Microsoft PowerPoint - TCI Dual ppt

Size: px

Start display at page:

Download "Microsoft PowerPoint - TCI Dual ppt"

つねときかに
4 years ago
Views:

1 ~ミックスモードカラム ~ DS との違い移動相の考え方 TCI Chromatography Department

2 逆相とミックスモード : 充填剤の違い DS カラムに用いる充填剤オクタデシル基をシリカゲルに化学結合ミックスモードカラムに用いる充填剤オクタデシル基とイオン交換基両方を有する試薬をシリカゲルに化学結合弊社製品は DS とイオン交換の充填剤を混ぜることはしておりません疎水性部分 : イオン交換基 :

3 逆相とミックスモード : 条件の違い分離モード逆相ミックスモードカラム DS DS+ イオン交換疎水性化合物分析有効有効酸性化合物分析塩基性化合物分析弱酸性化合物 : 移動相 pを下げ解離抑制させて分析強酸性化合物 : 酸性物質用イオン対試薬を移動相に添加塩基性物質用イオン対試薬を移動相に添加 DS+ アニオン交換系カラムを選択 (Kaseisorb LC DS-SAX Superなど ) 緩衝液 ( 弱酸性 ~ 中性条件 ) で酸性化合物を解離状態にして分析イオン対試薬の添加は不要 DS+ カチオン交換系カラムを選択 (TCI Dual DS-CX5など ) 緩衝液 ( 酸性 ~ 弱酸性条件 ) で塩基性化合物を解離状態にして分析イオン対試薬の添加は不要

4 逆相とミックスモード : 条件の違い分離モード逆相ミックスモード有機溶媒の種類有機溶媒比率アセトニトリルメタノール TF 等疎水性試料の保持は水との混合比率で調整する緩衝液イオン性試料分析時に必要必要 DS と同じ DS と同じ緩衝液の種類リン酸系酢酸系ギ酸系等 DS と同じ緩衝液濃度 5mM~5mM 程度 DS と同じイオン対試薬イオン性試料の保持が弱い場合に使用不要イオン対試薬濃度 ~mm 程度不要グラジエント溶出有効有効

5 カラム選択 : カチオン交換タイプ塩基性化合物 TCI Dual DS-CX5 (DS+ 中カチオン交換 ) 保持が弱い場合保持が強い場合 TCI Dual DS-CX (DS+ 強カチオン交換 ) TCI Dual DS-CX (DS+ 弱カチオン交換 ) 保持の強さはカラムのイオン交換基の強さと同じ順序になる場合が多い DS-CX( 強カチオン交換 )>DS-CX5( 中カチオン交換 )>DS-CX( 弱カチオン交換 )

6 カチオン交換系分離比較保持の強さ : TCI Dual DS-CX < TCI Dual DS-CX5 < TCI Dual DS-CX Column Size :.6 mmi.d. 5 mm Mobile Phase: C C / 5mmol/L C (p.5)=7/ Flow Rate :. ml/min Detection : UV 5 nm Temperature : 5 Sample : 5 uv,,5,7,. VMA 5 6 8,9,,. DPA 5. VA. oradrenaline Adrenaline 6. Creatinine 7. Dopamine 8. Serotonin 9. Tyramine. Isoproterenol 本条件下 (p.5) ではイオン交換基が解離抑制されるため保持が弱くなっています ( 中性条件では保持が強まります ) min 9 TCI Dual DS-CX TCI Dual DS-CX5 TCI Dual DS-CX

7 カチオン交換系分離比較保持の強さ : TCI Dual DS-CX < TCI Dual DS-CX5 < TCI Dual DS-CX Column Size :.6 mmi.d. 5 mm Mobile Phase : C C / mmol/l K P (p.) = /6 Flow Rate :. ml/min Detection : UV nm Temperature : 5 uv Sample : Melamine TCI Dual DS-CX 5 TCI Dual DS-CX5 TCI Dual DS-CX min

8 カラム選択 : アニオン交換タイプ酸性化合物 Kaseisorb LC DS-SAX Super 保持が弱すぎる場合 TCI Dual DS-AX まだ保持が弱い場合 TCI Dual DS-AX 保持の強さは以下の様になる場合が多い DS-AX( 弱アニオン交換 )>DS-AX( 強アニオン交換 )>DS-SAX( 強アニオン交換 )

9 アニオン交換系の分離比較保持の強さ :Kaseisorb LC DS-SAX Super<TCI Dual DS-AX<TCI Dual DS-AX uv p p5. p5. p5. 5 uv p p.5 6 p.5 p min min min Kaseisorb LC DS-SAX TCI Dual DS-AX TCI Dual DS-AX uv 5 6 p Mobile Phase : p7. C C/ 5mmol/L K P (p7., P )=5/5 p5. C C/ 5mmol/L C C (p5., C C)=5/5 p.5 C C/ 5mmol/L C (p.5, C)=5/5 Detection : UV5nm Flow Rate :.ml/min Temperature : Column Size :.6mmI.D. 5mm Sample :.Benzene.Toluene.Ethylbenzene.Benzenesulfonic Acid 5.p-Toluenesulfonic Acid 6.-Ethylbenzenesulfonic Acid

10 移動相設計有機溶媒の比率を変更する有機溶媒の組成を上げる疎水性化合物早く溶出する酸性および塩基性化合物早く溶出する傾向がある ( 疎水性化合物と比べて保持時間の変動が少ない場合が多い ) 緩衝液の濃度を変更する緩衝液の濃度を上げる疎水性化合物影響なし ( 保持時間がほとんど変わらない ) 酸性および塩基性化合物早く溶出する p を変更する p を低くする疎水性化合物影響なし ( 保持時間がほとんど変わらない ) 酸性化合物遅く溶出する傾向がある塩基性化合物早く溶出する傾向がある

11 有機溶媒と水の組成比を変更する Column:TCI Dual DS-AX.6mmI.D. 5mm Temperature:5 Flow Rate:. ml/min 5 -Adenylic Acid ( 酸性化合物 ). Methyl Benzoate ( 疎水性化合物 ) Methanol % Mobile Phase mmol/l Phosphate buffer 7% Time(min) Methanol 6% mmol/l Phosphate buffer %

12 バッファー濃度を変更する Column:TCI Dual DS-AX.6mmI.D. 5mm Temperature:5 Flow Rate:. ml/min 5 -Adenylic Acid ( 酸性化合物 ). Methyl Benzoate ( 疎水性化合物 ) Methanol % Mobile Phase mmol/l Phosphate buffer 7% Time(min) Methanol % 5mmol/L Phosphate buffer 7%

13 p を変更する Column : TCI Dual DS-AX.6mmI.D. 5mm Temperature : Flow rate :. ml/min Mobile phase : C C/5mM buffer=5 / 5 p7. : K P (p7.) p5. : C C (p5.) p.5 : C (p.5) Sample :. Benzene. Toluene. Ethylbenzene. Benzenesulfonic acid 5. p-toluenesulfonic acid 6. -Ethylbenzenesulfonic acid uv p7. p5. p min

14 pka を考える酢酸 C C C C 移動相 :p.75 pka:.75 移動相 :p6.75 疎水性増大逆相イオン性増大イオン交換グルクロン酸 C pka:. 親水性の糖関連化合物は逆相条件での保持が難しいイオン性を増大させイオン交換を適用試料の pka より以上離した p に移動相を調整することで試料が完全に解離しイオン交換が有効に働く (DS でイオン対試薬を使用するときと同じ考え方 )

15 グラジエント溶出 : 溶媒比率 Column : TCI Dual DS-CX5 (.6 mm I.D. 5 mm) Mobile phase : A) C C / 5mmol/L C (p.5) = / 9 Flow rate Detection B) C C / 5mmol/L C (p.5) = 7 / -5% B (-min.) :. ml/min : UV 5 nm Temperature : 5 Sample :. 5-ydroxy-L-tryptophan. 5-ydroxy--acetic acid(5-iaa). Acetylserotonin. L-Tryptophan 5. Serotonin(5-T) 6. Melatonin. C C 5. C. 6. C min

16 グラジエント溶出 : 塩濃度 Column : TCI Dual DS-AX (.6 mmi.d. X 5 mm) Mobile phase : A) C / mmol/l K P (p7.) = / 8 B) C / 5mmol/L K P (p7.) = / 8 -% B (-min) Flow rate :. ml/min mau 9 Detection : UV 5 nm 8 7 Temperature : C 6 5 Sample :. AMP. camp ADP. ATP min

17 Column size :.6 mmi.d. X 5 mm Mobile phase : C C / / P = 5 / 95 /. Flow rate :. ml/min Detection : UV nm Temperature : 5 Sample :. L-Glutamic Acid γ-aminobutyric acid(gaba) TCI Dual DS-CX TCI Dual DS-CX5 TCI Dual DS-CX 酸性条件ではイオン交換基が働かないため保持が弱い. γ-aminobutyric Acid(GABA) Kaseisorb LC DS 5 min

18 Sialic Acids Column size :.6 mmi.d. 5 mm Mobile phase : C C / mmol/l Ac (Ac, p5.) = 5/95 Flow rate :. ml/min uv Kaseisorb LC DS-SAX Super 5 Detection : UV nm Temperature : 5 Sample :. -Glycolylneuramic acid(eu5gc) C C. -Acetylneuramic acid(eu5ac) C TCI Dual DS-AX TCI Dual DS-AX Kaseisorb LC DS min

19 Galacturonic Acid, L-Ascorbic Acid Column :.6 mmi.d. 5 mm Mobile Phase : C / mmol/l K P (p7., P ) = /9 Flow Rate :. ml/min Detection : UV nm Temperature : Sample :. Galacturonic Acid Kaseisorb LC DS-SAX Super TCI Dual DS-AX. L-Ascorbic Acid, TCI Dual DS-AX Kaseisorb LC DS min

20 Basic Drugs Column : TCI Dual DS-CX.6 mmi.d. 5 mm Mobile phase : C C / 5mmol/L C C (p5.,c C) = 8 / Flow Rate :. ml/min Detection : UV nm Temperature : Sample :. icardipine. Verapamil. Alprenolol. Clomipramine 5. Chlorpromazine mau 5 C C C C C C C C C C C C Cl S Cl min

21 Basic Drugs Column : TCI Dual DS-CX.6 mmi.d. 5 mm Mobile phase : C C/5mmol/L C C (p5.,c C)=8/ Flow Rate :. ml/min Detection : UV nm Temperature : C Sample : C C 7 mau 6 5 C C.icardipine C C C C C C.Verapamil C.Alprenolol min

22 Column size :.6 mmi.d. X 5 mm Mobile phase : A) C C / 5mM C (p.5) = /9 Flow rate Detection Temperature : 5 Sample : C C Serotonin Metabolites mau 5 B) C C / 5mM C (p.5) = 7/ -5%B (-min) :. ml/min : UV 5 nm. 5-ydroxy-L-tryptophan. L-Tryptophan. 5-ydroxyindole--acetic acid(iaa). -Acetylserotonin C 5. Serotonin(5-T) 6. Melatonin C min mau min mau 5 TCI Dual DS-CX TCI Dual DS-CX5 6 5 Kaseisorb LC DS min 5 6 6

23 Amino Acids Column : TCI Dual DS-CX5(.6 mmi.d. 5 mm) Mobile Phase : A) C C / 5 mmol/l K P (p., P ) = 5/95 B) C C / 5 mmol/l K P (p., P ) = /6 -%B(5-min.) uv Flow Rate :. ml/min Detection : UV nm Temperature : Aspartic Acid 9 Aspartic Acid Alanine 8 7 Alanine S 6 5 Methionine Methionine Phenylalanine Phenylalanine Arginine Arginine min

24 Anti-diabetic agent Column size :.6 mmi.d. X 5 mm Mobile phase : C C / 5mmol/L K P (p.) = 5/5 Flow rate :. ml/min Detection : UV nm Temperature : Sample : uv TCI Dual DS-CX TCI Dual DS-CX5 Metformin 5 5 TCI Dual DS-CX 酸性条件ではイオン交換基が働かないため保持が弱い 5 5 Kaseisorb LC DS 5 min

25 Allantoin, D-Panthenol Column Size :.6 mmi.d. 5 mm Mobile Phase : C / mmol/l K P (p6., P ) = /9 Flow Rate :. ml/min Detection : UV nm C C Temperature : Sample :. Allantoin. D-Panthenol 8 time(min) TCI Dual DS-CX 8 time(min) TCI Dual DS-CX

26 Levulinic Acid, Methyl Levulinate Column : TCI Dual DS-AX.6mmI.D. 5mm Mobile Phase : C C / mmol/l K P (p7., P ) = / 8 Flow Rate :. ml/min Detection : UV nm Temperature : 5 mv 9 Sample : C. Levulinic Acid C C. Methyl Levulinate min

27 Adenosine Phosphates Column : TCI Dual DS-AX (.6 mmi.d. X 5 mm) Mobile phase : A) C / mmol/l K P (p7.) = / 8 B) C / 5mmol/L K P (p7.) = / 8 -% B (-min) Flow rate :. ml/min mau 9 Detection : UV 5 nm 8 7 Temperature : 6 5 Sample :. AMP. camp ADP. ATP min

28 ucleotides Column Size :.6 mmi.d. 5 mm Mobile Phase : C / mmol/l K P (p 7., P ) = / 8 Flow Rate :. ml/min Detection : UV 5 nm Temperature : Sample :. CMP. UMP. IMP. GMP 5. AMP, time(min) TCI Dual DS-AX 5 5 time(min) TCI Dual DS-AX

29 Alkali alides CI - Li + Coulmn : TCI Dual DS-CX5.6 mmi.d. 5 mm Mobile Phase : C C/ 5mmol/L C C (p5., C C) = 5/5 Detection : Corona CAD Temperature : Flow Rate :. ml/min Sample Size : 5uL Sample : Lithium chloride Sodium chloride Potassium chloride a + K min

30 alide Ions K + Br min I - UV nm Coulmn : Kaseisorb LC DS-SAX Super.6mmI.D. 5 mm Mobile Phase : C C/ 5mmol/L C C (p5., C C) = 5/5 Detection : UV nm, Corona CAD Flow Rate :. ml/min Temperature : Sample Size : 5 ul Sample : Potassium cloride Potassium bromide Potassium Iodide Cl - Br - I - Corona CAD 5 5 min

31 Ionic Liquid Column : TCI Dual DS-CX (.6 mm I.D. X 5 mm) Mobile phase : C C / 5mmol/L Ac (Ac,p5.) = / 9 Flow rate :. ml/min Detection : Corona CAD Temperature : Sample : -Butyl--methylimidazolium Chloride (bmimcl) Cl - + C (C ) C 6 8 min

32 ラインアップタイプ DS+ カチオン交換タイプ塩基性化合物の分離に DS+ アニオン交換タイプ酸性化合物の分離にカラム TCI Dual DS-CX TCI Dual DS-CX5 TCI Dual DS-CX TCI Dual DS-AX TCI Dual DS-AX Kaeisorb LC DS-SAX Super 保持力強中弱強中弱. 5mm 55, 円 S75 S765 S75 S75 S75 S8. mm 6, 円 S77 S767 S77 S77 S77 S8. 5mm 65, 円 S7 S76 S7 S7 S7 S98. 5mm 75, 円 S7 S76 S7 S7 S7 S99.6 5mm 7, 円 S7 S76 S7 S7 S7 S8.6 mm 5, 円 S79 S769 S79 S79 S79 S8.6 5mm 59, 円 S7 S76 S7 S7 S7 S9.6 5mm 7, 円 S7 S76 S7 S7 S7 S9. 5mm 8, 円 S76 S766 S76 S76 S76 S85. 5mm, 円 S78 S768 S78 S78 S78 S86 カートリッジタイプガードカラム [ 専用ホルダーが必要です :S5 9, 円 ]. 5mm, 円 S77 S77 S77 S775 S77 S77

Microsoft PowerPoint - 薬学会2009新技術2シラノール基.ppt

Microsoft PowerPoint - 薬学会2009新技術2シラノール基.ppt シラノール基は塩基性化合物のテーリングの原因いや違う! クロマニックテクノロジーズ長江徳和日本薬学会 9 年会緒言緒言逆相型固定相中の残存シラノール基は, 吸着やピークテーリング等の原因であるとされている残存シラノール基に基づく主な相互作用は, 吸着, イオン交換, 水素結合であるこれらの二次効果相互作用を積極的に利用することで, 極性化合物に対して特異的な保持を示す新規な逆相固定相の創出が可能であると思われる