VOL. 36 S-6 111 Fig. 1 Chemical structures of cefotiam hexetil and related compounds
112 CHEMOTHERAPY DEC. 1988 (ƒêg/ml) (ƒêg/ml) Fig. 2 Standard curves for assay of cefotiam using Proteus mirabilis ATCC21100 as the test organism Medium : DST (ph 8.0) Vehicle : œ \ œagar well Fig. 3 Effect of diluent on standard curves for assay of cefotiam by agar well method Test organism : P. mirabilis ATCC 21100 Medium : DST (ph 8.0) Diluent : œ \ œ 0.1M phosphate buffer (ph 7.0)
Fig. 4 Standard curves for assay of cefotiam using Providencia rettgeri ATCC9250 as the test organism Medium : MCA (ph 8.0) Table 1 Microbiological assay for cefotiam (a summary of assay conditions)
114 CHEMOT DEC.1988 HERAPY Urine of subj. A Urine of subj. B SCE-1006 SCE-1136 Urine of subj. C Urine of subj. D Fig. 5 れ る が,そ Bioautograms of human urine after oral administration の後 我 が 国 に お い て も報 告 さ れ る よ う に な っ た7) カ ッ プ 法 が 約0.3mlの の に 対 して,Agarwell法 検 液 を必 要 とす る で は50μlで よ い こ と, of cefotiam 外 に,微 及 びSCE-1006)が 転 倒 の よ う な 失 敗 の な い こ と等 か ら,CTMの 認 め ら れ て い る11) と し た CTMの れ らの 代 謝 物 は動 物 実 験 に お い て も で実施 す る こ と 血 清 蛋 白 結 合 率 は8%と (研究 期 間S59.2 62.6) 報 告 され て お り8),血 清(ま た は血 漿)試 料 の 測 定 に お い て は 血 清(ま た は血 漿)希 文 手 の容 易 な 市 販 1 ) NISHIMURA YAMAOKA よ るPhase 水)を 用 い る こ と と した 本 法 に I試 験 血 漿 試 料 の 測 定 値 は,CTMと て0.1 6.0μg/mlの 献 釋 による標準 曲線 の調 製が望 ま し い 今 回検 討 の 結 果 に 従 い,入 血 清(Consera,日 量 の 活 性 代 謝 物(SCE-1136 バ イ オ オ ー トグ ラ フ法 に よ り検 出 され た が,こ も今 回 の検 討 に よ りAgarwell法 (200 mg) hexetilを 投 与 し た ヒ トの 血 漿 及 び尿 中 よ りCTM以 及 び 検 液 注 入 後 の シ ャ ー レ の取 り扱 い 時 に カ ッ プ の 測定 hexetil 範 囲 に お い て,HPLC法 HIRAI し of によ 示 し た9} し た が っ て 上 記 希 繹 用 血 清 の 選 択 を 含 め て,本 YOSHIMURA Y, TAKANOHASHI S, YASHIKI T, K, NUMATA M (cyclohexyloxycarbonyloxy) 2) る値 と艮 好 な相 関(r=0.978)を T, M, cefotiam. J. 棚 山 薫 晴, MIYAKE A, HAMAGUCHI N, Orally alkylester Antibiotics 吉 田 清 志, 40: 三 谷 政 義, 微生 物 定量 法 81 `90, 3) 番野 剛, 前 田 憲 一: (SCE-963)の 内 濃 度 測 定 法 Chemotherapy 多 くな る た め,標 準 法 とは 別 に 高 感 度 法 の 設 定 が 必 要 と考 え られ る 今 回 設 定 した 高 感 度 法 は 喀 痰,乳 111, 4) 番野 27(S-3): 剛, 前 田 憲 一, Protetts か らの 抽 出 液(3 10倍 phalosporinの 高 感 度 測 定 法 Chemotherapy 109 110, 1984 抽 出)を 対 象 と して も,十 分 とな った 稿中 体液 106 試 験 菌 と す るaminothiazolyl retrgeri ce32: 5 ) BENNET JN, BRODIE JL, BEMER EJ, KIRBY WM discに M : Simplified, accurate method for antibiotic assay of clinical specimens. Appl. Microbial, 採 取 し,小 容 器 中 で 凍 結 保 存 した もの を定 量 に供 す る方 法10)も,高 9250を 逸 見 昭 二: ATCC 直 接Paper 鳥井 1979 汁 な ど の 試 料 の 測 定 に適 し て お り,ま た微 量 の 組 織 な 測 定 感 度 が 保 証 され る よ う に な っ た また 臨床 現 1987 塚 本 剛 司, 成 分 を 中 心 に し た 検 討 Chemotherapy投 経 口剤 は 注 射 剤 と比 較 し て低 濃 度 領 域 で の 測 定 が 1- prodrugs 洋: 新 規 経 ロ セ フ ァ ロ ス ポ リ ンSCE-2174の ラ ッ ト, マ ウ ス, イ ヌ に お け る 生 体 内 運 命 エ ス テ ル 側 鎖 由 来 の 設 定 は妥 当 で あ っ た と考 え られ る 場 に お い て 微 量 の 試 料(液)を active 14: 感 度 法 の裏 付 が あ っ て は じ め て 可 能 6) 170 177, Microbiol. 14: 宮 村 定 男, 金沢 1966 170 177, 裕: 1966 薄 層 カ ッ プ 法 に よ る体 液 中ぺ
MICROBIOLOGICAL METHODS FOR ASSAY OF CEFOTIAM HEXETIL RELATED COMPOUNDS IN BIOLOGICAL SPECIMENS TAKESHI FUGONO and KENICHI MAEDA Analytical Laboratories, Corporate Technology, Takeda Chemical Industries, Ltd., 2-17-85 Juso-honmachi, Yodogawa-ku, Osaka 532, Japan We developed assay methods for cefotiam (bioactive form of cefotiam hexetil, CTM) and related compounds in biological specimens. For determination of CTM, an agar well mathod using Proteus mirabilis ATCC 21100 as the test organism and DST agar (OXOID, ph 8.0) as the test medium was established. The sensitivity of the mothod for CTM was about 0.1ƒÊg/ml both in 0.1 M phosphate buffer (ph 7.0) and in human serum. A method with higher sensitivity was also elaborated by using Providencia rettgeri ATCC 9250 and MacConkey agar (ph 8.0). The sensitivity of this method using agar wells and paper discs as the vehicles was about 0.03 and 0.1ƒÊg/ml respectively/ A bioautographic method using the same Probidencia strain was devised for detection of antibactetially active metabolites. By this method, CTM and two minor metabolites (SCE-1006 and SCE-1136) were shown in human plasma and urine after oral administration of cefotiam hexetil.