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- あいね おとべ
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2 免疫組織化学の基礎と応用 蓮井和久鹿児島大学大学院医歯学総合研究科 講師 この講義は 2007 年から大学院専門基礎過程の選択科目として開講しているものである 教科書には 改訂四版渡辺 中根の酵素法 ( 名倉宏 長村義之 堤寛編集 ) 学際企画を用いています それに 最近のポリマー法の開発等と私の研究への応用等を基礎にしています III. 各酵素法 a) 酵素直接法基本となる酵素法である 一次が酵素で標識されており この酵素標識一次が細胞や組織のと反応し 酵素の呈色反応を行い その発色と顕微鏡で観察する 前述したように 一次を標識する必要があり 頻繁に用いる一次の場合以外には 余り用いられていない しかし 複数の酵素をポリマー等に標識して一次を標識する技術が開発さ 可視化酵素複合体反応酵素直接法 れており 外科病理診断に用いられる一次では 有用性が高い b) 酵素間接法 i. 酵素間接法 ( 古典的 ) 同じ動物種の一次抗 体の検出に用いる二次 を酵素標識する方 法である 一般に 二 次はポリクローナ ルであることから 一次の有する複数 のエピトープ (epitope= ) を二次との プロトコールと産物 1) 工程表 2) グラフィックな工程表 酵素間接法の染色工程 1) 脱パラフィン 2) 内因性 Peroxidase の不活化 3) 親水化 4) 非特異反応抑制処理 5) 一次反応と洗浄 6) 酵素複合体反応と洗浄 7) 酵素呈色反応と洗浄 8) 核染色 脱パラフィン 内因性 Peroxidase の不活化 非特異反応抑制処理 一次反応と洗浄 親水化 酵素複合体 反応が生じることから 直接法よりも 検出感度が高くなる 免疫組織化学の各方法を理解するのに 上の図に示す様に プロトコール ( 工 程表 ) グラフィックな工程表と産物のモデル図がある プロトコールとグラフ ィックな工程表は等価な表現であるが 産物のモデル図では 工程表 4) の非特 酵素複合体反応と洗浄 酵素間接法 酵素呈色反応と洗浄 核染色
3 異反応抑制処理等の表現が出来ない欠点がある ii. PAP 法 (Peroxidase - anti-peroxidase method) HRP(peroxidase) と抗 HRP で 複合体 (PAP complex) を作り 同種の一次と 抗 HRP をそ の動物種のへ のでブリッジ を形成する増感法 である しかし 右図に 示すような欠点が PAP 法の欠点 一次反応と洗浄 1) PAP complex の 成分との反応 ( 非特異反応は強くなる ) 2) PAP complex は大きな分子 ( 組織浸透性が低い ) 二次反応と洗浄 3) 過剰部では 二次の 2 つの Fab の反応部分が過剰な一次と反応して PAP complex と反応しない 4) 実際の検出感度は 間接酵素法源法と同じ PAP 複合体反応と洗浄 Peroxidase Rabitt anti- Peroxisae abitbody complex (PAP complex) あり 特に 4) の問題から 余り用いられなかった Fab 酵素呈色反応と洗浄 Fab 二次 (Anti-Rabbit) 一次 (Rabitt) iii. ABC 法 /sabc 法 /LSAB 法 (Avidin-biotin complex method) 1980 年代から 1990 年代に用いられた 代表的な高感度の 酵素間接法で ある 二次をビオ チンで標識し ( ビオ チン化二次 ) ビオチン化した HRP 等の酵素とア ビチンないしスト レプトアビチンの 複合体 ( ABC Biotinylated HRP streptavidin 複合体形成反応 (30min) 問題点 : 内因性ビオチン Biotin と Avidin/Streptavidin の結合の乖離条件 1) 0.45% H 2 O 2 溶液での酸化 2) 120 で 15min の加熱 3) 6~8M グアニジン塩酸 ph1.5 溶液での処理 complex) を作るか HRP 等の酵素で標識したストレプトアビチン (HRP 標識ス トレプトアビチン ) をビオチン化二次と反応させる方法である 非常に感 度が良い方法である しかし 内因性ビオチンないしビオチン様蛋白とのクロ ス反応が背景染色を増強し 時に 特異反応と区別が出来ないことがあること から ビオチンフリー法の開発が行われた ビオチンに代えて生体内に存在し HRP の代わりに ALP を用いることも可能 ABC(sABC) 法 HRP-labeled streptavidin LSAB 法
4 ない FITC 等を二次に標識し 酵素標識した抗 FITC( 三次 ) を反応さ せる方法等が開発された iv. 酵素標識プロテイン A 法 (Enzyme-labeled protein A method) 黄色ブドウ球菌の細胞膜構成蛋白であ る protein A ないし G 群ブドウ球菌の Protein G のの 2 つの 成分と結合す る性格を利用した方法である 感度は酵素間接法と同等であり また PAP 法の二次の変わりに用い ることも出来る また HRP の代わりに Gold や Silver 粒子を標識することも可能 Gold 標識の場合には 銀増感の処理も行 いえる しかし の 成分は 時に 非特 異反応の原因ともなることから また F(ab) 2 や F(ab) のの検出には使えな いことなど等から 余り普及しなかった Gold 標識の場合には 免疫電顕等で は使われたことがあるようである v. 高分子ポリマー法 ビオチンフリー法の一つとして 開発されたポリマー法では 酵素と をポリマーの担体に標識した ポリマー試薬により 酵素比を 上げることで 増感している ポリマー担体に標識される と酵素の数により 増感の程度が決 定されるが 余り長いポリマーより も短いポリマーへの標識の方が感 度が高いことが知られている ポリマー法には 右図に示すよう に ポリマー法直接法 ( 一次標 識ポリマー法 : primary antibody-labeled polymer (palp) method) とポリマー法間接法 ( 二次 標識ポリマー法 : secondary 酵素と一次を担体のポリマーに結合した複合体 ポリマー法直接法 酵素と Protein A/G の複合体 酵素標識プロテイン A 法 酵素と三次を担体のポリマーに結合した複合体 ( 三次ポリマー法 ) 二次 一次 Intercalated antibody-enhanced polymer (iaep) method 酵素と二次を担体のポリマーに結合した複合体 ポリマー法間接法 一次 二次ポリマー試薬 一次 二次ポリマーリンカー三次ポリマー法
5 antibody-labeled polymer (salp) method) の他に 三次と酵素を標識したポリマー試薬 (thirdary antibody-labeled polymer method) を用いる三次ポリマー法が開発されており それには 二次を用いるものと二次ポリマー試薬を持ちいる方法がある 前者は intercalated antibody-enhanced polymer (iaep) 法 後者は云わば二次ポリマーリンカー三次ポリマー法 (secondary antibody-labeled polymer-linker thirdary antibody-labeled polymer (salp-liker talp) method) である これ等のポリマー法の実際の検出感度は palp 法が酵素間接法と同感度 salp 法 (Dako EnVision 等 ) が改良型 ABC 法や sabc 法と同感度 iaep 法が salp 法の x10 倍未満 salp-liker talp 法 ( Dako EnVision Flex+ や Leica Bond polymer 法 ) が salp 法の x100 倍未満と考えられている しかし 一次反応の濃度や時間等の基準化を行って検討すべきであると考えられる vi. CSA 法 (Catalyzed signal amplification method) フェノール類の異化反応にて 沈着する catalyzed reporter deposition (CARD) 反応を利用し 方法で そのオリジナルは 右 図に示す様に sabc 法とビオチ ン化タイラマイドの CARD 反応 で沈着したビオチン化タイラマ イドを HRP 標識ストレプトアビ チンで標識して HRP の呈色反 応を行うもの (Dako CSA 法や ImmunoMax 法等 ) である しかし 二度の HRP 反応 二 度のビオチン - ストレプトアビ チン反応により 内因性ペロオ キシダーゼと内因性ビオチンに よる非特異反応が問題となり Dako は sabc 法を多数の HRP 分子標識二次法に代え タ イラマイドの標識を FITC にし て Dako CSA II 法を供給してい る 我々は sabc 法を二次 標識ポリマー法に代えた sabc 複合体 ビオチン化二次 一次 酵素標識二次 低増幅 HRP 反応 Catalyzed reporter deposition (CARD) 反応 X 1,000 倍の増感 非ビオチン検出系多酵素二次複合体非特異反応 ( 二次と三次 ) 増幅中 Dako CSA II 酵素標識抗 FITC FITC 二次 一次 Biotinylated tyramide HRP-labeled sreptavidin ポリマー試薬 増幅高 Hasui et al. 2002
6 newcsa 法を開発して 国内特許を得ている この CSA 法の検出感度は CARD 反応により 改良型 ABC 法 sabc 法 二次標識ポリマー法の検出感度を 1 とした場合に x1000 倍未満である 酵素間接法の 種々の方法は 検 出感度を上げて来た その一方で 免疫組 織化学の標的である の量に関する理 解は, 最近まで 議論 されることが余り無 かった Single copy の遺伝 子の DNA-ISH では 検出系に CSA 法を用いても 4 回前後の in-situ PCR にて 標的 DNA を増幅す る必要がある 即ち 少なくとも 10 前後の epitopes がないと標的を検出 できない しかしながら 改良型 ABC 法 sabc 法 二次標識ポリマー法の検 出感度を 1 とした場合に 三次ポリマー法で x10~x100 そして CSA 法 で x1000 倍と 検出される量は 一単位程の低発現のものとなって来てい る 検出感度 検出感度の向上に関する批判 ( を節約できるだけであり 検出感度は高くする必要がない ) がある 現在 通常用いられている方法は sabc 法レベルである 標的とするの量が問題となる 充分量のを対象とする場合には 検出感度を下げて, 非特異反応を少なくする が微量しか存在しない時には 検出感度の高い方法を用いる ポリマー法直接法 直接法 ポリマー法間接法 間接法 sabc 法 Protein A 法 PAP 法 三次ポリマー法 X1,000 CSA 法 X10~x steps 煩雑さ
免疫組織化学の基礎と応用 蓮井和久鹿児島大学大学院医歯学総合研究科 講師 この講義は 2007 年から大学院専門基礎過程の選択科目として開講しているものである 教科書には 改訂四版渡辺 中根の酵素抗体法 ( 名倉宏 長村義之 堤寛編集 ) 学際企画を用いています それに 最近のポリマー法の開発等と私の研究への応用等を基礎にしています I. 序論 1) 医学 生物学における免疫組織化学の確立と意義免疫組織化学は
Microsoft Word - Dr. Abe.doc
3 ステップ アビジン - ビオチンシステム (SAB 法 ) とポリマー法 慶應義塾大学医学部病理学教室阿部仁 はじめに 免疫組織化学は Coons らが蛍光色素を抗体に標識した蛍光抗体法の技術を確立してから Singers のフェリチン抗体法を経て 1967 年に Nakane と Pierce により標識物質に西洋ワサビペルオキシダーゼ (horseradish peroxidase:hrp)
ROWCatPathology_J.book
www.dako.jp IHC Solution Visualization Systems Number of Steps 5 4 3 2 1 LSAB TM 2 EnVision TM G 2 Doublestain EnVision TM DuoFLEX Doublestain LSAB TM + EnVision TM G 2 EnVision TM + EnVision TM FLEX 1
Western BLoT Immuno Booster
研究用 Western BLoT Immuno Booster 説明書 v201211 Western BLoT Immuno Booster は 抗体の反応性を増強させる成分を含む溶液で 抗体の希釈液に用いるだけで 抗原抗体反応を促進します 本製品は ウェスタンブロット ELISA 等の各種イムノアッセイに対応しており 各アッセイにおいて数倍から数十倍の検出感度向上が期待できます 西洋ワサビペルオキシダーゼ
Microsoft Word ab205921_自動染色プロトコール_YU_IS.docx
抗 PD-L1 抗体 [clone 28-8] 動免疫組織染 装置別プロトコール PD-L1 RabMAb [clone 28-8] (ab205921) BioGenex 社 i6000( オフライン抗原賦活化 ) Leica 社 BOND RX( オンライン抗原賦活化 ) Ventana 社 Ultra( オフライン抗原賦活化 ) Dako 社 Omnis BioGenex 社 i6000 プロトコール
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14 i ii iii iv v vi 14 13 86 13 12 28 14 16 14 15 31 (1) 13 12 28 20 (2) (3) 2 (4) (5) 14 14 50 48 3 11 11 22 14 15 10 14 20 21 20 (1) 14 (2) 14 4 (3) (4) (5) 12 12 (6) 14 15 5 6 7 8 9 10 7
プロトコール集 ( 研究用試薬 ) < 目次 > 免疫組織染色手順 ( 前処理なし ) p2 免疫組織染色手順 ( マイクロウェーブ前処理 ) p3 免疫組織染色手順 ( オートクレーブ前処理 ) p4 免疫組織染色手順 ( トリプシン前処理 ) p5 免疫組織染色手順 ( ギ酸処理 ) p6 免疫
< 目次 > 免疫組織染色手順 ( 前処理なし ) p2 免疫組織染色手順 ( マイクロウェーブ前処理 ) p3 免疫組織染色手順 ( オートクレーブ前処理 ) p4 免疫組織染色手順 ( トリプシン前処理 ) p5 免疫組織染色手順 ( ギ酸処理 ) p6 免疫組織染色手順 ( ギ酸処理後 マイクロウェーブまたはオートクレーブ処理 )p7 抗原ペプチドによる抗体吸収試験 p8 ウエスタン ブロッティング
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免疫組織染色用試薬 免疫染色用抗体 免疫組織染色は 抗体を用いて組織細胞内の抗原を可視化する手法で 現在幅広く用いられています 当社では免疫組織染色に使用できる抗体を数多く取扱っています Fas 抗マウス Fas, ウサギ マウス肝臓 ( パラフィン切片 ) 概要 免疫組織染色において マウス肝臓の肝細胞細胞質及び卵巣の顆粒層細胞 卵細胞に発現している Fas と反応 交差性 マウス ラット 使用濃度
i ii iii iv v vi vii ( ー ー ) ( ) ( ) ( ) ( ) ー ( ) ( ) ー ー ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) 13 202 24122783 3622316 (1) (2) (3) (4) 2483 (1) (2) (3) (4) (5) (6) (7) (8) (9) (10) (11) 11 11 2483 13
Western BLoT Rapid Detect
研究用 Western BLoT Rapid Detect 説明書 v201212 Western BLoT Rapid Detect は 標識二次抗体の代わりに独自の IgG Detector(HRP labeled) を利用して一次抗体を検出するウェスタンブロッティング専用の検出試薬キットです 本製品を利用することで 標識二次抗体を用いて検出する従来法ではできなかった迅速検出 高感度検出 シグナルの増強
Microsoft PowerPoint - 免疫染色における.ppt
免疫染色におけるトラブルシューティング 名古屋第二赤十字病院医療技術部検査 病理課 水嶋祥栄 免疫組織化学染色フローチャート検鏡脱水 透徹 封入免疫染色(用手法 機械法)抗原賦活(酵素処理 加熱処理)脱パラフィン薄切パラフィン包埋(脱脂 脱灰)ホルマリン固定臓器の切り出し 固定に関するトラブル 固定が強い タンパク間に形成された架橋により抗原決定基がマスクされる 抗原決定基の立体構造が変化して抗原性が失われる
262014 3 1 1 6 3 2 198810 2/ 198810 2 1 3 4 http://www.pref.hiroshima.lg.jp/site/monjokan/ 1... 1... 1... 2... 2... 4... 5... 9... 9... 10... 10... 10... 10... 13 2... 13 3... 15... 15... 15... 16 4...
44 4 I (1) ( ) (10 15 ) ( 17 ) ( 3 1 ) (2)
(1) I 44 II 45 III 47 IV 52 44 4 I (1) ( ) 1945 8 9 (10 15 ) ( 17 ) ( 3 1 ) (2) 45 II 1 (3) 511 ( 451 1 ) ( ) 365 1 2 512 1 2 365 1 2 363 2 ( ) 3 ( ) ( 451 2 ( 314 1 ) ( 339 1 4 ) 337 2 3 ) 363 (4) 46
i ii i iii iv 1 3 3 10 14 17 17 18 22 23 28 29 31 36 37 39 40 43 48 59 70 75 75 77 90 95 102 107 109 110 118 125 128 130 132 134 48 43 43 51 52 61 61 64 62 124 70 58 3 10 17 29 78 82 85 102 95 109 iii
178 5 I 1 ( ) ( ) 10 3 13 3 1 8891 8 3023 6317 ( 10 1914 7152 ) 16 5 1 ( ) 6 13 3 13 3 8575 3896 8 1715 779 6 (1) 2 7 4 ( 2 ) 13 11 26 12 21 14 11 21
I 178 II 180 III ( ) 181 IV 183 V 185 VI 186 178 5 I 1 ( ) ( ) 10 3 13 3 1 8891 8 3023 6317 ( 10 1914 7152 ) 16 5 1 ( ) 6 13 3 13 3 8575 3896 8 1715 779 6 (1) 2 7 4 ( 2 ) 13 11 26 12 21 14 11 21 4 10 (
4-4 in situ PCR 研究室 in situ PCR 標的菌種と遺伝子 ( 報告年 ) 応用 Dept. of Marine Sciences University of Georgia USA Escherichia coli O157slt II Escherichia coli 16SrDNA Ralstonia eutropha phl (1997,1998,1999,2002)
PowerPoint プレゼンテーション
実 践 的 な 免 疫 組 織 染 色 の 方 法 ~ 特 に 酵 素 抗 体 法 を 中 心 に~ 病 理 診 断 学 常 山 幸 一 野 本 一 博 林 伸 一 三 輪 重 治 西 田 健 志 八 田 秀 樹 免 疫 染 色 組 織 標 本 の 中 にある 或 る タンパク 質 の 場 所 を 目 で 見 えるようにするための 方 法 目 的 とするタンパク 質 ' 抗 原 (にだけくっつく 事
untitled
i ii iii iv v 43 43 vi 43 vii T+1 T+2 1 viii 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 a) ( ) b) ( ) 51
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成人および小児膜性腎症における M-type ホスホリパーゼ A2 受容体の免疫組織学的検出 東京女子医科大学腎臓病総合医療センター病理検査室 堀田茂 はじめに膜性腎症は 糸球体基底膜上皮下に形成される免疫複合体により糸球体上皮障害が惹起される糸球体腎炎である 本邦においては 成人ネフローゼ症候群の原因では膜性腎症が一番多く約 35% を占め 小児では少なく 1%~7% と報告されている 発症年齢は
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ACCESS ACCESS i ii ACCESS iii iv ACCESS v vi ACCESS CONTENTS ACCESS CONTENTS ACCESS 1 ACCESS 1 2 ACCESS 3 1 4 ACCESS 5 1 6 ACCESS 7 1 8 9 ACCESS 10 1 ACCESS 11 1 12 ACCESS 13 1 14 ACCESS 15 1 v 16 ACCESS
2
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 I II III 11 IV 12 V 13 VI VII 14 VIII. 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 _ 33 _ 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 VII 51 52 53 54 55 56 57 58 59
大学院博士課程共通科目ベーシックプログラム
平成 30 年度医科学専攻共通科目 共通基礎科目実習 ( 旧コア実習 ) 概要 1 ). 大学院生が所属する教育研究分野における実習により単位認定可能な実習項目 ( コア実習項目 ) 1. 組換え DNA 技術実習 2. 生体物質の調製と解析実習 3. 薬理学実習 4. ウイルス学実習 5. 免疫学実習 6. 顕微鏡試料作成法実習 7. ゲノム医学実習 8. 共焦点レーザー顕微鏡実習 2 ). 実習を担当する教育研究分野においてのみ単位認定可能な実習項目
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酵素 : タンパク質の触媒 タンパク質 Protein 酵素 Enzyme 触媒 Catalyst 触媒 Cataylst: 特定の化学反応の反応速度を速める物質 自身は反応の前後で変化しない 酵素 Enzyme: タンパク質の触媒 触媒作用を持つタンパク質 第 3 回 : タンパク質はアミノ酸からなるポリペプチドである 第 4 回 : タンパク質は様々な立体構造を持つ 第 5 回 : タンパク質の立体構造と酵素活性の関係
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 () - 1 - - 2 - - 3 - - 4 - - 5 - 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57
取扱説明書
Realtime PCR Master Mix Realtime PCR Master Mix トラブルシューティング SYBR Green Realtime PCR Master Mix トラブルシューティングは p3 へ 1. 増幅がみられない 乱れる原因対策検出機器の設定などが蛍光色標識に用いられている蛍光色素の種類によって 検素に適合していない出機器の設定を変更する必要があります 設定を適正化して再解析してください
86 7 I ( 13 ) II ( )
10 I 86 II 86 III 89 IV 92 V 2001 93 VI 95 86 7 I 2001 6 12 10 2001 ( 13 ) 10 66 2000 2001 4 100 1 3000 II 1988 1990 1991 ( ) 500 1994 2 87 1 1994 2 1000 1000 1000 2 1994 12 21 1000 700 5 800 ( 97 ) 1000
入門ガイド
ii iii iv NEC Corporation 1998 v P A R 1 P A R 2 P A R 3 T T T vi P A R T 4 P A R T 5 P A R T 6 P A R T 7 vii 1P A R T 1 2 2 1 3 1 4 1 1 5 2 3 6 4 1 7 1 2 3 8 1 1 2 3 9 1 2 10 1 1 2 11 3 12 1 2 1 3 4 13
<4D6963726F736F667420506F776572506F696E74202D208376838C835B83938365815B835683878393312E707074205B8CDD8AB78382815B83685D>
i i vi ii iii iv v vi vii viii ix 2 3 4 5 6 7 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60
SC-85X2取説
I II III IV V VI .................. VII VIII IX X 1-1 1-2 1-3 1-4 ( ) 1-5 1-6 2-1 2-2 3-1 3-2 3-3 8 3-4 3-5 3-6 3-7 ) ) - - 3-8 3-9 4-1 4-2 4-3 4-4 4-5 4-6 5-1 5-2 5-3 5-4 5-5 5-6 5-7 5-8 5-9 5-10 5-11
<4D F736F F D B82C982C282A282C482512E646F63>
サンプル条件および固定化分子の選択 Biacoreの実験ではセンサーチップに固定化する分子をリガンド それに対して結合を測定する分子をアナライトと呼びます いずれの分子をリガンドとし アナライトとするかは 実験系を構築する上で重要です 以下にサンプルに適したリガンド アナライトの設計方法やサンプルの必要条件などをご紹介します アナライト リガンド センサーチップ (1) タンパク質リガンドとしてもアナライトとしても用いることができます
イルスが存在しており このウイルスの存在を確認することが診断につながります ウ イルス性発疹症 についての詳細は他稿を参照していただき 今回は 局所感染疾患 と 腫瘍性疾患 のウイルス感染検査と読み方について解説します 皮膚病変におけるウイルス感染検査 ( 図 2, 表 ) 表 皮膚病変におけるウイ
2012 年 12 月 13 日放送 第 111 回日本皮膚科学会総会 6 教育講演 26-3 皮膚病変におけるウイルス感染検査と読み方 川崎医科大学皮膚科 講師山本剛伸 はじめにウイルス性皮膚疾患は 臨床症状から視診のみで診断がつく例もありますが ウイルス感染検査が必要となる症例も日常多く遭遇します ウイルス感染検査法は多種類存在し それぞれに利点 欠点があります 今回は それぞれのウイルス感染検査について
第１部 一般的コメント
(( 2000 11 24 2003 12 31 3122 94 2332 508 26 a () () i ii iii iv (i) (ii) (i) (ii) (iii) (iv) (a) (b)(c)(d) a) / (i) (ii) (iii) (iv) 1996 7 1996 12
モノクローナル抗体とポリクローナル抗体の特性と
実験動物における免疫組織化学染色 ~ マウス組織を中心に ~ 1) 1,2) 1) 川井健司, 中村雅登, 玉置憲一 1. 財団法人実験動物中央研究所, 2. 東海大学医学部基盤診療学系病理診断学 はじめに動物を使った実験というのは, 医学の研究者および新薬の開発を目指す研究者にとって欠かせないものであり, その実験の素材となるのが 実験動物 である. 実験動物として使用される動物は多種類の動物が使用されており,
Influenza Virus Typing Set
製品コード MK421 研究用 Influenza Virus Typing Set 説明書 インフルエンザウイルスには A, B, C の 3 つの型があります 現在 インフルエンザウイルスで流行を起こすのは A 型の H1 亜型 ( ソ連かぜ ) H3 亜型 ( 香港かぜ ) そして B 型の 3 種類です ウイルスの構造を図 1 に模式的に示します インフルエンザウイルスの型は核蛋白質 (NP)
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23 12 10 12:55 ~ 18:45 KKR Tel0557-85-2000 FAX0557-85-6604 12:55~13:00 13:00~13:38 I 1) 13:00~13:12 2) 13:13~13:25 3) 13:26~13:38 13:39~14:17 II 4) 13:39~13:51 5) 13:52 ~ 14:04 6) 14:05 ~ 14:17 14:18 ~
論文題目 腸管分化に関わるmiRNAの探索とその発現制御解析
論文題目 腸管分化に関わる microrna の探索とその発現制御解析 氏名日野公洋 1. 序論 microrna(mirna) とは細胞内在性の 21 塩基程度の機能性 RNA のことであり 部分的相補的な塩基認識を介して標的 RNA の翻訳抑制や不安定化を引き起こすことが知られている mirna は細胞分化や増殖 ガン化やアポトーシスなどに関与していることが報告されており これら以外にも様々な細胞諸現象に関与していると考えられている
第１章 国民年金における無年金
1 2 3 4 ILO ILO 5 i ii 6 7 8 9 10 ( ) 3 2 ( ) 3 2 2 2 11 20 60 12 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 13 14 15 16 17 14 15 8 16 2003 1 17 18 iii 19 iv 20 21 22 23 24 25 ,,, 26 27 28 29 30 (1) (2) (3) 31 1 20
- 2 -
- 2 - - 3 - (1) (2) (3) (1) - 4 - ~ - 5 - (2) - 6 - (1) (1) - 7 - - 8 - (i) (ii) (iii) (ii) (iii) (ii) 10 - 9 - (3) - 10 - (3) - 11 - - 12 - (1) - 13 - - 14 - (2) - 15 - - 16 - (3) - 17 - - 18 - (4) -
2 1980 8 4 4 4 4 4 3 4 2 4 4 2 4 6 0 0 6 4 2 4 1 2 2 1 4 4 4 2 3 3 3 4 3 4 4 4 4 2 5 5 2 4 4 4 0 3 3 0 9 10 10 9 1 1
1 1979 6 24 3 4 4 4 4 3 4 4 2 3 4 4 6 0 0 6 2 4 4 4 3 0 0 3 3 3 4 3 2 4 3? 4 3 4 3 4 4 4 4 3 3 4 4 4 4 2 1 1 2 15 4 4 15 0 1 2 1980 8 4 4 4 4 4 3 4 2 4 4 2 4 6 0 0 6 4 2 4 1 2 2 1 4 4 4 2 3 3 3 4 3 4 4
1 (1) (2)
1 2 (1) (2) (3) 3-78 - 1 (1) (2) - 79 - i) ii) iii) (3) (4) (5) (6) - 80 - (7) (8) (9) (10) 2 (1) (2) (3) (4) i) - 81 - ii) (a) (b) 3 (1) (2) - 82 - - 83 - - 84 - - 85 - - 86 - (1) (2) (3) (4) (5) (6)
20 15 14.6 15.3 14.9 15.7 16.0 15.7 13.4 14.5 13.7 14.2 10 10 13 16 19 22 1 70,000 60,000 50,000 40,000 30,000 20,000 10,000 0 2,500 59,862 56,384 2,000 42,662 44,211 40,639 37,323 1,500 33,408 34,472
I? 3 1 3 1.1?................................. 3 1.2?............................... 3 1.3!................................... 3 2 4 2.1........................................ 4 2.2.......................................
■リアルタイムPCR実践編
リアルタイム PCR 実践編 - SYBR Green I によるリアルタイム RT-PCR - 1. プライマー設計 (1)Perfect Real Time サポートシステムを利用し 設計済みのものを購入する ヒト マウス ラットの RefSeq 配列の大部分については Perfect Real Time サポートシステムが利用できます 目的の遺伝子を検索して購入してください (2) カスタム設計サービスを利用する
o 2o 3o 3 1. I o 3. 1o 2o 31. I 3o PDF Adobe Reader 4o 2 1o I 2o 3o 4o 5o 6o 7o 2197/ o 1o 1 1o
78 2 78... 2 22201011... 4... 9... 7... 29 1 1214 2 7 1 8 2 2 3 1 2 1o 2o 3o 3 1. I 1124 4o 3. 1o 2o 31. I 3o PDF Adobe Reader 4o 2 1o 72 1. I 2o 3o 4o 5o 6o 7o 2197/6 9. 9 8o 1o 1 1o 2o / 3o 4o 5o 6o
表1票4.qx4
iii iv v 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 22 23 10 11 24 25 26 27 10 56 28 11 29 30 12 13 14 15 16 17 18 19 2010 2111 22 23 2412 2513 14 31 17 32 18 33 19 34 20 35 21 36 24 37 25 38 2614
Bethesda system
第 26 回日本臨床細胞学会関東連合会学術集会 シンポジウム 新しい細胞診技術による診断精度の向上と臨床支援 LBCを用いた分子病理診断の現状と可能性 東海大学医学部付属病院病理検査技術科 1) 東海大学医学部基盤診療学系病理診断学 2) 伊藤仁 1), 小山田裕行 1), 古田島繁美 1), 加戸伸明 1), 宮嶋葉子 1) 芹澤昭彦 1), 井野元智恵 2), 梶原博 2), 中村直哉 2) 平成
MANUAL TSA Research Reagents Caution: For Laboratory Use. A research chemical for research purposes only. TSA Biotin Systems Tyramide Signal Amplifica
MANUAL TSA Research Reagents Caution: For Laboratory Use. A research chemical for research purposes only. TSA Biotin Systems Tyramide Signal Amplification For in situ Hybridization and Immunohistochemistry
iii iv v vi 21 A B A B C C 1 1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 19 22 30 39 43 48 54 60 65 74 77 84 87 89 95 101 12 20 23 31 40 44 49 55 61 66 75 78 85 88 90 96 102 13 21 24 32 41 45 50 56 62 67 76 79
免疫組織化学の基礎と応用 蓮井和久鹿児島大学大学院医歯学総合研究科 講師 この講義は 2007 年から大学院専門基礎過程の選択科目として開講しているものである 教科書には 改訂四版渡辺 中根の酵素抗体法 ( 名倉宏 長村義之 堤寛編集 ) 学際企画を用いています それに 最近のポリマー法の開発等と私の研究への応用等を基礎にしています IV. 抗体の性状と取り扱い 1. 抗体の性状と標識抗体 1) 抗体
PowerPoint プレゼンテーション
アフィニティービーズのご紹介 住友ベークライト株式会社 S- バイオ事業部 - 1 - 製品概要 生体分子 ( タンパク質や核酸など ) のアプリケーションに幅広く対応できるアフィニティ精製用担体 ( 球状ビーズ ) です ビーズ表面に施した弊社独自の表面処理により非特異吸着が高度に抑制されています 高 S/N 比を実現! ビーズ表面の活性エステル基がアミノ基 (-NH2) をもつリガンド ( タンパク質
これわかWord2010_第1部_100710.indd
i 1 1 2 3 6 6 7 8 10 10 11 12 12 12 13 2 15 15 16 17 17 18 19 20 20 21 ii CONTENTS 25 26 26 28 28 29 30 30 31 32 35 35 35 36 37 40 42 44 44 45 46 49 50 50 51 iii 52 52 52 53 55 56 56 57 58 58 60 60 iv
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i 1 1 2 2 3 3 4 4 4 5 7 8 8 9 9 10 11 13 14 15 16 17 19 ii CONTENTS 2 21 21 22 25 26 32 37 38 39 39 41 41 43 43 43 44 45 46 47 47 49 52 54 56 56 iii 57 59 62 64 64 66 67 68 71 72 72 73 74 74 77 79 81 84
これでわかるAccess2010
i 1 1 1 2 2 2 3 4 4 5 6 7 7 9 10 11 12 13 14 15 17 ii CONTENTS 2 19 19 20 23 24 25 25 26 29 29 31 31 33 35 36 36 39 39 41 44 45 46 48 iii 50 50 52 54 55 57 57 59 61 63 64 66 66 67 70 70 73 74 74 77 77
DNA複製開始領域の単分子オプティカルマッピング
DNA 複製開始領域の単分子オプティカルマッピング The single molecular optical mapping of oric region 66870 森泰啓 指導教員鷲津正夫教授 概要 : 本研究の目的は Mb サイズのゲノム DNA に存在する oric 領域を単分子レベルで可視化することである 巨大な DNA について 単分子のままで特定の遺伝子配列の位置情報を得るには DNA
2 参考 検体投入部遠心機開栓機感染症検査装置 感染症検査装置 (CL4800)
1 平成 19 年 11 月 14 日血液事業部会運営委員会配布資料 資料 1 検査法の変更について (CLEIA 法の導入について ) 1. 対象検査項目現在の検査項目 HBs 抗原 HBc 抗体 HBs 抗体 HTLV-1 抗体 HIV1/2 抗体 HCV 抗体 梅毒 TP 抗体 パルボウイルス B19 抗原のすべての検査項目について 検査方法を凝集法から化学発光酵素免疫法 (CLEIA 法 )
平成18年版 男女共同参画白書
i ii iii iv v vi vii viii ix 3 4 5 6 7 8 9 Column 10 11 12 13 14 15 Column 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 Column 27 28 29 30 Column 31 32 33 34 35 36 Column 37 Column 38 39 40 Column 41 42 43 44 45
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1 1 1 2 2 3 (1) 3 (2) 4 (3) 6 7 7 (1) 8 (2) 21 26 27 27 27 28 31 32 32 36 1 1 2 2 (1) 3 3 4 45 (2) 6 7 5 (3) 6 7 8 (1) ii iii iv 8 * 9 10 11 9 12 10 13 14 15 11 16 17 12 13 18 19 20 (2) 14 21 22 23 24
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I O 01 II O III IV 02 II O 03 II O III IV III IV 04 II O III IV III IV 05 II O III IV 06 III O 07 III O 08 III 09 O III O 10 IV O 11 IV O 12 V O 13 V O 14 V O 15 O ( - ) ( - ) 16 本 校 志 望 の 理 由 入 学 後 の
モノクローナル抗体とポリクローナル抗体の特性と
Epidermal growth factor receptor(egfr) p53 免疫染色を用いた尿細胞診の良悪性鑑別 総合病院土浦協同病院病理部 池田聡 背景膀胱や腎盂に出来る尿路上皮癌の頻度は近年増加している この尿路上皮癌の診断や経過観察において尿細胞診は最も重要な手段の 1 つである この検査は 患者への負担が小さく繰り返しの検査が容易であることから尿細胞診の診断価値は非常に高く 検査の頻度は年々増加している
「産業上利用することができる発明」の審査の運用指針（案）
1 1.... 2 1.1... 2 2.... 4 2.1... 4 3.... 6 4.... 6 1 1 29 1 29 1 1 1. 2 1 1.1 (1) (2) (3) 1 (4) 2 4 1 2 2 3 4 31 12 5 7 2.2 (5) ( a ) ( b ) 1 3 2 ( c ) (6) 2. 2.1 2.1 (1) 4 ( i ) ( ii ) ( iii ) ( iv)
MANUAL TSA Research Reagents Caution: For Laboratory Use. A research chemical for research purposes only. TSA Fluorescence Systems Tyramide Signal Amp
MANUAL TSA Research Reagents Caution: For Laboratory Use. A research chemical for research purposes only. TSA Fluorescence Systems Tyramide Signal Amplification For in situ Hybridization and Immunohistochemistry
Dr, Fujita
免疫組織化学染色における抗原賦活の原理について考える 東京医科大学病理学講座 藤田浩司 はじめにパラフィン切片により証明される抗原の種類は, この十数年のうちに飛躍的に増加した. 元来, 免疫組織化学法は凍結切片やアセトンを用いた固定により抗原温存を図っていたが, 現在ではホルマリン固定材料のパラフィン切片によっても多くの抗原の同定が可能となった. その理由には, 1) ホルマリン固定に抵抗性の抗原を認識するモノクローナル抗体の開発
650 Fluorophore 690 Fluorophore DMSO ( 1 x 500 μl) 1 x 1.5 ml) Opal polymer HRP Ms+Rb ( 2 x 50mL) Blocking/Ab Diluent (1 x 100 ml) 4 x 250ml) * 数量は Op
Manual Multiplex IHC For laboratory use only. A research method for research purposes only. Opal TM 4-7-color Manual IHC Kit 製品情報保存条件 : 遮光冷蔵保存 (4 ) 製品受領後 Opal 色素のみ DMSO 溶解前は -20 保存安定性 : 上記保存条件で 3 ヶ月間は安定適用用途
モノクローナル抗体とポリクローナル抗体の特性と
パラフィン切片を用いた免疫組織染色の結果の解釈 東京医科大学病理診断学 向井清 免疫組織化学 特に酵素抗体法は病理診断や形態学的研究に広く用いられている 免疫組織化学は生体内の物質 ( 抗原 ) の存在と分布を生物試薬 ( 抗体 酵素 ) を用いて高感度に かつ特異性高く検出する方法である ( 表 1) その特徴として 1) 手技的に易しい 2) 応用範囲が広い ( 生化学的情報 形態情報 ) 3)
免疫組織化学染色
免疫組織化学染色 - 227 229 233 - 平成 28 年度免疫組織化学サーベイ報告 免疫組織化学染色 (Ki-67) はじめに Ki-67は ヒトKi-67と特異的に反応し 休止期 (G0 期 ) を除く細胞周期の全周期 (G1 期 S 期 G2 期 M 期 ) で発現している核蛋白である 正常組織 腫瘍組織いずれも細胞増殖周期に入っている細胞に反応が見られる また 乳癌 大腸癌 乏突起膠腫
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i 1 1 2 3 5 5 6 7 7 8 9 9 10 11 11 11 12 2 13 13 14 15 15 16 17 17 ii CONTENTS 18 18 21 22 22 24 25 26 27 27 28 29 30 31 32 36 37 40 40 42 43 44 44 46 47 48 iii 48 50 51 52 54 55 59 61 62 64 65 66 67 68
おすすめのローディング コントロール抗体 ターゲット 免疫動物 * モノ M ポリ P 交差性 * 製品番号 Actin Rb P Ms, Rat, Chk, Cow, Hu, Xl,Dm, Zfsh ab1801 alpha sarcomeric Actin Ms M Hu, Ms, Rat ab
ローディング コントロール抗体 アブカムならあなたにぴったりの コントロール抗体 が見つかるはずです ローディング コントロール抗体 (Loading control antibody) は ウエスタン ブロッティングにおけるポジティブ コントロールとなる抗体で 各レーンのサンプルが均等に泳動されていることの確認 ゲルからメンブレンへ確実に転写されていることの確認 また異なるサンプル中のターゲット
本日の内容 HbA1c 測定方法別原理と特徴 HPLC 法 免疫法 酵素法 原理差による測定値の乖離要因
HbA1c 測定系について ~ 原理と特徴 ~ 一般社団法人日本臨床検査薬協会 技術運営委員会副委員長 安部正義 本日の内容 HbA1c 測定方法別原理と特徴 HPLC 法 免疫法 酵素法 原理差による測定値の乖離要因 HPLC 法 HPLC 法原理 高速液体クロマトグラフィー 混合物の分析法の一つ 固体または液体の固定相 ( 吸着剤 ) 中で 液体または気体の移動相 ( 展開剤 ) に試料を加えて移動させ
【Webinar】蛍光免疫染色の基礎
蛍光免疫染色の基礎 ライフテクノロジーズジャパン株式会社 テクニカルサポート 小林英夫 The world leader in serving science 1 蛍光免疫染色の概要 タンパク質の発現の確認 タンパク質の局在性の確認 上記を細胞や組織の形態と照らし合わせて観察 固定膜の浸透処理ブロッキング 1 次抗体を加える 酵素抗体法 ( 発色 ) と比較して 両方とも高感度 多重染色が容易 長期保存は不向き
ii iii iv CON T E N T S iii iv v Chapter1 Chapter2 Chapter 1 002 1.1 004 1.2 004 1.2.1 007 1.2.2 009 1.3 009 1.3.1 010 1.3.2 012 1.4 012 1.4.1 014 1.4.2 015 1.5 Chapter3 Chapter4 Chapter5 Chapter6 Chapter7
untitled
I...1 II...2...2 III...3...3...7 IV...15...15...20 V...23...23...24...25 VI...31...31...32...33...40...47 VII...62...62...67 VIII...70 1 2 3 4 m 3 m 3 m 3 m 3 m 3 m 3 5 6 () 17 18 7 () 17 () 17 8 9 ()
プロトコル 細胞 増殖 / 毒性酸化ストレス分子生物学細胞内蛍光プローブ細胞染色ミトコンドリア関連試薬細菌研究用試薬膜タンパク質可溶化剤ラベル化剤二価性試薬イオン電極 その他 機能性有機材料 酵素 (POD,ALP) を標識したい 利用製品 < 少量抗体 (10μg) 標識用 > Ab-10 Rap
増殖 / 毒性酸化ストレス分子生物学内蛍光プローブ染色ミトコンドリア関連試薬細菌研究用試薬膜タンパク質可溶化剤ラベル化剤二価性試薬イオン電極 機能性有機材料 酵素 (PD,ALP) を標識したい 利用製品 < 少量抗体 (0μg) 標識用 > Ab-0 Rapid Peroxidase Labeling Kit < 抗体 タンパク質 (0-00μg) 標識用 > Peroxidase Labeling
1... 1... 1... 3 2... 4... 4... 4... 4... 4... 6... 10... 11... 15... 30
1 2420128 1 6 3 2 199103 189/1 1991031891 3 4 5 JISJIS X 0208, 1997 1 http://www.pref.hiroshima.lg.jp/site/monjokan/ 1... 1... 1... 3 2... 4... 4... 4... 4... 4... 6... 10... 11... 15... 30 1 3 5 7 6 7
01_.g.r..
I II III IV V VI VII VIII IX X XI I II III IV V I I I II II II I I YS-1 I YS-2 I YS-3 I YS-4 I YS-5 I YS-6 I YS-7 II II YS-1 II YS-2 II YS-3 II YS-4 II YS-5 II YS-6 II YS-7 III III YS-1 III YS-2
BKL Kit (Blunting Kination Ligation Kit)
製品コード 6126/6127 BKL Kit (Blunting Kination Ligation Kit) 説明書 PCR 産物を平滑末端ベクターにクローニングする場合 使用するポリメラーゼ酵素の種類により 3' 末端に余分に付加された塩基を除去し さらに 5' 末端をリン酸化する必要があります 本製品は これらの一連の反応を簡便に短時間に行うためのキットです PCR 産物の末端平滑化とリン酸化を同時に行うことにより
untitled
( ) 200133 3 3 3 3, 7 347 57 10 i ii iii -1- -2- -3- -4- 90011001700mm -5- 4.2 1991 73.5 44.4 7.4 10.5 10.5 7.4 W 3 H 2.25 H 2.25 7.4 51.8 140.6 88.8 268.8m 5,037.9m 2 2mm 16cm916cm 10.5 W 3 H 2.25 62.8
Microsoft Word - iBind Western System 日本語簡易取扱説明書
簡易取扱説明書 ibind Western System 簡易取扱説明書 ver.2 ibind Western System 日本語簡易取扱説明書 ver.2 サンプルブロッティング済みメンブレン 試薬 ibind Solution kit 抗体反応用試薬 ibind Detection Kits 検出試薬 (AP 用の二次抗体も含む ) 一次抗体脱イオン水装置と器具 ibind Device ibind
1. INTRODUCTION Immunohistochemistry (IHC) is an efficient means to understand antigens distribution and localization in cells or tissue sections unde
Printed March 27, 2018 Version 2.1 For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures. Detection System for Human sections (Ms + Rb) Immunostaining Reagent, Anti- Mouse and Anti- Rabbit CODE No.
臨床検査の保険適用について ( 平成 23 年 10 月収載予定 ) 測定項目 参考点数 1 E2 ( 新方法 ) 抗好中球細胞質ミエロペルオキシダーゼ抗体 (MPO-ANCA) D 抗好中球細胞質ミエロペルオキシダーゼ抗体 (MPO-ANCA) 290 点 2 E2 ( 新方法 ) 結
臨床検査の保険適用について ( 平成 23 年 10 月収載予定 ) 測定項目 参考点数 1 E2 ( 新方法 ) 抗好中球細胞質ミエロペルオキシダーゼ抗体 (MPO-ANCA) D014 18 抗好中球細胞質ミエロペルオキシダーゼ抗体 (MPO-ANCA) 290 点 2 E2 ( 新方法 ) 結核菌群核酸同定検査 D023 7 結核菌群核酸同定検査 410 点 3 E3 ( 新項目 ) レジオネラ核酸同定検査
活用ガイド （ソフトウェア編）
(Windows 95 ) ii iii iv NEC Corporation 1999 v P A R T 1 vi P A R T 2 vii P A R T 3 P A R T 4 viii P A R T 5 ix x P A R T 1 2 3 1 1 2 4 1 2 3 4 5 1 1 2 3 4 6 5 6 7 7 1 1 2 8 1 9 1 1 2 3 4 5 6 1 2 3 4
3 5 18 3 5000 1 2 7 8 120 1 9 1954 29 18 12 30 700 4km 1.5 100 50 6 13 5 99 93 34 17 2 2002 04 14 16 6000 12 57 60 1986 55 3 3 3 500 350 4 5 250 18 19 1590 1591 250 100 500 20 800 20 55 3 3 3 18 19 1590