N [ GLYCAN ANALYSIS SLUTINS ]
[ GLYCAN ANALYSIS SLUTINS ] [ GLYCAN ANALYSIS SLUTINS ] N N 3 2
[ GLYC AN ANALYSIS SLUTINS ] インタクトプロテイン解析のワークフロー 糖タンパク質 Intact mab Mass Check スタンダード LC 分析カラムにインジェクション UV 検出による LC 分析 QTof MS による質量分析 MassPREP 脱塩カートリッジ または ACQUITY UPLC BEH C4 300Å カラム MassPREP タンパク質ミックススタンダード ACQUITY UPLC システム Xevo G2-XS QTof SYNAPT G2-Si HDMS LC 分析カラムに インジェクション UV 検出による LC 分析 およびインタクト質量解析キット サブユニット解析のワークフロー 糖タンパク質 還元 オプション と IdeS 酵素消化 Intact mab Mass Check ACQUITY UPLC PrST BEH C 4 300Å カラム スタンダード Alliance HPLC または ACQUITY UPLC システム 糖ペプチドマッピングのワークフロー 糖タンパク質 還元 アルキル化 酵素消化 Intact mab Mass Check 糖ペプチド断片 糖鎖の無いペプチド断片 スタンダード LC 分析カラムに インジェクション UV 検出による LC 分析 ACQUITY UPLC システム 逆相カラムまたは ウォーターズ BEH Amideカラム 単糖組成解析のワークフロー 糖タンパク質 単糖類の遊離 酸加水分解 蛍光標識 LC 分析カラムに インジェクション ACQUITY UPLC BEH C18 130Å 1.7 µm 2.1 100 mm カラム 3
+51 UNIFI MassLynx +54 +48 G0F/G0F G0F/G1F G1F/G1F, G0F/G2F G1F/G2F G2F/G2F 2000 2500 3000 3500 m/z 147700 148000 148300 148600 148900 149200 mass ESI-TF MS ESI-TF MS 0.24 Fc/2 +Glycans + 0.18 LC Fd QTof MS Xevo G2-XS QTof MS SYNAPT G2-Si HDMS MassLynx A214 0.12 0.06 0.00 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 min A 6 MS BPI B QTof MS Xevo G2-XS QTof SYNAPT G2-Si HDMS MassLynx UNIFI 4 UV 280 nm 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 min 50 45 40 35 1. N-acetylglucosamine (GlcNAc) 2. N-acetylgalactosamine (GalNAc) 3. Galactose (Gal) 4. Mannose (Man) 5. Glucose (Glc) 6. Fucose (Fuc). 3 4 5 30 25 6 EU 20 2 LC Alliance HPLC ACQUITY UPLC Empower 3 15 10 5 0 1-5 10 15 20 25 30 min
N 5
[ GLYCAN ANALYSIS SLUTINS ] GlycoWorks Rapi Fluor-MS N-Glycan N Rapi Fluor-MS MS N / 6
[ GLYC AN ANALYSIS SLUTINS ] 特長 糖タンパク質 糖タンパク質遊離 N 型糖鎖解析は多くの情報が得られる手法ですが その サンプル調製手順は複雑です PNGase F により糖鎖を切り出した後 効果的な分離と検出を行うには標識が不可欠です ウォーターズの新し いプロトコールは 下記のような幅広いワークフローに利用できます 糖鎖の同定 糖鎖の構造解析 糖鎖のモニタリング 遊離標識N 型糖鎖 糖タンパク質 Intact mab Mass Check N 型糖鎖 の切り出し 糖鎖標識 GlycoWorks Rapid PNGase F と GlycoWorks Rapi Fluor-MS に バッファー および Rapi Gest SF 試薬 スタンダード よる標識 LC 分析カラムに インジェクション 標識糖鎖の精製 Glycan BEH Amide カラム Glycan Performance Testスタンダード GlycoWorks HILIC µelution プレート またはカートリッジ デキストランキャリブレーションラダー 蛍光検出による LC 分析 特性解析または質量確認 Alliance HPLC または ACQUITY UPLC システム ACQUITY QDa MS 検出器 Xevo G2-XS QTof MS SYNAPT G2-Si HDMS 蛍光 FLR EU 1.2E+6 0.0E+0 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 min 0.0E+0 結果 MS データ処理 Intensity 1.2E+6 UNIFI MassLynx Empower ソフトウェア 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 min 糖鎖解析 モニタリング および特性解析に新しい可能性をもたらす 新規 GlycoWorks Rapi Fluor-MS 試薬の背景となるサイエンスをご紹介します 弊社のビデオ waters.com / SeeT hescience をご覧ください 7
[ GLYC AN ANALYSIS SLUTINS ] 糖タンパク質 N 型糖鎖サンプルの調製をスピーディーでシンプルにできたら 標識された N 型糖鎖サンプルを簡単かつ短時間で調製 エラーとサンプルロスが低減 皆様のラボにおける分析と他のラボとの間で容易にメソッド 移管可能 3 ステップで 30 分 糖タンパク質 Intact mab Mass Check N 型糖鎖の切り出し 糖鎖標識 標識糖鎖の精製 GlycoWorks Rapid PNGase F と バッファー Rapi Gest SF 試薬 GlycoWorks Rapi Fluor-MS GlycoWorks HILIC µelution プレート による標識 またはカートリッジ スタンダード ステップ 1 15 分 未満 RapiFluor-MS N-Glycan キットの ショートデモビデオ 2 分間 をご覧ください www.waters.com/rapifluorms 8 ステップ 2 ステップ 3 5分 10 分
[ GLYCAN ANALYSIS SLUTINS ] MS MS N Rapi Fluor-MS 100 100 MS BPI Glycan NH NH N NH N 90 80 90 80 AB NH 2 Glycan NH NH 2-AB Glycan NH NH 2 N NH Glycan NH % 70 60 50 40 30 20 10 0 RapiFluor-MS 2X 52.5 AB 14X 7.0 7.0* 2-AB * 70 60 50 40 30 20 10 0 RapiFluor-MS 1000X 160X AB 0.1 0.6 2-AB 3X 30.0* * 2-AB 14 MS 160 2 MS 1,000 * www.waters.com/xevog2xs 9
[ GLYCAN ANALYSIS SLUTINS ] MS MS N 1.2E+6 FLR Intensity EU 0.0E+0 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 min 1.2E+6 MS 0.0E+0 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 min RapiFluor-MS ACQUITY QDa MS MS 1 www.waters.com/qda 10
[ GLYCAN ANALYSIS SLUTINS ] GlycoWorks RapiFluor-MS N-Glycan 96 GlycoWorks GlycoWorks GlycoWorks GlycoWorks ACQUITY UPLC Glycan BEH Amide 1.7 µm 2.1 150mm GlycoWorks RapiFluor-MS N-Glycan 96 GlycoWorks GlycoWorks GlycoWorks GlycoWorks 176003635 176003606 176003635 176003606 RapiFluor-MS 50 µg/ 186007982 RapiFluor-MS Glycan Performance Test 400 pmol/ 186007983-186007081 186007986 GlycoWorks Rapi Fluor-MS N-Glycan 186007887 Rapi Fluor-MS N-Glycan ACQUITY QDa MS 0120-800-299 9:00am - 17:15pm WEB waters.com/glycans 11
[ GLYCAN ANALYSIS SLUTINS ] Rapi Fluor-MS Rapi Fluor-MS 5 Rapi Fluor-MS N NH N MS N NHS NH MS GlycoWorks RapiFluor-MS Rapi Fluor-MS Xevo G2-XS QTof SYNAPT G2-Si HDMS MS MS/MS UPLC FLR Xevo G2-XS QTof 1130.9423, 2+ 1: TF MSES+ FA2G2Ga1BPI 6.93e6 2-AB 10 µg 1.5 RapiFluor-MS 0.1 µg 1 5.5 10.0 15.0 20.0 25.0 min 1: TF MSES+ BPI 6.93e6 800 1600 m/z 2-AB N RapiFluor-MS N LC-MS ESI+MS RapiFluor-MS 100 MS 12
[ GLYCAN ANALYSIS SLUTINS ] Rapi Fluor-MS ACQUITY QDa MS MS Empower 3 GMP UPLC ACQUITY QDa ACQUITY UPLC H-Class Bio 480 FLR EU 240 0 10 15 20 25 30 min 3.2x10 6 MS Intensity 1.6x10 6 0 10 15 20 25 30 min ACQUITY UPLC H-Class Bio ACQUITY QDa MS RapiFluor-MS N 13
Australia 61 2 9933 1777 Austria 43 1 877 18 07 Belgium and Luxembourg 32 2 726 1000 Brazil 55 11 4134 3788 Canada 1 800 252 4752 China 86 21 6156 2666 Czech Republic 420 2 617 11384 Denmark 45 46 59 8080 Finland 358 9 5659 6288 France 33 1 30 48 72 00 Germany 49 6196 400 600 Hong Kong 852 2964 1800 Hungary 36 1 350 5086 India 91 080 49292200 03 Ireland 353 1 448 1500 Israel 9723 3731391 Italy 39 02 265 0983 Japan 81 3 3471 7191 Korea 82 2 6300 9200 Mexico 52 55 52 00 1860 The Netherlands 31 76 508 7200 Norway 47 6 384 6050 Poland 48 22 101 5900 Portugal 351 21 893 61 77 Puerto Rico 1 787 747 8445 Russia/CIS 7 495 727 4490 / 290 9737 Singapore 65 6593 7100 Spain 34 93 600 9300 Sweden 46 8 555 115 00 Switzerland 41 56 676 7000 Taiwan 886 2 2501 9928 www.waters.com/glycans UAE 971 4 214 62 38 UK 44 208 238 6100 US 1 800 252 4752 www.waters.com 140-0001 1-3-12 5 TEL 03-3471-7191 FAX 03-3471-7118 532-0011 5-14-1011F TEL 06-6304-8888 FAX 06-6300-1734 Waters The Science of What's Possible ACQUITY UPLC UPLC Alliance ACQUITY QDa UNIFI SYNAPT Empower Xevo MassPREP MassLynx Waters Corporation RapiFluor-MS GlycoWorks RapiGest Waters Corporation 2015 Waters Corporation. Printed in Japan. 2015 4 720005271JA 04A A JISQ9001:2008(IS9001:2008) JMAQA-331 1999 05 31