ュールが 容 器 に 記 載 されていた ( 図 3) 図 2 試 料 図 3 服 用 スケジュールの 記 載 2. 標 準 品 及 び 試 薬 1) 標 準 品 ヨヒンビン 塩 酸 塩 は 和 光 純 薬 工 業 社 製 の 一 級 試 薬 を グリベンクラミド グリクラジド 及 びトルブタミドは

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1 - 研 究 報 告 - 大 阪 府 立 公 衆 衛 生 研 究 所 報 第 47 号 平 成 21 年 (2009 年 ) ダイエット 効 果 を 暗 示 するいわゆる 健 康 食 品 から ヨヒンビンを 検 出 した 事 例 について 中 村 暁 彦 * 1 田 口 修 三 * 1 川 口 正 美 * 1 岩 上 正 藏 * 2 梶 村 計 志 * 1 大 阪 府 ではダイエット 効 果 を 暗 示 するいわゆる 健 康 食 品 について 医 薬 品 成 分 配 合 の 有 無 を 確 認 する ことを 目 的 とし 平 成 14 年 度 から 試 買 調 査 を 実 施 している 今 回 インターネットサイトを 通 じて 購 入 したダイエット 効 果 を 暗 示 する 健 康 食 品 から 催 淫 薬 であるヨヒンビンが 検 出 されたので 報 告 する ヨ ヒンビンの 確 認 はフォトダイオードアレイ 検 出 器 付 き 高 速 液 体 クロマトグラフィー(HPLC/PDA) 及 び 薄 層 クロマトグラフィー(TLC)により 行 い 含 量 の 測 定 は HPLC/PDA により 行 った キーワード : ヨヒンビン 催 淫 薬 ダイエット 健 康 食 品 Key words : yohimbine, aphrodisiac drug, weight reduction, dietary supplement 近 年 健 康 志 向 の 高 まりと 通 信 販 売 の 普 及 を 背 景 と して 健 康 食 品 が 注 目 を 集 めている 厚 生 労 働 省 の 推 計 によると 2000 年 に 1.3 兆 円 程 度 であった 健 康 食 品 の 市 場 は 急 速 に 拡 大 しており 2010 年 には 3.2 兆 円 に 達 するとされている 1 ) 保 健 機 能 食 品 以 外 の 健 康 志 向 食 品 いわゆる 健 康 食 品 ( 以 下 健 康 食 品 ) には 法 令 上 の 定 義 がなく 健 康 の 増 進 に 役 立 つものとして 販 売 利 用 されているものの 一 般 食 品 と 同 じ 分 類 となる 一 方 これら 健 康 食 品 が 原 因 と 疑 われる 健 康 被 害 が 多 数 発 生 している 2-5 ) ダイエット 効 果 を 暗 示 する 健 康 食 品 についても 例 外 ではなく それらに 配 合 された 医 薬 品 成 分 により 健 康 被 害 を 受 けた 人 数 は 平 成 14 年 から 平 成 18 年 7 月 12 日 までの 間 に 796 名 うち 4 名 が 死 亡 している 5 ) 6 平 成 14 年 の 検 出 事 例 ) を 契 機 に 大 阪 府 では 府 民 の 健 康 被 害 を 防 止 するため 健 康 食 品 安 全 対 策 事 業 とし て 健 康 食 品 の 試 買 調 査 を 継 続 している その 一 環 とし て 当 所 では 健 康 食 品 中 に 配 合 された 医 薬 品 成 分 の 分 析 を 行 っている 本 稿 では 平 成 20 年 度 に 行 われた 試 買 調 査 において ダイエット 効 果 を 暗 示 する 健 康 食 品 ( 輸 入 品 )1 検 体 から 催 淫 薬 のヨヒンビン( 図 1)を 検 出 した 事 例 につ いて 報 告 する 図 1 ヨヒンビンの 構 造 式 実 験 方 法 *1 大 阪 府 立 公 衆 衛 生 研 究 所 衛 生 化 学 部 薬 事 指 導 課 *2 旧 大 阪 府 立 公 衆 衛 生 研 究 所 食 品 医 薬 品 部 Yohimbine Found in a Dietary Supplement with Suggestive Expression for Weight Reduction by Akihiko NAKAMURA, Masami KAWAGUCHI, Keiji KAJIMURA, Shuzo TAGUCHI, Shozo IWAGAMI 1 1. 試 料 平 成 20 年 度 に ダイエット 効 果 を 暗 示 する 健 康 食 品 SLIMQUICK extreme ( 図 2)を 試 買 した 試 料 は 赤 色 の 軟 カプセルであり 内 容 物 は 粘 稠 性 のある 茶 色 の 液 体 であった また 1 日 目 から 段 階 的 に 増 量 し 5 日 目 以 降 1 日 あたり 6 カプセルの 摂 取 を 推 奨 するスケジ 37

2 ュールが 容 器 に 記 載 されていた ( 図 3) 図 2 試 料 図 3 服 用 スケジュールの 記 載 2. 標 準 品 及 び 試 薬 1) 標 準 品 ヨヒンビン 塩 酸 塩 は 和 光 純 薬 工 業 社 製 の 一 級 試 薬 を グリベンクラミド グリクラジド 及 びトルブタミドは 同 社 製 の 生 化 学 用 を 標 準 品 として 用 いた フェンフル ラミン 塩 酸 塩 N-ニトロソフェンフルラミン シブト ラミン 塩 酸 塩 一 水 和 物 は 国 立 医 薬 品 食 品 衛 生 研 究 所 か ら 供 与 されたものを 標 準 品 として 使 用 した マジンド ールは Sigma 社 製 の TLC 用 を 標 準 品 として 使 用 した 2) 試 薬 試 薬 は 全 て 和 光 純 薬 工 業 社 製 を 用 いた メタノール アセトニトリル エタノールは HPLC 用 を 使 用 した リン 酸 28%アンモニア 水 は 特 級 を 使 用 した 酢 酸 エ チルは 残 留 農 薬 用 硫 酸 は 精 密 分 析 用 を 使 用 した ド デシル 硫 酸 ナトリウム(SDS)は 生 化 学 用 ヘキサンス ルホン 酸 ナトリウムはイオンペアクロマトグラフ 用 を 使 用 した 3.HPLC/PDA による 痩 身 用 医 薬 品 成 分 の 一 斉 分 析 2 7 西 條 らの 方 法 ) に 準 じて 試 験 を 実 施 した 試 料 3 カプ セル(1 日 最 大 服 用 目 安 量 の 半 量 )をとり 切 れ 目 を 入 れ 70%メタノールを 正 確 に 100 ml 加 えた スターラ ーを 用 いて 5 時 間 攪 拌 し さらに 超 音 波 抽 出 を 15 分 間 行 った 溶 液 を 0.45 μmのメンブランフィルターでろ 過 し 試 料 溶 液 とした また フェンフルラミン 塩 酸 塩 N-ニトロソフェンフルラミン シブトラミン 塩 酸 塩 一 水 和 物 マジンドール グリベンクラミド グリクラ ジド トルブタミド ヨヒンビン 塩 酸 塩 をそれぞれメ タノールで 溶 解 し 各 標 準 溶 液 の 濃 度 を μg/mlとした HPLC/PDA 測 定 条 件 は 以 下 の 通 りである 装 置 :LC-10 AD-VP システム( 島 津 製 作 所 ) 測 定 波 長 :200~350 nm( 検 出 波 長 フェンフルラミン: 207 nm N-ニトロソフェンフルラミン:233 nm シブ トラミン:223 nm マジンドール:267 nm グリベン クラミド:229 nm グリクラジド:228 nm トルブタ ミド:229 nm ヨヒンビン:220 nm) カラム:TSK-gel ODS-80Ts QA 15 cm 4.6 mm 5 μm ( 東 ソー) カラム 温 度 :40 移 動 相 A 液 :5 mmol/l ヘキサンスルホン 酸 ナトリウム 含 有 アセトニトリル/ 水 /リン 酸 混 液 (100:900:1) 移 動 相 B 液 :5 mmol/l ヘキサンスルホン 酸 ナトリウム 含 有 アセトニトリル/ 水 /リン 酸 混 液 (900:100:1) グラジエント 条 件 :0 分 (A:B = 90:10) 25 分 (A:B = 55:45) 分 (A:B = 10:90) 分 (A:B = 90:10) 流 量 :1 ml/min 注 入 量 :20 μl 4.TLC によるヨヒンビンの 確 認 試 料 1 カプセルをとり 切 断 してカプセルごと 100 ml のマイヤーに 入 れ 0.1% 酢 酸 を 含 むメタノール 50 ml を 加 えて 20 分 間 激 しく 振 り 混 ぜた この 液 を 0.45 μm のメンブランフィルターでろ 過 し ろ 液 全 体 を Oasis MCX (60 mg/ 3cc Waters)(あらかじめメタノー ル 2 ml ついで 0.1% 酢 酸 2 ml でコンディショニング したもの)に 負 荷 し( 自 然 落 下 法 ) このカートリッジ を 水 2 ml 次 いでメタノール 2 ml で 洗 浄 した 次 に 2%アンモニアを 含 むメタノール 2 ml で 溶 出 させ 溶 出 液 をナス 型 フラスコに 入 れ 減 圧 乾 固 し メタノール 100 μl を 加 えて 振 り 混 ぜ TLC 用 試 料 溶 液 (SAM)と 38

3 した また ヨヒンビン 塩 酸 塩 をメタノールに 溶 かし て 1.0 mg/ml とした 溶 液 を TLC 用 標 準 溶 液 (STD)と した TLC 測 定 条 件 は 以 下 の 通 りである 薄 層 板 :HPTLC Kieselgel 60 F 254 (MERCK) 展 開 溶 媒 : 酢 酸 エチル/メタノール/28%アンモニア 水 混 液 (90:10:1) スポット 量 : 試 料 溶 液 は 2 μl 及 び 4 μl 標 準 溶 液 は 1 μl 及 び 2 μl をスポットした 検 出 法 :50% 硫 酸 エタノール 溶 液 を 噴 霧 後 105 で 5 分 間 加 熱 し 紫 外 線 (365 nm)を 照 射 した ール グリベンクラミド グリクラジド 及 びトルブタ ミドは 検 出 されなかった しかし 測 定 対 象 ではない ヨヒンビンのピークと 保 持 時 間 が 一 致 するピークが 確 認 された 当 該 ピークの 紫 外 部 吸 収 スペクトルをヨヒ ンビンのものと 比 較 したところ 同 一 のパターンを 示 した( 図 4) 5.ヨヒンビン 含 量 の 測 定 8 宮 武 らの 方 法 ) に 準 じて 試 験 を 実 施 した 試 料 3 カ プセルをとりカプセルに 切 れ 目 を 入 れ 下 記 に 示 す HPLC 用 移 動 相 を 90 ml 加 えて 10 分 間 超 音 波 処 理 を 行 った 後 30 分 間 振 とう 抽 出 した この 液 に 移 動 相 を 加 えて 正 確 に 100 mlとした 後 遠 心 分 離 し 上 澄 液 を 0.45 μmのメンブランフィルターでろ 過 し ろ 液 を 試 料 溶 液 とした また ヨヒンビン 塩 酸 塩 約 3 mg(1 日 最 小 服 9 用 量 ) の 半 量 )を 精 密 に 秤 量 し 移 動 相 に 溶 解 して 正 確 に 100 mlとしたものを 標 準 溶 液 とした 次 に 標 準 溶 液 を 移 動 相 で 正 確 に 1/3 1/6 1/12 の 濃 度 に 希 釈 し た 溶 液 を 検 量 線 用 標 準 溶 液 とし 検 量 線 を 作 成 して 定 量 を 行 った HPLC/PDA 測 定 条 件 は 以 下 の 通 りである 装 置 : 島 津 Prominence LC-20 システム( 島 津 製 作 所 ) 測 定 波 長 :200~350 nm( 定 量 波 長 272 nm) カラム:TSK-gel ODS-120T 15 cm 4.6 mm 5 μm( 東 ソー) カラム 温 度 :40 移 動 相 :0.6%SDS 含 有 水 /アセトニトリル/リン 酸 混 液 (550:450:0.7) 流 量 :1 ml/min 注 入 量 :5 μl 図 nm におけるクロマトグラム 及 び 検 出 ピークの UV スペクトル 2.TLC によるヨヒンビンの 確 認 試 料 溶 液 について TLCによる 分 析 を 行 ったところ 紫 外 線 照 射 下 においてヨヒンビンと 同 じ Rf 値 ( 約 0.44) に 同 様 の 青 色 蛍 光 スポットが 確 認 された( 図 5) これ らの 結 果 により 試 料 から 検 出 した 成 分 をヨヒンビン と 同 定 した 溶 媒 先 端 Rf = 0.44 結 果 展 開 方 向 原 線 1. 痩 身 用 医 薬 品 成 分 の 一 斉 分 析 試 料 溶 液 について HPLC/PDA による 分 析 を 行 った ところ 当 初 の 目 的 成 分 であるフェンフルラミン N- ニトロソフェンフルラミン シブトラミン マジンド 3 STD 1μL STD 2μL SAM 2μL SAM 4μL 図 5 紫 外 線 照 射 下 における TLC クロマトグラム (365 nm 明 暗 反 転 ) 39

4 3.ヨヒンビン 含 量 の 測 定 ヨヒンビンの 定 量 はより 妨 害 の 少 ない 宮 武 らの 方 法 8 ) に 準 じて 実 施 した 試 料 溶 液 及 び 標 準 溶 液 について HPLC/PDAによる 分 析 を 行 ったところ 結 果 1と 同 様 の 結 果 を 示 し 試 料 中 にヨヒンビンが 存 在 することを 確 認 した( 図 6) 次 に 検 量 線 ( 図 7)を 用 いて 試 料 中 のヨヒンビン 含 量 を 測 定 した 結 果 試 料 中 から1カ プセルあたり 約 0.15 mg( 塩 酸 塩 として 0.17 mg)のヨ ヒンビンが 検 出 された ピーク 面 積 図 nm におけるクロマトグラム 及 び 検 出 ピークの UV スペクトル y = 56951x ヨヒンビン 塩 酸 塩 濃 度 (mg/100ml) 図 7 ヨヒンビンの 検 量 線 考 察 及 びまとめ ヨヒンビンは アカネ 科 高 木 ヨヒンベPausinystalia yohimbeの 樹 皮 又 はラウオルフィア 属 植 物 に 含 有 され るインドール 系 アルカロイドであり 催 淫 薬 として 使 用 される 10) 国 内 ではヨヒンビン 塩 酸 塩 製 剤 が 医 薬 品 4 として 承 認 されており 第 一 類 医 薬 品 に 区 分 されている 9 ) 副 作 用 として 発 疹 発 赤 めまい 発 汗 虚 脱 感 等 が 知 られている 入 手 した 試 料 に 1 回 1~3 カプセル 1 日 2 回 摂 取 と 記 載 されており( 図 3) 使 用 法 に 従 って 摂 取 した 場 合 ヨヒンビン 塩 酸 塩 として1 日 あたり 最 大 1.01 mg 服 用 することになる 日 本 国 内 で 販 売 されているヨヒ ンビン 塩 酸 塩 製 剤 が1 日 あたり 6~19.9 mgを 服 用 量 と している 9 ) ことから 使 用 法 に 従 って 摂 取 した 場 合 今 回 の 試 料 から 服 用 するヨヒンビンの 量 は 薬 用 量 以 下 で ある 現 在 のところこの 製 品 による 健 康 被 害 の 報 告 は ないが 薬 用 量 は 年 齢 体 重 性 別 等 により 個 人 差 が 存 在 することから 使 用 法 に 従 って 摂 取 した 場 合 でも 安 全 であるとは 限 らない 本 件 は 輸 入 代 行 であったた め 府 民 への 注 意 喚 起 を 図 る 意 味 で 大 阪 府 では 薬 務 課 ホームページで 当 該 製 品 使 用 の 中 止 を 呼 びかけると 共 に 健 康 被 害 などの 発 生 が 疑 われる 場 合 は 速 やかに 医 療 機 関 を 受 診 すること 等 を 周 知 した 11) このように 近 年 ダイエット 効 果 を 暗 示 する 健 康 食 品 から 予 期 せぬ 医 薬 品 成 分 が 検 出 される 事 例 が 見 ら れるようになった 特 にヨヒンビンは 海 外 の 文 献 で ダイエット 効 果 の 可 能 性 が 報 告 されており 12) その 効 果 を 暗 示 する 健 康 食 品 に 配 合 される 事 例 が 今 後 増 えて くると 予 想 される 従 って ヨヒンビンを 含 め 服 用 目 的 から 予 想 されない 成 分 や 新 規 に 配 合 される 可 能 性 の ある 成 分 に 対 応 した 監 視 の 強 化 を 行 う 必 要 がある 文 献 1 ) 厚 生 労 働 省, 第 1 回 健 康 食 品 制 度 のあり 方 に 関 する 検 討 会 資 料, 2 ) 三 谷 裕 昭, 高 石 喜 久, 滝 口 祥 令 : 中 国 製 ダイエット 食 品 により 肝 障 害 甲 状 腺 中 毒 症 を 示 した 症 例, 日 本 医 事 新 報, 4122, (2003) 3 ) 熊 坂 謙 一, 宮 澤 眞 紀, 小 島 尚, 土 井 佳 代, 佐 藤 修 二 : 有 症 苦 情 に 係 るダイエット 用 健 康 食 品 の 検 査 結 果 について, 神 奈 川 県 衛 生 研 究 所 研 究 報 告, 33, (2003) 4 ) 愛 知 県 衛 生 研 究 所, 医 薬 品 成 分 が 検 出 された 健 康 食 品 について, 40

5 5 ) 厚 生 労 働 省, 中 国 製 ダイエット 用 健 康 食 品 ( 未 承 認 医 薬 品 )による 健 康 被 害 事 例 等, 6 ) 大 阪 府 薬 務 課, 中 国 製 痩 身 用 健 康 食 品 の 収 去 試 験 結 果 について, 4kaiage.htm 7 ) 西 條 雅 明, 石 井 俊 靖, 長 谷 川 貴 志, 永 田 知 子 : いわ ゆる 健 康 食 品 中 の 医 薬 品 成 分 分 析 について, 千 葉 県 衛 研 年 報, 55, (2006) 8 ) 宮 武 ノリエ, 安 田 一 郎, 三 宅 啓 文, 守 安 貴 子, 中 嶋 順 一, 岸 本 清 子, 上 村 尚 :いわゆる 合 法 ドラッグ 中 に 含 有 する 医 薬 品 成 分 の 分 析 - 高 速 液 体 クロマ トグラフィーによる 塩 酸 ヨヒンビンの 定 量 -, 東 京 衛 研 年 報, 51, (2000) 9 ) 日 本 医 薬 品 集 フォーラム 監 修 : 日 本 医 薬 品 集 一 般 薬 年 度 版, p , じほう, 東 京 (2008) 10) 高 木 敬 次 郎, 亀 山 勉 監 修 : 最 新 基 礎 薬 理 学, p.85, 廣 川 書 店, 東 京 (1999) 11) 大 阪 府 薬 務 課, 医 薬 品 成 分 が 検 出 された 健 康 食 品 について, l 12) Ostojic SM:Yohimbine: the effects on body composition and exercise performance in soccer players, 14, (2006) 5 41

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