714 植 物 防 疫 第 63 巻 第 11 号 2009 年 岡山県で発生した Rhizobium radiobacter Ti による ブドウ根頭がんしゅ病 岡山県農業総合センター農業試験場 は じ め かわ ぐち あきら 川 口 章 12 月のサンプルから AT06 1 AT06 8 株 を

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1 714 植 物 防 疫 第 63 巻 第 11 号 2009 年 岡山県で発生した Rhizobium radiobacter Ti による ブドウ根頭がんしゅ病 岡山県農業総合センター農業試験場 は じ め かわ ぐち あきら 川 口 章 12 月のサンプルから AT06 1 AT06 8 株 を選抜し に 以下の試験に供試した ブドウ根頭がんしゅ病は土壌伝染性の細菌病であり II 保菌苗木の流通によって病原細菌が広範囲に伝搬され 病原細菌の同定 病原性 世界中のブドウ生産国で発生が問題となっている 病原 1 細菌は海外では Rhizobium vitis Ti Agrobacterium 根頭がんしゅ病菌の病原性を調べるためには 検定植 vitis Ti A. tumefaciens biovar 3 以下 学名表記は 物であるトマトを利用することが多い 分離細菌 10 菌 C システム 澤田 2007 に従う Ti は植物にがんしゅ 株の菌液 約 108 cells/ml を滅菌した針に浸してトマ を形成させる能力をもつという意味 と R. radiobacter ト 品種 ポンデローザ およびブドウ 品種 ネ Ti A. tumefaciens Ti A. tumefaciens biovar 1 オ マスカット に有傷接種したところ トマトでは が知られていたが 日本では R. vitis Ti のみが報告 接種 30 日後に ブドウでは 90 日後にがんしゅ形成が確 されていた BURR and KATZ, 1984 ; THIES et al., 1991 日 認され 接種部位から接種した菌が再分離された 細菌学的性質 本植物病理学会 2000 しかし 2005 年岡山県におい 2 て 本病の病徴を呈するブドウの組織片から R. vitis 細菌学的性質の検査項目は非常に多いが 根頭がんし Ti のコロニー形状とは明らかに異なる細菌が優占的 ゅ病菌を特徴的に区別できる検査のみを選定することは に分離された 調査の結果 筆者らはそれらの細菌が 可能である 澤田 土屋 2003 および KAWAGUCHI et al. R. radiobacter Ti であることをつきとめた KAWAGUCHI 2005 b の報告を参考にし 13 項目の検査を行った and INOUE, 2009 本稿では 発生状況や病原細菌の性 その結果を対象菌株と比較したところ 非病原性 R. 質について紹介する 実験手法などの詳細は KAWAGUCHI radiobacter Ar 4 株 と す べ て の 項 目 で 一 致 し R. and INOUE 2009 を参照されたい radiobacter Ti AtC1 株と 12 項目で一致した 非病原 I 発 生 状 況 2005 年 10 月に岡山県赤磐市の無加温施設栽培ブドウ 品種 瀬戸ジャイアンツ 9 年生 の結果枝の副梢の 切り返し部に 直径 5 cm のがんしゅ様組織が形成され たものが農業試験場にもち込まれた 続いて同年 12 月 岡山県岡山市の加温施設栽培ブドウ マスカット オ ブ アレキサンドリア 6 年生 の地上部に直径 6 cm のがんしゅ様組織が形成されているのを確認した 図 1 これらの症状はこれまで筆者が見てきた R. vitis Ti によるブドウ根頭がんしゅ病の症状とほぼ同じで あった これらのがんしゅ様組織から R. vitis 用選択培 地である 3DG 培地 BRISBANE and KERR, 1983 を用いて 病原細菌の分離を行った 得られたコロニーから 10 菌 株 10 月のサンプルから ST05 1 株および ST05 2 株 Grapevine Crown Gall Caused by Rhizobium vitis Ti in Okayama Prefecture, Japan. By Akira KAWAGUCHI キーワード ブドウ根頭がんしゅ病 Rhizobium radiobacter Rhizobium vitis 図 1 Rhizobium radiobacter Ti によるブドウ根頭がん しゅ病の症状 矢印は形成されたがんしゅを示す 42

2 Rhizobium radiobacterti a R. R. radiobacter radiobacter TiAtC1 TiAr 4 R. rhizogenes TiCh Ag 2 R. vitisti G Ag b A 7 D L 5 25 KR K KR K KR K AC A KR A a ST05 1ST05 2AT06 1AT06 2AT06 3AT06 4AT06 5AT06 6AT06 7AT06 8 b KRAC NT R. radiobacter Ar 4 KAWAGUCHI et al., 2005 br. radiobactertiatc1 L 1 L R. radiobacter L BURR and KATZ, 1983 ; SALOMONE et al., 1996 ; 1998 L 3 PCR 16S rdna Ti pti virc virc1 virc2 R. vitis 16S rdna PCR KAWAGUCHI et al., 2005 a virc 2 pti R. vitis AT06 1 AT S rdna 1.4 kbp DNA DDBJ 600 bp 500 bp 400 bp M R. radiobacter 100 R. radiobacterti III Rhizobium 570 bp 414 bp 2 PCR KAWAGUCHI et al., 2005 a Rhizobium vitisti MDNA 1 2 R. radiobacterti 3 4R. vitisti bp R. vitis 16S rdna 414 bp virc 1 43

3 Rhizobium R. vitistivat07 1 AT06 1 AT R. vitistig Ag 27 R. radiobacterti ST05 1 AT06 1 R. vitistivat07 1 R. vitistig Ag 27 R. radiobactertiatc1 R. rhizogenesti A. rhizogenestia. tumefaciens biovar 2Ch Ag 2 2 R. radiobacterti R. vitisti AT06 1 VAT07 1 pti virc1 virc2 2 Rhizobium mm a b c ST a a AT a a Rhizobium vitisti VAT07 1 d a a G Ag a b R. radiobacterti AtC b b R. rhizogenesti Ch Ag b b R. radiobacter Ar c c a Tukey 1 b c d 2 virc1 virc2 pti Rhizobium virc1 virc2 350 bp DDBJ 3 R. vitisti R. radiobacterti R. vitisti 3 R. radiobacterti R. rhizogenesti 3pTi DNA Rhizobium VELAZQUEZ et al., 2005 R. radiobacterti R. vitisti 100 pti AT06 1 AT06 8 VAT07 1 AT06 1 AT06 5 AT06 1 pti pti R. vitis DNA R. vitisti A D KAWAGUCHI et al., 2008 a A BC D A BC D pti pti DNA Rhizobium R. radiobacterti R. rhizogenesti R. radiobacterti R. vitisti 44

4 Rhizobium radiobacterti 717 AB2/ MAFF At YGAt32 3 G Ag 4 G Ag 27 G Ag 52 G Ag 62 FZ 3 1 FM 3 2 MAFF MAFF MAFF A5 8 At 5 G Ag 19 G Ag 21 G Ag 23 G Ag ISP 2 IK MAFF C58 Bo542 CH3 770 AtC1 A B R. vitisti Rhizobium rhizogenesti R. radiobacterti 0.1 ST05 1 ST05 2 AT06 1 AT06 2 AT06 3 AT06 5 G Ag 60 YHsM 2 VAT07 1 FK 2 2 MM 2 OSW 1 YHtZ 2 YMK 1 NKZ 2 R. radiobacterti C D R. vitisti 3 Ti pti virc1 virc2 350 bp Rhizobium R. vitisti R. radiobacterti R. radiobacterti R. radiobacter PSA R. vitis 3 R. radiobacter R. radiobacter Rhizobium pti R. radiobacterti R. vitisti R. radiobacterti Rhizobium PCR 2009 R. vitisti R. vitis VAR03 1 KAWAGUCHI et al., 2005 b ; 2007 ; 2008 b2009 R. radiobacterti 45

5 BRISBANE, P. G. and A. KERR1983: J. Appl. Bacteriol. 54 : BURR, T. J. and B. H. KATZ1984: Phytopathology 73 : : Plant Dis. 68 : : ibid. 82 : KAWAGUCHI, A. et al.2005 a: J. Gen. Plant Pathol. 71 : et al.2005 b: ibid. 71 : et al.2007: ibid. 73 : et al.2008 a: Plant Pathol. 57 : et al.2008 b: Phytopathology 98 : and K. INOUE2009: J. Gen. Plant Pathol. 75 : : 63 : : 428 pp : 23 : : 73 : : 69 : THIES, K. L. et al.1991: Plant Dis. 75 : SALOMONE, J. Y. et al.1996: Mol Plant Microbe Interact. 9 : et al.1998: ibid. 11 : VELAZQUEZ, E. et al.2005: Mol. Plant. Microbe. Interact. 18 :

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