Vol.15, No.1 43

表5 cis-3-hexenal生 そ の 結 果,沈 成 酵 素 の ラ メ ラ膜 へ の局 在 澱 画 分Iに る こ と が 判 っ た.沈 澱 画 分Iは,電 か ら 明 ら か な よ う に,葉 で,そ 全 活 性 の 約90%が 局 在 して い 子 顕 微 鏡 写 真(図13) 緑 体 の 外 膜 の み が きれ い に とん の 中 の 顆 粒 を そ の ま ま 保 っ て い る.ま 素 は 葉 緑 体 中 の ラ メ ラ 膜 にcomplexし き と め た(34)(表5).こ れ たE2酵 の よ う に,酵 素E2は 10-3Mの は 表4に 茶 生 葉 中E2酵 示 す.lipoxygenase glycerideに 性 を 示 す.ま 素の局在 Iは,そ も 活 性 を 示 す が,E2酵 た,13-L-hydroperoxy も 基 質 と し う る が,そ の 反 応 の 際,活 の エ ス テ ル や 素 は遊 離 型 に の み活 linolenic acidを 性 が 半 減 し,O2 し,そ 素 の 活 性 の 局 在 性 の 探 索 は,図12に 従 って 分 画 の 活 性 は ヘ ッ ドー ス ペ ー ス 法 に よ り生 成 物 を,ま た ク ラ ー ク の 電 極 に よ っ て 溶 存O2の 失 活 す る.し た が っ て,安 24時 溶化 さ 間 の放 定 化 に は 目下, 活 性 を 保 つ ま で に 到 っ て い る(34).つ 間 わぶ き 生 葉 か ら の 酵 素 も 同 様 の 傾 向 を 示 し て い る が,安 の 吸 収 量 が 非 常 に 多 い こ と な ど 説 明 し か ね る こ と も 多 い, E2酵 X-100 チ オ グ リ コ ー ル 酸 な ど の 添 加 に よ っ て,24時 後,約83%の 図12 膜 酵 素 で,そ Triton 可 溶 化 に 成 功 し て い る.可 素 は そ の ま ま で は 不 安 定 で,4, 置 で 約80%が の酵 て い る こ とを つ の 可 溶 化 は 非 常 に 困 難 で あ る.現 在,2.0% に よ り約60 70%の た,こ 吸 収 量 を 測 定 し た. 定性 は 茶 生 葉 の そ れ よ り極 端 に 悪 い(35). ii) 加 水 分 解 酵 素(E1)(34,40),異 性 化 酵 素(E3)(51),ア ル コ ー ル 脱 水 素 酵 素(TADH=E4)(20 28) E1酵 素 は,次 の 過 程 に 関 与 す るE2酵 ス テ ル に 対 し て 活 性 を 示 さ ず,1, 系 の 遊 離 酸,linolenic, linoleic 素 が,脂 質やエ 4-cis, cis-pentadien acid,に 活 性 が あ り,こ れ らは中 性 脂 肪 や 燐 脂 質 の形 で のみ 存 在 して い る こ とか ら,加 水 分 解 酵 素 の 存 在 が 必 須 と 推 測 さ れ る.現 在,種 種 の リパ ー ゼ を用 い た モ デ ル 実 験 の 段 階 で あ る. 最 終 過 程 を 支 配 す るE3酵 素 は, 異 性 化 の 速 度 が 酸 アル カ リや ア ミ ド系 試 薬 な ど,い わ ゆ る有 機 試 薬 に よ る異 性 化 反 応 と比 較 す る と非 常 に 速 い こ と よ り,生 体 内で の異 性 化 反 応 は非 酵 素的 反 応 と して取 扱 え な い. しか し,傍 証 の 実験 に よ り,こ の 系 はE3酵 素 と他 の 因 子 の 複 合 制 御 の 形 を と って い る もの と考 え られ,目 下 精 査 検 討 中 で あ る(51).植 物 生 葉 図13 Vol.15, No.1 茶 生 葉 の 沈 澱 画 分1の 電 子 顕 微 鏡 写 真( 24,000) 中 で の 異 性 化 に つ い て は,表2よ り 45

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