CBP : GREB binding protein TAF TBP associated, factor TBP : TATA box bindingg protein PCB' ON/ CBP associated factor

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2 CBP : GREB binding protein TAF TBP associated, factor TBP : TATA box bindingg protein PCB' ON/ CBP associated factor

3 ヒス トンアセチル化 による転写制御機構 ど の よ う に貢 献 す る の で あ ろ うか DNA結 25 合 性 アクチ ベ ー タ ー の 多 く は ヌ ク レオ ソ ー ム 構 造 を 破 壊 す る こ と な くDNAに 結 合 す る 転 写 にお い て ヌ ク レオ ソー ム 構 造 が 障 害 に な る の は,TFIIDの コアプロモー ターへの 結 合 で あ る TFIIDのTATAボ ッ ト(TBP)はDNA副 ックス結 合 サブユニ 溝 に 結 合 し,DNA構 く変 化 さ せ る5) さ ら に,TFIIDは 造 を大 き マ ルチ サ ブユニ ッ ト複 合 体 で あ り,転 写 開 始 点 下 流 領 域 に も ヒス トン様 に 結 合 す る5) これ らを 総 合 す る と,コ ア プ ロモ ー タ ー 付 近 の ヌ ク レ オ ソー ム 構 造 が 緩 和 ま た は破 壊 さ れ ず に TFIIDがDNAに た が っ て,コ 結 合 す る ことは,不 可 能 で あ ろ う し ア プ ロ モ ー タ ー付 近 の ヌ ク レオ ソ ー ム を ア セ チ ル 化 しTFIIDが 結 合 可 能 な状 態 にす る こ とが, ア セ チ ル 化 酵 素 の 重 要 な 機 能 の ひ と つ で あ る と考 え ら れ る そ の 他 の ヒ ス トン ア セ チ ル 化 酵 素 の 重 要 な 作 用 点 と し て,RNAコ ー ド領 域 が 考 え られ る 高 等 真 核 細 胞 の 多 くの 遺 伝 子 で,転 写 開 始 後RNAポ リメ ラ ーゼ が転 写 の 途 中 で停 止 す る こ とが 知 られ て い る11) RNAポ リメ ラ ー ゼ が 停 止 す る原 因 の ひ と つ は ヌ ク レオ ソ ー ム 構 造 で あ り,こ れ を 解 除 す る こ と は 転 写 活 性 化 に お い て 重 要 な 機 構 で あ る この こ と と関 連 して,高 等真核 細胞 の 遺 伝 子 は プ ロ モ ー タ ー 領 域 の み な ら ず コ ー ド領 域 も ア セ チ ル 化 され て い る こ れ らの 事 実 は,ア 酵 素 がRNAポ セチル 化 リメ ラ ー ゼ の抗 停 止 に関 与 す る こ とを 示 唆 す る 図1 (A)モ ヒス トン ア セ チ ル 化 酵 素 は ヒ ス トン テ ー ル を修 飾 す る PCAFヒ ス トンア セ チ ル化 酵 素 ノヌ ク レオ ソ ーム の構 造 模 式 図 コア ヒス トンH2A,H2B H3,H4は そ れ ぞ れN末 りな る ヒ ス トン フ ォー ル ドが ヌ ク レオ ソー ム形 成 に重 要 な 役 割 を演 じ る一 方,ヒ はDNAに, 端 ヒス 端 ヒス トンテ ー ル(破 線)とC末 トン フ ォー ル ド(シ リン ダー)よ ス トン テ ール 結 合 しヌ ク レオ ソー ム構 造 を安 定化 す る ク ロス リン ク 実 験 に よ り同 定 され た各 ヒ ス トンの 結 合 部 位 をDNA上 (B)ヒ III. ス トンテ ー ル の1次 構 造(上) に 示 す6) ア デ ノ ウ ィル スE1Aは,細 胞 性 因 子 に結 合 し正 常 な 細 胞 周 期 の 制 御 を 乱 す こ と に よ り,細 胞 の ト ラ ン ス フ ォ ー メ ー シ ョ ン を誘 導 す る E1Aは,レ チノブ ラス ト ー マ フ ァ ミ リー(Rb)とp300/CBP(CREB binding ヒス トン テー ル が塩 基 性 残 基 に 富 む点 に注 目 ヒス トンア セ チ ル化 酵 素 に よる修 飾 部 位(下) protein)*2の2つ ヒス トンテ ー ル が 塩 基 性 残 基 の うち,表 結 合 と も トラ ン ス フ ォ ー メ ー シ ョン に は不 可 欠 で あ り, で ア セ チ ル 化 され る p300,pcafは た 場 合,表 示 したLysをin 示 したLysだ け がin vivo ヌ ク レオ ソ ー ム を基 質 と し vitroで ア セ チ ル 化 す る (C)ヒ の 因 子 群 をタ ー ゲ ッ トとす る 両 方 の Rbとp300/CBPは 異 な った 遺 伝 子 群 を制 御 して い る と ス ト ン ア セ チ ル 化 の 作 用 モ デ ル ヒ ス トンテ ー ル の塩 基 性 残 基(赤) 考 え られ て い る Rbは はDNA(白)と (G1,G0期)で 結 合 しヌ ク レオ ソ ー ム構 造 を 安 定 化 す る ヒス ト ン ア セ チル 化 酵 素 はLysの ε-アミノ 基 を アセ チ ル化 し,正 電 荷 を 中 和 す る この 結 果,ヌ ク レ オ ソ ー ム 構 造 が 緩 和 す る と推 察 され る(右) 細 胞 周 期 が停 止 して い る細 胞 は低 リ ン酸 化 型 と し て存 在 し,E2Fな ど細 胞 増 殖 に関 与 す る ア ク チ ベ ー タ ー と結 合,そ 性 を抑 制 す る こ の 抑 制 に は,ヒ 酵 素[ 今 月 のKey 胞 増 殖 の 際(G1後 の活 ス ト ン脱 ア セ チ ル 化 Words(p.2127)]が 関 与 す る 細 期),RbはCDK(cyclin-dependent 2081

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7 ヒス トンアセチル化による転 写制御機構 ア プ ロ モ ー タ ー に 結 合 す る 際,ヌ 問 題 とな る こ の 際,ヌ ク レ オ ソ ー ム構 造 が 単 に破 壊 さ れ た の で は,DNAの リ ン キ ン グ 数 が 変 化 し, DNA に もつ れ が 生 じ る そ こ で,ヒ ク レ オ ソ ー ム構 造 が 興 味 深 い 発 見 が あ る Workmanの よ り,GCN5を 含 むSAGA複 た18) SAGAはPCAF複 ス トン オ ク タ マ ー 類 似 SAGAに htaf100,80に リン キ ン グ 数 を元 の 値 に保 つ こ とが 可 能 とな る PCAF が 含 ま れ る(図4) 複 合 体 お よびTFIIDの GCN4の ヒス トンオ ク タマ ー 類 似 構 造 は, グル ー プ は 出芽 酵 母 合 体 を 精 製,同 定 し 合 体 と類 似 点 が 多 い 一 方, はPAF65α,β 構 造 が 真 の ヒス トン オ ク タマ ー と置 換 す る こ とに よ り, 29 に 相 当 す る 因 子 は 存 在 せ ず, 相 当 す る本 当 のTAF(yTAF60,90) 一 方,Hinnebuschの グ ル ー プ は, 転 写 活 性 化 ドメ イ ン にSAGA類 似 の複 合 体 が ヒ ス トン テ ー ル に相 当 す る領 域 を もた な い さ らに,ヒ 結 合 す る こ とを示 した19) 重 要 な こ とに,こ の複 合 体 は ス トン フ ォー ル ド中 のDNAと TBPを 結 合 す る と予 想 され る残 含 む ヒ ト,シ ョウ ジ ョ ウバ エ と は異 な り,出 基 が よ く保 存 され て い ない これ らの 結 果 は,PCAF複 芽 酵 母 のTFIIDはin 合 体 また はTFIIDがDNAと 塩 素 イオ ンによ りTBPがTFIIDよ 結 合 しヌ ク レ オ ソー ム 類 似 構 造 を 形 成 す る と して も,安 定 な 構 造 で な い こ と を と 同 様,生 示 唆 す る この ル ー ズ な構 造 こそ が,転 し て存 在 す る が,精 へ の ア ク セ ス効 率 な どか ら考 慮 し て,転 写 因 子 のDNA 写 活性 化 の有 り脱 離 す る TFIID 理 条 件 下 で はSAGAとTBPは よ りTBPが GCN4の う こ と は,ヒ ー トす る が,TFIIDを 転 写 活 性 化 ドメ イ ン はSAGA/TBPを リク ル リ ク ル ー ト し な い こ とで あ る を受 け ず,活 性 化 ク ロ マ チ ン の 維 持 とい う点 で 重 要 な TFIIDはRNAポ 役 割 を演 じ る の か も しれ な い 関 与 す る と考 え られ て い るが,こ PCAF複 複合体 と 製 の過程 で使 用 した塩素 イオ ン に 脱 離 し た 可 能 性 が 強 い 重 要 な こ と は, 利 な 材 料 と な る と考 え る ま た テ ー ル を もた な い とい ス トン脱 ア セ チ ル 化 酵 素 に よ る不 活 性 化 vitroで 不 安 定 で あ り,高 濃 度 の リメ ラー ゼII遺 伝 子 す べ て の転 写 に れ ら の 結 果 は,あ る 合 体 とp300/CBP は両 者 と も ヒス トン ア セ チ ル 化 酵 素 活 性,ヒ ス トン オ ク タ マ ー 類 似 構 造,WD40リ ピー ト構 造 を も つ 一 方,相 多 違点 も い(図4) TBP, htaf250,htaf110な TFIIDに どは 特 異 的 で あ り, PCAF,ADAな ど はPCAF 複合 体 に特異 的 であ る さ ら に,PCAF複 合 体 がTAF類 似 因 子(PAF65α,β)を もつ 点 が 非 常 に興 味 深 い ど う し て 本 当 のTAF(hTAF100, 80)を 使 わ ず,類 (PAF65α,β)を 似 因 子 用 意 す る必 然 図5 転 写 活性 化 モ デル 性 が あ っ た の か ひ とつ の 理 ア クチ ベ ー タ ー は,コ 由 と し て,hTAF100,80が に よ り,遺 伝 子 特 異 的 な ア セ チ ル化,さ TBPを す る TAFの 直 接 結 合 す る こ とが あ TFIIDが げ ら れ る し た が っ て, PAF65α,β はTBPを 含 ま な い複 合 体 を形 成 す るた め に, 重 要 な 役 割 を もっ て い る の か もしれな い これ に関連 す る ア クチ ベ ー タ ー お よ びTFIIDを ら にはRNAポ プ ロモ ー タ ー領 域 にl)ク ル ー トす る こ と リメ ラ ーゼ 転 写 開 始 複 合 体 の 形 成 を促 進 重 要 な機 能 は ア クチ ベ ー タ ー に 結 合 部 位 を提 供 す る こ と で あ り,こ の 結 合 に よ り リク ル ー トされ,転 す る とい う発 見 は,ア 写 活 性 化 につ な が る と考 え られ る5) PCAF複 クチ ベ ー タ ー はPCAF複 合 体 もTFIIDも 合 体 中 にTAFが 示 唆 す る ど の コ ア クチ ベ ー タ ー が リ クル ー トさ れ る か は ア ク チ ベ ー タ ー,プ 胞 の 状 態 な ど に依 存 す る ま た,こ こで はTFIIDの リ クル ー トさ れ る 場 合 もあ る 一 方,出 体 を リ ク ル ー トす る が,TFIIDを ロ モ ー ター,細 リ クル ー トに 重 点 を お いた が,真 転 写 活 性 化 に は複 数 の機 能 的 に重 複 す る 経 路 が 存 在 し,た 芽 酵 母 で はGCN4ア 存在 同様 にl)ク ル ー トす る 可 能 性 を と え ばRNAポ 核細胞 の リメ ラー ゼ ホ ロ酵 素 が ク チ ベ ー タ ー は,SAGA/TBP複 合 リ ク ル ー トしな い19) 2085

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45 癌抑制遺伝子PTEN 酵 素活 性 を阻害 す る活性 中心 後述 付 近 で の ミス セ ン 者 に は 乳 癌 甲状 腺 癌 卵 巣 癌 が 発 生 しや す い こ とが ス 変 異 が 多 く 子 宮 内 膜 腫 で 頻 繁 に観 察 さ れ る よ うな 知 ら れ て い る Cowden病 ナ ン セ ン ス フ レ ー ム シ フ ト変 異 は あ ま り検 出 さ れ な

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