Microsoft PowerPoint - LCテクノ　ポスター　塚本

Size: px

Start display at page:

Download "Microsoft PowerPoint - LCテクノ　ポスター　塚本"

みちしげしもとり
5 years ago
Views:

1 HPLC,UHPLCそれぞれの視点から見たコアシェル型充填カラムと全多孔性充填カラムとの比較塚本友康, 長江徳和 ( クロマニックテクノロジーズ )

2 表面多孔性シリカ ( コアシェル ) 細孔のない核 ( コア ) と多孔質層から形成されているシリカ粒子であり全多孔性シリカ粒子に比べ表面積は小さい粒子全体に対する多孔質層の割合が 77% と高いため, 試料負荷量が低くなる欠点を克服粒子細孔径が 9nm で低分子化合物の分離に適している同じサイズの全多孔性粒子の.5 倍の理論段数を有している全多孔性シリカより狭い粒径分布が得られる

3 単位圧力あたりの段数比較 Plates Pressure(MPa) Plates/pressure Sunniest C8-HT.0 mm 9, Brand A C8.9 mm 7, Brand B C8.8 mm 0, Brand C C8.7 mm,0.0 8 SunShell C8.6 mm 9, Sunniest C8-HT.0 mm Brand A C8.9 mm Brand B C8.8 mm Brand C C8.7 mm ~ 倍 SunShell C8.6 mm 0 5,000 0, Column: 50 x. mm C8, Mobile phase: Acetonitrile/water=(70/0), Temperature: 5 o C

4 全多孔性とコアシェル型の理論段高さの比較 8 Plate Height, um Mobile Phase Velocity, mm/sec Fully porous 5 um Fully porous um Fully proous.8 um Core Shell.6 um Fully porous.6 um Column: C8, 50 x.6 mm Mobile phase: Acetonitrile/water=(60/0) Temperature: 5 o C Sample : Naphthalene

5 コアシェル型と全多孔性充填剤の比較拡散幅 Ca..0 mm sample 試料成分が充填剤内に入った後拡散して広がる拡散幅.0 mm sample コアシェル型全多孔性.6 mm.6 mm.0 mm 理論段高さの A 項は粒子径ではなく, 拡散の幅に関係している? 5

6 µm 全多孔性カラムとの比較 Column: Sunniest C8, µm 50 x. mm Mobile phase: CH CN/H O=60/0 N()=007 Flow rate: 0.6 ml/min Pressure: 8 MPa Temperature: 0ºC N()=0 Column: SunShell C8,.6 μm 50 x. mm Mobile phase: CH CN/H O=60/0 Flow rate: 0. ml/min Pressure: 0 MPa Temperature: 5 ºC 0 5 Sample: = Uracil, = Toluene, = Acenaphthene, = BUtylbenzene 6

7 温度の影響 Plate height (μm) Column: C8, 50 x. mm Mobile phase: Acetonitrile/water=(60/0) Sample : Naphthalene プレヒート µm Flow late ml /min 7

8 塩基性化合物の分離の比較 A B C Sunniest C8 (HMODTS), 5 mm Sunniest C8-HT(HMODTS), mm TF()=.0 TF()=.0 TF()=. SunShell C8(HMODTS),.6 mm core shell type Column size: 50 x.6 mm for A, D and E 00 x. mm for B and C Mobile phase: CH CN/0mM Phosphate buffer ph7.0=60/0 Flow rate:.0 ml/min for A, D, and E 0. ml/min for B and C Temperature: 0 ºC Sample: = Uracil = Propranolol CH O NH CH OH = Nortriptyline D Brand D C8,.6 mm core shell type TF()=. NH CH E Brand E C8, 5 mm = Amitriptyline CH N CH TF()=5. TF: USP tailing factor

9 コアシェル C8 の標準試料の分離例 UHPLC 使用サブmm(.8mm) と同じ段数段数 ()=,00 Column: SunShell C8,.6 mm 00 x. mm Mobile phase: CH CN/H O=60/0 Flow rate: 0. ml/min Pressure:.5 MPa Temperature: 5 ºC サブ mm(.8mm) の半分以下の圧力 Retention time/min Sample: = Uracil = Toluene = Acenaphthene = BUtylbenzene Plates()=8,000 Column: SunShell C8,.6 mm 50 x.6 mm Mobile phase: CH CN/H O=70/0 Flow rate:.0 ml/min Pressure:.5 MPa Temperature: 5 ºC Retention time/min 9

10 HPLC 使用時のコアシェル C8 の標準試料の分離例 HPLC 使用 Plates()=0,000 Column: SunShell C8,.6 mm 00 x.6 mm Mobile phase: CH CN/H O=70/0 Flow rate:.0 ml/min Pressure: 9.5 MPa,.5 MPa Temperature: 5 ºC Sample: 0 = Uracil Retention time/min = Toluene = Acenaphthene HPLC 使用 Plates()=,000 = BUtylbenzene 50 x.6 mm 5mm.6x50mm(0,000 段 ) と同じ段数 Retention time/min SunSell C8 00x.6mm 分析時間 0% 使用溶媒量 0% 0

11 カラム - 検出器間における配管の影響 Column: SunShell C8,.6 μm 50 x. mm Mobile phase: CH CN/H O=60/0 Flow rate: 0. ml/min Temperature: 5 ºC 0.5 mm 0. mm 0.06 mm 0 5 三番目ピークの理論段数の平均値 (n=) 0.06 mm 0. mm 0.5 mm 理論段数

12 イソクラチック溶離例 5mm, mmc8 からの移行 Mobile phase:ch CN/0mM Phosphoric acid = 5/55 Flow rate:.0 ml/min, Temperature: 5 ºC, Detection: UV0 nm Pressure: 9.5 MPa for Brand F C8 5 mm,. MPa for SunShell C8.6 mm Sample: = Benzydamine, = Ketoprofen, = Naproxen, = Indomethacin, 5 = Ibuprofen HPLC: Hitachi LaChrom ELITE ( 内径 0.5mm の配管仕様 )

13 イソクラチック溶離例 UHPLC Column: SunShell C8,.6 mm 00 x.6 mm Mobile phase:ch CN/0mM Phosphoric acid = 5/55 Flow rate:.0 ml/min,.8 ml/min Temperature: 5 ºC Pressure. MPa Detection: UV0 nm Sample: = Benzydamine, = Ketoprofen, = Naproxen, = Indomethacin, 5 = Ibuprofen UHPLC: Jasco X-LC

14 グラジエント溶離例 5mm C8 からの移行 Column: Brand G C8, 5 mm 50 x.6 mm SunShell C8,.6 mm 75 x.6 mm Mobile phase: A) 0.% Phosphoric acid B) CH CN Gradient program for Brand G C8 for SunShell C8 Time 0 min 5 min 0 min %B % 5% 5% Time 0 min 7.5 min 0 min %B % 5% 5% Flow rate:.0 ml/min, Temperature: 5 ºC Detection: UV@50 nm Sample: Oolong tea = Gallocatechin, = Epigallocatechin, = Catechin, = Caffeine, 5 = Epicatechin, 6 = Epigallocatechin gallate, 7 = Gallocatechin gallate, 8 = Epicatechin gallate, 9 = Catechin gallate HPLC: Hitachi LaChrom ELITE ( 内径 0.5mmの配管仕様 ) UHPLC: Jasco X-LC

15 まとめコアシェル型カラムの理論段数を HPLC と UHPLC で比較した結果 UHPLC では 5% 程度高い性能を示した内径 0. mm の配管を用いると 0.5 mm の配管とに比べ 0% 程度理論段数の改善が観察されたコアシェル型カラムでは粒子径 5 mm, mm のカラムに比べ短いカラムで同等の分離が達成され分析時間使用溶媒量が大幅に削減できるコアシェル型カラムを HPLC に用いることは分析の高速化高感度化に有用であることが示唆された 5

16 オキシンのピーク比較ギ酸のピーク比較 6

17 コアシェル C8 の酸性条件での耐久性相対保持 (%) P company C8 S company C8 SunShell C 通液時間 (h) 耐久性試験条件 Column size: 50 x. mm Mobile phase: CH CN/.0% TFA, ph=0/90 Flow rate: 0. ml/min Temperature: 80 ºC 保持時間測定条件 Column size: 50 x. mm Mobile phase: CH CN/H O=60/0 Flow rate: 0. ml/min Temperature: 0 ºC Sample: = Uracil = Butylbenzene 7

標準試料の保持比較 5 6 7 5 Company P C8 6 7 Column: Company Kinetex C8, P C8,.6 mm.6 mm 50 50 x.

6 mm 50 x.6 mm Mobile phase: CH OH/H O=75/5 Flow rate:.

S C8 5 = o-terphenyl, 6 = Amylbenzene, 7 = Triphenylene SunShell C8 5 6 7 水素結合性

18 標準試料の保持比較 Company P C8 6 7 Column: Company Kinetex C8, P C8,.6 mm.6 mm x.6 x mm.6 mm Company Ascentis Express S C8,.7 C8, mm.750 mm x 50.6 mm x.6 mm SunShell C8,.6 mm 50 x.6 mm Mobile phase: CH OH/H O=75/5 Flow rate:.0 ml/min Temperature: 0 ºC Sample: = Uracil, = Caffeine, = Phenol, = Butylbenzene Company S C8 5 = o-terphenyl, 6 = Amylbenzene, 7 = Triphenylene SunShell C 水素結合性 (Caffeine/Phenol) 疎水性 (Amylbenzene/Butylbenzene) 立体選択性 (Triphenylene/o-Terphenyl) Company P C Company S C SunShell C

19 コアシェル C8 の標準試料の分離例 UHPLC と HPLC の比較 UHPLC 使用 Plates()=8,000 Column: SunShell C8,.6 mm 50 x.6 mm Mobile phase: CH CN/H O=70/0 Flow rate:.0 ml/min Pressure:.5 MPa Temperature: 5 ºC Retention time/min HPLC 使用 Plates()=,000 Sample: = Uracil = Toluene = Acenaphthene = BUtylbenzene Retention time/min 9

20 背景高速高感度分析の必要性からサブ μm の充填剤を用いる分析が注目されているそれらカラムを使用する場合圧力が高くなるため高耐圧な装置 (UHPLC) が必要となるコアシェル型充填剤は粒子径が.6 μm であるがサブ μm の充填剤と同等の性能が得られるしかし粒子径が約 μm であるため圧力がそれほど高くならない様々なメーカーから UHPLC は販売されているが現在でも多くの HPLC が使用されているコアシェル型カラムの HPLC への適用について C8 カラムを用いて検討を行った 0

21 単位圧力あたりの段数比較 Plates Pressure(MPa) Plates/pressure Sunniest C8-HT.0 mm 9, Brand A C8.9 mm 7, Brand B C8.8 mm 0, Brand C C8.7 mm,0.0 8 SunShell C8.6 mm 9, Sunniest C8-HT.0 mm Brand A C8.9 mm Brand B C8.8 mm Brand C C8.7 mm ~ 倍 SunShell C8.6 mm 0 5,000 0, Column: 50 x. mm C8, Mobile phase: Acetonitrile/water=(70/0), Temperature: 5 o C

22 SunShell C8 と PFP の分離例

23 アミトリプチリンのピーク比較 Ⅰ A N() =,000 TF() =.0 Column: Sunniest C8(HMODTS), 5 mm 50 x.6 mm Re: Brand E C8, 5 mm 50 x.6 mm N()=0,000 TF()=.50 Brand E C8 Mobile phase: A) CH OH/0mM Phosphate buffer ph7.5 = 80/0 B) CH OH/0mM Phosphate buffer ph6.0 = 80/0 C) CH CN/0mM Phosphate buffer ph7.0 = 60/0 Flow rate:.0 ml/min B N() =9,000 TF() =.06 N()=5,800 TF()=.86 Brand E C8 Temperature: 0 ºC for A and C, ºC for B Sample: = Uracil, = Propranolol, O OH CH NH CH = Nortriptyline, C N() =,500 TF() =.0 N()=,00 TF()=5. Brand E C8 = Amitriptyline, NH CH CH N CH TF: USP tailing factor

24 イソクラチック溶離例 5mm C8 からの移行 Column: Brand F C8, 5 m 50 x.6 mm SunShell C8,.6 μm 00 x.6 mm Mobile phase:ch CN/0mM Phosphoric acid = 5/55 Flow rate:.0 ml/min, Temperature: 5 ºC, Detection: UV0 nm Pressure: 9.5 MPa for Brand F C8 5 mm,. MPa for SunShell C8.6 mm Sample: = Benzydamine, = Ketoprofen, = Naproxen, = Indomethacin, 5 = Ibuprofen HPLC: Hitachi LaChrom ELITE ( 内径 0.5mm の配管仕様 )

25 5

PowerPoint プレゼンテーション

PowerPoint プレゼンテーション今までのカラムと何が違う? コアシェルカラムの基礎の基礎クロマニックテクノロジーズ塚本友康長江徳和 Email: info@chromanik.co.jp http://chromanik.co.jp 市販されているコアシェルカラム SunShell( クロマニックテクノロジーズ ) : C18, PFP, C8, RP-Aqua, C4-30, C8-30 Halo(AMT) Capcell Core(

Microsoft PowerPoint - LCテクノ ポスター 塚本

Microsoft PowerPoint - LCテクノ　ポスター　塚本