49619, H. influenzae ATCC49247, C. jejuni ATCC 33252, C. fetus ATCC15296, B. fragilis ATCC 25285, C. soldellii ATCC9714, P. rnagnus ATCC lin (ABPC), e

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1 Key words: MIC, agar dilution method, fastidious bacteria, Etes(R)

2 49619, H. influenzae ATCC49247, C. jejuni ATCC 33252, C. fetus ATCC15296, B. fragilis ATCC 25285, C. soldellii ATCC9714, P. rnagnus ATCC lin (ABPC), erythromycin (EM), clindamycin (CLDM), minocycline (MINO), vancomycin Table 1 Culture medium and conditions for suscepitibility tests MHA: Mueller-Hinton agar *Used for Etest only

3 新規MIC測 Fig. 1 Susceptibility of Cefotaxim: (VCM)で H. 定 キ ッ トを用 い た抗 菌 力 の 測定 zae to cefotaxim 2 )寒 CTX,IPM,OFLXで 問 目盛 り に つ い MHチ 同 様 に 行 い,菌 久 間 製 作 所)を 本 化 学 療 法 学 会 指 定 の5%馬 ョ コ レ ー ト寒 天 培 地 を 使 用 し た.抗 PCG(萬 液 は ミ 使 用 し て104 な る よ う 接 種 し た.H.influenzaeの 培 地 は,日 有 製 薬),ABPC(明 キ ス ト),IPM(萬 血 液 加 友 フ ァ ル マ シ ア-ア MINO(日 本 レ ダ リ ー),VCM(塩 ッ プ ジ ョ ン), 野 義 製 薬)の 天 ら に寒 天 平 板 をlog2に 変 順 位 和 検 定 法 に よ る有 相 関係 数 お よび 回帰式 な 成 績 S.pneumoniae に 対 す るPCG,ABPC,CTX,IPM, EM,MINO,VCMの7薬 剤 のMICを 比 較 し た. 対 す るMICは μg/mlに 分 布 し,MIC50は0.5μg/ml, MIC90は4μg/mlで あ り,Etest(R)で penicillin-resistant は それ ぞれ あ り,半 数 以 上 の 株 が Streptococcus 平 板 希 釈 に 合 わ せ てABPC,EM,CLDM, (PRSP)と MINO,VCMで 6薬 剤 に 対 す るMICは,Etest(R)と は >64μg/m,PCG, 内,±2log2(2管 ど に よ り統 計 学 的 に 解 析 し た ,0.5,2μg/mlで 囲 が 広 い が,寒 差)以 寒 天 平 板 希 釈 法 で のPCGに 測 定 値 の評 価 と統 計 処 理 示 し た. 測 定 し たMIC値 換 し た 値 で,Wilcoxonの 被 験 菌39株 を 受 け 使 用 し た. 平 成10年10月20日. に つ い て は,菌 内 に 一 致 す る 値 を 求 め た.さ 希 釈 法 とEtest(R)で 1. 製 薬 メ ー カ ー よ り分 与 Etest(R)は 測 定 可 能 なMIC範 差)以 が ±1log2(1管 菌薬 は 野 義 製 薬), CLDM(住 3. Etest 分 布,MIC50,MIC90を 意 差 の 検 定,Peasonの 治 製 菓),CTX(ヘ 有 製 薬),EM(塩 9薬 剤 の 原 末 に つ い て,各 the 天 平 板 希 釈 法 を 基 準 と し た 場 合 にEtest(R) のMIC値 日本 化 学 療 法 学 会 標 準 法 に 準 じ て 行 っ た3).す CFU/spotと by は >32μg/mlの 種 ご と にMICの ま た,寒 の 数 値 に 準 じ て 判 定 し た2). 天平板 希釈法 ク ロ プ ラ ン タ ー(佐 (AM) 範 囲 で 表 し た.測 定 さ れ たMIC値 あ り,中 な わ ち 前 培 養 はEtest(R)と ampicillin Ampicillin: >256ƒÊ/g/ml (PCG),cefotaxime(CTX),imipenem(IPM) て はNCCLS法 and 0.016ƒÊg/ml は μg/ml,benzylpenicillin で は μg/mlで (CT) 1019 判 定 さ れ た(Table2).VCM以 pneumoniae 外の 寒 天平板希 釈

4 Table 2 Range of MICE, MIC50, and MIC90S for 154 strains of fastidious bacteria

5

6 Table 3 Comparison of Etest(R) MICES with agar dilution MICS

7 6. Corynebacterium spp. 7. Eikenella corrodens, Capnocytophaga ochracea, Listeria monocytogenes

8 Table 4 Comparison of MICs using Wilcoxon test, Peason's correlation coefficient and regression line *: <0.05 significant **: <0.01 significant

9 Chemotherapy 1981; 29: ) Baker CN, Stocker SA, Culver DH, Thornsberry C: Comparison of the E test to agar dilu- tion, broth microdilution, and agar diffusion susceptibility testing techniques by using a special challenge set of bacteria. J Clin Microbiol 1991; 29: ) Jorgensen JH, Howell AW, Maher LA: Quantitative antimicrobial susceptibility testing of Haemophilus influenzae and Streptococcus pneumoniae by using Etest. J Clin Microbiol 1) National Committee for Clinical Laboratory Standards: Perfomance standards for antimi- disk susceptibility tests-sixth edition; crobial Approved standard. NCCLS Document M2-A6. Wayne, Pennsylvania, ) National Committee for Clinical Laboratory Standards: Methods for dilution antimicro- susceptibility tests for bacteria that grow bial aerobically-fourth Edition; Approved Standard. NCCLS Document M7-A4. Wayne, Pennsylvania, 1997

10 1991; 29: ) Jacobs MR, Bajaksouzian S, Appelbaum PC, Bolmstrom A: Evaluation of the E-test for susceptibility testing of pneumococci. Diag Microbiol Infect Dis 1992; 15: ) Carolyn NB: The E-test and Campylobacter 13) Huang MB, Baker CN, Banerjee S, Tenover jejuni. Diag Microbiol Infect Dis 1992; 15: ) Caderbrant G, Kahlmeter G, Liungh A: The E test for antimicobial susceptibility testing of Helicobacter pylori. J Antimicrob Chemother 1993; 31: ) Stone GG, Shortridge D, Versalovic J, et al: A PCR-oligonucleotide ligation assay to determine the prevalence of 23S rrna gene mutations in clarithromycin-resistant Helicobacter pylori. Antimicrob Agents Chemother 1997; 41: ) Citron DM, Ostovar MI, Karlsson A, Gold-stein EJC: Evaluation of the E test for suscepitibility testing of anaerobic bacteria. J Clin Microbiol 1991; FC: Accuracy of the E test for determining antimicrobial suseptibilities of Stapylococci, Enterococci, Campylobacter jejuni, and Gramnegative bacteria resistant to antimicrobial agents. J Clin Microbiol 1992; 30: ) McNughton RD: Cavitating pneumonia caused by Corynebacterium group JK. J Clin Microbiol 1988; 26: ) Appelbaum PC: Septicemia due to Capnocytophaga (Bacteroides ochraceus) in Hogikin's ease. Ann Inten Med, 1979; 90: 716. dis- Evaluation of a New Method for Susceptibility Testing against Fastidious and Unusual Bacteria Sayoko KAWAKAMI1), Yasuo ONO2), Junko KATO2) & Yukihisa MIYAZAWA1) Department of Central Laboratory, Teikyo University Hospital 1) Department of Internal Medicine, Teikyo University School 2) of Medicine The susceptibilities of 154 clinical isolates of fastidious and unusual bacteria were determined by the Etest(R), and were compared with the MICs for these strains obtained by the agar dilution method. Antimicrobial agents; benzylpenicillin, ampicillin, cefotaxime, imipenem, erythromycin, clindamycin and minocycline were used in this study. In general, the Etest(R) MICs were rapidly and easily interpreted. The Etest(R) MICs agreed within }1log2 and }2log2 dilution, 87.6% and 98.2% respectively in all strains tested. MICs of vancomycin with the Etest(R) for S. pneumoniae and other Streptococci tended to be 1 to 2log2 dilution higher than those of the agar dilution method. MICs of erythromycin for the other Streptococci also tended to be 1 to 2log2 dilution higher. However, there were no significant differences for H. influenzae, Campylobacter spp., H. pylori, Capnocytophaga spp., E. corrodens, M. catarrhalis, N. gonorrhoeae, Corynebacterium spp., L. monocytogenes and Anaerobic bacteria. As mentioned above, the Etest(R) represent a potential method for antimicrobial susceptibility testing of these fastidious and unusual bacteria.

Key words: yeast, Etest(R), microdilution method, MIC Table 1 MICs of quality control strains The data shown are the range of MIC performed in triplicate Table 2 Renge of MICs, MIC50s and MIC90s for 81

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