LC/MS/MS によるフェノール類分析 日本ウォーターズ株式会社 2015 Waters Corporation 1 対象化合物 Cl HO HO HO フェノール 2- クロロフェノール (2-CPh) Cl 4-クロロフェノール (4-CPh) HO Cl HO Cl HO Cl Cl 2,4

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1 LC/MS/MS による類分析 日本ウォーターズ株式会社 15 Waters Corporation 1 対象化合物 - クロロ (-CPh) 4-クロロ (4-CPh),4- ジクロロ (,4-DPh),6- ジクロロ (,6-DPh),4,6- トリクロロ (,4,6-TPh) 15 Waters Corporation 1

2 サンプル調製 ( 検量線 標準液 ) 5 標準溶液添加 (,,4,,,5uL) 精製水 5mL(H にて ph=. に調製,(.1M-H 5uL)) 乾燥 (1 空気吸引 ) Oasis HLB Plus コンディショニング ( メタノール 5mL 精製水 5mL) バックフラッシュ溶出 ( メタノール ) ( 溶出液が 1mL となるまで ) 通液 (1mL/) 精製水にて 5mL に定容 洗浄 ( 精製水 5mL) LC/MS 分析 15 Waters Corporation 3 サンプル調製 ( 水道水サンプル溶液 ) 5 標準溶液添加 (,4uL) 水道水 5mL(H にて ph=. に調製,(.1M-H 5uL)) 乾燥 (1 空気吸引 ) L- アスコルビン酸 Na5mg (5mg/mL 5uL) Oasis HLB Plus コンディショニング ( メタノール 5mL 精製水 5mL) バックフラッシュ溶出 ( メタノール ) ( 溶出液が 1mL となるまで ) 通液 (1mL/) 精製水にて 5mL に定容 洗浄 ( 精製水 5mL) LC/MS 分析 15 Waters Corporation 4

3 LC 分析条件 LC 条件 LC システム : カラム : カラム温度 : 4 移動相 A: 移動相 B: ACQUITY UPLC H-ass ACQUITY UPLC HSS T3,.1 x mm, 1.8µm 水 メタノール 注入量 : µl(5 ul ループ ) 流速 : グラジエント :.45 ml/ Time() A B Curve. 8 Initial 分析時間 : 13 分 15 Waters Corporation 5 MS 分析条件 MS 条件 MS システム : イオン化モード : 分析モード : コロナ : Xevo TQ-S micro APCI negative SIR ソース温度 : 15 プローブ温度 : 脱溶媒ガス : コーンガス : SIR 1 ua(1.5 kv) 1 L/hr 15 L/hr Name モニターイオン コーン電圧 (V) 15 Waters Corporation 6 RT IonMode Phenol APCI- -CPh APCI- 4-CPh APCI-,6-DCPh APCI-,4-DCPh APCI-,4,6-TCPh APCI- 3

4 水道水添加 SIR クロマトグラム添加濃度.8( 最終溶液 4) Tap.8 16_1 7: SIR of 1 Channel AP (46-TCPh) 5.4e4,4,6-トリクロロ _1 6: SIR of 1 Channel AP (4-DCPh) 7.7e4,4-ジクロロ _1 5: SIR of 1 Channel AP (6-DCPh) 6.97e4,6-ジクロロ _1 4: SIR of 1 Channel AP (4-CPh) 1.31e5 4-クロロ _1 3: SIR of 1 Channel AP (-CPh) -クロロ 7.3e _1 : SIR of 1 Channel AP (Phenol) 9.7e4 18 Time Waters Corporation 7 SIR クロマトグラム ( 最終溶液 4) 16_119 16_119 16_119 16_119 Phenol -CPh 4-CPh 6-DCPh 16_119 4-DCPh 16_ TCPh 標準溶液.8 -クロロ標準溶液.8 4-クロロ標準溶液.8,6-ジクロロ標準溶液.8,4-ジクロロ標準溶液.8,4,6-トリクロロ標準溶液.8 16_1 Phenol 16_1 -CPh 16_1 4-CPh 16_1 6-DCPh 16_1 4-DCPh 16_1 46-TCPh 水道水 クロロ水道水 クロロ水道水 Waters Corporation 8,6-ジクロロ水道水 ,4-ジクロロ標準水道水 ,4,6-トリクロロ水道水.8 4

5 検量線 Compound name: Phenol Correlation coefficient: r = , r^ = Calibration curve: * x Compound name: -CPh Correlation coefficient: r =.99911, r^ =.998 Calibration curve: * x R^= クロロ R^= Compound name: 4-CPh Correlation coefficient: r =.99936, r^ = Calibration curve: 83.9 * x Compound name: 6-DCPh Correlation coefficient: r = , r^ = Calibration curve: * x クロロ R^= ,6- ジクロロ R^= Compound name: 4-DCPh Correlation coefficient: r =.99955, r^ =.9995 Calibration curve: * x Compound name: 46-TCPh Correlation coefficient: r = , r^ = Calibration curve: * x ,4- ジクロロ R^= ,4,6- トリクロロ R^= Waters Corporation 9 妥当性評価結果 化合 A 物 検量線範囲 () R^ 基準値 *1/1 (ug/l=) 基準値 *1/1(u 基準値 *1/1 g/l=) (ug/l=) 最終溶液換算 測定濃度 1 日目 n=5 () 最終 () 溶液換算 真度 () 併行精度 RSD n=5 Phenol CPh CPh ,6-DCPh ,4-DCPh ,4,6-TCPh 化合物 1 日目 n=5 日目 n= 3 日目 n= 4 日目 n= 5 日目 n= 室内精度 () () () () () RSD Phenol CPh CPh ,6-DCPh ,4-DCPh ,4,6-TCPh Waters Corporation 1 5

6 LC/MS/MS による類分析 日本ウォーターズ株式会社 15 Waters Corporation 1 対象化合物 - クロロ (-CPh) 4-クロロ (4-CPh),4- ジクロロ (,4-DPh),6- ジクロロ (,6-DPh),4,6- トリクロロ (,4,6-TPh) 15 Waters Corporation 1

7 サンプル調製 ( 検量線 標準液 ) 5 標準溶液添加 (,,4,,,5uL) 精製水 5mL(H にて ph=. に調製,(.1M-H 5uL)) 乾燥 (1 空気吸引 ) Oasis HLB Plus コンディショニング ( メタノール 5mL 精製水 5mL) バックフラッシュ溶出 ( メタノール ) ( 溶出液が 1mL となるまで ) 通液 (1mL/) 精製水にて 5mL に定容 洗浄 ( 精製水 5mL) LC/MS/MS 分析 15 Waters Corporation 3 サンプル調製 ( 水道水サンプル溶液 ) 5 標準溶液添加 (,4uL) 水道水 5mL(H にて ph=. に調製,(.1M-H 5uL)) 乾燥 (1 空気吸引 ) L- アスコルビン酸 Na5mg (5mg/mL 5uL) Oasis HLB Plus コンディショニング ( メタノール 5mL 精製水 5mL) バックフラッシュ溶出 ( メタノール ) ( 溶出液が 1mL となるまで ) 通液 (1mL/) 精製水にて 5mL に定容 洗浄 ( 精製水 5mL) LC/MS/MS 分析 15 Waters Corporation 4

8 LC 分析条件 LC 条件 LC システム : カラム : ACQUITY UPLC H-ass ACQUITY UPLC HSS T3,.1 x mm, 1.8µm カラム温度 : 4 移動相 A: 移動相 B: 水 メタノール 注入量 : µl(5 ul ループ ) 流速 : グラジエント : 分析時間 :.45 ml/ Time() A B Curve. 8 Initial 分 15 Waters Corporation 5 MS 分析条件 MS 条件 MS システム : イオン化モード : 分析モード : コロナ : Xevo TQ-S micro APCI negative SRM 1 ua(1.5 kv) ソース温度 : 15 プローブ温度 : 脱溶媒ガス : 1 L/hr コーンガス : 15 L/hr SRM Name プレカーサイオン プロダクトイオン コーン電圧コリシ ョンエネルキ ー (V) (ev) RT IonMode Phenol APCI- -CPh APCI- 4-CPh APCI-,6-DCPh APCI-,4-DCPh APCI-,4,6-TCPh APCI- 15 Waters Corporation 6 3

9 水道水添加 SRM クロマトグラム添加濃度.8( 最終溶液 4) Tap.8 16_1 13: MRM of 1 Channel AP > 34.8 (46-TCPh),4,6-トリクロロ 1.38e _1 1: MRM of 1 Channel AP > (4-DCPh),4-ジクロロ 7.e _1 11: MRM of 1 Channel AP > 34.8 (6-DCPh),6-ジクロロ 1.95e _1 1: MRM of 1 Channel AP > 34.8 (4-CPh) 4-クロロ.73e _1 9: MRM of 1 Channel AP > 34.8 (-CPh) -クロロ 1.6e _1 8: MRM of 1 Channel AP > 64.7 (Phenol) 1.6e3 1 Time Corporation 15 Waters 7 SRM クロマトグラム ( 最終溶液 4) 16_119 16_119 16_119 16_119 Phenol -CPh 4-CPh 6-DCPh 16_119 4-DCPh 16_ TCPh 標準溶液.8 -クロロ標準溶液.8 4-クロロ標準溶液.8,6-ジクロロ標準溶液.8,4-ジクロロ標準溶液.8,4,6-トリクロロ標準溶液.8 16_1 Phenol 16_1 -CPh 16_1 4-CPh 16_1 6-DCPh 16_1 4-DCPh 16_1 46-TCPh 水道水 クロロ水道水 クロロ水道水 ,6-ジクロロ水道水.8,4-ジクロロ標準水道水.8,4,6-トリクロロ水道水.8 15 Waters Corporation

10 検量線 Compound name: Phenol Correlation coefficient: r = , r^ = Calibration curve: * x Compound name: -CPh Correlation coefficient: r = , r^ = Calibration curve: * x R^= クロロ R^= Compound name: 4-CPh Correlation coefficient: r =.99943, r^ = Calibration curve: * x Compound name: 6-DCPh Correlation coefficient: r = , r^ = Calibration curve: * x クロロ R^= ,6- ジクロロ R^= Compound name: 4-DCPh Correlation coefficient: r = , r^ = Calibration curve: * x Compound name: 46-TCPh Correlation coefficient: r = , r^ = Calibration curve: * x ,4- ジクロロ R^= ,4,6- トリクロロ R^= Waters Corporation 9 妥当性評価結果 化合物 検量線範囲 () R^ 基準値 *1/1 (ug/l=) 基準値 *1/1 (ug/l=) 基準値 *1/1(u g/l=) 最終溶液換算 測定濃度 1 日目 n=5 () 最終 () 溶液換算 真度 () 併行精度 RSD n=5 Phenol CPh CPh ,6-DCPh ,4-DCPh ,4,6-TCPh 化合物 1 日目 n=5 () 日目 n= () 3 日目 n= () 4 日目 n= () 5 日目 n= () 室内精度 RSD Phenol CPh CPh ,6-DCPh ,4-DCPh ,4,6-TCPh Waters Corporation 1 5

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