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4 図1 B. oleraceaのs13-s39f2(a)とr.sativusのs遺 体 のS遺 伝 子 分 離 系 統(b)に 伝 子 型 を 推 定 す る 模 式 図(上)と つ い て,各6個 各 個 体 柱 頭 糖 蛋 白 質 の 分 析(下) た とえば,S13-S39のF2の 各 個 体 はS13ホ モ かS39ホ モか あ るい はS13S39ヘ テ ロか のい ず れ か で あ る.各 個 体 間 で総 当 り 交 配 を 行 な っ て花 粉 が 柱 頭 に 侵 入 す るか(+;和 合)し な い か(-;不 和 合)を 観 察 す る と,上 段 の よ うに な る.S13S13 の 柱 頭 はS13を 持 った 個 体 か ら の花 粉 で は 不 和 合 で あ り,S39S39か らの花 粉 で 交 配 す る と和 合 とな る.逆 に,S39S39はS39 を持 った 個 体 か らの 花 粉 で は 不 和 合,S13S13の 花 粉 で は 和 合 とな る.S13S39の 個 体 起源 の花 粉 は,S13とS39の 両 者の性質 を 示 す 共 優 性 と考 え られ る.S13S39の 柱 頭はS13S13の 花粉 で の み 和 合 とな るの で 柱 頭 で はS39が 優 性 で,S39の 性 質 を 示 し て い る と理 解 され る.(b)のR. sativusで はS1とS2が 花 粉 で も柱 頭 で も共 優 性 と して 働 き,両 者 の 性 質 を 示 す の で S1S2ヘ テ ロの 個 体 は どの 交 配 で も不 和 合 とな る.こ の よ うな 総 当 り交 配 の結 果 か ら,各 個 体 のS遺 伝 子 型 が 推 定 され る. 各 個 体 の 柱 頭 を セ ル ロー ス ア セ テ ー ト等 電 点 電 気 泳 動 後,ConA-パ ー オ キ シ ダ ー ゼ 染 色 を 行 な った のが 下 段 で あ り,矢 印 で 示 した バ ン ドが そ れ ぞ れ のS遺 伝 子 に伴 って 遺伝 す る.い くつ か のS遺 伝 子 に つ い て は ま だ 特 異 パ ン ドが 同 定 され て い な い も の もあ り,R. sativusのs1も 未 発 見 で あ る.本 方 法 は さ らに 改 良 す る必 要 が あ るが,こ の 方 法 を 用 い る こ とに よ りS遺 伝 子 型 が 推 定 され,S遺 存 在 し,花 柱 や 子 房,そ 伝 子 同定 のた め の交 配 範 囲 は 著 し く狭 め られ る(40,41). の 他 の栄 養 器 官 に は 見 られ な 2).ア ブ ラナ 科 植 物 に お い て は,柱 頭 に 何 種 類 か の糖 蛋 い.ま た,蕾 か ら開花 に 至 る問 に 柱 頭 に 急 激 に 増 加 す る. 白 質 が 存 在 し,そ の うち の あ る も の はS遺 伝 子 と行 動 を こ の こと は ア ブ ラ ナ科 植 物 の 自家 不 和 合 性 が 柱 頭 上 で の 共 に す る.こ のS遺 伝 子 特 異 蛋 白質 は,そ れ ぞ れ のS遺 阻 害 で あ る こ と,蕾 の段 階 で は 不 和 合 性 を示 さず,開 花 伝 子 に よ り異 な った 等 電 点 を 持 つ とい え る.糖 蛋 白質 の 時 に は じ め て不 和 合 性 を示 す こ と と よ く対 応 す る(35 37). どの よ うな 構 造 変 化 に よ って 等 電 点 が 変 化 す るの か,こ campestris れ が 認 識 反 応 に どの よ うに 関 与 し てい る のか は 興 味 あ る モ 系 統 の 柱 頭 粗 抽 出 液 か ら セ フ ァデ ッ クスG- 課 題 で あ り,現 在 他 のS遺 伝 子 の糖 蛋 白質 の単 離 を 急 い 生 化 学 研 究 室 に指 導 と援 助 を 仰 い で,B. のS7ホ 200,ConA-セ フ ァロ ー ス ク ロ マ トグ ラフ ィー,蔗 糖 密 で い る と ころ で あ る.最 も 困難 な問 題 は,こ の糖 蛋 白質 度 勾 配 等 電 点 電 気 泳 動 を 組 み 合 わ せ て 単 離 した 特 異 糖 蛋 の 所 在 が 柱 頭 に 限 られ てい る こ とで あ り,1個 白 質 は,等 電 点 がpH5.7,SDS電 0.2μg含 子 量 は57,000,蛋 白:糖 の 比 が1:1.2,構 は セ リ ン,グ ル タ ミ ン酸,グ 694 気 泳 動 に よ る推 定 分 成 ア ミ ノ酸 リ シ ンが 比較 的 多 い(38)(図 ま れ て い て収 率 が50%と 頭 か ら とれ る量 が約1mgし す る と,1万 の 柱頭 に 個の柱 か な い とい う点 で あ る. 自家 不 和 合 性 の 性 質 か ら考 え て,花 粉 側 に もS遺 伝 子 化 学 と生 物

5 力 の高 い こ とが 多 い.そ の 他 に,こ の 方 法 を と る と,品 種 の均 一 性 が 得 られ て 栽 培 収 穫 流 通 が 省 力 化 され る し,ま た 品種 の保 護 の面 か らも好 適 と い え る.F1育 を 遂 行 す る に は,労 力 をか けず に 大 量 の 交雑F1種 生 産 す る方 法 が必 要 で,キ 種 子を ャベ ツや ハ クサ イで は 自家 不 和 合 性 を 利 用 し て採 種 され てい る.つ ま り,S1ホ モ の系 統 とS2ホ モ の系 統 を1列 ず つ 交互 に 植 え,近 くに 同種 の 植 物 を 植 え ない よ うに し て花 粉 の混 入 を防 ぐ と,S1系 統 は す べ てS2系 統 か らの 花 粉 で種 子 を つ け,S2系 統は S1花 粉 で 種 子 を つ け る.し た が っ て,こ の 圃 場 で得 られ る種 子 は す べ てS1とS2の 間 のF1雑 種 で あ る.た だ し, この 育 種 法 で は,ま ず 自家 受 粉 を 重 ね な が ら,優 良 で 自 家 不 和 合 性 が 強 く,し か もS遺 伝 子 の 異 な るい くつ か の 系 統 を 育 成 しな け れ ば な ら ない. 図2 B.canpestrisのS7特 異 蛋 白質 の 単 離 (a) ア ク リル ア ミ ド等 電 点 電 気 泳動 の 結 果 で,い ず れ も ク マ ジ ブル ー染 色.下 は柱 頭 粗 抽 出 液 の 泳 動 結 果 で,図1 に 示 した 方 法 に よ り矢 印 の蛋 白 質 がS7特 異蛋白質であ る こ とが わ か っ てい る.上 は精 製 後 の 溶 液 を 泳 動 し た も の で,S7特 異 蛋 白 質 が 単 離 され た こ とを 示 す.こ の場合に は 試 料 ゲル 中 に は残 渣 が残 らな い. 開 花 前 の 雌 ず い に 受 粉 す る こ とを 蕾 受 粉 とい い,こ の 時 期 に は 自家 不 和 合 性 を 示 さな い の で,こ れ に よ っ て 自 殖 種 子 が 得 られ る.育 種 に 利 用 され て い る の も ほ とん ど この 方 法 で あ るが,花 を1つ1つ 手 で交 配 し な けれ ば な らない の で多 大 の 労 力が か か る.何 か 薬 品 で処 理 し て, (b) 柱 頭 粗 抽 出液 を セ フ ァデ ック スG-200,ConA-セ フ ァ ロー ス ク ロマ トグ ラ フ ィー で 分 画 し た 後,蔗 糖 密 度 勾 あ と は 隔離 した 所 で訪 花 昆 虫 を 利 用 し て 自殖 種 子が とれ 配 等 電 点 電 気 泳 動 に よ っ て 分 離 した 際 の 各 フ ラ クシ ョ ン の280nmに お け る吸 光 度(実 線)と そ のpH(点 線)を 示 れ ば 労 力が 省 け る.中 西,日 す.S7特 の 濃 度 で与 え る こ とに よ り自家 不 和 合 性 が克 服 で き る こ 異 糖 蛋 白 質 の 等 電 点 はpH5.7と 推 定 され た. な お,(a)に 示 した 粗抽 出 液 の 電 気泳 動 の バ ン ドと(b)の ピ ー ク とは よ く対 応 し て い る の で,粗 抽 出 液 の ア ル カ リ側 蛋 白質 の多 くはConAと 反 応 す る と考 え られ る(38). 向(39)は,CO2ガ スを4% とを 見 い だ し,実 際 に 利 用 され て い る. F1育 種 に はA Bの 単 交 配 や(A B) (C D)の 四 元 交 配 な どが あ り,種 子 の 均 一 性 で は 単 交 配 の ほ うが, に 特 異 的 な物 質 が 存 在 す る はず であ る が,ア ブ ラナ 科植 種 子 の 生 産 量 で は 四 元 交 配 の ほ うが 優 れ て い る.四 元 交 物 の花 粉 で は免 疫 学 的 手 法 で も電 気 泳動 法 で も この よ う 配 の 場 合 に は4つ の 異 な るS遺 伝 子 が 必 要 で,そ の 遺 伝 な 物 質 は ま だ検 出 さ れ て い な い.筆 者 らは 尿 素 とTriton 子 型 の チ ェ ッ クが 必 要 で あ る.普 通 は,交 配 して で きた X-100,メ 種 子 数 を 数 え た り,受 粉 後 の 花 粉 管 の 状 態 を 検 鏡 して 調 ル カ プ トエ タ ノー ル を含 む 溶 液 で 花 粉 か ら蛋 白質 を 抽 出 し,尿 素 とTriton X-100を ミ ドゲル に よ る 等 電 点 電 気 泳 動 や,ク 含 む ア ク リル ア べ るが,環 境 条 件 に よ って 振 れ 易 く,多 数 の 反 復 が 必 要 ロ ロホ ル ム-メ タ で あ る.ま た,1回 ノール で プ ロ テ オ リピ ドを抽 出 し,0.9N酢 酸 と尿 素 を の 交 雑 に よ り2個 体 間 のS遺 伝 子 に つ い て の 相 同 性 しか わ か らな い.そ こで,筆 者 らは 前 項 含 む ア ク リル ア ミ ドゲル 電 気 泳 動 な どを試 み た が,い ず に 述 べ たS特 異 糖 蛋 白質 を この チ ェ ックに 使 う方 法 を 考 れ に お い て もS遺 伝 子 の特 異 性 は見 られ な か っ た.花 粉 え,そ の 簡 易 検 出 法 を 工夫 した.ア ク リル ア ミ ドゲル を の 側 の特 異 性 は これ ら の方 法 で は検 出 で き な い の か も し 使 う方 法 で は 手 数 が か か り,1回 の 分 析 に 多 くの 柱 頭 れ ない.柱 頭 の 特 異 糖 蛋 白質 が も っ と多量 に 得 られ れ ば, が 必 要 な の で,セ ル ロ ー ス アセ テ ー トの 等 電 点 電 気 泳 動 そ れ を 使 った 実 験 も可 能 であ ろ う. を 行 な い,FITC-ConA(フ 不 和 合 性 の 利 用 とS遺 伝 子 特異 蛋 白 質 作 物 を 異 品 種 また は 異 系 統 間 で交 雑 す る と,そ のF1 は 雑 種 強 勢 こ よ り,両 親 よ りも 旺盛 な生 育 を示 し,生 産 Vol.17, No.11 ル オ レサ イ ン イ ソチ オ シ ア ネ ー トを 結 合 させ た コ ン カナ バ リンA),あ A-パ ーオ キ シ ダ ー ゼ法 で 検 出 す る と,多 の シ ー トで4時 るい はCon 数 個 体 を1枚 間 で 分 析 検 定 で き る.し か も,多 場 合 は 各 個 体1 3個 くの の 柱 頭 で 充 分 で あ った.具 体 的 に 695

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22 610407487 ロ ペ ミ ッ ク 小 児 用 0. 0 5 % 2319001C1072 23 610412059 ゲ シ ン L 錠 5 0 m g 2478001G1046 24 610412105 ソ レ ル モ ン S R カ プ セ ル 3 7. 5 m g 1147002N1

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施 設 長 に 一 時 保 育 事 業 利 用 登 録 書 を 事 前 に 提 出 しなければならない ただし 緊 急 やむを 得 ない 場 合 は 利 用 当 日 の 登 録 手 続 きでも 差 支 えない 2 登 録 できる 保 育 所 は1か 所 とする ( 申 込 及 び 承 諾 ) 第 9 豊 中 市 一 時 保 育 事 業 実 施 要 綱 ( 目 的 ) 第 1 条 この 要 綱 は 保 護 者 の 就 労 形 態 の 多 様 化 や 傷 病 等 による 一 時 的 緊 急 的 な 保 育 需 要 に 対 応 するため 一 時 保 育 事 業 ( 以 下 事 業 という )を 実 施 し 児 童 の 福 祉 の 増 進 を 図 ることを 目 的 とする ( 実 施 施 設 及 び 定

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