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- あいね いりぐら
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1 Jpn. J. Oral Biol., 29, , (calciton gene-related peptide, CGRP) Calciton gene-related peptide (CGRP)-immunoreactive rat molars Masaaki Hosho, Takeyasu Maeda Department Oral Anatomy and Toshihiko Iwanaga*, Shigeo Kobayashi, Niigata University School Dentistry (Chief: Pr. Shigeo Kobayashi) * Department Anatom y, Niigata University School Medice (Chief: Pr. Tsuneo Fujita) Gakkocho , Niigata 951, Japan and * Asahimachi 1-757, Niigata 951, Japan CAccepted for publication: December k 10, 1986 l Key words: Immunohistochemistry/calciton gene-related peptide (CGRP)/neuril prote/immunoelectron microscopy/rat molars ament Abstract: By use an immunohistochemical technique we vestigated fib ers showg a calciton gene-related peptide (CGRP) immunoreactivity rat molars under both light and elect ron microscopy. The CGRP-immunopositive entered to dental pulp throu men, and were widely distributed coronal pulp gh apical fora-. They were concentrated at ro pulp chamber, formg subodontoblastic plexus. A part m furr penetrated to pre - dent pulp horn. In electron microscopic immunohistochemistry, fib ers were identified as electron-dense elements, which immunoreactivity for CGRP was localized maly at a number large cored vesicles. CGRP- occurred more frequently than any or peptidergic neurons which have been reported dental pulp. These fdgs suggested that CGRP is most important among peptidergic neurons.
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3 星 野 正 明 ほ か:ラ Fig.1 coronal pulp, and plexus. especially PAP ッ ト臼 歯 に お け るCGRP含 dense beneath coronal pulp 有神経. They odontoblastic were cell 223 distributed layer (arrows) to whole form method. ~250 髄 に はCGRP免 varicosityを 疫活 性 神経 が 多数 観 察 され た もつCGRP陽 性 神 経 は,血 管 と並 走 し な が ら根 尖 孔 よ り歯 根 歯 髄 内 に 侵 入 して い た 歯 髄 内 の 陽 性 神 経 は あ ま り 分 岐 す る こ と な く,血 管 に 近 接 し,ま た一 部 の もの は血 管 とは無 関係 に 歯 根 部 歯 髄 を 上 行 して い た 歯 冠 部 歯 髄 に 到 達 す る と,CGRP陽 性 神 経 は 分 枝 を 開 始 し,歯 冠 部 歯 髄 に 広 く分 布 して い た(Fig.1) 陽性 神 経 の多 く は,象 綜 して象 牙 芽 細 牙 芽 細 胞 下 に 多 く集 積,錯 胞 下 神 経 叢 を構 成 し て い た(Fig.1) 部 のCGRP陽 し,歯 性 線 維 は 象 牙 芽 細胞 層 間 を 通 過 髄 一 象 牙 質 境 を 超 え,象 に 侵 入 して い た(Fig.2) CGRP陽 Fig.2 predent. tive s penetrated dental The with to tubules. CGRP-immunoposidot-like appearance predent PAP method through さ ら に,一 牙 前 質 に ま っす ぐ 象 牙 前質 に 侵 入 す る 性 神 経 は 髄 角 部 で 最 も多 か った が,象 牙 質 に ま で 到 達 して い る も の は 認 め ら れ な か っ た CGRP陽 性 の 歯 髄 神 経 は 数 珠 状,い varicosityを もつ 神 経 で,象 わ ゆ る 牙質 の近 傍 お よび象 牙 前 質 内 で は点 状 に な って い た. ~450 (b) NFP免 す で に,我 疫 活 性 神経 々 が 報 告 し た よ うに11-13),非 常に多
4 224 Fig.3 歯 基 礎 誌29: ,1987. NFP-immunoreactive Fig.4 Electron one micrograph was present immunoreactive immunonegative (arrows) coronal pulp vicity which contag. A dense cell was a number occupied fiber by network rich. A electron neurilament NFP-immunoceactive zone Schwann. PAP cell -dense materials ( arrows). ~18,500 method. ~80 holds (*) contaed and one
5 星 野 正 明 ほ か:ラ Fig.5 Electron micrograph large cored ture is observed 数 の歯 髄 神経 がNFP抗 性 神 経 とCGRP陽 似 てい た が,そ 3-4倍 showg vesicles (arrows) between ッ ト 臼 歯 に お け るCGRP含 are recognized termal 体 に反 応 した NFP陽 性 神 経 の分布 パ タ ー ン は よ く の数 は,前 者 の ほ うが後 者 よ り約 多 か った(Fig.3) に染 ま るCGRP陽 数 珠 状 あ る い は点 状 性 神経 に対 して,NFP陽 endg a and 有神経 termals. odontoblast CGRP陽 免 疫 反応 物 は 神 経 に の み認 め られ,シ Many struc-,000 性 の 神経 終 末 に は 多数 の大 型 の 有 芯小 胞 が 観 察 さ れ た が,こ の 終 末 と象 牙 芽 細 胞 と の 間 に は シ ナ プ ス様 構 造 は 認 め ら れ な か っ た(Fig. 5) 考 近 年,神 免 疫反 応 物 は,電 顕 下 で電 子密 度 の高 い像 と して と らえ るこ とが で きた(Fig.4). synapse-like 性神 透 過型 電 子 顕微 鏡的 観 察 CGRPの No (OB). ~25 経 は太 さが 一 定 で,途 切 れ る こ とは なか った この ュ ワン細胞 察 経 生 化 学 の 進 歩 に 伴 い,ニ 特 異 抗 体 を 用 い た 免 疫 組 織 化 学 に よ り,ニ ュー ロ ン と グ リ ア を 染 め 分 け られ る こ と が 可 能 に な っ や象 牙 芽細 胞 に は ま っ た く 存 在 しな か った 歯 髄 た15) 我 々 は,歯 内 の陽性 神経 は,常 尿 素 鍍 銀 法 の 代 わ り に,neurilament に シ ュ ワ ン細 胞 お よび そ の細 ュー ロン あ る い は グ リ ア に 特 異 的 な 蛋 白 が 次 々 に 発 見 され, 髄 神経 の主 要 な 染色 方 法 で あ る prote 胞 質 突起 に抱 か れ て存 在 した 歯 冠 部 辺 縁 部 歯髄 (NFP)の 内 のす べ て のCGRP陽 ッ トの 歯 髄 お よ び 象 牙 質 内 神 経 線 維 を 染 め だ す こ 性 神経 は,無 髄 神経 で あ っ 免 疫 組 織 化 学 的 手 法 を 用 い,ヒ トと ラ た 免 疫反 応 陽 性 の 神経 を強拡 大 で観 察 す る と, と に 成 功 し た11-13) こ のNFPの ペ プチ ドを含 ん で い る と思 われ る直 径60-200nm は,脱 灰 標 本 に お い て も高 い 染 色 性 を 有 す る た の大 型 の有芯 小 胞 が認 め られ た 一 方,CGRP抗 め,硬 組織 領 域 の神 経 支 配 を 研 究 す る の に有 効 な 体 に反応 しなか った神 経 線 維 は 大型 有芯 小 胞 は含 ん でお らず,直 径7-10nmの 神 経 細 線 維 で満 た さ 手 段 で あ る れ てい た(Fig.4) また,辺 縁 部 歯 髄 に み られ る 今 回 の 研 究 は,ラ 内 に,CGRP免 免疫組織化学 ッ ト臼 歯 歯 髄 お よ び 象 牙 前 質 疫 活 性 を示 す神 経 が多 数 存 在 す る
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7 pulp. Pa 4: , ) Wakisaka, S., Nishikawa, S., Ichikawa, H., Matsuo, S., Takano, Y. and Akai, M.: The distribution and orig substance P- like immunoreactivity rat molar pulp and periodontal tissues. Arch. Oral Biol. 30: , ) Uddman, R., Bjorl, G., Moller, B. and Sundler F.: Occurrence VIP s mammalian dental pulps. Acta Odontol. Scand. 38: , ) Uddman, R., Grunditz, T. and Sundler, F.: Neuropeptide Y: occurrence and distribution dental pulps. Acta. Odontol. Scand. 42: , ) Rosenfeld, M.G., Mermod, J.J., Amara, S.G., Swansson, L.W., Sawchenko, P. E., River, J., Vale, W.W. and Evans, R. M.: Production novel neuropeptide encoded by calciton gene via tissue specific RNA processg. Nature 304: , ) Uddman, R., Grunditz, T. and Sundler, F.: Calciton gene-related peptide: a sensory transmitter dental pulp? Scand. J. Dent. 1) Fearnhead, R.W.: Innervation dental Res. 94: , tissues. In: Miles, A.E.W. (ed.): Structural and chemical organization teeth. Aca- 11) Maeda, T., Iwanaga, T., Fujita, T. and Kobayashi, S.: Immunohistochemical demonstration s human dental demic Press. New York, , ) Pohto, P. and Antila, R.: Demonstration adrenergic human dental pulp with antisera agast neurilament prote and glia-specific S-100 prote. Arch. pulp by histochemical fluorescence method. Histol. Jpn 48: , Acta Odontol. Scand. 26: , ) Maeda, T., Iwanaga, T., Fujita, T. and 3) Pohto, P. and Antila, R.: Acetylcholeesterase and noradrenale s Kobayashi, S.: Immunohistochemical demonstration s predent and dent human third molars with use mammalian dental pulps. Acta. Odontol. Scand. 26: , an antiserum agast neurilament prote (NFP). Cell Tissue Res. 243: , ) Maeda, T., Iwanaga, T., Takahashi, Y., 5) Olgart, L., Hokfelt, T., Nilson, G. and Fujita, T. and Kobayashi, S.: Distribution Pernow, B.: Localization substance P- immunoreactive to neuro- like immunoreactivity s tooth filament prote rat molars and periodontium. Cell Tissue Res ( press) 14) Sternberger, L.A.: Immunohistochemistry. 2nd. Prentice-Hall, Englewood Cliffs, New Jersey ) Bock, E.: Nervous system specific protes. J. Neurochem. 30: 7-14, ) Ohtsuka, M. and Konishi, S.: Substance P and excitatory transmitter primary sensory neurons. Cold Sprg Harbor Symp. Quant. Biol. 40: , ) Lee, Y., Kawai, Y., Shiosaka, S., Takami, K., Kiyama, H., Hillyard, C.J., Girgis, S., Mactyre, I., Emson, P.C. and Tohyama, M.: Coexistence calciton gene-related peptide and substance P-like peptide sgle cells trigemal ganglion rat: immunohistochenical analysis. Bra Res. 330: , ) Bra, S.D., Williams, T.J., Tipps, J. R., Morris, H.R. and Maclntyre, I.: Calciton gene-related peptide is a potent vasodilator. Nature 313: 54-56, 1985.
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