J. Brew. Soc. Japan. Vol.101, No.7, p.519 `525 (2006) Simple Method for the Determination of Ethyl Carbamate in Alcoholic Beverages Tomokazu HASHIGUCHI, Yukari IGI, Kuniyasu GoTo (National Research Institute of Brewing, 3-7-1 Kagamiyama, Higashi-Hiroshima, 739-0046, Japan) We developed a simple method for the determination of ethyl carbamate in alcoholic beverages. Butyl carbamate was added to sake sample as an internal standard and then added to Extrelut column. Ethyl carbamate and butyl carbamate were eluted with hexane-ethyl acetate (1: 1). The eluate was concentrated in a rotary evaporator or TurboVap concentrator. The concentrate was analyzed by GC/ MS in a selected ion monitoring mode. The detection limit and quantification limit of ethyl carbamate were 2.5 and 7.5 pg/l. This method was suitable for the analysis of many sake, Shaoxing rice wine (shokoshu), and plum liquor (umeshu) samples. Applying this extraction and concentration method, we could analyze ethyl carbamate in sake by FID-GC. Twenty times concentrated extract of sake obtained the approximate ethyl carbamate concentration.
Fig. 1 Fig.1 SIM chromatogram of ethyl carbamate (m/z 62) of unspiked sake. The retention time for the internal standard is 20.4 min. Fig. 2 Standard curve of ethyl carbamate
橋 口 伊 木 後 藤:酒 類 中 の カル バ ミン酸 エ チル の 簡 易 定 量法 Fig. 3 Fig. 4 Influence of ethanol Recovery of ethyl concentration value in this figure represents on the relative the mean+sd ル と カ ル バ ミ ン 酸 ブ チ ル の 面 積 比 は0.597 0.661の 範 囲 で,各 濃 度 に お け る 変 動 係 数 は3.4 8.5%と り,ア ル コ ー ル 分0 25%の 範 囲 に お い て,測 て,濃 in spiked recovery sake of ethyl carbamate (n=5). な 定への られ る 3. 他 の 酒類 への応 用 こ の 分 析 方 法 を 清 酒 以 外 の 酒 類 に 応 用 す る こ と を試 超 え る試 料 につ い 縮 の段 階 にお いて無 水硫 酸 ナ トリウムで脱 水 し きれ な い 水 が 残 っ た と報 告 し て い る が,本 方法 で は そ の よ う な こ と は 観 察 さ れ な か っ た これ は,本 方法 は み た 蒸 留 酒 に つ い て は,抽 あ る た め,対 象 と し な い こ と と した 永 田 ら7)に よ れ ば,蒸 出 液 と し て 酢 酸 エ チ ル 単 独 で は な く,ヘ 量 が 比 較 的 大 き い の は,紹 キ サ ン と酢 酸 エ チ ル の 混 合 溶 媒 を 用 い て い る た め に,溶 出液 の疎 水 出 操 作 が な いTEA (thermal energy analyzer)一 ガ ス ク ロ マ トグ ラ フ ィ ー に よ るAOAC法61が 抽 出 操作 の な い簡 便 な 方 法 で 加 藤 ら の 方 法 に 比 べ て,(1)濃 縮 倍 率 が 低 い こ と,(2)溶 522 in sake. Each 性 が 増 し 水 分 の 混 和 量 が 減 っ た こ とが 理 由 と し て考 え 大 き な 影 響 は 見 られ な か っ た(Fig.4) 加 藤 ら は ア ル コ ー ル 分 が20%を carbamate 留 酒 以 外 の 市 販 酒 類 で カ ル バ ミ ン酸 エ チ ル 含 有 出 範 囲11 738ppb,試 興 酒(平 均252.1ppb,検 料 数38)及 び 梅 酒(平 醸 協 (2006) 均
Fig. 5 SIM chromatogram of ethyl carbamate (m/z 62) of unspiked Shaoxing rice wine (shokoshu) and plum liquor (umeshu). The retention time for the internal standard is 20.4 mm. Fig. 6-a Recovery of ethyl carbamate in spiked Shaoxing rice wine (shokoshu)
Fig. 6-b Recovery of ethyl carbamate in spiked plum liquor (umeshu)
Fig. 7 FID gas chromatogram of extracts of sake concentrated 20 times and spiked with ethyl carbamate. 3) William Horwitz (Editor): Official Methods of Analysis of AOAC INTERNA- TIONAL 17th Edition, Chapter 28, p 14-15, AOAC INTERNATIONAL (2000) 6) William Horwitz (Editor): Official Methods of Analysis of AOAC INTERNA- TIONAL 17 th Edition, Chapter 28, p 18-19, AOAC INTERNATIONAL (2000)