A PROSPECT OF MOLECULAR BIOLOGY IN THE FIELD OF UROLOGIC ONCOLOGY : MECHANISMS OF CARCINOGENESIS OR TUMOR DEVELOPMENT IN TESTICULAR CANCER Norio NONOM
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1 Title 泌尿器科腫瘍学における分子研究の展望 : 発癌 転移機構 ( 精巣腫瘍 ) Author(s) 野々村, 祝夫 ; 奥山, 明彦 Citation 泌尿器科紀要 (2001), 47(11): Issue Date URL Right Type Departmental Bulletin Paper Textversion publisher Kyoto University
2 A PROSPECT OF MOLECULAR BIOLOGY IN THE FIELD OF UROLOGIC ONCOLOGY : MECHANISMS OF CARCINOGENESIS OR TUMOR DEVELOPMENT IN TESTICULAR CANCER Norio NONOMURA and Akihiko OKUYAMA From the Department of Specific Organ Regulation (Urology), Osaka University Graduate School of Medicine Testicular germ cell tumor comprises about 1 % of all the malignancies of males in Japan, and occurs in only one over 100,000 males annually. A susceptibility gene may be located on the short arm of the chromosome 12. Among the genes in this region, the expression of the KRAS2 mrna was increased in testicular cancer compared to the normal testicular tissue. By DNA typing, HLA-DR4 and 0405 allele in HLA-DRB1 showed high relative risk for testicular cancer. We analyzed the expression of the WT1 gene, reported to be a growth promoter for leukemia, by quantitative reverse transcription-pcr. Relative expression of the WT1 gene was significantly increased in high-stage cases than in low-stage cases, suggesting that WT1 could be useful as a tumor marker for progression of testicular cancers. Testicular germ cell tumors are usually very sensitive to chemotherapeutic agents such as cisplatin, and p53 has been reported to play an important role in chemosensitivity. Therefore, mutations of the p53 gene or other genes downstream may be responsible for their chemoresistance. The expression of the GML (GPI-anchored molecule like protein) gene was examined in testicular cancers. Its expression was not correlated with histology or stage. However, 4 refractory cases, 2 of which were recurrent cases from stage I and the others were at high stages, showed no expression of the GML mrna. These interesting facts suggest that the expression of GML gene could be a good marker for the prognosis of testicular germ cell tumors. (Acta Urol. Jpn. 47 : , 2001) Key words : Testicular cancer, Molecular biology, HLA, WT1, GML
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4 野 々 村,ほ か:精 巣 腫 瘍 分子生物学 Table3,ExpressionoftheGMLgeneintestiCUIargUrmCelltUmOrS GML(一)GML(十) 邑 LOWstage 7例 18例 Highstage 3例 6例 Seminoma 5例 18例 Nonseminoma 5例 6例 塁101 謹 誓 奎 き :. 葦 遷 N.S. N.S.=notsignificant : 一一 一一 N.S. 考 1; 察 一 精 巣 腫 瘍 の 発 生 に関 す る分 子研 究一 i 10 1 精 巣 腫 瘍 は 白人 に多 く,有 色 人 種 に少 な い傾 向 が あ る.白 人 にお け る罹 患 率 は黒 人 にお け るそ れ の 約5倍 LowstageHlghstage (n25)(n=9) で あ る とい わ れ て い る12)そ Fig,1.RelativeexpressionoftheWTIgcne し て,世 界 的 に み る と そ の 頻 度 は過 去40年 の 間 に約2倍 mrnaintesticulargermcelltumors accordingtotumorstage.thelevel 以 上 に 増 加 して い る13).わ が 国 で も,最 近 の調 査 で,過 去9年 間 に約 1.35倍 に 増 加 した こ とが 明 ら か に な っ た14)Cytoge- ofthewtimrnaexpressionin NEC8cellswasdefinedasl.The neticな 解 析 に よ り,精 巣 胚 細 胞 腫 瘍 は組 織 型 に か か cut-offpointof1.oismarkedbyasterisk. わ らず,そ の細 胞 内 に少 な くと も1つ 以 上 のX染 色 体 とY染 色 体 を有 して い る こ とが わ か って い る.そ ヅ多儀 て,ほ B.. e し とん どす べ て の精 巣 腫 瘍 細 胞 に12番 染 色 体 短 腕 の 重 複(12pisochromosome=i(12p))が 見 られる こ と も明 らか に され て い る2'3)i(12p)は,12番 染色 体 の 長 腕 上 の癌 抑 制 遺 伝 子 あ る い は12番 染 色 体 短 腕 上 の 難1 餓 叢 Fig.2. 癌 遺 伝 子 の存 在 を予 測 させ る.こ の重 複 す る12番 染 色 体 短 腕 上 の癌 遺伝 子 と して 同定 され て い る もの の 中 に KRAS2遺 伝 子 やcyclinD2な ど が 存 在 す る15 16) KRAS2は そ れ 自身 癌 遺 伝 子 と して 知 ら れて い る.わ れわれ の検討 で は同一患者 の精巣 腫瘍組 織 にお ける 属'. 一繭却5.一 一 KRAS2mRNAの 発 現 量 は正 常 の精 巣 組 織 に お け る そ れ の2倍 以 上 で あ っ た.こ れ が 単 に12番 染色 体 短腕 ImmunohistochemicalstainingofWTl proteins.sectionwasprobedwith の重 複 を意 味 して い るの か,KRAS2遺 polyclonalantibodyagainstwti(1: 瘍 発 生 へ の 関与 を意 味 して い る のか は不 明 で あ る. 100).Scalebarrepresents40μm. 伝 子 の精 巣腫 癌 の発 生 に は主 と して,単 一 の遺 伝 子(癌 抑 制 遺 伝 A=Seminomawithhighexpressionof WTIprotein.B:Seminomawithout 子 や癌 遺 伝 子)が 関与 す る と考 え られ るが,そ れ らの expressionofwtiprotein 遺伝 子 以 上 の生 じやす さな どが 多 くの遺 伝 子 に よ って 現 症 例 で はWTIタ ン パ ク も 高 発 現 し て い た(Fig. GMLmRNAの に,ま た,lowstage25例 中 の18例 中6例 に発 現 を認 は 有 意 差 を認 め な か っ 織 学 的 に は セ ミ ノ ー マ23例 中 の18例 ノ ー マ11例 生 じ る相 対 危 険率 を算 出 す る こ とが 可能 とな り,将 来 発 現:GMLはhighstageの9例 め,highstageとlowstageで た.組 ト遺 伝 子 の 中 に存 在 す る多 くの 多型 を解 析 して特 定 の表 現 系 が 2). 中6例 規定 され て い る可 能性 が あ る.最 近 で は,ヒ に 認 め ら れGMLの に,非 セ ミ 陽性 率 はセ ミ の 遺 伝 子 診 断 や い わ ゆ るオ ー ダー メ イ ド医療 へ つ な が る もの と期 待 され て い る.HLAtypingも 検 索 の 一種 で あ り,特 定 のHLAの 遺伝子 多型 型 を有 す る個 体 の特 定 の 疾 患 に対 す る な りや す さ を検 討 す る こ とが で ノ ー マ と非 セ ミ ノー マ で 有 意 な 差 を 示 さ な か っ た き る.わ れ われ は,精 巣 腫 瘍 患 者 のHLA-DRお よび (Table3).し HLA-DRBIに 示す か し,stageIの して 治 療 に 難 渋 し た2例 難 治 性 に な っ た2例 た. 症 例 の う ち,後 と,highstage9例 で はGMLの に再 発 の うち の 発 現 を認 め な か っ 関 して検 討 して み た.Table1に ご と く,HLA-DRは 精 巣 腫 瘍 患 者 に お い てDR4が 有 意 に高 頻 度 に み られ た.ま た,Table2の DRBIで は0405allclcを ご と く, 有 す る もの が 有 意 に高 頻 度
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6 13) Bosl GJ, Bajorin D, Sheinfeld J, et al. : Cancer of the testis. In : Cancer : principles and practice of oncology. Edited by Devita VT, Hellman S and Rosenberg S. 5th ed., pp , JB Lippincott, Philadelphia, ) Mostert MC, Verkerk AJ, van de Pol, et al. : Identification of the critical region of 12p overrepresentation in testicular germ cell tumors of adolescents and adults. Oncogene 16: , ) Houldsworth J, Reuter V, Bosl GJ, et al. : Aberrant expression of cyclin D2 is an early event in human male germ cell tumorigenesis. Cell Growth Differ 8: , ) Hoskin P, Dilly S and Easton D : Prognostic factors in stage I nonseminomatous germ cell testicular tumors managed by orchiectomy and surveillance : implications for adjuvant chemotherapy. J Clin Oncol 7: , ) Klepp 0, Olsson AM, Henrikson H, et al. : Prognostic factors in clinical stage I nonseminomatous germ cell tumors of the testis : multivariate analysis of a prospective multicenter study. J Clin Oncol 8: , ) Droz JP and Van Oosterom AT : Treatment options in clinical stage I nonseminomatous germ cell tumors of the testis : a wager on the future? a review. Eur I Cancer 29A: , ) Harada Y, Nonomura N, Nishimura K, et al. : WT1 gene expression in human testicular tumors. Mol Urol 3: , 1999 germ-cell Received on September 18, 2001 Accepted on September 18, 2001
MOLECULAR STAGING OF TESTICULAR CANCER USING POLYMERASE CHAIN REACTION OF THE TESTICULAR CANCER-SPECIFIC GENES Norio NONOMURA, Tetsuo IMAZU, Yasunori
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