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2 の 形態 で と り込 まれ て い くもの と結 論 した,ま た,彼 らは つ い て の幾 つか の 新知 見 を 得 て お り,以 下 に そ 総ち を 紹 この よ うな 細胞 膜 陥 入 に 由 来 す る タ ンパ ク顆 粒 とは 別 に, 介 した い.参 考 ま で に,セ ゴ ル ジ体 の二 重膜 に よ って ミ トコ ン ド リア,ERや 剖 図 を 図1お ソー ムが 封 入 され て生 じ るRNAを リボ 1.顆 ンパ ク顆 粒 と同 じ構 造 の も の に変 化 し,そ れ に は ラ イ ソ 図3Aに ゾー ムの 関与 が 考 え られ た. 粒 の 構 造 示 す よ うに,セ クロ ピア 蚕 休 眠 蛹 の脂 肪 体 細 胞 に は,ロ ゼ ッ ト状 の グ リコー ゲ ン粒(G)が タ ンパ ク顆 粒 は タ ンパ ク質 の貯 蔵 の場 と考 え られ て き の 実験 的 証拠 は 上 述 のLockeら の研 究 を除 く と,ほ と ん ど得 られ て い な い.藤 條 らは,ア クロ ピ ア蚕 を 用 い て,タ よび 図2に 示 す. 含 むRNA-protein 顆 粒 の 存 在 を 明 らか に した.後 者 の顆 粒 も最 終 的 に は タ た が,そ クロ ピ ア 蚕 の生 活 史 お よび解 メ リカ産 セ ンパ ク顆 粒 の構 造 お よび 機 能 に そ の 間 に リピ ッ ド顆 粒(L)や 在 して い る.タ 充 満 し, タ ンパ ク顆 粒(PG)が 散 ンパ ク顆 粒 に は 電 子 密 度 の 高 い 中心 部 分 と,低 い周 辺 部 分 と が あ る.図3Bで は,種 々 の程 度 に 電 子 密 度 の 高 い 部 分 を含 む タ ンパ ク顆 粒 の存 在 が 同 じ細 胞 の なか に 認 め られ,こ れ か ら電 子 密 度 の 高 い 部 分 を 少 な く含 む もの か ら多 く含 む ものへ と成長 して い く過 程 を推 察す る こ とが で き る.図3C は,タ ンパ ク顆 粒 の拡 大 写 真 で あ る が,電 子 密 度 の高 い部 分 に250Å の 間隔の結晶格子が左斜方向に走 って お り,そ の 方 向 に 結 晶 部 分 が 伸 長 す る こ とを示 唆 して い る(14). こ こに示 した セ ク ロピ ア 蚕 の タ ン パ ク顆 粒 の構 造 は,こ れ まで発 表 さ れ た他 種 昆 虫 の も の とか な り異 な る. シ ンジ ュ 蚕(5,6),ク ロバ エ(8)や カ イ 図1 セクロビア蚕の生活史 図2 818 セ ケ ロ ピ ア 蚕 の解 剖 図 化 学 と 生 物

3 コ(11)で は,電 子 密 度 の 高 い 部 分 の み か ら な るdarkbody と 呼 ば れ る顆 粒 が 存 在 す る.一 方,先 に 述 べ た セ セ リチ 図3 A:グ リコー 顆 粒(U).B:種 微 細 構 造.D:尿 Vol. 12, No. 12 ン粒(G)間 ヨウ の 一 種 で は(7,10),タ 一 な構 造 を もち,成 ンパ ク顆 粒 は 電 子 密 度 の低 い 均 熟 過 程 に あ るRNA-protein顆 粒に セ ク ロ ピア 蚕蛹 の 脂 肪 体 細 胞(14) に 散在 す る タ ン パ ク顆 粒(PG),リ ピ ッ ド顆 粒(L)お よび尿 酸 々 の程 度 に電 子 密 度 の 高 い 部 分 を 含む タ ンパ ク 顆 粒.C:タ ンパ ク顆 粒 の 酸 顆 粒 の 微 細 構 造. 819

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5 の に 対 し,後 者 で は3/4を 尿 酸 が,残 りを タ ンパ ク質 が 占 め て い る こ とが わ か る(14). 両 方 の 顆 粒 分 画 か ら可 溶 化 した タ ンパ ク質 の ア ク リル ア ミ ドゲル 電 気 泳 動 像 を 図6に 示 す.タン か らは移 動 度 の接 近 した2つ パ ク顆 粒 分 画 の 主要 バ ン ドが,一 方,尿 酸 顆 粒 分 画 か らは,そ れ ら よ り移 動 度 の か な り高 い バ ン ドが 検 出 さ れ る.そ の 他 に も弱 い バ ン ドが 存 在 す るが, そ れ らが 固 有 の 成 分 で あ るの か,あ る いは 混 入 に よ る も の な の か は 追 究 して い な い.図6に は,種 々 の ス テ ー ジ. の 脂 肪 体 タ ンパ ク質 の泳 動像 も示 して あ る.タン パ ク顆. 粒 の2つ の主 成 分 は,吐 糸 開始 期 ま で ほ とん ど確 認 で き な いが,そ の 後 の顆 粒 の 出 現 した 脂 肪 体 に は は っ き りと 検 出 で ぎ る(14).こ れ か ら も,タ ンパ ク顆 粒 分 画 か ら可 溶. 化 した2つ の 成 分 が顆 粒 の 固 有 成 分 で あ る と理 解 され よ う. 脂 肪 体 か らの タン パ ク 顆 粒 の 分 離 は,Thomasson ら(17)のシ ョウ ジ ョウ バエ を用 いたCsCl濃 度勾配遠心分 画 法 に よ る もの が報 告 さ れ た に す ぎな い が,彼 図5 分 離 した タ ン パ ク顆 粒 の 電 顕 像(14) 重 層 し,600 gで 遠 心 す る と,尿 酸 顆 粒 は 底 部 に 沈 殿 し, タ ンパ ク顆 粒 は 蔗 糖 液 の上 部 に 留 ま る.沈 殿 を緩 衝 液 に 懸 濁 し遠 心 す る操 作 を く り返 す と,き わ め て 純 度 の 高 い 尿 酸 顆 粒 分 画 が得 られ る.一 方,タ らは,分 離 した 顆 粒 は 非 常 に 強 固 で 構 成 タン パ ク質 の可 溶 化 は 不 ンパ ク顆 粒 分 画 を 集 め,さ らに段 階 的 蔗 糖 密 度 勾 配 カ ラ ム上 に 重 層 し,12,000 可 能 と記 載 した.と こ ろが,前 述 の よ うに タン パ ク顆 粒 は きわ め て不 安 定 で,低 濃 度 塩 類 溶 液 中 で構 成 タ ンパ ク 質 は た や す く可 溶化 さ れ る.一 方,尿 酸 顆 粒 は きわ め て 安 定 で,そ Thomassonら の よ うな 溶 液 中 で は ほ ぼ 完全 な 構 造 を 保 つ. の 分離 法 を検 討 す る と,彼 らの 分 離 した gで 遠 心 す る と,タ ンパ ク顆 粒 は 比 重1.22と1.26を 顆 粒 は 尿酸 顆 粒 で あ った 可 能 性 が 強 く,追 試 す る必 要 が もつ 蔗 糖 液 の 中 間 層 に 主 に 沈 降 す る.こ の よ うに して分 あ る と思 わ れ る. 離 した タ ンパ ク顆 粒 の電 顕 像 を 図5 に 示 す.顆 粒 の一 部 は破 れ て い る も の の,一 重 膜 に 囲 まれ た 完全 な 顆 粒 で 占 め られ て お り,か な り高 度 に 純 化 さ れ て い る と判 断 す る こ とが で ぎ る(14). 4.顆 粒構成成分 上 述 の よ うに し て 分 離 し た 顆 粒 で の タ ン パ ク 質,尿 DNAの 酸,RNAお 占 め る 割 合 は,タ よ び ンパ ク顆 粒 分 画 で は そ れ ぞ れ98.9,0.5,0.6 お よ び.0.0%,尿 酸 顆 粒 分 画 で は 24.1,75.1,0.6お よ び0.3%で, 前 者 で は タ ンパ ク質 が 主成 分 で あ る Vol. 12, No. 12 図6 顆 粒 か ら 可 溶 化 した タ ン パ ク 質 お よ び 脂 肪 体 タ ン パ ク 質 の ア ク リ ル ア ミ ドゲ ル 電 気 泳 動 像(14) EV:5齢 初 期,LV:5齢 末 期,SO:吐 糸 開 始 時,S:吐 後,PO:蛹 化 時,P30:蛹 化30日 後,P150:蛹 化150日 肪 体 抽 出物),PG:タン パ ク顆 粒,U:尿 酸 顆 粒. 糸 開 始5日 後(以 上脂 821

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8 1) G. R. Wyatt: "Metamorphosis", ed. by W. Etkin & L. I. Gilbert, Appleton-Century-Crofts, N. Y., 1968, p ) V. B. Wigglesworth: "The Principles of Insect Physiology", 2nd ed., Methuen & Co., London, 1965, pp ) H. Ishizaki: J. Insect Physiol., 11, 845 (1965). 6) P. A. Walker: J. Insect Physiol., 12, 1009 (1966). 7) M. Locke & J. V. Collins: J. Cell Biol., 36, 453 (1968).

9 8) G. M. Price: J. Insect Physiol., 15, 931 (1969). 9) G. H. Bishop: J. exp. Zool., 137, 501 (1958). 10) M. Locke & J. V. Collins: J. Cell Biol., 26, 857(1965). 12) A. De Loof & A. Lagasse: Z. Zellforsch., 106, 439 (1970). 13) N. M. G. Bhakthan & L. I. Gilbert: Z. Zellforsch., 124, 433 (1972). 15) A. M. Jungreis & S. Tojo: Am. J. Physiol., 224, 21 (1973). 16) S. Tojo & G. R. Wyatt: in prep. 17) W. A. Thomasson & H. K. Mitchell: J. Insect Physiol., 18, 1885 (1972). 18) J. L. Hedrick & A. J. Smith: Arch. Biochem. Biophys., 126, 155 (1968). 19) W. H. Telfer & C. M. Williams: J. Gen. Physiol., 36, 389 (1952). 20) G. M. Chippendale & B. A. Kilby: J. Insect Physiol., 15, 905 (1969). 21) G. M. Chippendale: J. Insect Physiot., 16, 1057 (1970). 22) G. M. Chippendale: J. Insect Physiol., 16, 1909 (1970). 23) G. M. Chippendale: Insect Biochem., 1, 122 (1971). 25) G. M. Price: J. Insect Phsiol., 12, 731 (1966). 26) E. A. Munn, G.M. Price & G. D. Greville: J. Insect Physiol., 15, 1601 (1969). 27) M. L. Pan, W. L. Bell & W. H. Telfer: Science, 165, 393 (1969). 28) W. H. Telfer: Ann. Rev. Entomol., 10, 161 (1965). 29) F. Engelmann: The Physiology of Insect Reproduction", Pergamon Press, London, 1970, pp ) M. P. Tombs: Plant Physiol., 42, 797 (1967). 32) B. Tronier, R. L. Ory & K. W. Henningsen: Phytochemistry, 10, 1207 (1971).

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