1. 緒 言 わが 国 で 生 産 されるカンキツの 中 でもウンシュ ウミカンは 単 為 結 果 性 が 強 いため, 種 子 はほとん ど 入 らない.このことから 生 産 上 あるいは 流 通 上, 種 子 の 有 無 が 論 じられることは 少 ない. 一 方, 中 晩 生 カンキツは 種

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1 長 崎 農 林 技 セ 研 報 第 3 号 : 149~ 155( 2011) 薬 剤 処 理 によるカンキツの 種 子 混 入 軽 減 効 果 ( 第 1 報 ) 花 粉 発 芽 阻 害 物 質 について 林 田 誠 剛 キーワード:カンキツ, 種 子, 発 芽 阻 害, 花 粉,ギ 酸 Effect of Seed Reduction in The Citrus Fruit by Chemical Control 1.Pollen Germination Inhibitor Seigo HAYASHIDA 目 次 1. 緒 言 2. 材 料 および 方 法 3)ギ 酸 カルシウムを 含 む 製 剤 の 濃 度 が 花 粉 発 芽 抑 制 に 及 ぼす 影 響 3. 結 果 3)ギ 酸 カルシウムを 含 む 製 剤 の 濃 度 が 花 粉 発 芽 抑 制 に 及 ぼす 影 響 4. 考 察 5. 摘 要 6. 引 用 文 献 Summary

2 1. 緒 言 わが 国 で 生 産 されるカンキツの 中 でもウンシュ ウミカンは 単 為 結 果 性 が 強 いため, 種 子 はほとん ど 入 らない.このことから 生 産 上 あるいは 流 通 上, 種 子 の 有 無 が 論 じられることは 少 ない. 一 方, 中 晩 生 カンキツは 種 子 が 混 入 する 品 種 が 多 い.この ことは 育 種 を 進 めていく 上 では 非 常 に 有 利 な 点 で あるが, 消 費 者 にとって, 種 子 が 多 く 存 在 するの は 食 する 上 でマイナスである.そのため, 種 子 の 混 入 は 果 実 の 商 品 性 を 低 下 させる 大 きな 要 因 とな っている. これまでカンキツの 無 核 あるいは 少 核 の 果 実 を 生 産 する 手 法 としていくつかの 方 法 が 検 討 さ れてきた. 育 種 的 な 手 法 としては 放 射 線 の 照 射 による 突 然 変 異 6), 倍 数 体 の 利 用 8),15),19), 葯 退 化 による 雄 性 不 稔 性 の 利 用, 無 核 紀 州 由 来 の 雌 性 不 稔 性 の 利 用 13),16),18) などがある.また, 栽 培 的 な 手 法 として 四 倍 体 の 花 粉 で 二 倍 体 の 品 種 を 受 粉 する 方 法 9),14),17), 植 物 ホルモンを 利 用 3),10),20) する 方 法,ハウス 栽 培 で 開 花 期 に 高 温 に する 方 法 2) などの 研 究 が 行 われてきた. 本 報 ではこれまでの 方 法 とはまったく 異 なっ た 栽 培 的 手 法 で 種 子 数 を 減 ずる 方 法 を 確 立 する ため, 花 粉 の 発 芽 を 阻 害 する 物 質 を 探 索 し, 効 果 が 高 いと 思 われる 薬 剤 の 発 芽 阻 害 に 有 効 な 濃 度 および 品 種 間 差 異 について 調 査 したので,そ の 結 果 を 報 告 する. 2. 材 料 および 方 法 部 門 内 に 植 栽 している 不 知 火, はる み, せとか, 津 之 輝, はるか, 清 見, 麗 紅 および 紅 まどか の 8 品 種 について 成 熟 した 果 実 を 各 品 種 10 果 供 試 し,2009 年 2 月 2 日 に 果 実 に 含 まれる 種 子 を 取 り 出 し, 完 全 種 子 および 不 完 全 種 子 に 分 類 し,その 数 を 調 査 した. 紅 まどか は 無 加 温 施 設 栽 培 でそれ 以 外 の 品 種 は 露 地 栽 培 である.なお, 写 真 1に 示 すように 胚 乳 が 完 全 に 形 成 さ れ て い る も の を 完 全 種 子 と 判 別 し, 胚 乳 の 発 達 が 不 十 分 な 種 子 を 不 完 全 種 子 とした 年 5 月 8 日, 露 地 栽 培 の 11 年 生 は るか の 開 花 直 前 の 花 蕾 を 採 取 し, 葯 を 取 り 出 して,25 のインキュベータで 開 葯 した. 開 葯 し た 花 粉 は n-ヘ キ サ ン で 純 花 粉 に 精 製 し,-85 で 保 存 した. 6 月 21 日 に,ショ 糖 10%, 寒 天 1%にギ 酸 カルシウム,ギ 酸 ナトリウム, 炭 酸 カルシ ウム, 塩 化 カルシウムをそれぞれ 1.0%,0.5 %, 0.2%になるように 調 整 した 培 地 を 作 成 した.また, 対 照 としてショ 糖, 寒 天 のみの 培 地 を 供 試 した. 上 記 培 地 に はるか の 花 粉 を 散 布 し,25 で 16 時 間 静 置 後, 花 粉 の 発 芽 率 を 調 査 し た.また,24 時 間 静 置 後, 花 粉 管 長 を 測 定 し た. 3)ギ 酸 カ ル シ ウ ム を 含 む 製 剤 の 濃 度 が 花 粉 発 芽 抑 制 に 及 ぼす 影 響 2008 年 4 月 9 日 に 少 加 温 ハウス 栽 培 の せ とか および 天 草, 5 月 8 日 に 無 加 温 ハ ウス 栽 培 の 晩 白 柚, 露 地 栽 培 の はるか, はるみ のそれぞれ 開 花 直 前 の 花 蕾 を 採 取 し, 葯 を 取 り 出 して,25 のインキュベータ で 開 葯 した. 開 葯 した 花 粉 は n-ヘキサンで 純 花 粉 に 精 製 した. ショ 糖 10%, 寒 天 1%にスイカル( 晃 栄 化 学 工 業 ギ 酸 カルシウム 98%, 水 分 等 2%) を 添 加 した 溶 液 を 直 径 8cm のシャーレに 約 20ml 流 し 込 んだ 培 地 を 作 成 し, 培 地 上 に 花 粉 を 25 で 16 時 間 静 置 後, 花 粉 の 発 芽 率 を 調 査 した. はるか および 晩 白 柚 はスイ カルの 濃 度 が 100 倍,200 倍,500 倍,1000 倍, せとか, 天 草, はるみ は 100 倍 の 培 地 を 供 試 し,ショ 糖, 寒 天 のみの 培 地 を 対 照 とした.また, 培 地 の ph を 測 定 した 年 5 月 15 日 に 露 地 栽 培 の はるか A B

3 から 採 取 し, 前 項 と 同 様 な 方 法 で 精 製 した 純 花 粉 を 供 試 し, 塩 酸 と 水 酸 化 ナトリウムを 用 いて ph を 調 整 したショ 糖 10%, 寒 天 1%の 培 地 に 散 布 し,25 で 16 時 間 静 置 後, 花 粉 の 発 芽 率 を 調 査 した. A B C D 写 真 1 完 全 種 子 (A)と 不 完 全 種 子 (B,C,D) 3. 結 果 種 子 数 は 品 種 によって 大 きく 異 なり, 完 全 種 子 が 最 も 少 ないのは 不 知 火 で, 最 も 多 いのは 紅 まどか であった( 表 1). 含 ま れ る 種 子 数 が 少 な い 品 種 ほ ど 標 準 偏 差 が 低 く, 多 い 品 種 ほど 高 かった. 不 完 全 種 子 が 最 も 少 ないのは せとか で, 最 も 多 いのは は るか であった. 含 まれる 種 子 数 が 少 ない 品 種 ほど 標 準 偏 差 が 低 く, 多 い 品 種 ほど 高 い 傾 向 にあった. 完 全 種 子 数 と 不 完 全 種 子 数 の 関 係 では, 完 全 種 子 が 比 較 的 少 なくても 不 完 全 種 子 が 多 い 品 種 や 完 全 種 子 が 多 くても 不 完 全 種 子 はほとんど 含 まれない 品 種 も 存 在 した. 表 1 果 実 に 含 まれる 種 子 数 の 品 種 間 差 異 完 全 種 子 不 完 全 種 子 品 種 名 平 均 標 準 平 均 標 準 ( 個 ) 偏 差 ( 個 ) 偏 差 不 知 火 は る み せ と か はるか 津 之 輝 清 見 麗 紅 紅 まどか 花 粉 の 発 芽 はギ 酸 カルシウムおよびギ 酸 ナ トリウムを 含 む 培 地 で 強 く 抑 制 され,それぞ れ 1.0%および 0.5%の 濃 度 ではまったく 発 芽 が 認 められなかった( 表 2). 0.2%では 発 芽 はみられたものの 発 芽 率 は 低 く, 花 粉 管 の 伸 長 も 短 かった( 表 3). 炭 酸 カルシウム は 花 粉 発 芽 率, 花 粉 管 長 とも 無 処 理 と 同 程 度 であり, 影 響 が 認 められなかった. 塩 化 カル シウムは 濃 度 1.0%で 花 粉 の 発 芽 や 花 粉 管 の 伸 長 を 阻 害 したが,その 程 度 はギ 酸 を 含 む 塩 類 よりも 軽 かった. 供 試 薬 剤 をそれぞれ 1% 添 加 した 培 地 での 花 粉 の 発 芽 状 況 を 写 真 2に 示 した 表 2 各 種 薬 剤 の 培 地 への 添 加 が はるか の 花 粉 発 芽 率 に 及 ぼす 影 響 薬 剤 名 花 粉 発 芽 率 (%) 濃 度 1.0% 0.5% 0.2% ギ 酸 カルシウム ギ 酸 ナトリウム 炭 酸 カルシウム 塩 化 カルシウム 無 処 理

4 表 3 各 種 薬 剤 の 培 地 への 添 加 が はるか の 花 粉 管 の 伸 長 に 及 ぼす 影 響 薬 剤 名 花 粉 管 長 (µm) 濃 度 1.0% 0.5% 0.2% ギ 酸 カルシウム ギ 酸 ナトリウム 炭 酸 カルシウム 塩 化 カルシウム 無 処 理 写 真 2 各 種 薬 剤 の 培 地 への 添 加 と はるか 花 粉 の 発 芽 ( 花 粉 散 布 24 時 間 後 ) A:1.0%ギ 酸 カルシウム B:1.0%ギ 酸 ナトリウム C:1.0% 炭 酸 カルシウム D:1.0% 塩 化 カルシウム E: 無 処 理

5 3)ギ 酸 カルシウムを 含 む 製 剤 の 濃 度 が 花 粉 発 芽 抑 制 に 及 ぼす 影 響 培 地 の ph はギ 酸 カルシウムを 含 むスイカ ルの 希 釈 倍 率 が 低 くなるにつれて 高 くなり, 中 性 に 近 くなった( 表 4). 花 粉 発 芽 率 はいずれの 品 種 でもスイカルの 濃 度 が 100 倍 では 花 粉 の 発 芽 は まったくみ られなかった.また, 濃 度 を 変 えた はるか と 晩 白 柚 では 濃 度 が 濃 くなるにつれて 花 粉 発 芽 率 が 低 下 した.なお, 花 粉 発 芽 率 は 品 種 により 差 が 認 められ, はるか が 最 も 高 く, 晩 白 柚 および せとか が 低 かった. 100 倍 のスイカルを 添 加 した 培 地 上 での 晩 白 柚 の 花 粉 の 発 芽 状 況 を 写 真 3に 示 した 培 地 の ph が 低 く 酸 性 が 強 いほど 花 粉 発 芽 率 が 低 く,pH が 5.0 以 上 では 発 芽 率 に 大 き な 差 は 認 めらなかった( 表 5). 表 4 培 地 へのスイカルの 添 加 が 花 粉 発 芽 率 に 及 ぼす 影 響 (%) 希 釈 倍 率 ph はるか 晩 白 柚 せとか 天 草 はるみ 100 倍 倍 倍 倍 無 処 理 表 5 培 地 の ph が はるか の 花 粉 発 芽 率 に 及 ぼす 影 響 ph 花 粉 発 芽 率 (%) スイカル 100 倍 を 添 加 した 培 地 スイカル 無 添 加 の 培 地 写 真 3 スイカルの 培 地 への 添 加 と 花 粉 の 発 芽 ( 品 種 : 晩 白 柚 ) 4. 考 察 荒 川 ら 1) はリンゴを 用 い, 満 開 後 にギ 酸 カル シウム 剤 を 散 布 することで 結 実 が 阻 害 され, 摘 花 効 果 が 得 られることを 明 らかにしており,そ の 作 用 機 作 は 柱 頭 に 傷 害 を 与 え, 花 粉 管 の 伸 長

6 を 阻 害 するためとしている.また, 増 田 ら 11), 孟 ら 12), 石 川 ら 7) も 同 様 にギ 酸 カルシウムがリ ンゴの 摘 花 に 効 果 があることを 認 めている. 一 方,ニホンナシについて 平 塚 ら 4),5) が 試 験 を 行 っており,リンゴと 同 様 な 摘 花 効 果 が 得 られているが,ニホンナシでの 摘 花 機 構 は ギ 酸 による 受 精 阻 害 であるとしている. 本 試 験 は in vitro での 試 験 であり, 柱 頭 上 の 受 精 阻 害 を 確 認 したわけではないが,ギ 酸 カルシウムがカンキツ 花 粉 の 発 芽 および 花 粉 管 の 伸 長 を 阻 害 しているのは 明 らかであり, カンキツにおいてもリンゴやニホンナシと 同 様 の 作 用 機 作 であると 考 えられる. 花 粉 の 発 芽 阻 害 に 有 効 な 薬 剤 を 探 索 するた め,ギ 酸 カルシウム,ギ 酸 ナトリウム, 炭 酸 カルシウムおよび 塩 化 カルシウムの 培 地 での 発 芽 率 および 花 粉 管 の 伸 長 を 調 査 した 結 果, ギ 酸 を 含 む 培 地 で 明 らかな 発 芽 阻 害 効 果 があ り,ギ 酸 以 外 の 有 機 酸 を 含 むカルシウム 塩 で は 効 果 が 劣 っていた.つまり, 発 芽 阻 害 には ギ 酸 が 有 効 であることを 裏 付 けたデータとな った. 平 塚 ら 4) はニホンナシを 供 試 し,ギ 酸 カルシウム, 乳 酸 カルシウムおよび 酢 酸 カル シウムの in vitro での 花 粉 の 発 芽 阻 害 効 果 を 調 査 し,ギ 酸 カルシウムの 阻 害 効 果 を 確 認 し ており, 本 試 験 もその 結 果 と 一 致 した. ギ 酸 カルシウムを 98% 含 む 製 剤 を 用 い, 花 粉 の 発 芽 阻 害 効 果 に 有 効 な 希 釈 倍 率 を 求 めた ところ, 100 倍 ( 濃 度 換 算 でおおむね 1%) ではまったく 発 芽 しなかったが,1000 倍 ( 同 0.1%)では 明 らかに 発 芽 抑 制 効 果 が 劣 ってい た. 平 塚 ら 4) のニホンナシの in vitro での 試 験 で は 0.1% で 完 全 な 阻 害 効 果 を 確 認 し て お り,カンキツの 花 粉 はニホンナシよりもギ 酸 カルシウムに 対 する 感 受 性 が 劣 ることも 考 え られる. 表 5に 示 したように 培 地 の ph が 5 以 下 の 酸 性 になると 花 粉 の 発 芽 率 は 低 下 し たが,5 以 上 であれば 変 わらなかった. 表 4にギ 酸 カ ルシウムの 濃 度 を 変 えた 培 地 の ph を 示 して いるが,ギ 酸 カルシウムの 濃 度 が 高 くなるに つれて ph は 高 くなっている.このことはギ 酸 カルシウムによる 花 粉 の 発 芽 阻 害 が ph に よるものではないことを 証 明 している. 5. 摘 要 カンキツの 種 子 混 入 を 防 止 するための 手 段 と して, 花 粉 発 芽 を 阻 害 する 物 質 の 探 索 を 行 った. その 結 果,ギ 酸 を 含 む 塩 類 が 花 粉 の 発 芽 および 花 粉 管 の 伸 長 を 阻 害 することが 判 明 した. 寒 天 培 地 に 含 まれるギ 酸 カルシウムの 濃 度 が 高 いほ ど 花 粉 の 発 芽 は 抑 制 され, 100 倍 でまったく 発 芽 しなかった.また ギ 酸 カルシウムの 発 芽 阻 害 は ph によるものではなく,ギ 酸 カルシウム の 直 接 的 な 効 果 によるものである. このようなことから,ギ 酸 カルシウムはカ ンキツの 種 子 混 入 を 防 止 する 薬 剤 として 利 用 できる 可 能 性 が 示 された. 6. 引 用 文 献 1) 荒 川 修 石 川 勝 規 小 原 繁 小 野 田 和 夫 福 田 博 之 :ギ 酸 カルシウム 剤 によるリンゴの 摘 花, 園 芸 学 研 究,1,259~262(2002) 2) 近 泉 惣 次 郎, 日 野 昭, 秋 好 廣 明, 水 谷 房 雄 : 開 花 期 の 温 度 が アンコール の 種 子 数 に 及 ぼす 影 響, 愛 媛 大 学 農 学 部 農 場 報 告,21, 11~17(2000) 3) 比 嘉 照 夫 : 果 樹 類 の 無 核 化 に 関 する 研 究 ( 第 1 報 ) 柑 橘 類 の 種 子 発 達 に 及 ぼすルチンおよ びトマトトーンの 影 響, 園 芸 学 会 発 表 要 旨, 昭 55 春,38~39(1980) 4) 平 塚 伸 渡 辺 学 河 合 義 隆 前 島 勤 川 村 啓 太 郎 加 藤 尉 行 :ニホンナシに 対 す るギ 酸 カルシウムの 摘 花 作 用, 園 芸 学 会 雑 誌, 71,62~67(2002) 5) 平 塚 伸 丹 羽 一 江 河 合 義 隆 前 島 勤 川 村 啓 太 郎 :ギ 酸 カルシウムによるニホン ナシの 摘 花 : 濃 度 の 影 響 と 花 柱 による 薬 剤 の

7 吸 収, 園 芸 学 会 雑 誌,72,224~229(2003) 6) 市 ノ 木 山 浩 道 大 野 秀 一 前 博 視 : 放 射 線 育 種 によるカンキツ 早 香 の 少 核 系 統 の 作 出, 園 芸 学 研 究.8( 別 )2,381(2009) 7) 石 川 勝 規 小 野 田 和 夫 小 原 繁 :リンゴ における 蟻 酸 カルシウムの 摘 花 効 果, 園 芸 学 会 東 北 支 部 発 表 要 旨, 平 12,23~24(2000) 8) 喜 多 景 治 佐 川 正 典 窪 田 聖 一 松 本 英 紀 :3 倍 体 利 用 によるカンキツ 類 の 無 核 品 種 育 成 に 関 す る 研 究, 園 芸 学 会 発 表 要 旨, 昭 62 春,6~7(1987) 9) 牧 田 好 高 小 中 原 実 : 有 核 性 カンキツの 無 核 果 生 産 に 関 する 研 究 第 1 報 4 倍 体 ナツ ダイダイ 花 粉 の 受 粉 によるヒュウガナツの 無 核 果 生 産, 静 岡 県 柑 橘 試 験 場 研 究 報 告,17,1 ~12(1981) 10) 牧 田 好 高 : 有 核 性 カンキツの 無 核 果 生 産 に 関 する 研 究 第 2 報 ジベレリンペースト 利 用 によるヒュウガナツと 清 見 の 無 核 果 生 産, 静 岡 県 柑 橘 試 験 場 研 究 報 告,20,21~29(1984) 11) 増 田 哲 男 工 藤 和 典 別 所 英 男 猪 俣 雄 司 和 田 雅 人 中 元 陽 一 藤 澤 弘 幸 :リンゴ ふじ の 摘 花 に 及 ぼすギ 酸 カルシウムの 影 響, 園 芸 学 研 究,5(3),283~288(2006) 12) 孟 玉 平 横 田 清 村 上 正 伸 田 口 芳 彦 :リンゴ ふじ における Ca 化 合 物 の 摘 花 効 果 とその 実 用 化 の 可 能 性, 園 芸 学 会 東 北 支 部 発 表 要 旨, 平 12,25~26(2000) 13) 根 角 博 久 中 野 睦 子 吉 田 俊 雄 : 無 核 紀 州 に 由 来 する 受 精 胚 珠 発 育 異 常 の 遺 伝 様 式. 園 芸 学 会 雑 誌. 70 別 (2001) 14) 高 原 利 雄 生 山 巌 奥 代 直 巳 :カンキツ 類 の 自 家 不 和 合 性 品 種 に 対 する 受 粉 樹 として の 4 倍 体 花 粉 の 影 響, 果 樹 試 験 場 研 究 報 告 D, 4,11~24(1982) 15) 徳 永 忠 士 新 居 美 香 津 村 哲 宏 山 尾 正 実 :スダチにおける 四 倍 体 と 二 倍 体 との 交 雑 に よる 三 倍 体 雑 種 の 作 出 および 無 核 品 種 徳 島 3X1 号 の 育 成, 園 芸 学 研 究, 4(1), 11~ 15(2005) 16) 山 﨑 安 津 金 好 純 子 古 田 貴 音 我 藤 雄 文 室 政 彦 羽 生 剛 北 島 宣 : 無 核 紀 州 型 の 無 核 性 発 現 を 抑 制 する 温 度 条 件, 園 芸 学 研 究,8( 別 )2,138(2009) 17)Yamashita, K.:Production of seedless fruits in Hyuganatsu,Citrus tamurana Hort,ex Tanaka,and Hassaku,Citrus hassaku Hayata through pollination with pollen grains from the 4 x Natsudaidai,Citrus natsudaidai Hayata, J.Japan.Soc.Hort.Sci,45,225~230(1976) 18) 矢 野 加 奈 子 清 水 徳 朗 西 川 芙 美 恵 遠 藤 朋 子 島 田 武 彦 藤 井 浩 根 角 博 久 : 無 核 紀 州 'の 無 核 性 発 現 関 連 遺 伝 子 の 解 析, 園 芸 学 研 究, 7( 別 2),401(2008) 19) 吉 田 俊 雄 根 角 博 久 吉 岡 照 高 家 城 洋 之 伊 藤 祐 司 中 野 睦 子 上 野 勇 山 田 彬 雄 村 瀬 昭 治 瀧 下 文 孝 :キンカン 新 品 種 ぷ ちまる, 果 樹 研 究 所 研 究 報 告,2,9-16(2003) 20) 湯 田 英 二 松 井 弘 之 中 井 功 :GA 処 理 がポンカンの 無 核 化 に 及 ぼす 影 響, 園 芸 学 会 発 表 要 旨, 昭 51 春,142~143(1976) Summary To reduction seed mixture, searched for the material which obstructed pollen germination of citrus. As a result, it was recognized that salts including the formic acid obstructed germination of the pollen and the extension of the pollen tube. The germination of the pollen was restrained so that the density of calcium formate included in an agar nutrient medium was high, and it did not germinate at 100 times (density conversion, about 1%) at all. This germination obstruction depends on the direct effect of the formic acid not a thing by the ph. From such a thing, the possibility that I could use the calcium formate as the medicine which reduced the seed mixture of the citrus fruit was shown

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