HPLC-PDA 使 用 機 器 移 動 相 表 1 分 析 条 件 Agilent 1 A: 5mM 1-ヘキサンスルホン 酸 Na 含 有.1リン 酸 B: アセトニトリル A:B=(82:18) 25min. (54:46) 19min. (19:81) 5min. (19:81) 1min.

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1 札 幌 市 衛 研 年 報 4,42-47(213) 健 康 食 品 中 医 薬 品 成 分 の 分 析 痩 身 系 健 康 食 品 からのセンノシド 検 出 事 例 *1 小 金 澤 望 戸 田 史 明 *1 上 井 大 司 *2 徳 田 美 穂 子 牧 里 江 宮 本 啓 二 宮 田 淳 *3 三 ツ 屋 文 秀 要 旨 平 成 24 年 度 に 実 施 された 札 幌 市 保 健 所 のいわゆる 健 康 食 品 ( 以 下 健 康 食 品 という ) 買 上 げ 検 査 において 強 壮 系 及 び 痩 身 系 健 康 食 品 1 検 体 の 分 析 依 頼 をうけ 医 薬 品 2 成 分 の 検 査 を 実 施 した この 買 上 げ 品 のうち 痩 身 系 健 康 食 品 1 検 体 から 医 薬 品 センナ 葉 の 有 効 成 分 であるセンノシド A 及 び センノシド B が 検 出 されたので 報 告 する 1. 緒 言 近 年 強 壮 作 用 や 痩 身 効 果 を 標 榜 した 健 康 食 品 に 医 薬 品 成 分 が 添 加 され 健 康 被 害 が 出 るケースが 相 次 いでいる 医 薬 品 成 分 を 含 む 健 康 食 品 は 無 承 認 無 許 可 医 薬 品 に 該 当 し 薬 事 法 規 制 の 対 象 となる 札 幌 市 保 健 所 では 平 成 19 年 度 から 健 康 食 品 の 買 上 げ 検 査 を 実 施 しており 平 成 22 年 度 よりその 成 分 分 析 を 札 幌 市 衛 生 研 究 所 にて 実 施 している 違 法 に 添 加 される 医 薬 品 成 分 は 構 造 を 変 えつつ 種 類 を 増 やしているため 検 査 にあたっては 最 新 の 情 報 収 集 に 努 め 効 率 的 に 分 析 可 能 な 医 薬 品 成 分 を 増 加 させ ていく 必 要 がある 平 成 22 年 度 ( 開 始 年 度 )は 9 成 分 23 年 度 には 17 成 分 の 分 析 を 可 能 とし 平 成 22 年 度 に 違 反 品 1 検 体 を 検 出 している しかし 近 年 はインターネットを 経 由 し MD ク リニックダイエット ホスピタルダイエット な どと 称 され 国 内 未 承 認 の 医 薬 品 成 分 を 含 有 してい る 製 品 が 個 人 輸 入 されており 死 亡 事 例 を 含 む 健 康 被 害 が 多 数 報 告 されている 1) これまで 札 幌 市 では 店 頭 による 買 上 げ 検 査 を 行 ってきたが この 状 況 を 受 け 平 成 24 年 度 には 初 めてインターネットによ る 検 体 購 入 を 実 施 し 2 成 分 について 分 析 を 行 っ た このうち 痩 身 系 健 康 食 品 の 1 つから 医 薬 品 成 分 センナ 葉 の 有 効 成 分 であるセンノシドを 検 出 した ため 本 稿 ではその 詳 細 について 報 告 する 2. 対 象 と 検 査 項 目 2-1 標 準 試 薬 シルデナフィル(クエン 酸 塩 ) バルデナフィル タダラフィル キサントアントラフィル ホンデナ フィル チオキナピペリフィル フェンフルラミン N-ニトロソフェンフルラミン オリスタットについ ては 国 立 医 薬 品 食 品 衛 生 研 究 所 より 標 品 として 配 布 されたものを 使 用 した ヒドロキシホモシルデナ フィル アミノタダラフィル クロロプレタダラフ ィル チオデナフィル メチソシルデナフィルにつ いては( 株 ) 関 東 化 学 より ヨヒンビン フェノール フタレイン センノシド A センノシド B について は 和 光 純 薬 ( 株 )より シブトラミン マジンドール については SIGMA より 入 手 した センノシド A セ ンノシド B は 1 炭 酸 水 素 ナトリウム 溶 液 に 他 は メタノールにそれぞれ ~4ppm になるよう 溶 *1 保 健 福 祉 局 保 健 所 医 療 政 策 課 *2 手 稲 区 保 健 福 祉 部 健 康 子 ども 課 *3 中 央 区 保 健 福 祉 部 健 康 子 ども 課 -42-

2 HPLC-PDA 使 用 機 器 移 動 相 表 1 分 析 条 件 Agilent 1 A: 5mM 1-ヘキサンスルホン 酸 Na 含 有.1リン 酸 B: アセトニトリル A:B=(82:18) 25min. (54:46) 19min. (19:81) 5min. (19:81) 1min. (82:18) カラム: 流 速 : 注 入 量 : PDA 条 件 : Mightysil RP18-GP 4.6x15mm, 5µm 1mL/min. 1μL 19-42nm 観 測 波 長 21nm 29nm 36nm 39nm LC-MS/MS 強 壮 系 医 薬 品 成 分 痩 身 系 医 薬 品 成 分 使 用 機 器 移 動 相 カラム: 流 速 : 注 入 量 : イオン 化 条 件 : Waters UPLC-Quattro Premier XE A: 2mM ギ 酸 アンモニウム 含 有.2ギ 酸 B: アセトニトリル A:B=(8:2) 6min. (6:4) 1min. (3:7) (5:95) 1min. (5:95) (8:2) Acquity UPLC BEH C xmm, 1.2µm.5mL/min. 5μL ESI positive Source temp. 12 Desolvation temp. 45 Desolvation gas 9L/hr Cone gas 5L/hr Waters UPLC-Quattro Premier XE A: 1mM ギ 酸 アンモニウム 含 有.1ギ 酸 B: アセトニトリル A:B=(9:1) 1min. (8:2) 3min. (1:9) (2:98) 3min. (2:98) (9:1) Acquity UPLC HSS T3 2.1 mm, 1.2µm.3mL/min. 5μL ESI positive / negative Source temp. 12 Desolvation temp. 3 Desolvation gas 6L/hr Cone gas 5L/hr メチソシルデナフ ィル(MSF) チオキナピペリフ ィル(TPF) 解 し 標 準 溶 液 とした 2-2 分 析 用 試 料 の 調 製 既 報 2) に 従 って 抽 出 調 製 した 2-3 分 析 条 件 表 2 LC-MS/MS イオン 条 件 Precursor Product Cone Collision ヨヒンビン(YOH) シブトラミン(Sib) マジンドール (Maz) フェンフルラミン (Fen) N-ニトロソフェンフ ルラミン(N-fen) オリスタット (Orl) フェノールフタレイ ン(Phe) センノシド A B (SenA SenB) フ ォ ト ダ イ オ ー ド ア レ イ 検 出 器 付 き HPLC (HPLC-PDA) 及 び LC-MS/MS を 使 用 した HPLC-PDA 及 び LC-MS/MS の 分 析 条 件 を 表 1 に メチソシルデナ フィル チオキナピペリフィル ヨヒンビン シブ トラミン マジンドール フェンフルラミン N-ニ トロソフェンフルラミン オリスタット フェノー ルフタレイン センノシド A センノシド B の LC-MS/MS イオン 条 件 を 表 2 に 示 す シルデナフィル (クエン 酸 塩 ) バルデナフィル タダラフィル キ サントアントラフィル ホンデナフィル ヒドロキ シホモシルデナフィル アミノタダラフィル クロ ロプレタダラフィル チオデナフィルの LC-MS/MS 2) 条 件 は 既 報 に 従 った 定 量 下 限 値 は 各 物 質 の 1 回 摂 取 量 につき.5mg とした 3. 結 果 平 成 22 年 度 に 分 析 対 象 であったシルデナフィル バルデナフィル タダラフィル キサントアントラ フィル ホンデナフィル チオデナフィル ヒドロ キシホモシルデナフィル アミノタダラフィル ク ロロプレタダラフィルに 加 え 強 壮 系 医 薬 品 成 分 3 成 分 (メチソシルデナフィル ヨヒンビン チオキ ナピペリフィル) 及 び 痩 身 系 医 薬 品 として 検 出 例 の 多 い 8 成 分 (シブトラミン マジンドール フェン -43-

3 2.556 XAF TPF thdf YOH VDF Maz HDF HSF SLF ATF MSF TDF CTF SenB SenA Fen Phe Sib N-Fen 図 1 HPLC-PDA PDA クロマトグラム 図 2 SenA 及 び SenB の 構 造 式 SenA SenB MW= フルラミン N-ニトロソフェンフルラミン オリス タット フェノールフタレイン センノシド A セ ンノシド B)を 新 たに 分 析 対 象 に 追 加 した 2) 成 分 の 定 性 及 び 定 量 を 確 実 にするために 既 報 同 様 HPLC-PDA 及 び LC-MS/MS を 使 用 した 混 合 標 準 品 の HPLC-PDA 分 析 クロマトグラムを 図 1 に 示 す オリ スタット(Orl)については HPLC-PDA でのピーク 検 出 が 極 めて 微 弱 なため 定 量 は LC-MS/MS でのみ 行 うこととした LC-MS/MS 分 析 については 分 析 対 象 成 分 数 が 増 加 したため 選 択 性 及 び 感 度 を 考 慮 し 強 壮 系 痩 身 系 の 成 分 をそれぞれ 別 途 測 定 することとした( 表 1) センノシド A(SenA)およびセンノシド B(SenB)の 構 -44-

4 造 は 図 2 に 示 すように 互 いに 立 体 異 性 体 (ジアステ 表 3 各 物 質 の LC-MS/MS 分 析 における RT 強 壮 系 医 薬 品 成 分 ヨヒンビン (YOH) チオキナピペリフィル (TPF) ホンデナフィル (HDF) バルデナフィル (VDF) ヒドロキシホモシルデ ナフィル(HSF) シルデナフィル (SLF) アミノタダラフィル (ATF) メチソシルデナフィル (MSF) キサントアントラフィ ル(XAF) 痩 身 系 医 薬 品 成 分.89 センノシド B (SenB) 1.8 センノシド A (SenA) 1.89 マジンドール (Maz) 2.4 フェンフルラミン (Fen) 2.42 フェノールフタレイ ン(Phe) 2.49 シブトラミン (Sib) 2.75 N-ニトロソフェンフ ルラミン(N-fen) 2.87 オリスタット (Orl) 3.53 タダラフィル(TDF) 3.55 チオデナフィル (thdf) クロロプレタダラフィ ル(CTF) ( 単 位 : 分 ) レオマー)であり SenA 及 び SenB の Precursor 及 び Product イオンは 同 一 である( 表 2) このため LC-MS/MS による 両 者 の 分 別 はリテンションタイム (RT)の 違 いによってのみ 可 能 である SenA と SenB は 比 較 的 高 極 性 であり 従 前 LC-MS/MS 分 析 に 使 用 し ていた Acquity UPLC BEH C 18 では 分 離 が 不 十 分 であ った このため SenA 及 び SenB を 含 む 痩 身 系 成 分 の 分 析 においては 豊 成 らの 方 法 3) を 参 考 として 分 析 カラム 及 び 移 動 相 を 変 更 した LC-MS/MS 分 析 におけ る 各 々の 物 質 のリテンションタイム(RT)を 表 3 に 示 す 平 成 24 年 度 の 買 上 げ 検 査 は 札 幌 市 として 初 めて インターネットによる 購 入 で 実 施 され 買 上 げ 品 の 内 訳 は 錠 剤 4 検 体 カプセル 5 検 体 茶 1 検 体 の 計 1 検 体 であった 搬 入 された 1 検 体 を 先 述 の 分 析 用 試 料 調 製 法 に 従 い 抽 出 し HPLC-PDA で 分 析 実 施 し たところ 検 体 No.1( 商 品 名 :ヤーヤ ダイエッ a b 標 準 品 861>386 No.1 861>386 a: RT=4.593 b: RT=6.536 SenB 2.43 SenA min a b 861> >224 SenB SenA 図 3 検 体 No.1 HPLC-PDA PDA クロマトグラム 及 び PDA スペクトル 図 4 検 体 No.1 及 びセンノシド 標 準 品 の LC-MS/MS クロマトグラム -45-

5 1 2 成分表記 包装写真及び内容物(カプセル) 3 4 服用法 包装上記載 和訳 用法 成人 2 カプセル 1 日 1 回 便秘時就寝前に服用 成分表記拡大図 (和訳) 1 カプセル 薬品粉末正味 19mg 中の成分 センナ葉 76mg ナンバンサイカチ果肉 76mg クローブ 19mg センナ莢 19mg 5 製品に内包の日本語による説明書(抜粋) 図 5 検体 No.1 ヤーヤ ダイエットカプセル 写真 No.1 ヤーヤ ダイエットカプセル 写真 トカプセル から RT が SenA 及び SenB とそれぞれ一 検体 No.1 は痩身効果を謳う健康食品で 商品に 致するピークが検出され それぞれの PDA スペクト は日本語の表記がなく 英語及びタイ語で表示がな ルは a が SenB b が SenA と類似していた 図 3 されていた(図 ) 検体 No.1 について調査 さらに LC-MS/MS による分析結果において RT 及び したところ 当該製品はタイで製造され輸入された Product イオンの比率が一致したため(図 4) 検体 ものであり 成分表記には英語表記及びタイ語の双 No.1 より SenA 及び SenB 検出と断定した 検出濃 方で センナ葉 の記載があることが翻訳により判 度は 1 カプセルあたり.71 (SenA)及び 1.51 明した(図 5-3) センナ葉は厚生労働省通知 4)中 専 (SenB)であった ら医薬品として使用される成分本質 原材料 リス ト に掲載されており 本質的に専ら医薬品とみな 4. 考 察 される センノシド A B は共にセンナ葉に含有され -46-

6 る 成 分 であり そのカルシウム 塩 は 薬 局 製 造 販 売 医 薬 品 として 緩 下 剤 に 含 有 される(センノシド 製 剤 ) 5) 保 健 所 では 本 分 析 結 果 をもって 検 体 No.1 に 医 薬 品 成 分 センナ 葉 の 使 用 が 確 認 されたとし 当 該 製 品 に ついて 報 道 機 関 に 情 報 提 供 を 行 うと 共 に 輸 入 者 の 所 在 地 である 大 阪 市 に 通 報 した 当 該 製 品 の 包 装 にはタイ 語 及 び 英 語 で 1 日 2 カ プセルを 服 用 するように 記 述 されていた( 図 5-4)が 同 梱 の 日 本 語 の 注 意 書 きには 1 日 2~6 カプセルを 服 用 するように 記 述 されていた( 図 5-5) 仮 に 6 カプ セルを 服 用 した 場 合 摂 取 するセンノシド 量 は 13.32mg となり これは 国 内 で 便 秘 の 解 消 を 目 的 と して 通 常 処 方 される 1 日 量 (12~24mg)と 同 程 度 の 量 となり 健 康 被 害 の 可 能 性 を 十 分 想 定 できる 含 有 量 であると 考 えられる No.1 の LC-MS/MS スペクトルにおいて SenA 及 び SenB のピーク 間 に RT=2.51 のピークが 検 出 された ( 図 4) このピークは 試 験 溶 液 の 保 管 期 間 が 長 期 に 及 ぶほど 大 きくなる 傾 向 にあることから 高 橋 ら 6) の 報 告 にあるように SenA 及 び SenB の 分 解 物 である と 考 えられる ト などと 称 されるタイ 製 の 向 精 神 薬 等 を 含 有 する 無 承 認 無 許 可 医 薬 品 による 健 康 被 害 事 例 に つ い て /jirei/392-1.html (2) 小 金 澤 望 鎌 倉 浩 之 最 所 和 宏 合 田 幸 広 武 口 裕 水 嶋 好 清 三 觜 雄 平 成 22 年 度 健 康 食 品 買 上 げ 検 査 結 果 について 札 幌 市 衛 生 研 究 所 年 報 38, (211) (3) 豊 成 美 香 三 宅 崇 仁 無 承 認 無 許 可 医 薬 品 及 び 指 定 薬 物 の 一 斉 分 析 法 の 検 討 徳 島 県 立 保 健 製 薬 環 境 センタ- 年 報 1, (211) (4) 昭 和 46 年 6 月 1 日 薬 発 第 476 号 無 承 認 無 許 可 医 薬 品 の 指 導 取 締 りについて 別 添 2 専 ら 医 薬 品 として 使 用 される 成 分 本 質 ( 原 材 料 )リス ト (5) 植 物 性 緩 下 剤 セネバクール R 錠 12mg 添 付 文 書 213 年 1 月 改 訂 ( 第 7 版 ) (6) 髙 橋 美 津 子 桜 井 克 斉 藤 貢 一 センノシド 標 準 溶 液 の 安 定 性 の 検 討 及 び 分 解 物 の 解 析 分 析 化 学 61(4), (212) 5. 結 語 平 成 24 年 度 の 保 健 所 による 健 康 食 品 買 上 げ 検 査 において 2 医 薬 品 成 分 を 対 象 に 検 査 を 行 い 1 検 体 中 1 検 体 から 医 薬 品 成 分 センナ 葉 の 成 分 である センノシド A 及 びセンノシド B を 検 出 した 保 健 所 では 当 該 製 品 について 輸 入 者 の 所 在 地 である 大 阪 市 に 通 報 した 本 事 例 は 札 幌 市 においてインターネ ットで 試 買 された 健 康 食 品 から 痩 身 系 の 医 薬 品 成 分 を 検 出 した 初 めての 事 例 である 国 内 で 医 薬 品 とし て 承 認 を 受 けていない 製 品 を 個 人 輸 入 などで 安 易 に 購 入 服 用 することは 大 変 危 険 な 行 為 であり 今 後 ともインターネットによる 買 上 げ 検 査 を 継 続 してい く 必 要 がある 6. 文 献 (1) 厚 生 労 働 省 ホームページ ホスピタルダイエッ -47-

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製 造 業 者 は 製 造 販 売 業 者 の 管 理 監 督 の 下 適 切 な 品 質 管 理 を 行 い 製 品 を 製 造 します なお 製 造 業 は 製 造 に 特 化 した 許 可 となっており 製 造 業 の 許 可 のみでは 製 品 を 市 場 に 出 荷 することはできま せん 化 粧 品 の 製 造 販 売 業 製 造 業 について 化 粧 品 の 定 義 について ( 医 薬 品 医 療 機 器 等 の 品 質 有 効 性 及 び 安 全 性 の 確 保 等 に 関 する 法 律 第 2 条 第 2 項 ) 化 粧 品 とは 人 の 身 体 を 清 潔 にし 美 化 し 魅 力 を 増 し 容 貌 を 変 え 又 は 皮 膚 若 しくは 毛 髪 を 健 やかに 保 つために

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