6:180 血 液 図2 Neocarzinostatin投 c:60分 後,d:120分 後.白 後,b:30分 の そ の 他 の 目 的 で,現 在,最 各種 の抗 白血 病 剤 の 白血 病 細 胞 に お よ ぼす 影 響 る 実 験 白 血 病 で あ る, を経 時 的 か つ 表 面
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- のぶみつ つねざき
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2 6:180 血 液 図2 Neocarzinostatin投 c:60分 後,d:120分 後.白 後,b:30分 の そ の 他 の 目 的 で,現 在,最 各種 の抗 白血 病 剤 の 白血 病 細 胞 に お よ ぼす 影 響 る 実 験 白 血 病 で あ る, を経 時 的 か つ 表 面 形 態 学 的 に 観 察 し,比 較 検 討 2.走 白 血 病 剤 の 種 類 に よ りお の お の 異 っ た 特 徴 あ る 変 化 が み られ る と い う興 味 あ る 知 見 を え た の で 報 告 す る. 1.白 査 電顕的観 察のため の試料作 成 7.2)で し,日 をBDF1マ 移 植 後6日 目 の,腹 L1210白 ウ ス 白血 病 細 胞 を な わ ち,L1210マ 1 106個 処 理 し たcover glassにl1210細 ウ ス白血 病 細胞 胞 固 定 し, セ トンか ら無 水 ア セ トン ま で の 上 昇 ア 立HCP-1臨 acetateに 置換 界 点 乾 燥 装 置 で 乾 燥 し, Gold-palladiumを 蒸 着 後,JSM-U3型 走 査 電 子 顕 微 鏡 で 観 察 し た. ウ ス腹 腔 内 に 移 植 し, II.成 水 の 充 分 貯 溜 した マ ウ ス に, 血 病 に 対 す る 抗 白 血 病 剤 のoptimal 1.抗 dose(ncso.25mg/kg,dvi1mg/kg,vcr 1mg/kg,CA20mg/kg)を 血 病 細 胞 は,直 腹 腔 内 に 投 与 し, ん ど な く,表 径6 10の の 多 数 のmicrovilliが 形 態 で あ っ た(図1-a,b). ウ ス白血 病 は 腹 水 型 で継 代 され る リン パ 性 白 血 病 で あ り,抗 癌 剤 の ス ク リー ニ ン グ, -6- 球形 で凹 凸 はほ と 面 に 長 さ0.1 1μ,幅 μ に,経 時 的 に 採 取 し た 腹 水 細 胞 を 用 い た. 績 白 血 病 剤 投 与 前 の 無 処 置 のL1210白 投 与 前 お よ び 投 与 後5分,30分,60分,120分 L1210マ 液(PH セ トン 系 列 で 脱 水 後,Isoamyl 血病細胞 用 い た.す も広 く使 用 さ れ て い を の せ,1.2%glutaraldehydeで30分 料 お よび 方 法 材 料 と し て は,L1210マ 後 Poly-L-Lysine30μg/ml加PBS溶 50%ア 1.材 第3号 線:1μ, istille(vcr),cytosine訂abinoside(ca)等 し た と こ ろ,抗 と 脈 管 第6巻 認 め ら れ,ほ ぼ均一 の 2.Neocarzinostatin投 NCSに 胞 表 面 の 窪 み と,か よ る 変 化 は,細
3 Blood&Vessel 図3 6:181 Daunomycin投 d:120分 後.白 か る変 化 がNCS投 線:1μ. 与 後 か な り早 期 に 出 現 す る こ とが 特 徴 的 で あ っ た.す 5分 後 で,す な わ ち,NCS投 与 で に大 多 数 の細 胞 の歪 み,陥 凹, の細 胞 に は 表 面 に 円形 の窪 み が み られ た.ま た 膨 化 した と老 え られ る巨 大 な 細 胞 の 出現 が 認 め 後 に は 細 胞 膜 の 円形 の 窪 み が よ り明 瞭 とな り,巨 大 な 細胞 も増 加 した (図2-c)-120分 後 に は,ほ 後, 30分 後 で は5分 後 と ほ ぼ 同 様 で あ っ た(図3-b). 60分 後 で は,約 半 数 の 細 胞 に(図3-c),120分 べ て の 細 胞 に 著 明 な 変 化 が み られ た (図3-d). 30分 後 に は紙 風 船 が しぼ ん だ よ うに な り,1部 られ た(図2-b).60分 後,c:60分 5分 後 で す で に 少 数 の 細 胞 に 認 め ら れ(図3-a), 後 で は,す 突 出 等 の 明 瞭 な形 態 変 化 が み られ た(図2-a) 後,b:30分 とん どす べ て の細 4.Vincristine投 与 後 の変化 5分 後 で は 少 数 の 細 胞 表 而 よ り瘤 状 突 出 が み ら れ た り,表 面 の 小 隆 起 や 陥 凹 が 認 め ら れ た (図4-a).30分 後 に は細胞 内容 が 出 て きた よ うな 大 き な 突 起 を も つ 手 鏡 状 の 細 胞 や,表 胞 に か か る変 化 が 出 現 し,microvilhは ほ とん 腫 瘤 状 小 隆 起 の 数 も増 加 し た(図4-b).60 どみ られ ず,多 数 の 小 孔 が観 察 され,軽 石の表 120分 面 を み る が ご と くで あ った.cytolysisを 起し て い る 細 胞 も多 くみ られ た.比 較 的 変 形 の 少 な い 細 胞 で も,表 面 の 大 小 の 窪 み の た め に,あ た か も月 の 表 面 を思 わ せ る もの で あ った(図2-d). 3.Daunomycin投 た か もブ ドウ房 状 を呈 す る極 め て特 異 な 変 化 が 観 察 さ れ た.か か る変 化 はDM投 与 -7- の よ うな 細 胞 は 増 加 して く る が 高 頻 度 に は み られ ず,変 化 のな い細 胞 の方 が 多 か っ た. 5.Cytosine arabilloside投 30分 後 ま で は 薬 剤 に よ る 影 響 は 全 く認 め られ ず(図4-e),60分 細 胞 表 面 よ り腫 瘤 状 突 起 や,瘤 状 の 小 隆 起 が み られ,あ 後 に は,こ 面 の 後 に は 変 形,凹 凸 の あ る細胞 が わ ず か に認 め られ る程 度 で あ り,120分 後に は 腫 瘤 状 突 出 や 表 面 の 陥 凹 の あ る 細 胞 が み られ た りす る が(図4-d),こ の よ うな 変 化 を受 け
4 6 血 液 :182 図4 と 脈 管 第6巻 上 段:Vincristine投 後b:30分 下 段:Cytosine arabinoside投 血 病 細 胞 の 経 時 的 変 化c:5分 d:120分 後.白 線;1μ. た 細 胞 は 少 数 し か み ら れ な か っ た. な く,む し ろ,microvilliは 数 の 円 形 の 窪 み が で き,あ III.考 L1210白 案 と く で あ っ た,中 血 病 細 胞 に お よぼ す 抗 白血 病 剤 の 影 響 を 走 査 電 顕 で 観 察 し比 較 検 討 し た 結 果, NCSは 作 用 の 発 現 が 早 く,し actionと た.DMに よ る作 用 の 発 現 も早 く,2時 に はtotal 思 え る変化 が 認 め られ cell killin9の の 薬 剤 はcycle 状 態 で あ り,こ phase non-specificで と を 示 して い る.VCRお よ びCAで ま た,従 来,下 胞 に お け るcytocydal れ ら 抗 癌 剤 を,細 あ る こ は,時 くらべ て非 depen- 間 後 の 形 態 変 化 で 特 徴 的 な の は,DM actionの は 特 に 目立 っ た 瘤 状 突 出 は -8- 様 式 に よ って の うち作 用 明 な もの を 時 間 接 触 の 場 合 は殺 細 胞 作 用 は わず る 濃 度 以 上 で はtime な 作 用 を 示 すII型 dependent に 分 類 し,NCSはIa型,,VCR,CAはII型 報 告 して い る が,か か る 分 類 は,私 に お け る こ れ ら の 薬 剤 のL1210細 で は 表 面 よ り大 小 多 数 の 腫 瘤 状 突 起 が 現 れ る の に 反 して,NCSで vitroのl1210細 濃 度 差 の ほ と ん ど な い も の をIa,著 DMはIb型 あ る こ と が 表 面 形 態 的 に も判 別 で き た. 査電 関 係 な く殺 細 胞 作 用 を 示 すI型(そ か で あ り,あ ま た2時 胞 膜 面 への 胞 と の接 触 時 間 の 長 短 に ほ とん ど Ib)と,短 dentで 山 ら5)がin 間後 間 以 内 で は 全 体 と して は変 specificでtime 作用 機序の 顕 に よ る 観 察 結 果 で も そ の 可 能 性 が 示 唆 さ れ た. 数 は 増 加 し た が2時 常 に 少 な く,Sphase 面 に多 た か も軽 石 を み る こ 成 阻 害 の 他 に,細 間 の経 過 と と もに薬 剤 に よ る変 化 を受 け た細 胞 化 の み ら れ る 細 胞 はNCS,DMに 消 失 し,膜 直 接 作 用 の あ る こ と を 報 告 し て い る が,走 か も多数 の 細胞 にcytotoxic 後 後, 村 ら4)はNCSの 1つ にDNA合 第3号 に属 す る と 達 のin す 経 時 的 形 態 変 化 の観 察 結 果 と も符 合 し て 興 味 深 い. vivo 胞 に お よぼ,極 め
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