ISSN 0916-3328 東京大学アイソトープ総合センター VOL. 37 NO. 4 2007. 3. 26 アイソトープ総合センターの将来展望 40 18 18 20 3 800 1/3 1300 14 18 20 3 19
2 生きた細胞内の分子過程を 時間 空間計測する蛍光プローブの開発 1. はじめに Fura-2 Fura-2 198 1, 2 3, 4 2. 生体脂質分子の機能とその分析 3,4,- phosphatidylinositol 3,4,-triphosphate; PI (3,4,) P 3 1 PI 3,4, P 3 PI 3,4, P 3 PI 3,4, P 3 PI 3,4, P 3 PI 3,4, P 3 100
VOL. 37 NO. 4 2007. 3. 26 3 PI 3,4, P 3 PI 3,4, P 3 Fllip 3.PI(3,4,5)P 3 の蛍光プローブの設計 Fllip 2 Fluorescence Resonance Energy Transfer; FRET PI 3,4, P 3 CFP YFP CFP YFP Green Fluorescent Protein; GFP 6 PI 3,4, P 3 Grp1 Pleckstrin Homology Domain; PHD CFP PHD YFPGlu-Ala-Ala-Ala-Arg 図 1 ホスファチジルイノシ PI 3,4, P 3 トール 3,4,5- 三リン酸 (PI (3,4,5)P 3 ) の構造 hinge PHD-CFP PI 3,4, P 3 Fllip PHD PI 3,4, P 3 PHD-CFP CFP YFP FRET FRET CFPYFP 図 2 PI(3,4,5)P 3 の蛍光プローブ (Fllip; フリップ ) の原理 Ex, ; Em, ; MLS,, CFP, ; YFP, ; PHD, ; FRET, FRETCFP YFP CFPFRET YFP YFP FRET
4 4.PI(3,4,5)P 3 の可視化計測 PI 3,4, P 3 Fllip-pm PDGF 3 CFP/YFP PI 3,4, P 3 Fllip Fllip Fllip PI 3,4, P 3 plasma membrane; pm Gln-Gly-Cys-Met-Gly- Leu-Pro-Cys-Val-Val-Met endomembranes; em Gln-Gly-Ser-Met-Gly-Leu-Pro-Cys-Val-Val-Met PI 3,4, P 3 Fllip-pm, Fllip-em PDGF Fllippm FRET PDGF PI 3,4, P 3 PI 3,4, P 3 Fllip-em PDGF Fllip-em2 FRET 3 図 3 PI(3,4,5)P 3 の細胞内動態 PI 3,4, P 3 PI 3,4, P 3 Fllip-pm Fllip-em PI 3,4, P 3 PI 3,4, P 3 2 PI 3,4, P 3 PI 3,4, P 3 Fllip PI 3,4, P 3 PI 3,4, P 3 Fllip Fllip Fllip PI 3,4, P 3 Fllip PHD PI 3,4, P 3 PHD 7 5. おわりに
VOL. 37 NO. 4 2007. 3. 26 文献 1 ) Grynkiewicz, G.; Poenie, M.; Tsien, R.Y., A new generation of Ca 2+ indicators with greatly improved fluorescence properties. J. Biol. Chem. 198, 260, 3440-340. 2 ) Tsien, R.Y., Fluorescence imaging creates a window on the cell. Chem. Eng. News 1994, 18, 34-44. 3 ) Umezawa, Y., Genetically encoded optical probes for molecular processes in living cells. Trac-Trends Anal. Chem. 200, 24, 138-146. 4 ) Sato, M., Imaging molecular events in single living cells. Anal. Bioanal. Chem. 2006, 386, 43-443. ) Sato, M.; Ueda, Y.; Takagi, T.; Umezawa, Y., Production of PtdInsP 3 at endomembranes is triggered by receptor endocytosis. Nature Cell Biol. 2003,, 1016-1022. 6 ) Miyawaki, A.; Tsien, R.Y., Monitoring protein conformations and interactions by fluorescence resonance energy transfer between mutants of green fluorescent protein. Method. Enzymol. 2000, 327, 472-00. 7 ) Sato, M.; Ueda, Y.; Umezawa, Y., Imaging diacylglycerol dynamics at organelle membranes. Nature Methods 2006, 3, 797-799. システインの酸化的修飾による蛋白機能の調節 はじめに Cys -SOH -SO 2 H -SO 3 H -S-S- Cys
6 OxyR ジスルフィド結合の形成と開裂による転写因子 OxyRの活性制御 OxyR OxyR OxyR OxyR RNA OxyR OxyR OxyR OxyR OxyR 6 Cys 199 208 2 Cys 2 Cys OxyR SDS SDS-PAGE Cys Cys Cys Cys Cys SDS-PAGE Cys OxyR 199-Cys 208-Cys in vivo 1 OxyR OxyR C2S 2 CysC143S C180S C29S OxyR C199S C208S
VOL. 37 NO. 4 2007. 3. 26 7 図 1 システイン セリンのアミノ酸置換を持つ変異型 OxyR でのジスルフィド結合形成 OxyR 199 208 Cys 30 1µM 30µM OxyR OxyR OxyR おわりに Yap1 Cys Cys 平成 18 年度受託研究等の受入について 4,998,000 1,200,000
8 巻出義紘先生の最終講義行われる 3 3 9 3 40 18 12 37 3 1 平成 19 年度新規放射線取扱者全学一括講習会のお知らせ RI RI RI
VOL. 37 NO. 4 2007. 3. 26 9 19 19 10 20 3 12 RI X RI 132 A 19 14 1 60 132 B 19 14 16 60 133 A 19 22 23 60 133 B 19 22 24 60 134 A 19 6 18 19 60 134 B 19 6 18 20 60 13 A 19 7 2 26 60 136 A 19 10 9 11 60 136 B 19 10 9 12 60 RI 17 A 19 10 10 11 20 17 B 19 10 10 12 20 RI 12 60 X 100 19 17 120 101 19 18 120 102 19 2 120 103 19 7 2 120 104 19 9 28 120 X 14 19 9 28 30 委員会だより 18 17 19 1 1 18 18 19 1 29 19 1 30 18 19 19 2 13 18 20 19 2 27 19 3 18 21 19 3 12 18 22 19 3 22 18 23 19 3 30
10 センター日誌 19 1 9 18 3 16 18 19 1 30 2 2 2 16 19 opqropqropqropqropqropqropqropqropqropqropqropqropqropqropq 東京大学アイソトープ総合センターニュース 目 次 巻頭言 1 研究紹介 2 報告 18 7 8 学内 RI 管理メモ 19 8 委員会だより 9 センター日誌 10 編集後記 4 19 10 3 VOL. 37 NO. 4 2007 3 26 113-0032 11 16 03 841 2881 http://www.ric.u-tokyo.ac.jp/