(2) (2) (3) (3) (4) ABI PRISM 7700 TaqMan (4) Roche LightCycler TM (5) BioFlux LineGene TaqMan (6) 1 RT-PCR (7) (9) (10) F. Hoffmann-La Roche Ltd. Roc

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1 05-8 Realtime PCR Master Mix (Code No. QPK-101, QPK-101T) TOYOBO CO., LTD. Life Science Department OSAKA JAPAN A3313K

2 (2) (2) (3) (3) (4) ABI PRISM 7700 TaqMan (4) Roche LightCycler TM (5) BioFlux LineGene TaqMan (6) 1 RT-PCR (7) (9) (10) F. Hoffmann-La Roche Ltd. Roche Molecular Systems Inc. The Perkin-Elmer Corporation Purchase of this product is accompanied by a limited license to use it in the Polymerase Chain Reaction (PCR) process for The Research Field in conjunction with a thermal cycler whose use in the automated performance of the PCR process is covered by the up-front license fee, either by payment to Perkin-Elmer or as purchased, i.e., an authorized thermal cycler. LightCycler TM Idaho Technology Inc. Roche Molecular Systems Inc. TaqMan Roche Molecular Systems Inc. ABI PRISM The Perkin-Elmer Corporation

3 DNA 2 TaqMan PCR PCR LightCycler TM BSA ABI PRISM 7700 LightCycler TM LineGene Taq DNA Taq PCR 10 1 LightCycler TM PCR (QPK ) ( )

4 [Realtime PCR Master Mix] dntp MgCl 2 Taq DNA Taq PCR 2 [ ] 200bp 150bp [ ] PCR [ PCR ] ABI PRISM 7700 LightCycler TM LineGene PCR DNA [cdna] 1st strand cdna 1st strand cdna dt PCR 1st strand cdna ReverTra Ace - - (Code:FSK-101) 10 cdna ( ) PCR [ DNA ] PCR DNA 1 10ng

5 ABI PRISM 7700 TaqMan (1) [PCR ( )]( 0.4 M 0.2 M 50 L) 14 L Realtime PCR Master Mix 25 L 1 (10 M) 2 L 2 (10 M) 2 L TaqMan (5 M) 2 L 5 L 50 L Realtime PCR Master Mix 1/2 ( ) M M SNPs (2)PCR PCR 1 5 PCR data collection 30 [PCR ( )](2 60 ) (data collection)

6 Roche LightCycler TM (1) [PCR ( )]( 0.3 M 0.2/0.4 M 20 L) 5.6 L Realtime PCR Master Mix 10 L 1 (10 M) 0.6 L 2 (10 M) 0.6 L 1(5 acceptor) (10 M) 0.8 L 2(3 donor) (10 M) 0.4 L 2 L 20 L 2 (FRET) 1 5 (LC-Red640 ) 2 3 (FITC ) Realtime PCR Master Mix 1/2 1 2 ( ) (2)PCR Tm data Tm 30 5 PCR 1 5 [PCR ( )]( ) (data collection)

7 BioFlux LineGene TaqMan (1) [PCR ( )]( 0.4 M 0.2 M 10 L) 1.8 L Realtime PCR Master Mix 5 L 1 (10 M) 0.4 L 2 (10 M) 0.4 L TaqMan (5 M) 0.4 L 2 L 10 L Realtime PCR Master Mix 1/2 ( ) M M SNPs (2)PCR PCR 1 5 PCR [PCR ( )]( ) (data collection)

8 1 RT-PCR (1) cdna DNA PCR RNA 1 RT-PCR TaqMan 1 RT-PCR PCR ReverTra Ace (Code:TRT-101,102) (2) PCR RNase Inhibitor (Code:SIN-101,102) 0.5U/ L ReverTra Ace U/ L( ) 1U/ L ReverTra Ace ReverTra Ace RNase Inhibitor 5U/ L ReverTra Ace RT DNA DNA RT(-) ( ) [RT ( )](ReverTra Ace 3U/ L ( 0.3U/ L)) RT (RNase Inhibitor 5U/ L) 32 L ReverTra Ace (100U/ L) 1 L 33 L [PCR ( : TaqMan )] 9 L Realtime PCR Master Mix 25 L 1 (10 M) 2 L 2 (10 M) 2 L TaqMan (5 M) 2 L RT (ReverTra Ace 3U/ L) 5 L 5 L 50 L Realtime PCR Master Mix 1/2 ( )

9 (3)PCR PCR ( ) ( PCR ) Tm [ABI PRISM 7700( )] (data collection)

10 (1) ( ) (2) PCR cdna (1) ( ) (2) cdna

11 PCR Code No. ReverTra Ace FSK-101 ReverTra Ace RNase Inhibitor SYBR Green Realtime PCR Master Mix 10,000U 1 50,000U 1 2,500U 1 2,500U 5 1mL 1 1mL 5 TRT-101 TRT-102 SIN-101 SIN-102 QPK-201T QPK

12 TEL FAX order_lifescience@bio.toyobo.co.jp TEL FAX order_lifescience@bio.toyobo.co.jp TEL FAX :00 12:00, 13:00 17:00 techosk@bio.toyobo.co.jp URL

(2) (2) (3) (3) (5) ABI PRISM 7700 (5) Roche LightCycler TM (7) BioFlux LineGene (9) 1 RT-PCR (10) (12) (13) F. Hoffmann-La Roche Ltd. Roche Molecular

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