動物実験結果報告書

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1 国立病院機構近畿中央胸部疾患センター院長殿 23 年 3 月 1 日 動物実験責任者所属 : 臨床研究センター氏名 : 岡田全司連絡先 : 内線 3300(pu8010) 動物実験結果報告書 国立病院機構近畿中央胸部疾患センター動物実験規程第 6 条の規程に基づき 下記のとおり報告します

2 1. 承認番号 6 2. 研究課題名 Granulysin, サイトカインによる結核治療効果及び肺癌治療効果 3. 実験の結果 ( 該当項目にマークし その概要を簡潔に記述 ) 計画どおり実施 一部変更して実施 (*) 中止結果の概要 (1) 正常 C57BL/6マウスに結核菌を感染させ granulysin 蛋白やIL-6 DNA 治療を行うため granulysin 蛋白 IL-6 DNA KSP37 DNAを大量作製中である (2) granulysin Tgマウス : KSP37 Tgマウスを実験が可能な群にするためにブリーディングし 匹数をそろえつつある 2 月 15 日現在 granulysin Tgマウス264 匹 KSP37 Tgマウス67 匹 HSP65 Tgマウス68 匹 Wildは83 匹である 実験 1( 操作 1):2009 年 7 月 23 日 granulysin Tgマウス 182 匹導入 ( 平成 21 年度使用数 58 匹 ) 平成 22 年度使用数 54 匹 70 匹経過観察中 ( 未実施を含む ) 実験 2( 操作 2):2009 年 7 月 23 日 KSP37Tgマウス 90 匹導入 平成 21 年度使用数 65 匹 平成 22 年度使用数 20 匹 5 匹経過観察中 ( 未実施を含む ) 実験 3( 操作 3):2009 年 7 月 23 日 HSP65Tgマウス 41 匹導入 ( 平成 21 年度使用数 8 匹 ) 平成 22 年度使用数 33 匹 実験 4( 操作 4):2010 年 7 月 22 日 granulysin Tgマウス 11 匹導入 11 匹経過観察中 ( 未実施を含む ) 実験 5( 操作 5):2010 年 7 月 22 日 KSP37Tgマウス 20 匹導入 20 匹経過観察中 ( 未実施を含む ) 実験 6( 操作 6):2010 年 7 月 22 日 Wildマウス 15 匹導入 15 匹経過観察中 ( 未実施を含む ) 実験 7( 操作 7):2010 年 11 月 16 日 granulysin Tgマウス 82 匹導入 平成 22 年度使用数 1 匹 81 匹経過観察中 ( 未実施を含む ) 実験 8( 操作 8):2010 年 11 月 16 日 KSP37Tgマウス 21 匹導入 21 匹経過観察中 ( 未実施を含む ) 実験 9( 操作 9):2010 年 11 月 16 日 HSP65Tgマウス 16 匹導入 平成 22 年度使用数 1 匹 15 匹経過観察中 ( 未実施を含む ) 実験 10( 操作 10):2010 年 11 月 16 日 Wildマウス 36 匹導入 36 匹経過観察中 ( 未実施を含む ) を解析した granulysin Tg で抗結核効果を示した KSP37Tg でキラー T 分化誘導増強を示した 合計 109 匹使用

3 4. 成果 ( 予定を含む ) ( 得られた業績 例 : 雑誌論文 図書 工業所有権などについて 著者名 論文標題 雑誌名 巻 号 発行年 頁 出版社などを記載 必要に応じて別紙に記載 ) 1. Okada M, Kita Y, Nakajima T, Kanamaru N, Hashimoto S, Nagasawa T, Kaneda Y, Yoshida S, Nishida Y, Nakatani H, Takao K, Kishigami C, Nishimatsu S, Sekine Y, Inoue Y, Matsumoto M, McMurray DN, E.C.Dela Cruz, E.V. Tan, R.M.Abalos, J.A.Burgos, Saunderson P, Sakatani M: Novel therapeutic vaccine: Granulysin and new DNA vaccine against Tuberculosis. Human Vaccine. (in press) 2. Kita Y, Okada M, Nakajima T, Kanamaru N, Hashimoto S, Nagasawa T, Kaneda Y, Yoshida S, Nishida Y, Nakatani H, Takao K, Kishigami C, Nishimatsu S, Sekine Y, Takamori Y, McMurray DN, E.C.Dela Cruz, Tan EV, R.M.Abalos, J.A.Burgos, Saunderson P, Sakatani M.: Development of therapeutic and prophylactic vaccine against tuberculosis using monkey and granulysin transgenic mice models. Human Vaccine. (in press) 3. Masaji Okada, Yoko Kita, Toshihiro Nakajima, Noriko Kanamaru, Satomi Hashimoto, Tetsuji Nagasawa, Yasufumi Kaneda, Shigeto Yoshida, Yasuko Nishida, Hitoshi Nakatani, Kyoko Takao, Chie Kishigami, Shiho Nishimatsu, Yuki Sekine, Yoshikazu Inoue, David N. McMurray, Mitsunori Sakatani. Novel prophylactic vaccine using a prime-boost method and hemagglutinating virus of Japan-envelope against tuberculosis. Clin. Devel. Immunol. in press 4. 岡田全司. 結核 分子予防環境医学 : 生命科学研究の予防 環境医学への統合 ( 分子予防環境医学研究会編 ). 本の泉社 2010; Okada M, Kita Y. Anti-tuberculosis immunity by cytotoxic T cells granulysin and the development of novel vaccines (HSP-65 DNA+IL-12 DNA). Kekkaku. 2010;85(6): Okada M. Immunity against Mycobacterium tuberculosis (introduction). Kekkaku. 2010;85(6): Okada M, Kita Y, Nakajima T, Kanamaru N, Kaneda Y, Saunderson P, Tan E.V, N.McMurray D. A Novel Therapeutic and Prophylactic Vaccine against Tuberculosis Using the Cynomolgus Monkey Model and Mouse Model. Procedia in Vaccinology in press 8. 岡田全司. 感染 炎症 免疫新たな結核ワクチン ( 出版中 ) 9. 岡田全司 喜多洋子 金丸典子 橋元里実 西田泰子 仲谷均 高尾京子 岸上知恵 西松志保 関根有紀. 新しい結核ワクチンの開発 : 小児の結核医療. 小児科.51: , 特記事項 * 変更届が提出されていること ( 学会発表は別紙に記載 )

4 学会発表 1) A Novel Therapeutic Vaccine Against Tuberculosis Using the Cynomolgus Monkey Model. Okada M, Kita Y, Kanamaru N, Hashimoto S, Nakajima T, Kaneda Y, P. Saunderson, E.V.Tan. 41th IUATLD(The International Union Against Tuberculosis and Lung Disease), Nov, 2010, Berlin, Germany. 2) A Novel Therapeutic and Prophylactic Vaccine against Tuberculosis Using the Cynomolgus Monkey Model and Mouse Model.Okada M, Kita Y, Kanamaru N, Hashimoto S, Nishida Y, Nakatani H, Takao K, Kishigami C, Nishimatsu S, Sekine Y, Inoue Y, Nakajima T, Nagasawa T, Kaneda Y, Yoshida S, Matsumoto M, P Saunderson, E. V.Tan, E.C.D. Cruz, D McMurray, Hayashi S. 4 th Vaccine Global Congress, 3-5 Oct, 2010, Wien, Austria. 3) A Novel Therapeutic Vaccine (HVJ-Envelope/HSP65 DNA+IL-12 DNA) against Tuberculosis Using Monkey Models. in Symposium: Host-Directed Therapies in Bacterial and Fungal Infections (Invited Speaker) Okada M. 50 th ICAAC (International Conference on Antimicrobial Agents and Chemotherapy), Sep 11-15,2010, Boston, USA. 4) Novel therapeutic vaccines (granulysin and novel DNA vaccine) against Tuberculosis. Okada M. 7 th WCVII(WORLD CONGRESS ON VACCINE, IMMUNISATION AND IMMUNOTHERAPY) 2010 May Berlin, Germany. 5) Novel prophylactic and therapeutic vaccine against Tuberculosis using monkey and transgenic mice models. Kita Y, Okada M. 7 th WCVII(WORLD CONGRESS ON VACCINE, IMMUNISATION AND IMMUNOTHERAPY), May, 2010, Berlin, Germany. 6) A novel prophylactic and therapeutic vaccines against tuberculosis in the tuberculosis-sensitive mice and SCID-PBL/hu mice.kita Y, Kanamaru N, Hashimoto S, Nishida Y, Nakatani H, Takao K, Kishigami C, Nishimatsu S, Sekine Y, Inoue Y, Nakajima T, Kaneda Y, Yoshida S, D McMurray, Okada M. 14 th International Congress of Immunology, Aug, 2010, Kobe, Japan. 7) A Novel Therapeutic and Prophylactic Vaccine (HVJ-Envelope/Hsp65 DNA + IL-12 DNA) against Tuberculosis Using The Cynomolgus Monkey Model. Okada M, Kita Y, Kanamaru N, Hashimoto S, Nishida Y, Nakatani H, Takao K, Kishigami C, Nishimatsu S, Sekine Y, Nakajima T,, Kaneda Y, P Saunderson, E. V.Tan, D McMurray. 14 th International Congress of Immunology, Aug, 2010, Kobe, Japan. 8) A NOVEL THERAPEUTIC VACCINE (HVJ-ENVELOPE/HSP65 DNA+IL-12 DNA) AGAINST TUBERCULOSIS USING THE MONKEY MODEL. Okada M, Kita Y, Kanamaru N, Hashimoto S, Nishida Y, Nakatani H, Takao K, Kishigami C, Nishimatsu, Sekine Y, Nakajima T, Nagasawa T, Yasufumi Kaneda, Yoshida S, E. V.Tan, P Saunderson, E.C.Dela Cruz, D McMurray, Sakatani M. 45 th US-JAPAN CONFERENCE ON TUBERCULOSIS AND LEPROSY, Jul, 2010, Cambridge, USA 9) 結核高感受性マウスを用いた新しい結核治療ワクチン (Hsp 65 DNA+IL-12 DNA) の開発. 岡田全司, 喜多洋子, 金丸典子, 橋元里実, 西田泰子, 仲谷均, 高尾京子, 岸上知恵, 西松志保, 関根有紀, 井上義一, 吉田栄人, 中島俊洋, 金田安史, 坂谷光則. 第 50 回日本呼吸器学会学術講演会 2010 年 4 月 23 日 -25 日京都日本呼吸器学会雑誌 48 巻増刊 Page296( ) 10) ヒト結核感染モデルに最も近いカニクイザルを用いた新しい結核治療ワクチン開発. 喜多洋子, 金丸典子, 橋元里実, 西田泰子, 仲谷均, 高尾京子, 岸上知恵, 西松志保, 関根有紀, 吉田栄人, 中島俊洋, 坂谷光則, 金田安史, TanE.V., SaundersonPaul, 岡田全司. 第 50 回日本呼吸器学会学術講演会 2010 年 4 月 23 日 -25 日京都日本呼吸器学会雑誌 48 巻増刊 Page295( ) 11) ヒト結核感染モデルに最も近いカニクイザルを用いた結核に対する新しい予防 治療ワクチン開発研究. 喜多洋子 岡田全司 金丸典子 橋元里実 西田泰子 仲谷均 高尾京子 岸上知恵 西松志保 関根有紀 林清二 吉田栄人 中島俊洋 金田安史 E.V.Tan E.L.C.DelaCruz Paul

5 Saunderson. 64 回国立病院総合医学会 2010 年 11 月 26 日 -27 日福岡 12) 新しい結核治療ワクチン (HVJ- エンベロープ /Hsp65+IL-12 DNA) 及び granulysin ワクチンの開発. 喜多洋子 金丸典子 橋元里実 西田泰子 仲谷均 高尾京子 岸上知恵 西松志保 関根有紀 井上義一 坂谷光則 岡田全司. 第 80 回実験結核研究会総会 2010 年 5 月 19 日京都 13) 新しい結核治療ワクチン (HVJ- エンベロープ /Hsp65+IL-12 DNA) の開発 (SCID-PBL/hu マウスを用いた ). 岡田全司, 喜多洋子, 金丸典子, 井上義一, 坂谷光則. 第 85 回結核病学会総会 2010 年 5 月 20 日 -21 日京都結核 85 巻 4 号 Page383( ) 14) ヒト結核感染モデルに最も近いカニクイザルを用いた結核に対する新しい予防 治療ワクチン開発. 喜多洋子, 金丸典子, 井上義一, 坂谷光則, 岡田全司. 第 85 回結核病学会総会 2010 年 5 月 20 日 -21 日京都結核 85 巻 4 号 Page383( )