ルス薬の開発の基盤となる重要な発見です 本研究は 京都府立医科大学 大阪大学 エジプト国 Damanhour 大学 国際医療福祉 大学病院 中部大学と共同研究で行ったものです 2 研究内容 < 研究の背景と経緯 > H5N1 高病原性鳥インフルエンザウイルスは 1996 年頃中国で出現し 現在までに

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1 [PRESS RELEASE] 平成 28 年 4 月 27 日 鳥インフルエンザウイルスはヒトで増殖しやすく変化する ~ 鳥インフルエンザウイルスのメカニズム解明に関する論文掲載 ~ 京都府立医科大学医学研究科感染病態学講師渡邊洋平らの研究グループは H5N1 高病原性鳥インフルエンザウイルスが感染患者体内で獲得するウイルス遺伝子変異を網羅的に解析することで ウイルスポリメラーゼ遺伝子の新たな適応変異を同定することに成功し 本件に関する論文が米国科学雑誌 PLoS Pathogens オンライン版に平成 28 年 4 月 20 日 ( 水 ) に掲載されましたのでお知らせします これまで 鳥インフルエンザウイルスのパンデミックウイルスへの変異メカニズムは不明でしたが 今回の研究成果により 鳥インフルエンザウイルスがヒト生体内で増殖しやすく変化する新しい分子メカニズムが提起され パンデミックインフルエンザ発生メカニズムを解明する糸口として パンデミックインフルエンザ対策や新規抗ウイルス薬の開発に繋がっていくことが期待されます 1 研究概要本学大学院医学研究科渡邊洋平講師らの研究グループは H5N1 高病原性鳥インフルエンザウイルスがヒトで増殖しやすく変化する分子機構を明らかにしました パンデミックインフルエンザ ( 注 1) は 鳥や豚で流行するインフルエンザウイルスがヒトで増殖しやすく変異を獲得することで発生すると考えられていますが その詳細なメカニズムは不明です H5N1 高病原性鳥インフルエンザウイルスは 鳥からヒトに感染すると致死率が 60% と極めて高い重度の呼吸器疾患を引き起こすことから そのパンデミック化が危惧されています 特に エジプトは H5N1 高病原性鳥インフルエンザの蔓延地域であり 世界保健機関 (WHO) の報告によると 近年ヒト感染事例が際立って多いことから 同地域からパンデミックウイルスが出現する高い潜在性が指摘されています 本研究グループは エジプトにおいて H5N1 高病原性鳥インフルエンザウイルスに感染した患者から検出されたウイルス遺伝子変異を網羅的に探索しました その結果 ウイルスが感染患者体内において ウイルスポリメラーゼ蛋白質 ( 注 2) に新たな適応変異 ( 注 3) を獲得していることを明らかにしました これらの研究成果は 鳥インフルエンザウイルスがパンデミック化する新しい分子メカニズムを提起するものであり パンデミックインフルエンザ発生メカニズムの解明の糸口となり パンデミックインフルエンザ対策や新規抗ウイ

2 ルス薬の開発の基盤となる重要な発見です 本研究は 京都府立医科大学 大阪大学 エジプト国 Damanhour 大学 国際医療福祉 大学病院 中部大学と共同研究で行ったものです 2 研究内容 < 研究の背景と経緯 > H5N1 高病原性鳥インフルエンザウイルスは 1996 年頃中国で出現し 現在までにユーラシア アフリカ大陸において広範に分布しています また 中国 インドネシア ベトナム エジプトにおいて鳥類において継続的な伝播を繰り返す流行域を獲得しており 当該地域において 感染鳥との濃厚接触によって致死率が 60% と極めて高い重度の呼吸器疾患を引き起こすことから 公衆衛生上の重大な懸案事項となっています 鳥や豚で流行するインフルエンザウイルスは ヒトで増殖しやすく変異を獲得することで 歴史的にパンデミックウイルスに変化してきました そのため H5N1 高病原性鳥インフルエンザウイルスが 感染を繰り返す過程でパンデミック化する危険性があります 特に エジプトは 近年のヒト感染事例の 67% が報告されている特異な地域であることから 同地域から H5N1 由来パンデミックウイルスが出現する潜在性が高いと指摘されています しかしながら 鳥インフルエンザウイルスが変異を獲得することでヒトに感染しやく変化するメカニズムの詳細は不明なままでした また H5N1 高病原性鳥インフルエンザウイルスを含む鳥インフルエンザウイルスが感染患者体内で獲得するウイルス遺伝子変異について これまで大規模に解析されたことはありませんでした < 研究内容 > 本研究グループは エジプトの感染患者において H5N1 高病原性鳥インフルエンザウイルスが獲得したウイルスポリメラーゼ蛋白質の変異を網羅的に探索しました まず 過去に報告があるヒト感染事例において分離された高病原性鳥インフルエンザウイルス遺伝子配列を網羅的に解析することで 感染患者由来ウイルス遺伝子配列に特異的に検出された 85 種類の遺伝子変異を選定しました 続いて 遺伝子変異がヒト生体内での増殖性にどのように関係しているのか調べるため 選定した 85 種類の遺伝子変異を導入したウイルスポリメラーゼ蛋白質をヒト細胞に発現させ ウイルスの複製 転写に及ぼす効果を調べました その結果 ヒト細胞においてウイルスゲノムの複製 転写を高める 29 種類の遺伝子変異を同定しました 次に 29 種類の遺伝子変異が インフルエンザウイルスの増殖性に及ぼす効果を調べるため 変異を導入した H5N1 高病原性鳥インフルエンザウイルスを作製して ヒト呼吸器上皮細胞とマウスに感染させてウイルスの増え方を解析しました その結果 特にヒト呼吸器細胞とマウスにおけるウイルスの増殖性を高める 9 種類の遺伝子変異を同定しました さらに ヒト呼吸器上皮細胞においてウイルス増殖性を高めた遺伝子変異について構造

3 解析を実施したところ 同定した変異がこれまでに報告がない新しいウイルスポリメラーゼ蛋白質の機能ドメインに位置していました シミュレーション解析によって これらの変異がポリメラーゼ蛋白質の機能に与える効果を解析したところ 変異がウイルスゲノム RNA とウイルスポリメラーゼ蛋白質との相互作用を変化することでヒト細胞内におけるウイルス複製開始過程を至適化することが示唆されました < 今後の展開 > 本研究は H5N1 高病原性鳥インフルエンザウイルスが感染患者体内で獲得する新たな適応変異を複数同定することに成功しました 本研究成果は 鳥インフルエンザウイルスがヒト生体内で増殖しやすく変化する新しい分子メカニズムを提起しており パンデミックインフルエンザ発生メカニズム解明の糸口となる非常に有用な情報です さらに パンデミックインフルエンザ防疫対策やインフルエンザウイルスがヒト生体内で効率的に増殖するために必要な複製過程を特異的に抑制する新規抗ウイルス薬の開発に非常に重要な発見です 3 発表雑誌 : 雑誌名 : PLoS Pathogens 平成 28 年 4 月 20 日 ( 水 ) オンライン速報版掲載 参照 URL: 論文タイトル :Novel Polymerase Gene Mutations for Human Adaptation in Clinical Isolates of Avian H5N1 Influenza Viruses 著者 : 荒井泰葉 1,2,3 川下理日人 4,5 大道寺智 3 Madiha S. Ibrahim 3,6 Emad M. El-Gendy 3,6 高木達也 4,5 高橋和郎 7 鈴木康夫 8 生田和良 2 中屋隆明 3 塩田達雄 1 渡邊洋平 1,2,3 所属 : 1 大阪大学微生物病研究所ウイルス感染制御分野 2 大阪大学微生物病研究所難治感染症対策研究センター 3 京都府立医科大学医学研究科感染病態学 4 大阪大学薬学研究科情報 計量薬学分野 5 大阪大学微生物病研究所遺伝情報実験センター 6 エジプト国 Damanhour 大学獣医学部 7 国際医療福祉大学病院検査部 8 中部大学生命健康科学部 4 研究資金 : 日本学術振興会科学研究費助成事業 (15H05295, 15K08497)

4 5 問い合せ先 : 渡邊洋平 ( ワタナベヨウヘイ ) 京都府立医科大学医学研究科感染病態学講師 京都府上京区河原町通広小路上る梶井町 465 Tel: Fax: nabe@koto.kpu-m.ac.jp 6 用語説明 : 注 1) パンデミックインフルエンザ A 型 B 型 C 型と大きく 3 種類に分かれるインフルエンザウイルスの中で A 型インフルエンザウイルスは変化しやすく 歴史的に数十年に一度の頻度で人類に世界的大流行 ( パンデミック ) を起こしてきました このようなインフルエンザウイルスは 毎年流行している季節性インフルエンザウイルスとは異なるため パンデミックインフルエンザウイルスと区別されて呼ばれます 注 2) ウイルスポリメラーゼ蛋白質ウイルス粒子内に含まれる蛋白質で 感染細胞核内においてウイルスゲノム RNA を複製 転写することで子孫ウイルスが産生されます 鳥インフルエンザウイルスは そのままではヒト呼吸器上皮細胞内で効率的に増殖できないため パンデミックウイルスとなるにはウイルスポリメラーゼ蛋白質の機能に何らかの変化が起こる必要があると考えられています 注 3) 適応変異ウイルスが宿主域を変化する際には 新しい宿主において効率的に増殖するためにウイルス遺伝子に変異を獲得する必要があります このように宿主域を変化させる際に獲得される変異を適応変異と呼びます

5 7 添付資料 : 図 1. 同定した適応変異を導入した H5N1 ウイルスを感染させたマウス肺の免疫組織 ( 左図 ) 変異を導入する前の H5N1 ウイルスを感染させたマウス肺の組織像です 正常な肺胞の構造が保たれている箇所が残存しています ( 右図 ) 変異ウイルスを感染させたマウス肺の組織像です 肺組織の障害が増強し ウイルス抗原 ( 黒褐色 ) が多く観察されます

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