査読済み試験論文 n-3 脂肪酸が豊富な微細藻類を含む飼料を給与されたアトランティックサーモン (Salmo salar) の代謝 健康及び切り身の栄養価について Katerina Kousoulaki1*, Tone-Kari Knutsdatter Østbye 1, Aleksei Krasn

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1 査読済み試験論文 n-3 脂肪酸が豊富な微細藻類を含む飼料を給与されたアトランティックサーモン (Salmo salar) の代謝 健康及び切り身の栄養価について Katerina Kousoulaki1*, Tone-Kari Knutsdatter Østbye 1, Aleksei Krasnov 1, Jacob Seilø Torgersen 1, Turid Mørkøre 1 and John Sweetman 2 1 Nofima AS, Department of Nutrition and Feed Technology, N-5141 Fyllingsdalen, Norway 2 Alltech Inc., Sarney, Dunboyne, County Meath, Republic of Ireland (Received 21 October 2014 Final revision received 10 March 2015 Accepted 22 April 2015) Journal of Nutritional Science (2015), vol. 4, e24, page 1 of 13 摘要 EPA や DHA の主要な生産源である微細藻類は 動物及びヒト用の n-3 長鎖多価不飽和脂肪酸源である魚油の代替えとして最も注目されている 本試験は 魚油の添加をせず またはその添加量を減らし Schizochytrium 種の DHA を生成する藻類製品 ( オルテック社製 ) の給与量を増やして n-3 強化アトランティックサーモン (Salmo salar) を生産するにあたり 技術的 栄養的及び魚の健康面を検討する目的で行われた 試験では アトランティックサーモンのスモルト幼魚に 添加量を変えた微細藻類を加えた飼料を 12 週にわたって給与した 試験期間中はすべての魚の飼料摂取率が高く 飼料摂取後血しょうレプチン値は最終体重と反比例な相関を示した 魚の成績はすべての試験区で適正範囲内であり ( 熱成長係数 : 約 4.0 増肉係数:0.8~0.9) タンパク消化率はいずれの飼料区でも同等で 脂肪消化率は SFA( 飽和脂肪酸 16:0) の給与レベルに反比例な相関を示した 切り身の品質 (n-3 長鎖多価不飽和脂肪酸含有量 身割れの割合 きめ 解凍時のドリップロス ) については 対照区と同様にすべての試験区で良好であった サーモンの腸管 ( 中腸 : 腸管及び柔毛の基底部 ) の組織の蛍光染色及び免疫蛍光分析の結果 Schizochytrium 種の藻類の給与量を増すにつれ 粘液 胚細胞産生 誘導型 NO 合成酵素 (inos) の活性に大きな影響がもたらされることが明らかになった マイクロアレイ解析を行ったが Schizochytrium 種の藻類を飼料に添加して給与することによる サーモンへの毒性 ストレス 炎症などの負の影響は何も確認されなかった

2 表 1 本試験においてアトランティックサーモンに給与した飼料の組成 表 2 試験用飼料原料及びその成分値 ( 次ページに続く )

3 表 3 ScYE(Schizochytrium 種の藻類 + 酵母抽出物 ) の添加量を徐々に増やし 魚油含有量の添加量を減らした 飼料を給与したアトランティックサーモンの成績 魚体 血しょうレプチン

4 表 4 ScYE(Schizochytrium 種の藻類 + 酵母抽出物 ) の添加量を徐々に増やし 魚油含有量の添加量を減らした 飼料を給与したアトランティックサーモン ( ノルウェー クオリティ カット ) の切り身の品質 表 5 ScYE(Schizochytrium 種の藻類 + 酵母抽出物 ) の添加量を徐々に増やし 魚油含有量の添加量を減らした 飼料を給与したアトランティックサーモン ( ノルウェー クオリティ カット ) の切り身に含まれる脂肪酸の変化

5 表 6 試験飼料の粗タンパク 粗脂肪 熱量及び脂肪酸のアトランティックサーモンにおける見かけの消化率係 数 (% ADC) 図 1 異なる量 ( %) の ScYE( 従属栄養的に培養され スプレー ドライし 酵母抽出物によって 総 脂肪量がキロ当たり 500g になるように調整された Schizochytrium 種の藻類 ) を添加した飼料を給与したアトラ ンティックサーモンの肝臓のマイクロアレイ解析結果

6 表 7 異なる量 ( %) の ScYE を添加した飼料を給与したアトランティックサーモンの肝臓内で見ら れた異なる遺伝子発現具合の例

7 図 2 異なる量の ScYE( 従属栄養的に培養され スプレー ドライし 酵母抽出物によって 総脂肪量がキロ当たり 500g になるように調整された Schizochytrium 種の藻類 ) を添加した飼料を給与されたアトランティックサーモンの腸管内における 誘導型 NO 合成酵素 (inos) 活性 ( 疑似カラー着色 : 赤 ) F-アクチン ( 疑似カラー着色 : 緑 ) 杯細胞( 疑似カラー染色 : 黄色 ) の蛍光染色を行い 免疫蛍光分析を行った 細胞核には DAPI (4,6- diamidino-2-phenylindole; 疑似カラー着色 : 青 ) が付着していた (A) The control fish showed normal intestinal morphology and a low inos activity. Distribution and number of goblet cells (arrow) and apical F-actin (arrow head) in the enterocytes appeared normal. (B) Intestines from fish fed a diet with 1 % ScYE showed a normal morphology with respect to the number of goblet cells (arrow) and apical F-actin (arrow head), but slightly more intense apical inos activity in the enterocytes.

8 (C) In fish fed 6 % ScYE we observed an increased inos activity in the submucosa(arrow head). (D) In the villus of fish fed 6 % ScYE apical inos was more intense (arrow head) and some enterocytes and goblet cells also showed increased inos staining. (E) Inclusion levels of 15 % ScYE revealed similar inos activity in the submucosa (arrow head), but the villus (F) appeared quite different from the control fish with increased number of swollen goblet cells (arrow), more intense F-actin staining (arrow head) and higher inos activity.

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