用 としては 使 用 しないようにご 注 意 ください

5 造 血 コロニーアッセイ 用 メチルセルロース 培 地 ヒト MethoCult アプリケーション 別 培 地 選 択 組 成 は P.6 商 品 コードは P.7 を 参 照 アプリケーション BM PB MPB CB 分 離 した 細 胞 ( 例 CD34 + 細 胞 )を 用 いた 一 般 的 な 造 血 コロニーアッセイ CFU-E BFU-E CFU-GM CFU-G CFU-M CFU-GEMM が 観 察 可 能 BM PB MPB CB 分 離 した 細 胞 ( 例 CD34 + 細 胞 )を 用 いた 造 血 コロニー アッセイ 商 品 名 MethoCult H4435 Enriched MethoCult H4034 Optimum MethoCult H4434 Classic MethoCult H4535 Enriched without EPO MethoCult H4035 Optimum without EPO CFU-GM CFU-G CFU-M が 観 察 可 能 MethoCult H4534 Classic without EPO CB を 用 いた 短 時 間 での 造 血 コロニーアッセイ(7 日 間 で 観 察 可 能 ) MethoCult Express P.8 参 照 Progenitor の 総 コロニー 数 の 観 察 に 最 適 化 BM PB MPB CB 分 離 した 細 胞 ( 例 CD34 + 細 胞 )を 用 いた 無 血 清 培 地 での 造 血 コロニーアッセイ 向 け MethoCult SF H4436 CFU-E BFU-E CFU-GM CFU-G CFU-M CFU-GEMM が 観 察 可 能 BM PB MPB CB 分 離 した 細 胞 ( 例 CD34 + 細 胞 )を 用 いた 無 血 清 培 地 での 造 血 コロニーアッセイ 向 け MethoCult SF H4536 CFU-GM CFU-G CFU-M が 観 察 可 能 BM PB などを 用 いた 条 件 培 地 による 造 血 コロニーアッセイ CFU-E BFU-E CFU-GM CFU-G CFU-M CFU-GEMM が 観 察 可 能 MethoCult H4531 あるいは H4533 を 用 いた EPO 非 依 存 性 の erythroid progenitor assay のポジティブコントロールとしても 使 用 可 能 CSF の 代 わりに 条 件 培 地 を 用 いた 造 血 コロニーアッセイにおける EPO 非 依 存 性 の erythroid progenitor の 観 察 MethoCult H4431 MethoCult H4433 MethoCult H4531 MethoCult H4533 MethoCult H4435 Enriched 分 離 した 細 胞 を 用 いた 造 血 コロニーアッセイ MethoCult H4435 Enriched without EPO ヒト LTC-IC アッセイ MethoCult H4435 Enriched サル 造 血 コロニーアッセイ 用 培 地 MethoCult H4435 Enriched MethoCult H4034 Optimum MethoCult H4434 Classic MethoCult H4535 Enriched without EPO MethoCult H4035 Optimum without EPO MethoCult H4534 Classic without EPO MethoCult H4230 成 長 因 子 など ユーザーご 自 身 で 添 加 調 製 可 能 な MethoCult MethoCult H4230 (with EPO) 血 清 含 有 培 地 EPO 含 有 培 地 無 血 清 培 地 を 販 売 MethoCult SF H4236 (serum free) MethoCult のベースとなる 培 地 MethoCult H4100 ユーザーご 自 身 で 成 分 を 添 加 調 製 可 能 BM-Bone Marrow;PB-Peripheral Blood;MPB-Mobilized Peripheral Blood;CB-Cord Blood 5 本 カタログに 掲 載 の は 研 究 用 です 研 究 目 的 にのみ 使 用 し 人 や 動 物 の 医 療 用 臨 床 診 断 用 食 品 用 としては 使 用 しないようにご 注 意 ください

6 造 血 コロニーアッセイ 用 メチルセルロース 培 地 ヒト MethoCult コンポーネントの 有 無 ヒト MethoCult H4034 Optimum H4035 Optimum without EPO H4434 Classic H4534 Classic without EPO H4435 Enriched H4535 Enriched without EPO 商 品 コード ST-04034V ST-04044V ST ST ST ST ST ST ST ST ST ST ST ST ST ST MC FBS BSA INSULIN + TRANSFERRIN コンポーネント 2-ME 成 長 因 子 EPO SCF,GM-CSF,IL-3 その 他 G-CSF G-CSF IL-6,G-CSF IL-6,G-CSF H4436 ST IL-6,G-CSF H4536 ST IL-6,G-CSF H4431 ST Agar-LCM H4531 ST Agar-LCM H4433 ST PHA-LCM H4533 ST PHA-LCM H4100 ST H4236 ST H4330 ST H4230 ST MC=Methylcellulose;2-ME=Mercaptoethanol;Agar-LCM=Agar-Leukocyte Conditioned Medium; PHA-LCM=Phytohemagglutinin-Leukocyte Conditioned Medium ヒト MethoCult CFC アッセイに 使 用 する 細 胞 量 (35mm ディッシュ) 細 胞 の 種 類 細 胞 数 (35mm) Bone Marrow - Ammonium Chloride Treated 2 x x 10 5 Bone Marrow - Mononuclear Cells* 1-5 x 10 4 Cord Blood - Mononuclear Cells* 5 x x 10 4 Normal Peripheral Blood - Mononuclear Cells* 1-2 x 10 5 Mobilized Peripheral Blood 1-5 x 10 4 Progenitor (e.g. CD34 + ) Cell Enriched (BM,CB,MPB) x 10 3 *Mononuclear cells (MNCs) isolated by density-based cell separation (light density, g/ml) ヒト 正 常 細 胞 における 標 準 的 な Progenitor 数 細 胞 の 種 類 PROGENITOR の 種 類 CFU-E BFU-E CFU-GM CFU-GEMM Bone Marrow - Ammonium Chloride Treated per 10 5 cells (n=50) 31(1-78) 115(1-251) 100(30-170) 5(1-15) Bone Marrow - Mononuclear Cells* per 10 5 cells (n=17) 188(1-506) 175(1-477) 408(1-990) 10(1-30) Bone Marrow - CD34 + Cell Enriched per 10 3 cells (n=15) 30(1-59) 34(1-74) 54(7-101) 2(1-5) Cord Blood - Mononuclear Cells* per 10 5 cells (n=16) 9(1-48) 104(1-310) 115(1-303) 25(1-59) Normal Peripheral Blood - Mononuclear Cells* per 10 5 cells (n=30) 2(1-10) 30(1-62) 9(1-18) 2(1-5) Mobilized Peripheral Blood per 10 5 cells (n=19) 8(1-27) 121(1-257) 111(1-257) 23(1-67) CFC numbers were determined using MethoCult H4434 Classic. Values are expressed as means; the range is defined by means ± 2 standard deviations. *Mononuclear cells (MNCs) isolated by density-based cell separation (light density, g/ml) 6 本 カタログに 掲 載 の は 研 究 用 です 研 究 目 的 にのみ 使 用 し 人 や 動 物 の 医 療 用 臨 床 診 断 用 食 品 用 としては 使 用 しないようにご 注 意 ください

7 造 血 コロニーアッセイ 用 メチルセルロース 培 地 ST-04034V MethoCult H4034 Optimum 100 ml ST MethoCult H4035 Optimum without EPO 100 ml ST MethoCult H4034 Optimum 3 ml x 24 tubes ST-04044V Special MethoCult H4034 Optimum (4 ml/tube) 4 ml x 12 tubes ST MethoCult H4035 Optimum without EPO 3 ml x 24 tubes ST MethoCult H ml ST MethoCult H ml ST MethoCult SF BIT H ml ST MethoCult H ml ST MethoCult H ml ST MethoCult H ml ST MethoCult H4434 Classic 100 ml ST MethoCult H4435 Enriched 100 ml ST MethoCult SF BIT H ml ST MethoCult H4434 Classic 3 ml x 24 tubes ST MethoCult H4435 Enriched 3 ml x 24 tubes ST MethoCult H ml ST MethoCult H ml ST MethoCult H4534 Classic without EPO 100 ml ST MethoCult H4535 Enriched without EPO 100 ml ST MethoCult SF BIT H ml ST MethoCult H ml x 24 tubes ST MethoCult H4534 Classic without EPO 3 ml x 24 tubes ST MethoCult H4535 Enriched without EPO 3 ml x 24 tubes MethoCult - ヒト 細 胞 用 スターターキット メチルセルロースをベースとした 培 地 MethoCult を 用 いた 造 血 幹 細 胞 コロニーアッセイを 行 うための 試 薬 器 具 類 を 全 て 取 り 揃 えたスターターキットです 造 血 幹 細 胞 コロニーアッセイを 初 めて 行 う 方 或 いは 検 体 数 が 少 ない 方 に 最 適 です キッ ト 中 の MethoCult の 種 類 の 違 いにより 種 々のキットをご 用 意 しております コンポーネント MethoCult(3mL x 24 本 ) Plating syringes(30 本 ) Blunt-end needles (30 本 ) Assay dishes(70 枚 ) Scoring dishes(5 枚 ) 細 胞 洗 浄 用 2% FBS in Iscove's MDM(100mL x 6 本 ) RBC lysing 用 Ammonium chloride solution (100mL) Technical Manual Colony Atlas ST Starter Kit MethoCult H4034 Optimum 1 kit ST Starter Kit MethoCult H4434 Classic 1 kit ST Starter Kit MethoCult H4534 Classic without EPO 1 kit 7 本 カタログに 掲 載 の は 研 究 用 です 研 究 目 的 にのみ 使 用 し 人 や 動 物 の 医 療 用 臨 床 診 断 用 食 品 用 としては 使 用 しないようにご 注 意 ください

8 造 血 コロニーアッセイ 用 メチルセルロース 培 地 MethoCult Express - 7 日 間 での 総 コロニー 数 カウント 用 培 地 従 来 の MethoCult を 用 いた 造 血 コロニーアッセイでは 結 果 を 得 るために 14 日 間 必 要 でしたが MethoCult Express を 用 いることにより 7 日 間 でコロニー 総 数 をカウントすることができるようになります コロニーを 形 成 する 細 胞 の 増 殖 を 促 進 する 培 地 組 成 となっています 特 長 移 植 片 の 品 質 を 7 日 間 で 評 価 可 能 Progenitor の 増 殖 とコロニー 形 成 を 促 進 するために 最 適 化 された 組 成 培 養 を 日 続 けることで Colony lineage の 同 定 も 可 能 臍 帯 血 移 植 における CFC アッセイの 重 要 性 移 植 片 におけるトータルの colony-forming cell (CFC) 数 や colony-forming unit-granulocyte,macrophage (CFU- GM) は 好 中 球 血 小 板 移 植 や 移 植 後 の 生 着 のよい 指 標 になります 特 に 臍 帯 血 (CB) 移 植 においては 臍 帯 血 ユニッ ト 解 凍 後 のトータル CFC 数 が 他 のパラメーター( 凍 結 保 存 前 の CFC 数 やトータル 有 核 細 胞 数 CD34 陽 性 細 胞 数 など) よりも 回 復 と 生 着 に 強 く 相 関 があることが 分 かっております 移 植 片 の 前 駆 細 胞 含 有 量 を 移 植 前 に 評 価 することは 以 下 のような 理 由 から 臍 帯 血 移 植 に 非 常 に 重 要 と 考 えられています 前 駆 細 胞 含 有 量 は 臍 帯 血 ユニット 間 で 大 きな 違 いがある 移 植 に 有 効 な 細 胞 数 は 限 られている ex vivo での 操 作 ( 凍 結 保 存 や 解 凍 を 含 む)による 様 々な 影 響 7 日 間 で CFC アッセイが 行 えるメリット MethoCult Express を 使 用 した 7 日 間 の CFC アッセイにより 臍 帯 血 バンクや 移 植 施 設 は 保 存 や 移 植 に 最 適 な 臍 帯 血 ユニットを 従 来 の 半 分 の 時 間 で 選 択 することが 可 能 となります コロニーのタイプを 識 別 する 必 要 がなく トータルの CFC 数 を 測 定 するのであれば コロニーが 完 全 に 成 熟 し 形 状 学 的 に 判 別 することを 待 つ 必 要 がありません A) Da y 7, 2X objective B) Da y 14, 2X objective Colonies derived from cord blood progenitors in MethoCult Express at (A) day 7 and (B) day 14 with a 2X objective lens;at (C) day 7 and (D) day 14 with a 4X objective lens. C) Da y 7, 4X objective D) Da y 14, 4X objective ST MethoCult Express 100 ml ST MethoCult Express 3 ml x 24 tubes 8 本 カタログに 掲 載 の は 研 究 用 です 研 究 目 的 にのみ 使 用 し 人 や 動 物 の 医 療 用 臨 床 診 断 用 食 品 用 としては 使 用 しないようにご 注 意 ください

9 造 血 コロニーアッセイ 用 メチルセルロース 培 地 MethoCult - マウス 細 胞 用 コロニーアッセイ 培 地 マウス 造 血 前 駆 細 胞 コロニー 測 定 用 の 培 地 です マウス MethoCult アプリケーション 別 培 地 選 択 アプリケーション 骨 髄 脾 臓 胎 仔 肝 臓 分 離 した 細 胞 ( 例 lineage - SCA1 + c-kit + )を 用 いた 造 血 コロニーアッセイ BFU-E CFU-GM CFU-G CFU-M CFU-GEMM が 観 察 可 能 骨 髄 脾 臓 胎 仔 肝 臓 分 離 した 細 胞 ( 例 lineage - SCA1 + c-kit + )を 用 いた 造 血 コロニーアッセイ CFU-GM CFU-G CFU-M が 観 察 可 能 骨 髄 などから BFU-E の 観 察 に 適 した 培 地 骨 髄 などから CFU-pre-B の 観 察 に 適 した 培 地 LTC-IC アッセイから primitive hematopoietic progenitor の 検 出 CFU-E late BFU-E の 検 出 向 け ユーザーご 自 身 で 成 長 因 子 を 添 加 し 他 の 造 血 幹 細 胞 を 形 成 させることも 可 能 成 長 因 子 など ユーザーご 自 身 で 添 加 調 製 可 能 な MethoCult 血 清 含 有 培 地 EPO 含 有 培 地 無 血 清 培 地 を 販 売 MethoCult のベースとなる 培 地 ユーザーご 自 身 で 成 分 を 添 加 調 製 可 能 商 品 名 MethoCult GF M3434 MethoCult GF M3534 MethoCult SF M3436(serum free) MethoCult M3630 MethoCult GF M3434 MethoCult GF M3334 MethoCult M3231 MethoCult M3234 MethoCult SF M3236 (serum free) MethoCult M3134 マウス MethoCult コンポーネントの 有 無 マウス METHOCULT 商 品 コード MC FBS BSA0 INSULIN + TRANSFERRIN コンポーネント 2-ME 成 長 因 子 EPO SCF, IL-6, IL-3 その 他 GF M3434 ST ST GF M3534 ST M3630 ST IL-7 SF M3236 ST SF M3436 ST GF M3334 ST M3234 ST M3231 ST M3134 ST MC=Methylcellulose; 2-ME=Mercaptoethanol マウス MethoCult CFC アッセイに 使 用 する 細 胞 量 (35mm ディッシュ) 細 胞 の 種 類 CFC アッセイ 使 用 する METHOCULT 細 胞 数 (35mm ディッシュ) Mouse Bone Marrow CFU-E, Mature BFU-E M x 10 5 Mouse Bone Marrow BFU-E, CFU-GM, CFU-GEMM M x 10 4 Mouse Bone Marrow CFU-pre-B M x 10 4 Adult Spleen and Peripheral Blood BFU-E, CFU-GM, CFU-GEMM M x 10 5 Fetal Liver (day pc) BFU-E, CFU-GM, CFU-GEMM M x 10 4 *Lin - BFU-E, CFU-GM, CFU-GEMM M x 10 3 Yolk sac BFU-E, CFU-GM, CFU-GEMM M x 10 4 Mouse Bone Marrow BFU-E M x 10 4 Notes: 1. The plation concentrations were established using C57BL/6 strains. For other strains, transgenic or treated mice, plate cells at 2-3 cell densities to establish optimal plating concentrations. 2. Cell purification steps are generally not necessary. RBCs can be removed from spleen and peripheral blood samples by ammonium chloride lysis (ST-07800/07850). *Lin - cells from mouse bone marrow and fetal liver are isolated using StemSep (ST-13056) or EasySep (ST-19756) progenitor cell enrichment kits. 9 本 カタログに 掲 載 の は 研 究 用 です 研 究 目 的 にのみ 使 用 し 人 や 動 物 の 医 療 用 臨 床 診 断 用 食 品 用 としては 使 用 しないようにご 注 意 ください

10 造 血 コロニーアッセイ 用 メチルセルロース 培 地 マウス 正 常 骨 髄 細 胞 における 標 準 的 な Progenitor 数 PROGENITOR METHOCULT MEDIUM CFC PER 10 6 BONE MARROW CELLS CFU-E Mature BFU-E BFU-E CFU-GEMM CFU-GM M3334 M ± ± ± ± ± 800 CFU-Pre-B M ± 30 BFU-E M ± 460 Assays performed using 6-12 week old C57BL/6 mice. Values are expressed as means; the range is defined by mean ± 2 standard deviations. ST MethoCult M ml ST MethoCult M ml ST MethoCult M ml ST MethoCult SF M ml ST MethoCult M ml ST MethoCult GF M ml ST MethoCult SF M ml ST MethoCult GF M ml x 24 tubes ST MethoCult GF M ml ST MethoCult M ml MethoCult - ラット 細 胞 用 コロニーアッセイ 培 地 ラット 造 血 前 駆 細 胞 コロニー 測 定 用 の 培 地 です CFU-GM CFU-G CFU-M の 各 種 コロニーが 観 察 可 能 です アプリケーション ラットを 用 いた in vitro での 薬 剤 安 全 性 の 評 価 トランスジェニックラットにおける 造 血 発 生 の 評 価 ラット 細 胞 への 遺 伝 子 導 入 の 最 適 化 ST MethoCult GF R ml 10 MethoCult 用 サポート 試 薬 器 具 ST ErythroClear Red Blood Cell Depletion Reagent kit 臍 帯 血 2 ml 用 ST ErythroClear Red Blood Cell Depletion kit 臍 帯 血 2 ml 用 ST Human LDL 5 mg ST % Acetic acid with Methylene Blue 100 ml ST Iscove's MDM +2% FBS 100 ml ST Ammonium Chloride Solution 100 ml ST Ammonium Chloride Solution 500 ml ST HetaSep 20 ml ST HetaSep 100 ml ST STEMgrid-6 1 枚 ST mm Culture Dishes 10 枚 ST mm Culture Dishes 500 枚 ST SmartDish 5 枚 ST SmartDish 50 枚 ST mm Gridded Scoring Dishes 5 枚 ST Blunt End Needles 100 本 ST Blunt End Needles 2000 本 ST cc Syringes 30 本 ST cc Syringes 100 本 ST Cord Blood Colony Atlas 1 冊 本 カタログに 掲 載 の は 研 究 用 です 研 究 目 的 にのみ 使 用 し 人 や 動 物 の 医 療 用 臨 床 診 断 用 食 品 用 としては 使 用 しないようにご 注 意 ください

11 コロニー 判 定 自 動 化 装 置 STEMvision TM コロニー 判 定 自 動 化 装 置 STEMvision は メチルセルロース 培 地 を 用 いた 造 血 コロニー 形 成 細 胞 アッセイの 判 定 を 自 動 で 行 うための 機 械 です MethoCult 培 地 と SmartDish プレートを 組 み 合 わせたアッセイ 系 での 使 用 に 最 適 化 されています 特 長 コロニーカウントの 自 動 化 と 標 準 化 作 業 時 間 の 短 縮 コロニー 画 像 のデジタル 化 と 永 久 保 存 経 時 的 な 変 化 をイメージングにより 記 録 可 能 仕 様 大 きさ 478 mm ( 幅 )x 335 mm ( 奥 )x 347 mm ( 高 ) 重 量 STEMvision TM 27 kg および PC 12 kg 電 源 120V/240V, 1.5A, 60Hz/50Hz 商 品 コード ST ST ST ST ST ST ST ST 商 品 名 STEMvision Instrument STEMvision Human Cord Blood 7-day CFU analysis package STEMvision Color Human Cord Blood 14-day CFU analysis package STEMvision Color Human BM 14-Day CFU analysis package STEMvision Color Human MPB 14-Day CFU analysis package STEMvision Mouse M3434 Assay STEMvision Mouse M3534 Assay STEMvision Mouse M3436 Assay STEMvision による 判 定 のイメージ 赤 色 の 丸 がエリスロイド 系 黄 色 の 丸 がミエロイド 系 青 色 の 丸 が 混 合 コロニーを 示 す 専 用 器 具 SmartDish はメニスカスフリーの 6 ウェルプレートです ウェルの 縁 のコロニーもカウントできるため より 正 確 な 結 果 が 得 られます ST SmartDish 5 枚 ST SmartDish 50 枚 11 本 カタログに 掲 載 の は 研 究 用 です 研 究 目 的 にのみ 使 用 し 人 や 動 物 の 医 療 用 臨 床 診 断 用 食 品 用 としては 使 用 しないようにご 注 意 ください

12 造 血 コロニーアッセイ 用 コラーゲン 培 地 造 血 コロニーアッセイ 用 コラーゲン 培 地 これまで 造 血 性 細 胞 のコロニー 形 成 能 分 化 を 検 出 するために 種 々の 半 固 体 培 養 系 が 用 いられてきました 最 適 濃 度 の 造 血 成 長 因 子 を 添 加 したメチルセルロースベース 培 地 により 赤 血 球 顆 粒 球 / マクロファージ 系 統 のコロニー 形 成 細 胞 の 形 態 学 的 基 準 に 基 づくルーチン 定 量 に 便 利 で 再 現 性 のある 系 が 得 られます しかし マクロファージなどのある 種 の 細 胞 と 区 別 するのが 容 易 ではない 巨 核 球 を 同 定 するには 特 定 の 染 色 法 が 必 要 です メチルセルロースベースの 培 養 物 は 固 定 することができず さらに 細 胞 的 または 分 子 的 な 分 析 を 実 施 するにはコロニーを 個 別 に 適 採 加 工 する 必 要 が あります そこで 一 部 の 用 途 に 対 しては メチルセルロースベースの 半 固 体 培 養 物 の 代 替 としてコラーゲンゲルを 使 用 することが 有 効 です コラーゲンゲルは 造 血 細 胞 など 種 々の 細 胞 の 増 殖 を 促 進 することがわかっています インキュベーションに 続 いて 培 地 全 体 を 脱 水 固 定 し その 次 に 細 胞 化 学 的 または 免 疫 染 色 を 実 施 することが 可 能 です 得 られたスライドは 長 期 保 存 が 可 能 なため アッセイ 結 果 のアーカイブとして 保 管 することができます MegaCult-C ヒト 巨 核 球 前 駆 細 胞 アッセイキット MegaCult-C は 無 血 清 培 地 とコラーゲン 溶 液 を 用 いた 巨 核 球 前 駆 細 胞 アッセイ 用 の 培 養 固 定 染 色 用 のキットです 細 胞 学 的 または 免 疫 染 色 を 実 施 することが 可 能 です 得 られたスライドは 長 期 保 存 が 可 能 なため アッセイ 結 果 のアーカイブとして 保 管 することができます 特 長 臍 帯 血 動 員 末 梢 血 骨 髄 に 由 来 する 造 血 前 駆 細 胞 の 定 量 形 態 学 的 細 胞 学 的 または 免 疫 細 胞 学 的 な 染 色 技 術 を 用 いたコロニー 型 の 決 定 本 能 性 血 小 板 血 症 および 真 性 多 血 症 の 患 者 サンプル 中 の 巨 核 球 赤 血 球 前 駆 細 胞 増 殖 の 調 査 コラゲナーゼ(ST-07902) を 用 いたコラーゲンゲルからの 細 胞 単 離 操 作 手 順 12 本 カタログに 掲 載 の は 研 究 用 です 研 究 目 的 にのみ 使 用 し 人 や 動 物 の 医 療 用 臨 床 診 断 用 食 品 用 としては 使 用 しないようにご 注 意 ください

13 造 血 コロニーアッセイ 用 コラーゲン 培 地 特 長 CFU-Mk 検 出 用 のアッセイキットです 無 血 清 培 地 を 用 いることで FBS に 含 まれる TGF- β 等 による 巨 核 球 前 駆 細 胞 の 成 長 の 阻 害 その 他 の 不 確 定 な 要 因 を 排 除 します 巨 核 球 の 培 養 に 最 適 なサイトカイン(TPO IL-3 IL-6) 入 り 完 全 培 地 と サイトカイン 抜 きの 添 加 試 験 用 の 培 地 があります ダブルチャンバースライドを 用 いることで 培 養 した 全 てをそのまま 簡 単 に 固 定 染 色 可 能 です 培 養 した 細 胞 全 体 や コロニーを 採 取 して 顕 微 鏡 用 のスライドガラスに 移 す 操 作 は 不 要 です 固 定 したコロニーは 巨 核 球 に 特 異 的 な 抗 体 (GPIIb/IIIa(CD41) に 対 する 一 次 抗 体 )とビオチン 化 二 次 抗 体 - アビ ジン 結 合 アルカリフォスファターゼの 検 出 システムを 用 いて 免 疫 組 織 染 色 して 同 定 します 難 しいマクロファージと の 識 別 や 細 胞 数 の 少 ないコロニーの 同 定 が 増 幅 染 色 を 用 いることで 明 確 になります 巨 核 球 前 駆 細 胞 コロニーと Mixed コロニーの 同 定 が 可 能 です ( 巨 核 球 系 はピンク 色 その 他 は 薄 い 青 ) 1キット 24 検 体 用 です(1 検 体 あたり 2 アッセイとした 場 合 ) 1 検 体 あたり 1 アッセイとした 場 合 は 48 検 体 のアッ セイが 可 能 です チューブに 小 分 け 済 みの と ボトル がございます ST MegaCult-C Collagen and Medium without Cytokines 1.7 ml x 24 tubes ST MegaCult-C Collagen and Medium with Cytokines 2.0 ml x 24 tubes ST MegaCult-C Collagen and Medium without Cytokines 50 ml ST MegaCult-C Collagen and Medium with Cytokines 50 ml ST MegaCult-C Complete Kit without Cytokines 1.7 ml x 24 tubes ST MegaCult-C Complete Kit with Cytokines 2.0 ml x 24 tubes ST MegaCult-C Complete Kit without Cytokines 50 ml ST MegaCult-C Complete Kit with Cytokines 50 ml ST MegaCult-C Collagen and Medium with Lipids without Cytokines 50 ml MegaCult-C ヒト 染 色 キット ヒト 用 MegaCult-C で 用 いる 染 色 キットです コンポーネント Primary antibody( 染 色 用 一 次 抗 体 ) anti-tnp isotype negative control antibody (コントロール 抗 体 ) Secondary Biotin Conjugated Goat anti-mouse IgG antibody Avidin-alkaline Phosphatase conjugat Alkaline phospatase substrate tablets and buff er tablets Evans blue counterstain Human serum 10% BSA Solution ST MegaCult-C CFU-Mk Staining Kit 1 kit 13 本 カタログに 掲 載 の は 研 究 用 です 研 究 目 的 にのみ 使 用 し 人 や 動 物 の 医 療 用 臨 床 診 断 用 食 品 用 としては 使 用 しないようにご 注 意 ください

14 造 血 コロニーアッセイ 用 コラーゲン 培 地 / 造 血 前 駆 細 胞 長 期 培 養 培 地 MegaCult-C マウス 巨 核 球 前 駆 細 胞 アッセイキット マウス 用 の MegaCult-C です 巨 核 球 の 同 定 には 酵 素 法 による 染 色 でアセチルコリンエステラーゼを 検 出 して 巨 核 球 を 同 定 します ST MegaCult-C Collagen and Medium without Cytokines 1.7 ml x 24 tubes ST MegaCult-C Collagen and Medium without Cytokines 50 ml ST MegaCult-C Collagen and Medium with Lipids without Cytokines 50 ml MegaCult 用 サポート 試 薬 ST Human LDL 5 mg ST MegaCult-C Double Chamber Slides 16 Slides ST Collagen Solution 35 ml ST Filter cards & Polypropylene 48 セット ST Double Chamber Slides 48 セット ST ES-Cult Endothelial Collagen and Medium Kit 1 kit ST Collagenase 5 ml 造 血 前 駆 細 胞 長 期 培 養 用 培 地 MyeloCult は 長 期 培 養 用 の 培 地 で LTC-IC アッセイにご 利 用 いただけます LTC-IC アッセイ ヒト 細 胞 の 長 期 培 養 では 5 週 間 以 降 に 検 出 されたコロニー 形 成 細 胞 (CFC) は LTC-IC の 子 孫 に 相 当 します 試 験 細 胞 懸 濁 液 中 の LTC-IC を 定 量 するには 放 射 線 を 転 射 した 骨 髄 細 胞 あるいは 適 切 なヒトまたはマウスの 線 維 芽 細 胞 株 の 支 持 細 胞 層 上 で LTC-IC 細 胞 を 培 養 する 必 要 があります 限 界 希 釈 法 は LTC-IC の 発 生 頻 度 および 1 個 の LTC-IC あたりの 平 均 CFC 産 生 数 が 確 立 されれば サンプルの LTC- IC 含 有 量 をバルク 培 養 LTC-IC アッセイによって 測 定 できます( 骨 髄 臍 帯 血 動 員 末 梢 血 など 同 じ 供 給 源 からの 試 験 細 胞 を 使 用 しており アッセイ 条 件 が 同 一 である 場 合 ) その 後 CFC の 合 計 アウトプットを 1 個 の LTC-IC あたりの 平 均 CFC 産 生 数 で 割 ることによって LTC-IC 含 有 量 を 算 出 します MyeloCult ヒト&マウス 長 期 培 養 用 培 地 ヒトあるいはマウスの 造 血 性 細 胞 の 骨 髄 系 細 胞 長 期 培 養 地 です MyeloCult 長 期 培 養 用 培 地 は 長 期 造 血 細 胞 の 増 殖 を 最 適 に 促 進 する 性 能 に 関 する 広 範 なスクリーニングを 経 て 選 定 されています MyeloCult に 使 用 されているすべての 血 清 は 増 殖 性 ストローマ 細 胞 にサポートされた 状 態 でヒト マウス 骨 髄 造 血 細 胞 またはマウス B リンパ 系 細 胞 (Whitlock-Witte) の 培 養 を 確 立 できるかどうか 厳 しいスクリーニングを 経 て 選 定 されています 用 途 LTC-IC の 発 生 頻 度 の 定 量 および 表 現 型 機 能 的 特 性 の 研 究 長 期 培 養 において 骨 髄 造 血 を 開 始 し それを 数 週 間 にわたって 維 持 することが 可 能 な 幼 弱 な 造 血 前 駆 細 胞 は LTC-IC (Long term culture initiating cell ) と 呼 ばれてきました ヒトまたはマウスサンプル 中 の LTC-IC の 発 生 頻 度 は LTC- IC アッセイを 用 いて 測 定 することが 可 能 です MyeloCult および 関 連 を 用 いた 実 験 によると LTC-IC は 表 現 型 細 胞 周 期 特 性 増 殖 能 力 がそれぞれ 異 なる 異 種 細 胞 集 団 であることがわかりました 14 本 カタログに 掲 載 の は 研 究 用 です 研 究 目 的 にのみ 使 用 し 人 や 動 物 の 医 療 用 臨 床 診 断 用 食 品 用 としては 使 用 しないようにご 注 意 ください

15 造血前駆細胞 長期培養用培地 遺伝子導入の促進 MyeloCult 中での培養により 原始造血前駆細胞にレトロウイルス遺伝子を導入し それらのトランスフェクション細 胞を増殖させることが容易になります 骨髄造血調節因子の評価 骨髄造血の調節における間質由来因子の役割 正または負の調節因子あるいはその両方 および付着性分子 は MyeloCult を用いた長期培養で評価することが可能です in vitro での多能性造血細胞の増殖 ヒトのコロニー形成細胞 CFC および LTC-IC は MyeloCult に懸濁して培養することで増殖させることができます MyeloCult による長期静置培養で増殖したマウス全能性造血細胞は 照射マウスでリンパ球骨髄造血を維持することが 可能です 正常細胞と悪性細胞の違いの研究 MyeloCult は CML AML 再生不良性貧血の患者由来の LTC-IC 培養に使用されています CD34+ 細胞からナチュラルキラー NK 細胞への分化の研究 臍帯血由来の CD34+ 細胞のサブポピュレーションは IL-2 および IL-7 または幹細胞因子 (SCF) および IL-15 の存 在下で MyeloCult 中で培養することによって NK 細胞への分化を誘発することが可能です NK 細胞株の培養 MyeloCult はヒト NK-92 細胞株の培養に使用されています 限界希釈法による LTC-IC Assay MyeloCult バルク培養法による LTC IC Assay STEP 1 STEP 1 フィーダ細胞を定着させる フィーダ細胞を定着させる Test cells MyeloCult 3 mg/ml = feeder cel l = feeder cel l MyeloCul t 3 mg/ml MyeloCult Test cells 段階希釈した Test Cells を加える STEP 2 PRODUCTS FOR HEMA T OPOIETIC STEM CELL RESEARCH STEP 2 数がわかっている Test Cells を加える = LTC-IC = LTC-IC = CFC = CFC = mature cel l = mature cel l STEP 3 維持培養する STEP 3 維持培養する STEP 4 収集してプレートにまく MethoCult STEP 4 収集してプレートにまく MethoCult STEP 5 スコアリングする STEP 5 STEP 6 LTC-IC の発生頻度を計算する 商品コード ST ST ST ST MyeloCult MyeloCult MyeloCult MyeloCult H5100 H5100 M5300 M5300 商品名 コロニーの総数をカウントする 梱包単位 100 ml 500 ml 100 ml 500 ml H5100 はヒト用 M5300 はマウス用です 15 本カタログに掲載の製品は 研究用 です 研究目的にのみ使用し 人や動物の医療用 臨床診断用 食品用としては使用しないようにご注意ください

16 造 血 幹 / 前 駆 細 胞 増 殖 用 無 血 清 培 地 造 血 幹 / 前 駆 細 胞 増 殖 用 無 血 清 培 地 造 血 幹 細 胞 および 前 駆 細 胞 を in vitro で 維 持 増 殖 させたり アッセイを 行 う 技 術 は 造 血 に 関 する 研 究 の 発 展 に 大 きく 貢 献 してきました 従 来 造 血 細 胞 の 培 養 にはウシ 胎 仔 血 清 (FBS) を 含 む 培 地 が 用 いられていました しかし TGF- βやその 他 の 阻 害 因 子 の 濃 度 は 血 清 のバッチ 間 で 異 なります これらのばらつきを 最 小 限 にするため 特 に 特 定 の 調 節 因 子 または 成 長 因 子 の 作 用 に 関 する 研 究 においては 無 血 清 培 地 の 使 用 に 高 い 関 心 が 寄 せられています StemSpan Serum Free Expansion Media STEMCELL Technologies 社 は 造 血 幹 細 胞 および 造 血 前 駆 細 胞 の 維 持 増 殖 をサポートする 血 清 代 替 物 や 無 血 清 培 地 のリーディングサプライヤーとして StemSpan シリーズの 培 地 サイトカインカクテルを 提 供 しています 用 途 正 常 な 骨 髄 動 員 末 梢 血 臍 帯 血 に 由 来 する 造 血 細 胞 の 増 殖 に 適 しています CD34 + 細 胞 コロニー 形 成 細 胞 (CFC) Long term culture initiating cells ( LTC-IC ) 以 下 の 細 胞 に 由 来 する 樹 状 細 胞 の 発 生 培 養 に 適 しています ヒト CD34 + 細 胞 および 末 梢 血 CD14 + 細 胞 マウス 骨 髄 培 地 にサイトカインまたは 成 長 因 子 を 含 まないため 下 記 のアプリケーションが 可 能 です 骨 髄 臍 帯 血 動 員 末 梢 血 に 由 来 する 造 血 細 胞 の 維 持 または 増 殖 に 最 適 な 条 件 決 定 造 血 における 正 負 の 調 節 因 子 の 作 用 に 関 する 研 究 ( 組 成 が 明 確 なため 新 規 の 制 御 因 子 の 同 定 が 容 易 です) 培 地 成 分 説 明 ST ml BSA, rh Insulin, Human Transferrin 造 血 系 細 胞 の 培 養 増 殖 用 の 無 血 清 培 地 適 切 な 成 長 StemSpan SFEM (Iron-saturated), 2-ME, Iscove's 因 子 やサイトカインを 加 えることで 各 細 胞 に 最 適 な 培 ST ml MDM, Supplements 養 環 境 を 実 現 可 能 ST ml 造 血 系 細 胞 の 培 養 増 殖 用 の 無 血 清 培 地 (StemSpan BSA, rh Insulin, Human Transferrin SFEM を 改 変 した 培 地 ) CC100, CC110 など 適 切 なサ StemSpan SFEM II (Iron-saturated), 2-ME, Iscove's ST ml イトカインを 加 えて 増 殖 に 用 いたり 赤 芽 球 や 巨 核 球 MDM, Supplements への 分 化 に 用 いることが 可 能 ST ST StemSpan H ml 500 ml ヒト 由 来 およびヒトリコンビナントタ ンパク ヒト 造 血 系 細 胞 の 培 養 増 殖 用 のゼノフリー 培 地 適 切 な 成 長 因 子 やサイトカインを 加 えることで 各 細 胞 に 最 適 な 培 養 環 境 を 実 現 可 能 ST ST StemSpan ACF 100 ml 500 ml リコンビナントタンパク 合 成 成 分 ヒト 造 血 系 細 胞 の 培 養 増 殖 用 のアニマルコンポーネ ントフリー( ) 培 地 適 切 な 成 長 因 子 等 を 加 えるこ とで 各 細 胞 に 最 適 な 培 養 環 境 を 実 現 可 能 ヒトや 動 物 由 来 の 成 分 を 含 みません 16 サイトカインカクテル サプリメント 成 分 説 明 ST StemSpan CC100 1 ml rhflt-3l, rhscf, rhil-3, rhil-6 ヒト 造 血 前 駆 細 胞 の 増 殖 用 サプリメント ST StemSpan CD34+ rhscf, rhtpo, rhil-3, rhil-6, rh- Expansion Supplement (10X) 10 ml ヒト CD34+ 前 駆 細 胞 の 増 殖 用 サプリメント Flt-3L, other supplements ST StemSpan Erythroid Expansion Supplement 1 ml rhscf, rhil-3, rhepo ヒト 赤 血 球 前 駆 細 胞 の 増 殖 と 分 化 用 サプリメント (100X) StemSpan ST Myeloid Expansion Supplement (100X) 1 ml rhscf, rhtpo, rhgm-csf, rhg-csf ヒトミエロイド 前 駆 細 胞 の 増 殖 と 分 化 用 サプリメント ST StemSpan Megakaryocyte Expansion 1 ml rhscf, rhtpo, rhil-6, rhil-9 Supplement(100X) ヒト 巨 核 球 前 駆 細 胞 の 増 殖 および 巨 核 球 血 小 板 産 生 用 サプリメント( 旧 名 :StemSpan CC220) ST StemSpan CC110 1 ml rhflt-3l, rhscf, rhtpo ヒト 造 血 前 駆 細 胞 の 増 殖 用 サプリメント ST Human LDL 5 mg ヒト 血 漿 由 来 低 密 度 リポタンパク 無 血 清 培 地 への 添 加 により 各 種 前 駆 細 胞 の 増 殖 と 生 存 を 促 進 rh-recombinant human 本 カタログに 掲 載 の は 研 究 用 です 研 究 目 的 にのみ 使 用 し 人 や 動 物 の 医 療 用 臨 床 診 断 用 食 品 用 としては 使 用 しないようにご 注 意 ください

17 ALDH 活 性 に 基 づく 幹 細 胞 / 前 駆 細 胞 同 定 キット ALDH 活 性 に 基 づく 幹 細 胞 / 前 駆 細 胞 同 定 キット ALDH(Aldehyde dehydrogenase) は 生 きている 全 ての primitive な 細 胞 で 活 性 が 高 く mature な 細 胞 では 活 性 が 低 いことが 知 られています ALDEFLUOR の 試 薬 BAAA(Bodipy-aminoacetaldehyde) は 細 胞 に 取 り 込 まれ ALDH によって BAA- (Bodipy-aminoacetate 蛍 光 発 光 )に 変 換 されるため ALDH の 活 性 の 高 い 細 胞 は 強 い 緑 色 の 蛍 光 を 発 します さらに 細 胞 膜 の 状 態 が 悪 い 死 んだ 細 胞 や 弱 っている 細 胞 では 産 出 した BAA- を 細 胞 内 に 保 持 でき ないため 生 細 胞 のみが 同 定 されます 従 来 の 免 疫 学 的 染 色 で 分 離 した 細 胞 でコロニーアッセイを 行 った 場 合 必 ずし もすべての 細 胞 がコロニー 形 成 能 を 持 つわけではないため アプリケーションによってはより 精 度 の 高 い 細 胞 の 絞 り 込 みが 必 要 とされます ALDEFLUOR では 本 当 にコロニー 形 成 能 の 高 い primitive な 生 細 胞 のみを 同 定 することができ ます ALDEFLUOR - ALDH 活 性 に 基 づく 幹 細 胞 / 前 駆 細 胞 同 定 キット ALDEFLUOR は 細 胞 の ALDH 酵 素 活 性 を 測 定 してヒト 骨 髄 動 員 末 梢 血 臍 帯 血 中 の 幹 細 胞 / 前 駆 細 胞 を 同 定 す る 試 薬 です ALDHbr の 細 胞 集 団 は CD34 + cells CD133 + cells c-kit + cells Lin - cells Colony forming cells LTC-IC NOD/SCID repopulating cells を 含 みます 特 長 従 来 の 抗 体 染 色 とは 異 なる 幹 細 胞 / 前 駆 細 胞 同 定 法 細 胞 膜 が intact な 状 態 で primitive な 生 細 胞 のみを 同 定 in vivo in vitro 共 にノントキシック 簡 便 なプロトコル 高 い 再 現 性 新 鮮 および 凍 結 サンプルの 両 方 に 使 用 可 能 細 胞 表 面 マーカーに 対 する 蛍 光 標 識 抗 体 と 併 用 可 能 一 般 的 なフローサイトメーターおよびセルソーターで 測 定 コンポーネント(ST-01700) Dry ALDEFLUOR reagent 50 μ g Diethylaminobenzaldehyde(DEAB) 1.5mM in 95% ethanol 1 ml 2N HCl 1.5 ml Dimethylsulphoxide(DMSO) 1.5 ml ALDEFLUOR Assay Buffer 25 ml x 4 本 ALDEFLUOR Quick Reference Guide 原 理 細 胞 の ALDH( 酵 素 )+BAAA( 基 質 Bodipyaminoacetaldehyde) BAA-(Bodipy-aminoacetate 蛍 光 発 光 ) FACS PROFILE RESULTS WITH ALDEFLUOR Live cell gate (based on scatter) ALDEFLUOR の 使 用 が 確 認 されているアプリケーション Side Scatter 造 血 幹 細 胞 内 皮 前 駆 細 胞 間 葉 系 前 駆 細 胞 神 経 前 駆 細 胞 腫 瘍 幹 細 胞 乳 腺 幹 細 胞 使 用 文 献 につきましてはお 問 合 せ 下 さい Side Scatter ALDEFLUOR Green Fluorescence Forward Scatter Representative Data Plots for Human Apheresis Products. ALDEFLUOR + ALDH enzyme inhibitor (negative control) Side Scatter Green Fluorescence ST ALDEFLUOR 40 tests ST ALDEFLUOR Assay Buffer 25 ml ST ALDEFLUOR Assay Buffer 55 ml ST ALDEFLUOR DEAB 1 ml 17 本 カタログに 掲 載 の は 研 究 用 です 研 究 目 的 にのみ 使 用 し 人 や 動 物 の 医 療 用 臨 床 診 断 用 食 品 用 としては 使 用 しないようにご 注 意 ください

18 間 葉 系 幹 細 胞 研 究 用 培 地 間 葉 系 幹 細 胞 研 究 用 培 地 ( 注 )ヒト 用 は ES/iPS& 間 葉 系 幹 細 胞 研 究 用 試 薬 カタログに 掲 載 マウス 間 葉 系 幹 細 胞 培 養 用 関 連 マウス 緻 密 骨 から 分 離 回 収 したマウス 間 葉 系 幹 細 胞 を 専 用 培 地 と Hypoxia Chamber で 培 養 することで 効 率 的 に 増 殖 す ることができます 低 酸 素 条 件 での 培 養 は ips 細 胞 の 樹 立 においても 好 成 績 を 示 しております Hypoxia Chamber を 使 用 することで 大 掛 かりなインキュベーター 装 置 を 使 用 することなく 簡 単 に 低 酸 素 条 件 を 整 えるこ とができます マウス 間 葉 系 幹 細 胞 の 分 離 培 養 マウス 間 葉 系 幹 細 胞 分 離 ( 緻 密 骨 より 細 胞 を 調 整 ) 専 用 培 地 と Hypoxia Chamber で 培 養 10 倍 以 上 も 増 殖 効 率 がアップ 増 殖 能 を 有 するマウス 間 葉 系 幹 細 胞 は 骨 髄 よりも 緻 密 骨 (compact bone) から より 多 く 得 ることができます Hypoxia Chamber Single Flow Meter マウス 間 葉 系 幹 細 胞 分 離 用 試 薬 ST EasySep Neg Mouse Mesenchymal Progenitor Cell Kit from Compact Bone 4x10^8 cells 用 ST EasySep Magnet 1 個 Hypoxia chamber とガス 流 量 計 ST Hypoxia Chamber 1 セット ST Single Flow Meter 1 個 マウス 間 葉 系 幹 細 胞 用 培 地 詳 細 は 細 胞 分 離 カタログをご 覧 ください Hypoxia Chamber には 35mm ディッシュが 84 枚 (10mm ディッシュなら 12 枚 ) 入 ります ST MesenCult Proliferation Kit with MesenPure ( Mouse ) 500 ml ST MesenCult MSC Basal Medium ( Mouse ) 400 ml ST Mesenchymal Stem Cell Stimulatory Supplements ( Mouse ) 100 ml ST Adipogenic Stimulatory Supplement ( Mouse ) 100 ml ST MesenCult Osteogenic Stimulatory Kit ( Mouse ) 500 ml 18 本 カタログに 掲 載 の は 研 究 用 です 研 究 目 的 にのみ 使 用 し 人 や 動 物 の 医 療 用 臨 床 診 断 用 食 品 用 としては 使 用 しないようにご 注 意 ください

19 ES/iPS 細 胞 研 究 用 培 地 ES/iPS 細 胞 研 究 用 培 地 ( 注 )ヒト 用 は ES/iPS& 間 葉 系 幹 細 胞 研 究 用 試 薬 カタログに 掲 載 ES-Cult マウス ES/iPS 細 胞 の 維 持 培 養 ES 細 胞 は 白 血 病 阻 止 因 子 (LIF) の 存 在 下 厳 密 な 特 定 の in vitro 培 養 条 件 において 未 分 化 状 態 のまま 維 持 されます LIF の 使 用 を 中 止 すると ES 細 胞 は 内 胚 葉 外 胚 葉 および 中 胚 葉 の 三 胚 葉 由 来 の 細 胞 を 含 む 胚 葉 体 (EB) と 呼 ばれる 複 雑 な 構 造 物 に 分 化 します この 細 胞 はその 後 膵 臓 細 胞 神 経 細 胞 造 血 細 胞 心 筋 細 胞 脂 肪 細 胞 上 皮 細 胞 内 皮 細 胞 リンパ 系 細 胞 および 骨 芽 細 胞 などのさまざまな 細 胞 へ 分 化 誘 導 することができます ES 細 胞 を in vitro 分 化 させると 細 胞 過 程 および 分 子 過 程 の 検 討 薬 物 のスクリーニングのほか 組 織 工 学 および 細 胞 治 療 への 利 用 可 能 性 を 模 索 する 上 で 強 力 無 比 な 系 とな ります 用 途 に 応 じ 充 分 なスクリーニング 品 質 管 理 を 行 った ES 細 胞 培 養 用 を 取 り 揃 えております 胚 の 発 生 時 および 分 化 時 の 遺 伝 子 発 現 パターンの 解 析 有 望 な 治 療 法 に 対 する 特 異 的 細 胞 の 産 生 に 適 したモデル 系 の 作 製 機 能 研 究 を 目 的 とする 遺 伝 子 組 み 換 え ES 細 胞 (ノックアウト トランスジェニック アンチセンス)の 作 製 外 部 刺 激 が 発 生 過 程 に 及 ぼす 作 用 の 評 価 遺 伝 子 トラップ 法 Degenerate PCR 法 または RNA サブトラクション 法 を 用 いる 発 生 過 程 で 制 御 を 受 ける 新 たな 遺 伝 子 の 同 定 ST ES-Cult Complete Maintenance Kit 1 Kit ST Murine PEF Day E12.5, Passage 2 (CD-1 embryos) 1x10^6 cells 以 上 ST Murine PEF Day E14.5, Passage 2 (CD-1 embryos) 1x10^6 cells 以 上 ST Hygromycin 耐 性 Mouse PEF Day E13.5, Passage 1 3x10^6 cells 以 上 ST Puromycin 耐 性 Mouse PEF Day E13.5, Passage 2 3x10^6 cells 以 上 ST Human BMP-4 10 µg ST Murine LIF 10 µg ST ES-Cult FBS ES 細 胞 維 持 用 100 ml ST ES-Cult FBS ES 細 胞 維 持 用 500 ml ST DMEM with 4500 mg/l D-glucose 500 ml 19 本 カタログに 掲 載 の は 研 究 用 です 研 究 目 的 にのみ 使 用 し 人 や 動 物 の 医 療 用 臨 床 診 断 用 食 品 用 としては 使 用 しないようにご 注 意 ください

20 ES/iPS 細胞 研究用培地 ES-Cult - マウス ES/iPS 細胞から造血系細胞への分化 Maintenance Maintain undifferentiated cells on MEFs or gelationcoated culture dishes with mlif. 製品 2 段階 in vitro 分化法を用いることによって 胚 葉体 EB) 内部から発生する造血細胞の定量性が 1 大幅に向上しました 最初の分化段階では メ チルセルロースベースの半固形培地で ES 細胞が Primary Differentiation Suspend undifferentiated cells in methylcellulose based medium to promote EB formation. EB を形成します 様々な培養期間終了後に EB を回収し トリプシン -EDTA またはコラゲナー 2 ゼで分散させて単一細胞の浮遊液にします 適 Secondary Hematopoietic Differentiation Harvest and disrupt EBs to obtain single cell suspension. 切なサイトカインを含有するメチルセルロース 培地でこの細胞を再び平板培養すると 特定の 種類の造血前駆細胞への分化が誘導されます STEMCELL Technologies 社では マウス胚性幹 3 Plate and Incubate 4 Count Colonies 細胞系の in vitro 造血細胞分化を実施するための 製品シリーズを取り揃えております ES-Cult は キット製品あるいは培地単品で購入 いただけます 商品コード ST ST ST 商品名 ES-Cult M3120 ES-Cult Hematopoietic Differentiation Kit without Cytokines ES-Cult Hematopoietic Differentiation Kit with Cytokines Plate in methylcellulose based medium containing appropriate cytokines for hematopoietic colony formation. May also be cultured in liquid suspension cultures for further studies. Count and evaluate colony types using inverted microscope and gridded scoring dishes. Alternatively, individual colonies may be plucked for routine staining, PCR, or cytogenetic analysis. 梱包単位 40 ml 1 kit 1 kit ES-Cult - マウス ES/iPS 細胞から内皮系細胞への分化 製品 血管形成 前駆体の中胚葉細胞から血管芽細胞への分化による血管網原基の形成 および血管新生 既存の血管からの 出芽 分裂および再形成による新しい血管の形成 の過程を詳細に理解するため 胚性幹細胞が広く用いられています 血管新生は 固形腫瘍の増殖および転移に関する癌生物学研究 創傷治療研究 炎症性疾患研究および循環器病学研究 などの数多くの研究分野で重要です 血管新生研究のモデル系となる以下のような方法が確立されています あらかじ めスクリーニングした FBS のほか 内皮前駆細胞の豊富な胚葉体 (EB) の形成に必要な血管新生サイトカインを含有す るメチルセルロース培地で未分化のマウス ES 細胞を平板培養します 11 日間増殖させたのちに そのままの状態の EB を回収し 内皮細胞の発生に必要な同じサイトカインを添加したコラーゲン基質上で継代培養します EB は 3 日後 血管新生を示す中心部からの発芽を開始します Mouse ESCs in the undifferentiated state 商品コード ST ST Day11 EB prior to culture in collagen 商品名 ES-Cult M3120 ES-Cult Endothelial Collagen and Medium Kit Sprouting EB grown in ES-Cult Endothelial Collagen-Based Medium 梱包単位 40 ml 1 kit 20 本カタログに掲載の製品は 研究用 です 研究目的にのみ使用し 人や動物の医療用 臨床診断用 食品用としては使用しないようにご注意ください

21 100mL FOR RESEARCH USE ONL Y STEMCELL Technologies Inc Va ncouver, BC (604) 血 管 内 皮 細 胞 研 究 用 培 地 血 管 内 皮 細 胞 研 究 用 培 地 血 管 形 成 は 隣 接 する 既 存 血 管 からの 内 皮 細 胞 の 増 殖 移 行 再 形 成 ( 脈 管 形 成 ) また 中 胚 葉 性 前 駆 細 胞 からの 内 皮 前 駆 細 胞 の 分 化 ( 血 管 新 生 )を 伴 います 内 皮 前 駆 細 胞 (EPC) または 血 管 芽 細 胞 は 当 初 胚 発 生 の 間 しか 存 在 しないと 考 えら れていました しかし 数 年 にわたって 蓄 積 された 根 拠 により これらは 成 人 期 にも 残 存 することが 示 唆 されました このこ とから 虚 血 組 織 または 損 傷 組 織 の 新 規 血 管 形 成 および 種 々の 病 気 の 危 険 因 子 の 臨 床 評 価 に EPC を 用 いることへの 関 心 が 高 まっています CFU-HILL アッセイ 用 培 地 CFU-Hill Liquid Medium Kit は 骨 髄 または 末 梢 血 由 来 の MNC から ヒト 内 皮 前 駆 細 胞 を 効 果 的 に 培 養 するために 最 適 化 された キットです サイトカイン 添 加 の 必 要 はありません 5Day EPC(CFU-hill) Colony Assay Unprocessed peripheral blood (PB) Ficoll-Paqye TM PLUS 用 途 末 梢 血 骨 髄 由 来 EPC の 表 現 型 の 決 定 内 皮 系 統 の 分 化 経 路 の 研 究 臨 床 試 験 における 診 断 ツールとしての 使 用 EPC 培 養 アッセイ 末 梢 血 (PB) および 骨 髄 (BM) に 由 来 する 内 皮 前 駆 細 胞 を 培 養 定 量 するための in vitro アッセイ 法 が 確 立 されています コロニー は 放 射 状 の 扁 平 細 胞 で 包 囲 された 細 胞 の 集 合 体 として 観 察 され ここでは DAY 5 EPC 由 来 コロニー (CFU-Hill) と 呼 びます これらの 細 胞 の 内 皮 系 統 は von Willebrand ファクター 血 管 内 皮 成 長 因 子 レセプター 2 CD31 の 免 疫 染 色 によって 確 認 する ことができます Collect mononuclear cells Wash 2X with PBS+2%FBS Resuspend in CFU-Hill Liquid Medium Plate 5 x 10 6 cells/well on fibronectincoated 6-well plate 2 days Collect non-adherent cells Plate 1 x 10 6 cells/well on fibronectin-coated 24-well plate 3 days CFU-Hill Medium Day 0 Day 2 文 献 1. Hill JM, et al., N Engl J Med 348: , Yoder MC, et al., Blood 109: , Rohde E, et al., Stem Cells 25: , Van Beem RT, et al., J Immunol 180l: , Thum T, et al., Am Coll Cardiol 46: , Shaff er RG, et al., Cytometry B Clin Cytom 70: 56-62, Palange P, et al., Eur Respir J 27: , Asosingh K, et al., J Immunol 178: , Sobrino T, et al., Stroke 38: , 2007 Count colonies CFU-Hill Colony Cultured in CFU-Hill Liquid Medium Day 5 ST CFU-Hill Liquid Medium Kit (Human) 100 ml ST CFU-Hill Liquid Medium Kit (Human) 500 ml 21 本 カタログに 掲 載 の は 研 究 用 です 研 究 目 的 にのみ 使 用 し 人 や 動 物 の 医 療 用 臨 床 診 断 用 食 品 用 としては 使 用 しないようにご 注 意 ください

22 神 経 幹 細 胞 研 究 用 培 地 神 経 幹 細 胞 研 究 用 培 地 神 経 幹 細 胞 研 究 用 の 培 地 類 細 胞 試 薬 類 です Neurospheres - マウス ラット 凍 結 神 経 幹 細 胞 マウス Neurosphere マウス CNS の 異 なる3 部 位 (Cortex, Striata, Ventral Mesencephalon) に 由 来 する 発 生 14 日 目 (E14) の 凍 結 Neurosphere (Passage 1) です ラット Neurosphere 発 生 18 日 目 (E18) のラット Cortex もしくは Hippocampus Spinal Cord に 由 来 する 凍 結 Neurosphere (Passage1, Day4) です ST Murine Striatal Neurospheres 5x10^6 cells ST Murine Cortex Neurospheres 5x10^6 cells ST Murine Ventral Mesencephalon Neurospheres 5x10^6 cells ST Rat Cortex Neurospheres, E18 1x10^6 cells ST Rat Hippocampus Neurospheres, E18, P1 1x10^6 cells NeuroFluor CDr3 - 神 経 前 駆 細 胞 検 出 用 蛍 光 プローブ NeuroFluor CDr3 は 神 経 前 駆 細 胞 を 選 択 的 に 生 きたまま 標 識 できる 膜 透 過 性 の 蛍 光 プローブです 標 識 した 細 胞 は 蛍 光 イメージングや FACS に 使 用 できます( 励 起 579 nm 発 光 604 nm) 特 長 マウス ラットおよびヒトの 神 経 前 駆 細 胞 を 固 定 せず 選 択 的 に 標 識 可 能 生 細 胞 の 蛍 光 イメージング フローサイトメトリー FACS に 利 用 可 能 ヒト 多 能 性 幹 細 胞 から EB を 経 て 神 経 誘 導 する 際 の 確 認 に 利 用 可 能 非 毒 性 非 持 続 性 シンプルで 迅 速 なプロトコール マウス subventricular zone (SVZ) 由 来 P1 neurospheres から 解 離 した 生 細 胞 の 染 色 像 (A) NeuroFluor CDr3( 赤 ) (B) NeuroFluor CDr3( 赤 )+ DAPI( 青 ) スケールバー:50 um ST NeuroFluor CDr3 0.5 ml 22 本 カタログに 掲 載 の は 研 究 用 です 研 究 目 的 にのみ 使 用 し 人 や 動 物 の 医 療 用 臨 床 診 断 用 食 品 用 としては 使 用 しないようにご 注 意 ください

23 神経幹細胞 研究用培地 NeuroCult - マウス神経幹細胞培養培地 製品 マウス神経幹細胞の培養に最適に調製された NeuroCult Basal Medium および NeuroCult NSC 分化用サプリメント NeuroCult NSC 培養 増殖用サプリメントです 発生 14 日目 (E14) のマウス NSC は 自己複製 多数の子孫の産生 そして成体哺乳動物 CNS に見られる 3 種類の主要な表現型への子孫の分化といった幹細胞機能を示す 独特な細胞集 団です マウス E14 CNS から単離した幹細胞は 上皮細胞成長因子 (EGF) の存在下 組成の明らかな無血清培地中で は in vitro で未分化の増殖状態を維持することが可能です この増殖培地中で EGF 応答性 NSC はニューロスフィアと 呼ばれる球体として増殖しますが これは週単位での継代が可能で そのため細胞数を算術的に増加させることができ ます この幹細胞を培地から取り出して分化に適した培地中で培養すると その子孫をニューロン 星状細胞 乏突起 膠細胞という 3 種類の腫瘍な CNS 表現型に分化させることができます 神経幹細胞研究用製品フロー Precursor Cell NeuroCult Proliferation Kit (Mouse) A Neurosphere NeuroCult Differentiation Kit (Mouse) B Neurons D Oligodendrocytes C Astrocytes and Neurons E GABA-nergic Neurons A NeuroCult Proliferation Kit で培養したマウス Neurosphere B 神経細胞体の免疫蛍光染色とその写真 マウスモノクローナル抗β チューブリン ST-01409) を用いて同定 C 星状細胞はウサギポリクローナル抗 GFAP ST-01415) を用いて同定し ニューロンはマウスモノクローナル抗 MAP2 ST-01410) を用いて同定 D 乏突起膠細胞の免疫蛍光染色 マウスモノクローナル抗 04 乏突起膠細胞マーカー ST-01416) を用いて同定 E GABA ニューロンの免疫蛍光染色 ウサギポリクローナル抗 GABA を用いて同定 商品コード ST ST ST ST ST NeuroCult NeuroCult NeuroCult NeuroCult NeuroCult 商品名 Basal Medium (Mouse) Proliferation Supplement (Mouse) Proliferation Kit (Mouse) Differentiation Supplement (Mouse) Differentiation Kit (Mouse) 梱包単位 ml ml ml ml ml 23 本カタログに掲載の製品は 研究用 です 研究目的にのみ使用し 人や動物の医療用 臨床診断用 食品用としては使用しないようにご注意ください

24 神経幹細胞 研究用培地 NeuroCult - ラット神経幹細胞培養培地 製品 神経幹細胞は マウスおよびヒトの NSC を刺激する共通のマイトジェンに応答して増殖するラット胚性 CNS から単離 されてきました 懸濁培養中の固有 Neurosphere に由来するラット成長因子応答性細胞は継代によりその総数を増加 させることが可能で またニューロン 星状細胞 乏突起膠細胞への分化が可能です しかし 培養中の細胞の増殖は 約 30 日後に停止する傾向があります ラット細胞は 多くの研究者が CNS 疾患の様々な実験系において選択する細 胞であるため 培養中で何代か継代した後にラット成長因子応答性細胞の増殖が制限されることは重大な問題です たとえば ラットモデルは細胞移植および虚血傷害の研究においてほぼ例外なく使用されるため ラット CNS 細胞か らエピジェネティックに刺激された NSC 系統を産生できる能力は非常に役立つと考えられます ラット幹細胞および前駆細胞を in vitro で増殖させる上での困難を克服するためには ラット細胞を長期間にわたり 増殖できる培地が不可欠です STEMCELL Technologies 社では 胚性ラットおよび成体ラットの神経幹細胞 前 駆細胞の培養に最適に調整された NeuroCult NS-A Basal medium および NeuroCult NS-A 分化用サプリメント NeuroCult NS-A 培養 増殖用サプリメントを提供しており ラットの Neurosphere の継代培養が可能です さらに NeuroCult の場合 特別に加工した培養プレートは不要です NeuroCult NS-A 増殖用キット ラット用 無血清培地と ラット CNS から単離したラット神経幹細胞および前駆細胞に最適な成長 増殖用サプリメントのセッ トです 上皮細胞成長因子 基本線維芽細胞成長因子 ヘパリンを添加して組成を最適化した場合 この培地で少なく とも第 10 継代の間はラット NSC の増殖が可能で また培養中 60 日間以上は細胞数が安定して増加します NeuroCult NS-A 分化用キット ラット用 ラットの神経幹細胞および前駆細胞をニューロン 星状細胞 乏突起膠細胞へ分化させることが可能です Positive Cells (%) Passage 5 70 Passage Neuron Oligodendrocyte Astrocyte Neural Cell Type Neurons, oligodendrocytes and astrocytes are observed after culturing with the NeuroCult NS-A Proliferation Kit (Rat) for more than 5 passages (prior to differentiation). 商品コード ST ST 商品名 NeuroCult NS-A Proliferation Kit (Rat) NeuroCult NS-A Differentiation Kit (Rat) Neurons (red) were detected with a mouse monoclonal β-tubulin lll antibody (ST-01409), oligodendrocytes (green) with a mouse monoclonal O4 Oligodendrocyte Marker antibody (ST-01416) and astrocytes (blue) with a rabbit polyclonal GFAP antibody (ST-01415). 梱包単位 500 ml 500 ml 24 本カタログに掲載の製品は 研究用 です 研究目的にのみ使用し 人や動物の医療用 臨床診断用 食品用としては使用しないようにご注意ください

25 神 経 幹 細 胞 研 究 用 培 地 NeuroCult - ヒト 神 経 幹 細 胞 培 養 培 地 神 経 幹 細 胞 (NSC) は 最 初 にげっ 歯 類 から 単 離 され 後 にヒトの 胎 児 および 成 人 の 中 枢 神 経 系 (CNS) 中 にも 存 在 する ことがわかりました 特 性 試 験 により ヒト NSC の 成 長 制 御 に 関 する in vitro の 機 能 特 性 はマウス NSC およびラット NSC のそれとは 異 なることが 示 され 最 適 な 培 養 条 件 下 では ヒト NSC はマウス 細 胞 よりも 成 長 速 度 が 遅 く マウス NSC の 2 日 に 対 し 5~12 日 という 2 倍 の 時 間 が 必 要 でした ヒト NSC の 最 適 な 増 殖 を in vitro で 長 期 間 維 持 するには EGF と FGF- βの 両 成 長 因 子 を 培 地 に 添 加 する 必 要 があります いくつかの 論 文 において 神 経 障 害 の 動 物 モデル 中 に 移 植 されたヒト 胎 児 NSC のグラフト 化 の 成 功 例 が 報 告 されています 種 々の 神 経 変 性 障 害 の 細 胞 治 療 にヒト NSC に 関 する 特 性 試 験 をさらに 進 めることが 必 要 です しかしその 前 には 移 植 処 置 に 十 分 な 量 の 機 能 性 ヒト NSC の 産 生 とい う 大 きな 問 題 が 存 在 しています このため ヒト NSC の 長 期 増 殖 を 促 進 する 最 適 化 標 準 化 された 効 率 的 な 培 養 系 が 必 要 です STEMCELL Technologies 社 では ヒト 神 経 幹 細 胞 前 駆 細 胞 の 培 養 に 最 適 に 調 製 された NeuroCult NS-A 分 化 用 サプ リメント NeuroCultNS-A 培 養 増 殖 用 サプリメントを 提 供 しております NeuroCult NS-A 増 殖 用 キット(ヒト 用 ) 無 血 清 培 地 と CNS から 単 離 したヒト 神 経 幹 細 胞 および 前 駆 細 胞 に 最 適 な 成 長 増 殖 用 サプリメン トを 含 有 しています 上 皮 細 胞 成 長 因 子 基 本 線 維 芽 細 胞 成 長 因 子 ヘパリンを 添 加 して 組 成 を 最 適 化 した 場 合 この 培 地 で 長 期 間 のヒト NSC の 増 殖 が 可 能 です A Neurons B Oligodendrocytes NeuroCult NS-A 分 化 キット(ヒト 用 ) ヒト 神 経 幹 細 胞 および 前 駆 細 胞 をニューロン 星 状 細 胞 乏 突 起 膠 細 胞 に 効 率 的 に 分 化 させる 成 分 を 含 有 しています C Astrocytes D Mature Oligodendrocytes NeuroCult-XF Proliferation Medium ヒト 神 経 幹 細 胞 および 前 駆 細 胞 を Neurosphere と して 増 殖 させるための Xeno-Free な 無 血 清 培 地 で す A. ニューロンの 免 疫 蛍 光 染 色 マウスモノクローナル 抗 b チューブリンを 用 いて 同 定 倍 率 10 倍 B. 星 状 細 胞 の 免 疫 蛍 光 染 色 ウサギポリクローナル 抗 GFAP を 用 いて 同 定 倍 率 20 倍 C. 未 成 熟 乏 突 起 膠 細 胞 の 免 疫 蛍 光 染 色 ウサギポリクローナル 抗 04 乏 突 起 膠 細 胞 マーカーを 用 いて 同 定 倍 率 20 倍 D. 成 熟 乏 突 起 膠 細 胞 の 免 疫 蛍 光 染 色 抗 ガラクトセレブロシド 抗 体 を 用 いて 同 定 倍 率 20 倍 ST NeuroCult NS-A Proliferation Kit (Human) 500 ml ST NeuroCult NS-A Differentiation Kit (Human) 500 ml ST NeuroCult-XF Proliferation Medium (Human) 500 ml 25 本 カタログに 掲 載 の は 研 究 用 です 研 究 目 的 にのみ 使 用 し 人 や 動 物 の 医 療 用 臨 床 診 断 用 食 品 用 としては 使 用 しないようにご 注 意 ください

26 神 経 幹 細 胞 研 究 用 培 地 NeuroCult NCFC Assay Kit 神 経 幹 細 胞 (NSC)の 長 期 間 にわたる 自 己 複 製 能 多 分 化 能 を 保 持 しながら Neurosphere に 分 化 して 多 数 の 子 孫 を 産 生 する 能 力 を 調 べるアッセイとして 従 来 から 液 体 培 地 を 用 いた Neurosphere アッセイと 呼 ばれる 試 験 が 行 われてい ます Neurosphere アッセイは 哺 乳 類 の 成 長 因 子 応 答 性 NSC を 検 出 単 離 するための 標 準 試 験 となっており 中 枢 神 経 系 (CNS) の 幹 細 胞 に 関 する 細 胞 生 物 学 分 子 生 物 学 の 理 解 を 目 的 として 行 われる 多 くの 研 究 の 根 幹 を 成 すものとい えます また 幹 細 胞 機 能 に 対 する 影 響 による 外 部 シグナル 因 子 のスクリーニングや NSC に 関 する 生 物 学 的 研 究 に も 使 用 されています しかしながら Neurosphere アッセイは 幹 細 胞 による 高 い 増 殖 能 を 有 する 細 胞 と より 成 熟 の 進 んだ 細 胞 および 前 駆 細 胞 に 特 長 的 な 低 い 増 殖 能 を 有 する 細 胞 とを 直 接 識 別 するものではありません NSC は Neurosphere アッセイに よって 同 定 されますがこのアッセイで 産 生 されたすべての Neurosphere が NSC 由 来 というわけではありません し たがって Neurosphere アッセイにより Neurosphere 数 の 単 純 な 定 量 から 決 定 した NSC 数 は 真 の 数 を 過 大 評 価 し ている 可 能 性 があります 神 経 幹 細 胞 と 前 駆 細 胞 とを 識 別 できるアッセイへのニーズから STEMCELL Technologies 社 は NCFC(Neural Colony-Forming Cell) アッセイと 呼 ばれるコラーゲンベースのアッセイを 開 発 しました このアッセイでは 神 経 幹 細 胞 と 前 駆 細 胞 を 定 量 できます NCFC アッセイで 形 成 したコロニーの 直 径 が 2mm 以 上 の 場 合 その 元 細 胞 は NSC の 機 能 的 条 件 をそなえていたと 考 えられ 2mm 以 下 の 増 殖 能 の 弱 かった 細 胞 は 前 駆 細 胞 とし て 区 別 されます NCFC Assay 概 要 Primary CNS tissue Cultured neurospheres Dissociate Dissociate Cells OR Cells Filter Filter NeuroCul t NCFC serum-free medium PLUS cytokines supplements collagen solution Plate into 35 mm dish Incubate 21 days Score NCFC colonies (size and frequency) A >2.0 mm B mm C mm D <0.5 mm (Grid 2.0 mm x 2.0 mm) ST NeuroCult NCFC Assay Kit (Mouse) 1 kit ST NeuroCult NCFC Assay Kit (Rat) 1 kit 26 本 カタログに 掲 載 の は 研 究 用 です 研 究 目 的 にのみ 使 用 し 人 や 動 物 の 医 療 用 臨 床 診 断 用 食 品 用 としては 使 用 しないようにご 注 意 ください

27 神 経 幹 細 胞 研 究 用 培 地 NeuroCult Chemical Dissociation Kit 胎 児 や 成 体 のマウス CNS 組 織 由 来 の Neurospheres を 非 物 理 的 且 つ 非 酵 素 的 に 解 離 させるための 化 学 的 解 離 キットです Neurosphere 中 の 細 胞 へのダメージを 最 小 限 に 抑 えます 物 理 的 解 離 法 (Trituartion) で 細 胞 を 解 離 させ 継 代 培 養 を 行 っ た 時 に 比 べて 高 い viability とトータル 細 胞 数 が 得 られます コンポーネント NeuroCult Chemical Dissociation Solution A NeuroCult Chemical Dissociation Solution B NeuroCult Chemical Dissociation Solution C NeuroCult Chemical Dissociation Kit による Neurospheres の 解 離 の 様 子 (a)(b):2 分 後 (c)(d):5 分 後 (e)(f):7 分 後 2 分 後 5 分 後 7 分 後 ST NeuroCult Chemical Dissociation Kit (Mouse) 1 kit NeuroCult Enzymatic Dissociation Kit NeuroCult Enzymatic Dissociation Kit は 成 体 のマウスと ラット CNS 組 織 から 酵 素 処 理 により 高 い viability で single cell suspention を 得 るための "ready-to-use" な 細 胞 解 離 用 キットです 4つの 最 適 化 された 溶 液 から 構 成 されており 成 体 マウスもしくはラットの CNS からの 酵 素 的 組 織 消 化 酵 素 反 応 の 不 活 性 化 single cell suspention への 再 懸 濁 を 行 います コンポーネント NeuroCult Tissue Collection Solution NeuroCult Enzymatic Dissociation Solution NeuroCult Enzyme inhibition Solution NeuroCult Resuspension Solution ST NeuroCult Enzymatic Dissociation Kit for Adult CNS Tissue (Mouse and Rat) 1 kit 27 本 カタログに 掲 載 の は 研 究 用 です 研 究 目 的 にのみ 使 用 し 人 や 動 物 の 医 療 用 臨 床 診 断 用 食 品 用 としては 使 用 しないようにご 注 意 ください

28 神経幹細胞 研究用培地 NeuroCult SM Neuronal Supplement 製品 NeuroCult SM1 Neuronal Supplement は マウスおよびラットのプライマリーニューロン培養のために標準化され た無血清サプリメントです 多くの機能性ニューロンを再現性高く得られ グリア細胞のコンタミネーションを最小限 に抑える <1% GFAP+ ように最適化されています また NeuroCult SM1 Neuronal Supplement は 低および 高細胞密度のプライマリーニューロンの培養を短期 長期ともにサポートします NeuroCult SM2 Neuronal Supplement は culture substrate PDL 等 不要の無血清サプリメントです プレート へのコーティング作業が必要ないため コーティングによるバラツキ 手間を省くことができます 従来の無血清サプリメント B27 との比較 今までの無血清サプリメントと比較して NeuroCult SM1 Neuronal Supplement は mature なニューロンの培養に非 常に優れています 従来よりも神経突起の長さが長くなり 枝分かれ部位の数が増えることが示されています さらに 電気生理学的特性を示す成熟ニューロンの数が多く得られます 皮質ニューロンの培養 A B Magnification: 20X B 従来の無血清サプリメント より長い神経突起の伸長 NeuroCult SM1 Neuronal Supplement (SM1) で培養し たニューロンの方が従来の無血清サプリメント TSFS と比較してより長い神経突起を伸ばした * Average neurite outgowth (µm) A NeuroCult SM1 Neuronal Supplement Magnification: 20X TSFS より多い枝分かれ部位 NeuroCult SM1 Neuronal Supplement (SM1) で培養し たニューロンの方が従来の無血清サプリメント TSFS と比較してより多くの枝分かれ部位を有した Average number of branch points B27 * TSFS B27 商品コード ST ST ST ST ST NeuroCult NeuroCult NeuroCult NeuroCult NeuroCult SM1 SM1 SM2 SM2 SM1 商品名 Neuronal Supplement Neuronal Culture Kit Neuronal Supplement Neuronal Culture Kit without Vitamin A SM1 SM1 梱包単位 10 ml 1 Kit 2 ml 1 Kit 10 ml 28 本カタログに掲載の製品は 研究用 です 研究目的にのみ使用し 人や動物の医療用 臨床診断用 食品用としては使用しないようにご注意ください

29 神 経 生 理 学 用 無 血 清 培 地 神 経 生 理 学 用 無 血 清 培 地 BrainPhys TM BrainPhys は 無 血 清 神 経 培 養 用 の 基 礎 培 地 で プライマリーニューロンおよびヒト 多 能 性 幹 細 胞 (ES/iPS) 由 来 ニューロンの 培 養 に 適 しています 従 来 の 神 経 培 養 培 地 や DMEM と 異 なり 細 胞 の 生 存 だけでなく in vitro での 神 経 機 能 をより 良 くサポートするように 設 計 されていますので 培 地 を 交 換 せずに 活 動 電 位 発 生 やシナプス 活 動 を 含 む 神 経 機 能 解 析 を 行 うことができます BrainPhys は 下 記 文 献 の 組 成 を 元 に 開 発 されています (Table S5 参 照 ) Bardy C et al. (2015) Neuronal medium that supports basic synaptic functions and activity of human neurons in vitro. Proc Natl Acad Sci. 112(20):E 特 長 生 理 的 : 脳 の 細 胞 外 環 境 を 再 現 活 性 : 神 経 機 能 が 改 善 され シナプス 活 性 の 高 いニューロンの 比 率 が 上 昇 簡 便 : 培 地 交 換 することなく 機 能 解 析 が 可 能 多 用 途 :ES/iPS 細 胞 由 来 ニューロンおよび 中 枢 神 経 系 プライマリーニューロンの 長 期 培 養 が 可 能 信 頼 性 : 細 心 の 原 料 スクリーニングと QC で 最 小 限 のロット 間 差 を 実 現 データ 例 BrainPhys で 成 熟 させた 神 経 細 胞 ではシナプス 活 性 が 向 上 します 下 図 はラット E18 cortical neuron を BrainPhys (A, C) または 従 来 のメディウム (B, D) で 成 熟 させ 興 奮 性 (AMPA) および 抑 制 性 (GABA) のシナ プス 活 性 を 測 定 した 結 果 です 必 要 試 薬 使 用 時 には NeuroCult SM1 Neuronal Supplement (ST-05711) N2 Supplement-A (ST-07152) などのサプ リメントの 添 加 を 推 奨 致 します その 他 各 種 の 低 分 子 化 合 物 やサイトカインを 添 加 して 使 用 頂 けます ST BrainPhys Neuronal Medium 500 ml ST NeuroCult SM1 Neuronal Supplement 10 ml ST N2 Supplement-A 5 ml ST N2-Supplement-B 5 ml 29 本 カタログに 掲 載 の は 研 究 用 です 研 究 目 的 にのみ 使 用 し 人 や 動 物 の 医 療 用 臨 床 診 断 用 食 品 用 としては 使 用 しないようにご 注 意 ください

30 上 皮 細 胞 研 究 用 培 地 上 皮 細 胞 研 究 用 培 地 EpiCult - 乳 腺 上 皮 細 胞 培 養 培 地 ヒト 乳 腺 は 嚢 様 腺 胞 の 排 液 を 行 う 一 連 の 分 岐 管 からなる 複 合 管 状 胞 状 腺 です これらの 管 や 腺 胞 は 管 胞 細 胞 と そ の 下 層 をなす 平 滑 筋 様 の 筋 上 皮 細 胞 という 2 種 類 の 上 皮 細 胞 系 統 で 主 に 構 成 されています 最 近 の 報 告 によると 乳 腺 上 皮 内 には 表 現 型 が 互 いに 異 なる 前 駆 細 胞 および 非 前 駆 細 胞 の 上 皮 細 胞 が 存 在 することが 明 らかになりました 前 駆 細 胞 のサブセットには 管 腔 細 胞 および 筋 上 皮 細 胞 の 両 方 に 分 化 可 能 な 二 分 化 能 前 駆 細 胞 (EpCAM + MUC1 - CD49f + CD10 + ) と 管 腔 限 定 前 駆 細 胞 (EpCAM + MUC1 + CD49f + Cd10 - ) があります これらのサブポピュレーションは フローサイトメトリーまたは 免 疫 磁 気 細 胞 分 離 のいずれかを 用 いて 正 常 な 乳 腺 組 織 または 培 養 乳 腺 上 皮 細 胞 から 単 離 することができます この 細 胞 の 成 長 分 化 能 は in vitro において 低 密 度 でプレーティ ングした 時 のコロニー 形 成 能 を 見 ることでモニタリングが 可 能 です ヒト マウスの 乳 腺 組 織 の 解 離 乳 腺 上 皮 細 胞 サブセットの 濃 縮 乳 腺 細 胞 の 培 養 や 特 性 を 決 定 するための 無 血 清 培 地 です 乳 腺 上 皮 細 胞 の 解 離 濃 縮 培 養 解 離 乳 腺 細 胞 の Single cell suspension( 細 胞 が1つ1つ バラバラになった 状 態 の 懸 濁 液 )は 次 の 2 段 階 の 処 理 で 得 ることができます STEP 1 コラゲナーゼ / ヒアルロニダーゼカクテルを 用 いて 組 織 を 酵 素 的 に 乳 腺 類 器 官 に 解 離 します STEP 2 この 乳 腺 類 器 官 を トリプシン DNase ディスパー ゼを 用 いて Single cell suspension にします 濃 縮 ヒト 細 胞 のサブセットは 上 皮 細 胞 接 着 分 子 (EpCAM) CD49f CD10 MUC1 糖 タンパク 質 の 発 現 の 違 いを 利 用 して フローサイトメトリーまたは EasySep を 用 いた 免 疫 磁 気 細 胞 分 離 法 により 細 胞 懸 濁 液 中 から 単 離 するこ とができます マウス 乳 腺 上 皮 細 胞 は EasySep を 用 いて 非 上 皮 細 胞 を 除 去 し その 後 フローサイトメトリーで CD24 または CD49f(あるいはその 両 方 )を 発 現 する 細 胞 を 濃 縮 する ことによって 単 離 することができます EpiCult を 使 用 したヒト マウス 乳 腺 上 皮 細 胞 の 単 離 培 養 のプロトコール 概 要 解 離 1 解 離 2 濃 縮 培 養 乳 腺 組 織 乳 腺 類 器 官 EpiCult-C (ST-05630) コラゲナーゼ / ヒアルロニダーゼ(ST-07912) 組 織 解 離 フラスコ(ST-27300) EpiCult-C 乳 腺 上 皮 細 胞 の 単 細 胞 懸 濁 液 EasySep またはフローサイトメトリーを 用 いた 濃 縮 EpiCult-B (ST-05601) 中 で CFC assay により 乳 腺 前 駆 細 胞 の 検 出 (or EpiCult-C (ST-05630) 中 で 培 養 ) 検 出 (or 培 養 ) 培 養 ヒト マウス 乳 腺 上 皮 細 胞 は 精 製 の 有 無 を 問 わず 組 織 培 養 用 プラスチック または EpiCult-B(ヒト マウス 乳 腺 上 皮 細 胞 の 増 殖 を 促 進 する 目 的 で 設 計 された 特 製 培 地 )を 用 いた 3 次 元 のコラーゲンゲル 内 で 培 養 すること ができます A. 純 粋 なヒト 筋 上 皮 細 胞 コロニー B. 純 粋 なヒト 管 腔 細 胞 コロニー C. 混 合 ヒトコロニーの 位 相 差 顕 微 鏡 写 真 すべてのコロニー 写 真 は 放 射 線 照 射 した NIH3T3 支 持 細 胞 層 の 存 在 下 で EpiCult TM -B で 培 養 し Wright-Giemsa 染 色 を 行 ったものです 30 本 カタログに 掲 載 の は 研 究 用 です 研 究 目 的 にのみ 使 用 し 人 や 動 物 の 医 療 用 臨 床 診 断 用 食 品 用 としては 使 用 しないようにご 注 意 ください

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