また, 席 を 離 れる 際 や 使 わない 時 は 必 ず 電 源 を OFF にします (3) ステージを 一 番 下 まで 下 げます (4) プレパラートをステージの 所 定 の 位 置 ( 顕 微 鏡 の 図 参 照 )にセットします *クレンメルとメカニカルステージの 使 い 方 に 注

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1 自 然 科 学 実 験 観 察 ( 植 物 ) 担 当 鈴 木 雅 大 第 2 回 顕 微 鏡 の 使 い 方 と 細 胞 の 観 察 顕 微 鏡 は 小 さいものを 大 きく 見 るための 機 械 です 顕 微 鏡 で 観 察 するためには, 厚 さ 1.2~1.5 mm の 透 明 なスライドガラスの 上 に 材 料 を 乗 せ, 材 料 の 上 に 厚 さ 0.12~0.17 mm のカバーガラスを 乗 せます これをプレパラートといいます プレパラートを 対 物 レン ズの 下 に 置 き, 下 から 透 過 してくる 光 をつかまえて 材 料 を 見 ます 透 明 に 近 いものほど 良 く 見 えます 材 料 が 厚 いと 光 が 透 過 せず, 暗 い 画 像 しか 得 られません 材 料 を 薄 く 切 る 技 術 が 必 要 です 顕 微 鏡 を 使 ってものを 見 るには, 顕 微 鏡 の 使 い 方 を 学 ぶと 共 に,プ レパラート 作 成 技 術 を 学 ぶ 必 要 があるのです 本 実 習 では, 植 物 細 胞 と 動 物 細 胞 の 観 察 を 通 して, 顕 微 鏡 の 使 い 方,プレパラート 作 成 方 法 を 習 得 します 顕 微 鏡 の 構 造 と 扱 い 方 1) 顕 微 鏡 を 取 り 出 します( 毎 回 同 じ 番 号 の 顕 微 鏡 を 使 うこと) 顕 微 鏡 は 精 密 機 械 です 顕 微 鏡 を 使 う 前 に 手 を 洗 いましょう また, 机 の 上 がきれい に 片 付 いているか 確 認 し, 汚 れていたら 雑 巾 で 拭 きます 顕 微 鏡 の 箱, 顕 微 鏡 は 必 ず 両 手 でしっかり 持 って 運 びます 片 方 の 手 は 顕 微 鏡 Box の 取 っ 手 又 は 顕 微 鏡 のアームを 持 ち,もう 片 方 の 手 は 顕 微 鏡 箱 の 下 又 は 顕 微 鏡 の 下 を 支 えます 2) 顕 微 鏡 を 使 う 際 の 注 意 点 (1) レンズ 面 を 直 接 手 で 触 らない, 汚 さない, 濡 らさない( 汚 したら 教 員 に 連 絡 する) (2) レンズを 落 とさない( 落 とした 場 合 は 教 員 に 連 絡 する) (3) レンズを 別 の 顕 微 鏡 のレンズと 交 換 しない (4) ステージを 濡 らさない 濡 れたらキムワイプで 拭 く 3) 顕 微 鏡 の 構 造 ( 別 紙 参 照 ) 4) 顕 微 鏡 の 使 い 方 (1) 顕 微 鏡 を 点 検 します 接 眼 レンズ(10 倍 )が 鏡 筒 にセットされているか? 対 物 レンズ(4 倍,10 倍,40 倍 )が 揃 っているか? レンズが 汚 れていないか? 光 源 の 光 量 ダイヤルは 1 になっているか? (2) 光 源 のスイッチを 入 れます *スイッチを ON, OFF する 際 は 必 ずダイヤルを 1 の 状 態 で 行 います 1

2 また, 席 を 離 れる 際 や 使 わない 時 は 必 ず 電 源 を OFF にします (3) ステージを 一 番 下 まで 下 げます (4) プレパラートをステージの 所 定 の 位 置 ( 顕 微 鏡 の 図 参 照 )にセットします *クレンメルとメカニカルステージの 使 い 方 に 注 意 (5) 最 初 は 低 倍 率 (4 倍 )のレンズを 光 路 にセットします (6) 粗 動 ハンドルをゆっくりと 動 かし,ステージをレンズ 下 端 ぎりぎりまで 上 げます (7) 接 眼 レンズをのぞきながら 粗 動 ハンドルでステージをゆっくりと 下 げ,ピントを 合 わせます (8) 微 動 ハンドルを 使 って, 像 が 鮮 明 になるよう 正 確 にピントを 合 わせます (9) 視 野 が 暗 ければコンデンサーの 視 野 絞 りを 調 節 し, 観 察 しやすい 明 るさにします (10) プレパラートを 動 かして, 観 察 に 適 した 部 分 を 視 野 の 中 心 に 持 ってきます (11) ピントを 再 調 整 します (12) 倍 率 を 変 えて 検 鏡 します( 低 倍 率 高 倍 率 へ) (13) もう 一 度 ピントと 明 るさを 調 節 します 5) 顕 微 鏡 のしまい 方 (1) 光 量 ダイヤルを 1 にして 電 源 を 切 ります (2) ステージを 一 番 下 まで 下 げます (3) ステージにプレパラートや 汚 れが 残 っていないか 確 認 します (4) レボルバーを 回 して 盲 栓 が 光 路 に 入 るようにします (5) アームを 元 の 位 置 に 戻 します (6) コードをきちんとたばねます (7) 顕 微 鏡 Box にしまいます * 顕 微 鏡 のしまう 向 きに 注 意! 微 動 ハンドルと 視 野 絞 り 顕 微 鏡 の 使 い 方 をマスターする 上 で 最 も 重 要 なのが, 微 動 ハンドルと 視 野 絞 りの 使 い 方 です この 二 つをうまく 使 えないと 目 的 のものを 観 察 することが 難 しくなります 観 察 中, 片 方 の 手 は 常 に 微 動 ハンドルに 置 く 癖 をつけましょう 観 察 する 時 は 利 き 手 で 微 動 ハンドルを 使 い,スケッチをする 時 は 反 対 の 手 で 使 います 微 動 ハンドルを 使 い, 常 に 最 も 鮮 明 な 像 を 観 察 するように 心 がけます 微 動 ハンドルを 使 いこなせるようになる と, 細 胞 が 3~4 層 重 なった 組 織 の 中 から 目 的 とする 細 胞 や 構 造 を 見 つけ 出 すことが 出 来 るようになります 視 野 絞 りは 像 のコントラストを 調 節 します 通 常, 視 野 絞 りは 開 いた 状 態 で 使 います が, 観 察 するプレパラートに 応 じて, 絞 りを 調 整 する 必 要 があります 例 えば, 透 明 に 近 いものは 視 野 が 明 るすぎると 観 察 しづらく, 視 野 絞 りを 絞 ってコントラストを 上 げる 2

3 必 要 があります 厚 い 切 片 など 不 透 明 なものを 観 察 するときは, 視 野 絞 りを 開 いてたく さんの 光 を 当 てる 必 要 があります 口 腔 上 皮 細 胞 とタマネギの 表 皮 細 胞 の 観 察 口 腔 上 皮 細 胞 ( 口 腔 粘 膜 細 胞 )とタマネギの 表 皮 細 胞 の 観 察 は, 生 物 の 観 察 では, 定 番 中 の 定 番 です 皆 さんの 多 くはこれらの 細 胞 を 観 察 したことがあるでしょう ヒトの 口 腔 上 皮 細 胞 は, 絶 えず 剥 がれ 落 ち, 唾 液 の 中 に 混 じっています このため, 綿 棒 や 割 り 箸 などで 頬 の 内 側 をこするだけで 簡 単 に 採 取 出 来 ます 簡 易 な DNA 抽 出, 解 析 にも 用 いられる 細 胞 です タマネギの 細 胞 もとても 簡 単 に 観 察 出 来 ます 我 々が 食 べている タマネギは 鱗 茎 葉 といって, 葉 に 相 当 する 器 官 です 鱗 茎 葉 の 表 皮 の 細 胞 をはぎ 取 って 観 察 します この 2 つは, 観 察 が 容 易 なことに 加 え, 材 料 が 通 年 手 に 入 ることから,50 年 以 上 前 から 理 科 の 実 習 に 用 いられています この 観 察 のポイントは, 動 物 細 胞 と 植 物 細 胞 の 違 い( 細 胞 壁 の 有 無 )を 学 ぶことと 核 を 見 ることです 用 意 するもの 顕 微 鏡 (1 人 1 台 ),タマネギ( 中 2, 3 個 ), 綿 棒 又 は 割 り 箸 ( 人 数 分 ),スライドガラス ( 人 数 分 ),カバーガラス( 人 数 分 ),ピンセット( 人 数 分 ),シャーレ( 人 数 分 ), 両 刃 のカミソリ( 人 数 分 ), 酢 酸 オルセイン(1,2 班 当 り 1 本 ),ケント 紙 ( 一 人 1 枚 ),ス ケール 用 定 規 又 はミクロメーター( 各 班 1 本 ),まな 板, 包 丁 口 腔 上 皮 細 胞 の 観 察 手 順 1. 口 を 十 分 にゆすぎます 2. 頬 の 内 側 を 綿 棒 か 割 り 箸 でこすります 3. 採 れたねばねばした 液 をスライドグラスに 塗 りつけます 4. カバーガラスをかけて 検 鏡 します 5. 4 倍 の 対 物 レンズで 観 察 した 後,10 倍,40 倍 と 倍 率 を 上 げて 観 察 します 6. 核 を 探 します * 生 の 細 胞 は 透 明 に 近 いため, 視 野 絞 りを 絞 った 状 態 で 探 すと 見 つけやすくなります 7. 生 の 状 態 の 核 と 細 胞 を 確 認 出 来 たら, 酢 酸 オルセインで 染 色 します 乾 燥 した 上 皮 細 胞 の 端 に 酢 酸 オルセインを 1~2 滴 たらします スライドグラスを 傾 け 染 色 液 がまんべんなく 行 渡 るようにします 2~3 分 染 色 します * 酢 酸 オルセインの 代 わりにメチレンブルーを 使 っても 良 く 染 まります 8. カバーグラスをかけて 検 鏡 します 9. 染 色 前 と 同 様 に 観 察 した 後, 対 物 レンズを 40 倍 にし,ケント 紙 の 左 半 分 側 を 使 って 3

4 細 胞 をスケッチします 1 個 の 細 胞 を 大 きくスケッチします 10. スケッチに 倍 率 とスケールを 記 入 します 11. 描 いた 図 に 核 と 細 胞 膜 という 用 語 を 書 き 入 れます タマネギの 表 皮 細 胞 の 観 察 手 順 1. タマネギ( 中 )を 包 丁 で 4 等 分 し,タマネギの 根 の 部 分 を 斜 めに 切 り 落 とします 2. 鱗 茎 葉 を 一 枚 外 し, 中 央 付 近 にカミソリで 約 5 mm 四 方 の 碁 盤 目 状 に 切 り 込 みを 入 れ ます 3. ピンセットで 薄 皮 をはぎ,シャーレに 張 った 水 に 浮 かべます 4. 薄 い 切 片 を 選 び,スライドガラスに 乗 せます 5. カバーガラスをかけて 検 鏡 します 6. 4 倍 の 対 物 レンズで 観 察 した 後,10 倍,40 倍 と 倍 率 を 上 げて 観 察 します 7. 核 と 細 胞 壁 を 探 します 8. 生 の 状 態 の 核 と 細 胞 を 確 認 出 来 たら, 酢 酸 オルセインで 染 色 します 9. 染 色 前 と 同 様 に 観 察 した 後, 対 物 レンズを 10 倍 又 は 40 倍 にして,ケント 紙 の 右 半 分 側 を 使 って 細 胞 をスケッチします 1 個 の 細 胞 を 大 きく 描 きます * 細 胞 壁 がはっきりと 分 かるように 描 きましょう 10. スケッチに 倍 率 とスケールを 記 入 します 11. 描 いた 図 に 核, 細 胞 壁, 細 胞 膜 という 用 語 を 書 き 入 れます 発 展 学 習 * 本 実 習 ではやりません タマネギの 鱗 茎 葉 の 内 側 と 外 側 とで 細 胞 の 大 きさを 比 べてみましょう どちらの 細 胞 が 大 きいでしょうか また,それはなぜでしょうか 鱗 茎 葉 は 内 側 から 外 側 に 向 かって 生 長 します 細 胞 は 生 長 して 大 きくなるということを 実 際 に 観 察 して 確 かめることが, この 観 察 のポイントです スケッチの 描 き 方 観 察 したものを 記 録 する 方 法 には 写 真 とスケッチがあります 写 真 は 見 たものを 嘘 偽 りなく 正 確 に 記 録 出 来 ますし,デジタルカメラの 発 達 により, 顕 微 鏡 写 真 を 撮 るのに 特 別 な 技 術 は 必 要 なくなりました スケッチなど 止 めて 写 真 で 撮 れば 良 いと 思 う 方 もいる ことでしょう ですが, 観 察 をする 時, 特 に 教 育 の 場 においては, 写 真 を 撮 るだけで はダメなのです 顕 微 鏡 で 初 めて 見 るもの, 今 までの 生 活 の 中 で 見 たことも 聞 いたこと もないようなものを 前 にして, 写 真 を 眺 めるだけで 理 解 出 来 るでしょうか 写 真 を 見 て, 子 どもたちが 本 当 に 理 解 出 来 ているかどうか 判 断 出 来 るでしょうか 写 真 と 違 い,スケ ッチは, 見 たものをただ 単 に 描 き 写 せば 良 いというものではありません 観 察 の 目 的 を 4

5 しっかりと 理 解 し, 見 るべきポイントだけをとらえて 描 きます スケッチを 見 れば,そ の 人 が 正 しく 観 察 出 来 ているか 一 目 瞭 然 です また, 実 は 写 真 も, 撮 る 方 が 観 察 対 象 を 正 しく 理 解 していなければ 良 い 写 真 は 撮 れません スケッチをしてさらに 写 真 を 撮 る 事 が 出 来 れば 文 句 なしでしょう 理 科 のスケッチは, 美 術 におけるスケッチと 違 い, 絵 の 上 手 下 手 は 問 われません 従 って, 誰 でも 簡 単 に 描 けます 重 要 なのは, 観 察 すべきものを 正 しく, 丁 寧 に 描 けてい ることです スケッチは 基 本 的 に 鉛 筆 で 描 きます 細 胞 を 描 く 時 は,1 個 の 細 胞 をなる べく 大 きく 描 きましょう 色 は 付 けず, 色 の 濃 淡 や 立 体 感 は 点 描 で 表 現 します ただし, 点 描 に 時 間 をかける 必 要 はありません 写 実 的 なスケッチを 描 くにこしたことはないの ですが, 観 察 対 象 は 生 き 物 です 時 間 を 置 けば 細 胞 の 形 は 変 わってしまいます 死 んでしまえば 細 胞 が 壊 れてしまいます 従 って, 出 来 る 限 り 早 く 描 き 上 げる 必 要 がある のです 定 規 を 使 った 細 胞 の 大 きさの 測 り 方 正 確 に 大 きさを 測 りたい 時 はミクロメーターを 使 いますが, 赴 任 した 学 校 に 必 ずしも ミクロメーターが 常 備 されているとは 限 りません ミクロメーターの 代 わりに 定 規 で 大 きさを 測 る 方 法 があります 正 確 ではありませんが, 大 体 の 大 きさは 分 かります 倍 (100 倍 )にして, 定 規 を 観 察 し, 視 野 の 直 径 の 大 きさを 測 る 100 倍 のときの 視 野 の 直 径 = mm = μm 2. 視 野 に 細 胞 が 何 個 並 んでいるか 数 える 視 野 の 直 径 細 胞 の 数 =1 個 の 細 胞 の 長 さ 又 は 幅 ( 直 径 ) 5

6 オオカナダモの 葉 の 細 胞 の 観 察 オオカナダモは, 南 アメリカ 原 産 の 帰 化 植 物 です 大 正 時 代 に 植 物 生 理 学 の 実 験 のた めに 導 入 されたものが 逃 げ 出 し, 現 在 では 関 東 以 南 や 東 北 地 方 の 一 部 などに 分 布 を 広 げ ています 特 に 琵 琶 湖 では, 在 来 種 のクロモ 等 を 駆 逐 している, 異 常 繁 殖 して 船 の 通 航 の 妨 げになる, 大 量 に 打 ち 上 がり 悪 臭 を 発 するなどの 被 害 が 報 告 されています このた め 外 来 生 物 法 では, 要 注 意 外 来 生 物 リストに 挙 げられ, 特 定 外 来 生 物 への 指 定 も 検 討 さ れています 水 槽 などで 飼 うのは 良 いですが, 野 外 に 放 してはいけません このように, ブラックバスほどではないものの, 社 会 的 に 歓 迎 されていないオオカナダモですが, 理 科 の 実 験 観 察 にこれほど 適 した 材 料 はありません まず, 材 料 の 確 保 が 容 易 です 野 外 で 採 集 しなくとも,ペットショップや 熱 帯 魚 屋 で アナカリス や 金 魚 藻 という 名 で 売 られており,その 旺 盛 な 繁 殖 力 のため, 飼 育 も 簡 単 です そして, 細 胞, 原 形 質 流 動, 原 形 質 分 離 の 観 察, 光 合 成, 呼 吸 の 実 験,メダカの 産 卵 場 所 など 様 々な 実 験, 観 察 に 用 いることが 出 来 ます 本 実 習 では,オオカナダモの 葉 の 細 胞 を 観 察 します 葉 を 1 枚 ス ライドガラスに 乗 せるだけで 細 胞 を 観 察 出 来 ます 特 にタマネギの 表 皮 細 胞 では 観 察 出 来 なかった 葉 緑 体 や 原 形 質 流 動 を 見 ることが 出 来 ます オオカナダモの 葉 は 表 と 裏 の 2 層 から 成 っています 裏 面 の 細 胞 は 細 長 く, 表 面 よりも 小 さいです 原 形 質 流 動 を 観 察 出 来 たら, 表 と 裏 それぞれの 細 胞 を 観 察,スケッチします 用 意 するもの 顕 微 鏡 (1 人 1 台 ),オオカナダモ(1 株 ),スライドガラス( 人 数 分 ),カバーガラス( 人 数 分 ),ピンセット( 人 数 分 ),シャーレ( 人 数 分 ),ケント 紙 ( 一 人 1 枚 ),スケール 用 定 規 又 はミクロメーター( 各 班 1 本 ) 観 察 手 順 1. オオカナダモの 葉 を 1 枚 ちぎってスライドガラスの 上 に 乗 せます 2. 葉 の 上 にピンセットで 運 んだ 水 を 落 とします 3. カバーガラスをかけて 検 鏡 します 4. 4 倍 の 対 物 レンズで 観 察 した 後,10 倍,40 倍 と 倍 率 を 上 げて 観 察 します 5. 原 形 質 流 動 を 確 認 します 6. 原 形 質 流 動 が 確 認 出 来 たら, 対 物 レンズ 40 倍 にして 細 胞 をスケッチします 1 個 の 細 胞 を 大 きく 描 きます * 葉 緑 体 と 細 胞 壁 がはっきりと 分 かるように 描 きましょう 7. ミクロメーターを 使 って, 細 胞 の 大 きさを 測 ります 8. スケッチに 倍 率 とスケールを 記 入 します 9. 描 いた 図 に 葉 緑 体, 細 胞 壁, 細 胞 膜 という 用 語 を 書 き 入 れます 6

7 ミクロメーターの 使 い 方 1. ステージに 対 物 ミクロメーターをセットする 2. 接 眼 ミクロメーターの 目 盛 と 対 物 ミクロメーターの 目 盛 とを 合 わせる 3. 対 物 レンズを 10 倍,40 倍 と 倍 率 を 上 げ,それぞれの 倍 率 において, 接 眼 ミクロメー ターの 一 目 盛 の 長 さを 計 算 する 4. 接 眼 ミクロメーターを 使 って 細 胞 の 大 きさを 測 る 100 倍 のときの 接 眼 ミクロメーターの 一 目 盛 = μm 400 倍 のときの 接 眼 ミクロメーターの 一 目 盛 = μm 発 展 学 習 * 本 実 習 ではやりません ミクロメーターを 使 ってオオカナダモの 細 胞 の 原 形 質 流 動 の 速 度 を 測 ってみましょう 接 眼 ミクロメーターの 一 目 盛 の 長 さを 計 算 したら,オオカナダモの 葉 緑 体 が 1 又 は 2 秒 間 に 動 いた 距 離 を 測 ります この 方 法 は, 花 粉 管 の 伸 長 速 度 を 測 る 観 察 などにも 使 えま す おわりに 本 実 習 では, 口 腔 上 皮 細 胞 では 動 物 細 胞 の 構 造 を,タマネギの 表 皮 細 胞 では, 植 物 細 胞 の 核 と 細 胞 壁,オオカナダモの 葉 の 細 胞 では, 葉 緑 体 と 原 形 質 流 動 を 観 察 しました いずれも 教 材 として 申 し 分 ない 材 料 ですが, 口 腔 上 皮 細 胞 では 細 胞 組 織 が 観 察 出 来 ない, タマネギの 表 皮 細 胞 では 葉 緑 体 が,オオカナダモの 葉 の 細 胞 では 核 が 観 察 出 来 ない( 観 察 しづらい)という 欠 点 があります これらの 欠 点 を 補 える 材 料 として, 鶏 の 手 羽 先 の 軟 骨 細 胞,ミカヅキモ,アオミドロなどが 挙 げられます 理 科 の 教 員 になったら, 教 材 は 自 分 で 探 して 用 意 しなければなりません 様 々な 教 材 を 扱 う 知 識 と 技 術 を 身 に 付 ける ことは 当 然 として, 新 しい 教 材 の 開 発 も 必 要 なのです 課 題. 光 学 顕 微 鏡 では, 核, 葉 緑 体 以 外 の 細 胞 小 器 官 はほとんど 観 察 出 来 ませんでした が, 電 子 顕 微 鏡 を 使 って 観 察 すると 細 胞 には 様 々な 細 胞 小 器 官 が 含 まれていることが 分 かります 動 物 細 胞 と 植 物 細 胞 の 模 式 図 を 描 きましょう ノート 1 ページ 全 体 に 大 きく 1 個 の 細 胞 を 描 き, 下 に 挙 げた 細 胞 小 器 官 を 描 き 入 れましょう また,それぞれの 細 胞 小 器 官 はどのような 機 能 があるか 調 べましょう 核, 核 膜, 細 胞 膜, 細 胞 壁, 小 胞 体,ゴルジ 体,リソソーム,リボソーム,ミトコンド リア, 葉 緑 体, 液 胞 7

8

表紙

表紙 現 況 の 指 定 容 積 率 をすべて 使 い 切 った 場 合 に 現 況 容 積 率 の 2.25 倍 以 上 になるかどうかを 確 認 する 現 況 の 街 区 面 積 は 3,569,759m2 延 べ 床 面 積 は 3,569,759m2であるから 目 標 とする 延 べ 床 面 積 はその 2.25 倍 の 8,031,958m2である 一 方 指 定 容 積 率 をすべて 使 い

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