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1 TOYOBO 30~50%OFF!! 期間 : 2013 年 7 月 17 日 ~ 2013 年 9 月 30 日 [ ご注文分 ] *qpcr 関連商品のキャンペーンは 2013 年 6 月 24 日から既に開始しております

2 KOD DNA polymerase は強い校正活性と高い伸長性をもつ KOD DNA polymerase は ポリメラーゼ活性に加え 強力な 3-5 エキソヌクレアーゼ活性 ( 校正活性 ) を有し 誤って取り込まれた塩基を除去しながら合成を行うため 校正活性のない Taq DNA polymerase などに比べ 飛躍的に高い正確性で DNA 合成を行うことができ クローニング等の用途に適しています また KOD DNA polymerase の DNA 複製速度は 約 130 base / sec. と Taq DNA polymerase の約 2 倍であり 高効率 高速 PCR にも適しています KOD DNA polymerase の立体構造解析から 他のポリメラーゼに比べ Thumb 領域が弛緩した状態であることが分かっており そのダイナミックな構造変化が速く正確な複製に関与していると推察されています それらの性質を利用して 様々な製品が開発されました ここでは KOD -Plus- シリーズと KOD FX シリーズを主にご紹介いたします KOD FX 強い校正活性 優れた DNA 合成活性阻害物質に強い KOD -Plus- シリーズ KOD FX シリーズ KOD DNA polymerase は 今中忠行先生らのグループにより 鹿児島県小宝島の硫気孔から分離されました 遺伝子クローニング 迅速検出等 ジェノタイピング 高難易度 PCR 等 KOD 2xBuffer 待望のクルード 難配列用 PCR 酵素! KOD FX シリーズは 優れた増幅成功率 増幅効率 伸長性を示し クルードサンプルを用いるジェノタイピングをはじめ 難配列ターゲットの増幅など 時間の短縮やトラブルシューティング的な使い方ができる 有用な酵素です 特に マウステールや植物サンプルからのジェノタイピングは 短時間の処理によって得られたライセートから直接 PCR 可能であり 煩雑な抽出作業をスキップすることができます 難配列に強い (High GC%, AT% Long targets) KOD FX Neo はゲノム DNA から最大 40 kb の増幅が可能です クルードサンプルに強い KOD FX シリーズは 阻害を受けにくいという酵素の特性をさらに引き出すことにより 今まで困難だった核酸を含むクルードサンプルからの高効率な増幅が可能となりました マウステール 植物 土壌 細胞壁を有する微生物からの直接増幅に強い 血液 つめ ヒレ ( 魚 ) 食品など ホットスタート対応 高効率 高成功率 PCR 酵素 KOD FX Neo 200 U 1 本 KFX ,000 21,000 高成功率 PCR 酵素 KOD FX 200 U 1 本 KFX ,000 21,000 μ KOD Neo シリーズには伸長エンハンサー技術が使われています PCR 酵素による遺伝子増幅において 20 サイクル目以降 基質の消耗 劣化や酵素の失活 副生成物による阻害など様々な要因によって 増幅産物がそれ以上増えにくくなる いわゆる プラトー現象 が問題となっていました TOYOBO では プラトー現象を抑える効果のある物質を見出し KOD Neo シリーズに応用することに成功しました 伸長エンハンサーの添加により 20 サイクル以降も増幅が効率的に継続するため 飛躍的な増幅効率の向上が期待できます 特に 長いターゲットの増幅効率が飛躍的に向上し また高速条件 ( 伸長時間 30 sec./kb) を実現しました 20 Cycle Number KOD Neo KOD -Plus- Neo KOD -Plus- ( 従来品 ) Cycle numbers X15 X20 X25 X30 X35 X40 X45 X50 PCR 阻害成分伸長エンハンサー KOD DNA polymerase

3 KOD -Plus- KOD -Plus- シリーズは KOD DNA ポリメラーゼのもつ高い Proof-reading 活性 (3-5 エキソヌクレアーゼ活性 ) を活かし ホットスタート法をはじめ様々な改良を加え Taq の約 80 倍という高い正確性を保ちながら PCR 効率を向上させています 昨年発売された最新バージョン KOD -Plus- Neo は 新規な伸長エンハンサーを添加することで 微量サンプルからの増幅や長鎖ターゲットの増幅効率を向上させています また 伸長時間を 30 sec./kb と短縮し 高速化にも成功しました KOD -Plus- KOD -Plus- Neo 高正確 KOD FX KOD FX Neo Pfu DNA polymerase A 社 Long PCR 酵素 Taq DNA polymerase Mutation frequency (100,000 塩基あたりのエラー塩基数 ) 各酵素における PCR エラー率の比較 ホットスタート対応 高正確 高効率 高速 PCR 酵素 KOD -Plus- Neo 200 U 1 本 KOD ,000 18,000 高正確 高効率 PCR 酵素 KOD -Plus- Ver U 1 本 KOD ,000 18,000 高正確 PCR 酵素 KOD -Plus- 200 U 1 本 KOD ,000 18,000 μ 10 A-attachment Mix は KOD -Plus- シリーズ KOD FX シリーズ等で増幅した未精製の PCR 産物に添加することで 平滑末端に A を導入する試薬です 本試薬には 抗 KOD DNA polymerase 中和抗体と Taq DNA polymerase が含まれており 効果的に DNA 末端に A を付加することができます (Taq が A を付加し 抗 KOD 抗体が KOD 残留校正活性による平滑化を防止します ) A を導入した産物は Ligation high Ver.2 (Code No. LGK-201)[ キャンペーン対象品 ] を用いて 任意の T ベクターと連結することができます また 同一原理で T ベクターやリガーゼを含むフルキット TArget Clone TM -Plus- (Code No. TAK-201) ( キャンペーン対象外 ) もございます KOD DNA ポリメラーゼ エキソヌクレアーゼの阻害 TA クローニング用 A 付加試薬 (KOD 用 ) 10 A-attachment Mix 高効率 TA クローニングキット (KOD 用 ) TArget Clone TM -Plus- 25 回用 TAK ,000 7, 回用 TAK ,000 対象外 抗 KOD DNAポリメラーゼ抗体 PCR 産物 A A da の付加 Taq DNA polymerase A-attachment Mixの原理 KOD Dash と Blend Taq は それぞれ KOD DNA polymerase (exo-) と Taq DNA polymerase に 校正活性を有する PCR 酵素を微量混合することにより 取り込みエラーによる複製の停止を防止し 長鎖 PCR の効率を高めるという方法 (Barnes らの方法 ) を用いています KOD Dash 伸長時間を 30 sec./kb に設定可能 ( 迅速検出 ) Blend Taq 長鎖ターゲットを高効率に増幅 コロニーダイレクト PCR に最適 スタンダードな高性能 Taq として使用可能 長鎖ターゲットを高効率に増幅 コロニーダイレクト PCR にも最適 Blend Taq M rtaq DNA polymerase M 高効率 PCR 酵素 KOD Dash 高性能 Taq ポリメラーゼ Blend Taq 高性能 Taq ポリメラーゼ ( ホットスタート対応 ) Blend Taq -Plus- 250 U 1 本 (100 ~ 200 回用 ) 250 U 1 本 250 U 1 本 LDP ,000 15,000 BTQ ,000 11,400 BTQ ,000 12,600 μ

4 Quick Taq HS DyeMix は 2 濃度に調整されています プライマーと滅菌水を加えて反応液を簡単に調製できます 凍結融解 30 回 4 保存 3 ヵ月において安定性を確認しています ホットスタート対応 品名 包装 Code No. 通常価格 1.25 ml 2 本ホットスタート対応 色素入り Taq Master Mix (100 回用 ) DTM-101 9,800 5,880 Quick Taq HS DyeMix (1.25 ml 2 本 ) 10 (1,000 回用 ) DTM-101X10 44,000 対象外 μ サンプル ( DNA 溶液 大腸菌コロニーなど ) PCR ( ホットスタート対応 ) コロニーダイレクト PCR に最適です そのままゲルにアプライ可能 クローニング用コンピテントセル Competent high DH cfu/μg (pbr322) と高効率です SOC 培地が添付されており すぐに形質転換が可能です 包装:100 μl 10 本 Code No. DNA-903 品名 ( セット品 ) Competent high DH5α/ Quick Taq Set Code No. DNA903/DTM101 14,000 40% ~ OFF Competent high DH5α (Code No. DNA-903) 通常価格 : \17,000 キャンペーン ( セット ) 価格 \14,000 Quick Taq HS DyeMix (Code No. DTM-101) 1) 通常価格 : \9,800 サブクローニング用コンピテントセル Competent Quick DH5 約 10 分で形質転換が完了します -80 で 3 ヵ月間保存することができます 10 8 cfu/μg (pbr322) と高効率です 20 本入りでお得です Competent Quick DH5α 100 μl 20 本 DNA ,000 17,400 Competent Quick DH5α プレートへ播種 DNA 溶液 On ice Heat shock (42 ) 5min. 1min. 約 10 分 [Competent Quick DH5α] 高効率ライゲーション試薬 -20 保存での試薬の状態 Ligation high Ver.2 Ligation high 1 液タイプのライゲーション試薬です 高効率にライゲーションできます Ligation high Ver.2-20 で凍結しないため 便利にお使いいただけます TA クローニング効率がアップ A-attachment mix [Code No. TAK-301] を併用することで KOD -Plus- シリーズで増幅した DNA 断片の任意のベクターへの導入効率を飛躍的に高めることができます 品名 包装 Code No. 通常価格 Ligation high Ver μl 1 本 LGK ,000 13,200 Ligation high 375 μl 2 本 LGK ,000 12,000 1 回の使用量を 15 μl とした場合 50 回用として 7. 5 μl とした場合 100 回用としてご使用いただけます

5 KOD -Plus- Mutagensis Kit は KOD -Plus- の高い正確性を活かした Inverse PCR 法に基づく部位特異的変異導入キットです 通常の一塩基置換に加え 欠失や挿入など 幅広い変異導入が可能です また NNN のように連続したランダム変異を持つライブラリーの作製などにも適しています 置換 or Template plasmid His-Tag (18 bp) 挿入における効率比較 配列確認を試みたクローン数 目的の変異を有していたクローン数 目的とした変異体の割合 KOD -Plus- Mutagenesis Kit % A 社キット ( 非 PCR 法 ) % Template (Plasmid) 変異導入フロー PCR Primer X 変異導入箇所 メチル化部位 Inverse PCR (5 ~ 10 サイクル ) <0.5 ~ 2hr> PCR Dpn I による鋳型 Plasmid の分解 <37 1hr> Dpn I によって断片化された鋳型 Plasmid Mutant Transform E.coli PCR 産物の Self-ligation (Kinase / Ligase) <16 1hr> 変異が導入された Plasmid 本試薬には以下の試薬が含まれています KOD -Plus-, 10xBuffer for ipcr, 2mM dntps, Dpn I, T4 Polynucleotide Kinase, Ligation high, Control plasmid, Control primer#1, Control primer#2 部位特異的変異導入キット KOD -Plus- Mutagenesis Kit 20 回用 SMK ,000 22,800 M-MLV RTase をベースとして開発された高効率逆転写酵素です タンパク質工学技術により ポリメラーゼドメインと RNase H ドメインを改変することで 伸長性と高温反応性が向上しています RTase activity M-MLV RTase RNase H RNase H activity 反応温度 ( ) ReverTra Ace A 社酵素 B 社酵素 高効率逆転写酵素 ReverTra Ace 10,000 U 1 本 TRT ,000 10, ~ 60 における cdna 合成効率の比較 MagExtractor TM -Genome- 血液 ( 全血 ) や培養細胞 組織などから高純度ゲノム DNA を抽出するためのキットです MagExtractor TM -Plant Genome- 葉 種子などの植物組織や植物培養細胞などから高純度のゲノム DNA を抽出するためのキットです 回収した DNA は PCR などの酵素反応に直接使用できます 主な対応サンプル血液培養細胞組織マウステール 主な対応サンプルタバコ ( 培養細胞 ) イネ ( 葉 ) シロイヌナズナ ( 葉 ) 大豆 ( 凍結乾燥 ) 収量 2 μg / 100 μl 全血 3 μg / cells (HeLa cell) 5 μg / 5 mg ( 組織 ) 3 μg / 2 mm テール 収量 2 ~ 3 μg / 100 mg 3 ~ 5 μg / 100 mg 1μg / 100 mg 2 μg / 25 mg Magical Trapper ( キャンペーン非対象品 ) 磁性ビーズを使用した核酸やタンパク質のマニュアル法での精製に最適な磁性チューブスタンドです 1.5 ~ 2ml マイクロチューブ 10 本 15 ml チューブ 1 本 ( 背面 ) を保持することが可能です 従来の磁性スタンドに比べ軽量設計になっています 30%OFF ゲノム DNA 抽出キット MagExtractor TM - Genome - 00 回用 NPK ,000 19,600 MagExtractor TM - Genome - 植物ゲノム DNA 抽出キット MagExtractor TM - Plant Genome - 磁性スタンド Magical Trapper 100 回用 1 個 NPK-501 MGS ,000 38,000 19,600 対象外

6 100 bp DNA Ladder [DNA-035, DNA-135] DNA 濃度 (ng/6μl)* 2 1,500bp 10 1,000bp bp bp bp bp bp* bp bp bp bp 25 DNA 濃度の推定が容易 各バンドの DNA 量が厳密に調整されています 明瞭なバンド 全体のバンド強度のバランスを整えることにより 従来品に比べバンドが判別しやすくなりました *1 500bp のバンドは強調されています *2 色素別添タイプはマーカー 5μl と色素 1μl を混合し ロードします Ready-to-use タイプはそのまま 6μl をロードします マイクロチップキャピラリー電気泳動解析結果 キャンペーン品名包装 Code No. 通常価格価格 < 色素別添タイプ > : 6 X Loading Dye が添付されています DNA Ladder Markers, 100 bp DNA Ladder DNA Ladder Markers, 200 bp DNA Ladder DNA Ladder Markers, 1 kb DNA Ladder DNA Size Markers, λ/hind III digest DNA Size Markers, φx174/hae III digest DNA Size Markers, λ/hind III digest -φx174/hae III digest μg 1 15μg 1 25μg 1 DNA-035 DNA-031 DNA-032 DNA-010 DNA-012 DNA ,000 20,000 22,000 17,000 7,000 12,000 13,200 10,200 50% OFF 1 kb DNA Ladder [DNA-032] < 色素別添タイプ > *5,000bp のバンドが強調されています 200 bp DNA Ladder [DNA-131] [DNA-031] <Ready-to-use タイプ > 40 ~ 50%OFF 10,000 bp 9,000 bp 8,000 bp 7,000 bp 6,000 bp 5,000 bp * 4,000 bp 3,000 bp 2,000 bp 1,000 bp < 色素別添タイプ > 6,600 bp <Ready-to-use タイプ > : Loading Dye があらかじめ混合されています Loading Quick 100 bp DNA Ladder Loading Quick 200 bp DNA Ladder Loading Quick DNA Mass Ladder Loading Quick λ/hind III digest 40μg 2 Loading Quick φx174/hae III digest 20μg 1 Loading Quick λ/hind III digest - φx174/hae III digest 20μg 1 DNA-135 DNA-131 DNA-134 DNA-110 DNA-112 DNA ,000 15,000 27,000 10,000 18,000 20,000 7,000 16,200 6,000 10,800 12,000 50% OFF 4,000 bp 2,200 bp 200 bp 1,000 bp * ~ ~ 200 bp 200 bp ~ 200 bp bp* ~ 200 bp 200 bp *1,000bp のバンドが強調されています 品名 包装 Code No. 通常価格 Alu I BamH I Bcl I Bgl I Bgl II Dde I Dpn I EcoR I EcoRV Hind III Hinf I Mlu I Mro I Msc 500U 1 12,000U 1 500U 1 1,000U 1 6,000U 1 500U 1 1,000U 1 12,000U 1 4,000U 1 12,000U 1 2,000U 1 1,000U 1 40U 1 40U 1 ALU-101 BAH-111 BCL-101 BGL-101 BGL-211 DDE-101 DPN-101 ECO-111 ER5-101W HND-311 HNF-101W MLU-101 MRO-101 MSC-101 8,000 8,500 13,000 10,000 11,000 12,000 8,000 11,000 10,000 4,800 5,100 7,800 6,000 6,600 7,200 4,800 6,600 6,000 品名 包装 Code No. 通常価格 Nco I Nhe I Not I Pst I Pvu I Pvu II Sac I Sal I Sfi I Sma I Spe I Sph I Xho I 200U 1 250U 1 1,000U 1 12,000U 1 200U 1 5,000U 1 5,000U 1 5,000U 1 2,000U 1 3,000U 1 200U 1 600U 1 3,000U 1 NCO-101 NHE-101 NOT-111X PST-111 PVU-101W PVU-211 SAC-111 SAL-111 SFI-111 SMA-111 SPE-101 SPH-111 XHO-101 5,500 5,500 15,000 10,000 16,000 14,000 13,000 15,000 15,500 7,500 13,000 7,000 3,300 3,300 6,000 9,600 8,400 7,800 9,300 4,500 7,800 4,200

7 ウェスタンブロット ELISA 免疫染色等の感度不足 特異性でお困りの方 是非一度お試しください ウェスタンブロット ELISA 用 Can Get Signal 酵素標識 及び蛍光標識抗体で使用可能です 現在お使いのブロッキング試薬や検出試薬を変更する必要はありません PCR Antigen 使用方法は簡単 1 次抗体 2 次抗体 Can Get Signal Solution 1 Can Get Signal Solution 2 酵素標識 及び蛍光標識抗体で使用可能です 現在お使いのブロッキング試薬や検出試薬を変更する必要はありません 操作フロー ( ウェスタンブロット ) 抗体を直接希釈して使用するだけ! ー塩バッファー界面活性剤添加剤その他 Antibody 最適 I E ( immunoreaction enhancing ) technology PCR 用バッファーはポリメラーゼの活性や特異性を引き出すために種々の工夫が重ねられてきました 一方 ウェスタンブロット用の反応液 ( 抗体希釈液 ) は汎用バッファー (TBS-T, PBS-T) やブロック剤溶液などが使われるだけでした そこで TOYOBO は多変量解析法を用いて 抗原抗体反応を最適条件で行うための条件を絞り込み Can Get Signal を開発しました + Prestained Marker Samples Membrane + SDS-PAGE Gel ウエスタンブロットによる各種タンパク質の検出 HeLa 細胞のライセートをサンプルとして ウエスタンブロット法によって Human β-actin 及び ERK-2 の検出を行いました その結果 従来法 (TBS-T 使用 ) 他社試薬に比べ Can Get Signal を用いた場合 明らかなシグナルの増強と 特異性の向上が見られました 従来法 (TBS-T) Human β-actin 洗浄洗浄洗浄洗浄 Gel Membrane Membrane Membrane 1 次抗体反応 2 次 ( 標識 ) 抗体反応 Solution 1 Solution 2 Can Get Signal で抗体を希釈 ERK-2 Can Get Signal A 社試薬 Can Get Signal B 社試薬 Membrane 低感度 PVDF Blocking Reagent for Can Get Signal は Can Get Signal を用いるウェスタンブロット解析に適した人工合成ブロッキング試薬です 日油株式会社により専用製品として製造されています 42 kda 1: 2-0 希釈 2: 2-1 希釈 3: 2-2 希釈 4: 2-3 希釈 PVDF Blocking Reagent for Can Get Signal 非特異反応 品名及び内容包装 Code No. 通常価格 Can Get Signal Immunoreaction Enhancer Solution Solution 1 for primary antibody Solution 2 for secondary antibody 各 250ml 1 本 NKB ,000 18,000 Can Get Signal Solution 1 250ml 1 本 NKB ,000 10,200 Can Get Signal Solution 2 250ml 1 本 NKB ,000 10,200 PVDF Blocking Reagent for Can Get Signal 500ml 1 本 NYPBR01 13,500 対象外 Solution 1 と 2 は それぞれ 1 次抗体と 2 次抗体に対応しています 多くの場合において 使用する抗体の量を減らすことができます

8 免疫組織染色 ( I H C ) 用 Can Get Signal immunostain 組織 細胞に対応 パラフィン包埋切片 凍結切片に対応 ABC 法やポリマーコンプレックス法などとの併用も可能 使用方法は簡単 1 次抗体 2 次抗体 Can Get Signal Solution A or B 抗体を直接希釈して使用するだけ! Schneider 2 (S2) の alpha-tubulin 染色における従来法との比較実 Drosophila 細胞株 [Schneider 2 (S2)] から 2 次抗体として Alexa Fluor 488 標識 anti-mouse IgG を用いて alpha-tubulin の検出を行いました その結果 従来法ではやや diffuse であったチューブリン束のシグナルが鮮明に検出されました また 細胞内のバックグラウンドと思われるシグナルが減少傾向にありました 特に Solution B の方がシグナルが若干強い印象を受けました データは 京都大学 研究員様よりご提供いただきました 従来法 (1% BSA, 0.02% TX-100 /PBS 使用 ) Can Get Signal immunostain (Solution A) 使用 Can Get Signal immunostain (Solution B) 使用 CD133 免疫染色における従来法との比較検討 ヒト脳腫瘍 ( グリオブラストーマ ) に発現する CD133 を パラフィン包埋切片をサンプルとして検出を行いました 1 次抗体には Rabbit polyclonal to CD133-Stem Cell Marker を用い 1 次抗体の希釈は 1%BSA/PBS もしくは Can Get Signal immunostain (Solution B) にて行いました 検出は Envision (Dako ChemMate) を用い DAB 発色にて行いました その結果 従来法で微弱なシグナルが Can Get Signal immunostain を使用することで増強されることが分かりました データは 北海道大学大学院医学研究科分子細胞病理学分野野田頭未歩先生 笹井研先生よりご提供いただきました 従来法 (1% BSA/PBS 使用 ) Can Get Signal immunostain (Solution B) 使用 操作フロー (ABC 染色 ) 脱パラフィン洗浄洗浄洗浄洗浄洗浄 1 次抗体反応 2 次 ( 標識 ) 抗体反応 必要に応じて Solution A Solution A 内在性ペルオキシダーゼの or Solution B or Solution B 失活処理 抗原の賦活化処理 アビジン ビオチン複合体 Can Get Signal immunostain で抗体を希釈 保存 蒸留水 数々の論文は信頼のあかし Can Get Signal を用いた論文は国内外の多くのピアレビュー誌に掲載されています Google 等を用いて確認してみてください Can Get Signal 検索 品名及び内容 Can Get Signal immunostain Startar Set Solution A, Solution B Can Get Signal immunostain Solution A Can Get Signal immunostain Solution B 包装 Code No. 通常価格 各 5ml 1 本 NKB ,000 7,200 20ml 1 本 NKB ,000 18,000 20ml 1 本 NKB ,000 18,000 Solution A と B は それぞれ単品で使用いただく設計になっております 1 次抗体用 2 次抗体用にそれぞれが対応しているわけではありませんのでご注意ください Solution A と B は免疫反応の促進作用が異なります 最初にご使用いただく際に Startar Set (Code No. NKB-401) を用いてご検討いただくことをお薦めいたしております 多くの場合において 使用する抗体の量を減らすことができます

9 リアルタイム PCR 試薬 TaqMan アッセイ SYBR Green I アッセイ SYBR Green I アッセイに問題を抱えている 新しい解析法に応用したい SYBR Green I アッセイ THUNDERBIRD シリーズ KOD SYBR qpcr Mix THUNDERBIRD Probe qpcr Mix THUNDERBIRD SYBR qpcr Mix PCR GC 2 2 kb Taq DNA Polymerase を用いたリアルタイム PCR 試薬です 標準的な条件を用いて 高い精度で解析が可能です KOD exo(-) DNA Polymerase を用いて開発されたリアルタイム PCR 試薬です 通常の試薬にない優れた性能を発揮します cdna 合成試薬 ( リアルタイム PCR 用 ) ReverTra Ace qpcr RT シリーズ qpcr アッセイ用の cdna を高効率で合成したい プレミックス試薬で効率良く cdna を合成したい ゲノム除去機能 +プレミックスでさらに簡便に! ReverTra Ace qpcr RT Kit (Code No. FSQ-101) ReverTra Ace qpcr RT Master Mix (Code No. FSQ-201) ReverTra Ace qpcr RT Master Mix with gdna Remover (Code No. FSQ-301)

10 高効率リアルタイム PCR 用マスターミックス THUNDERBIRD qpcr Mix ( サンダーバード ) 特長 1 高い特異性 ( プライマーダイマーの低減 ) 特長 2 広いレンジでの検出が可能 ( 高効率 ) バッファーに改良を加えることにより SYBR Green I および TaqMan アッセイにおいて 低コピー数のターゲットの検出感度 定量性が向上しました 新規エンハンサーを採用し ターゲットごとの PCR 効率のばらつきを最小限に抑えることにより 広いダイナミックレンジを実現しています THUNDERBIRD SYBR qpcr Mix A 融解曲線 増幅曲線 SYBR Green I 検出系による反応特異性の比較 (Applied Biosystems 7900HT 使用 ) Cycles プライマーダイマーが発生しやすいプライマーセットを用いて 各リアルタイム PCR 試薬による反応特異性の比較を行いました HeLa 細胞 Total RNA から合成した cdna を用いてヒト β-actin 遺伝子 (188 bp) を増幅しました THUNDERBIRD qpcr Mix A 社試薬 B 社試薬 SYBR Green I 検出系による TaqMan 検出系による GAPDH cdna の定量ノロウイルス G1 cdna の検出 (Roche Diagnostics LightCycler 1.1 使用 ) (Roche Diagnostics LightCycler 1.1 使用 ) 10-4 特長 3 高い測定精度 微妙なコピー数の差を 精度よく検出することができます E E slope: : Log Cycles SYBR Green I 検出による cdna 倍希釈系列の検出 サンプル : HeLa 細胞 Total RNA 由来 cdna の (=1.414) 倍希釈系列 (7 水準, N = 4 ) ターゲット遺伝子 : GAPDH 反応液量 :20 µl 測定装置 : Applied Biosystems 7900HT Applied Biosystems Roche Diagnositics 特長 4 様々な機器に対応 ABI PRISM 7000 ABI PRISM 7700 Applied Biosystems 7300 Applied Biosystems 7500 Applied Biosystems 7500 FAST Applied Biosystems 7900HT Applied Biosystems StepOne Applied Biosystems StepOnePlus LightCycler 1.x / 2.0 LightCycler Nano LightCycler 480 Bio-Rad/MJ Agilent Technologies TaKaRa BioFlux icycler iq MiniOpticon CFX96 Touch Mx3000P Mx3005P Mx4000 Thermal Cycler Dice Line Gene (TaqMan アッセイ用 ) THUNDERBIRD Probe qpcr Mix THUNDERBIRD Probe qpcr Mix 50 ROX reference dye (SYBR Green I アッセイ用 ) THUNDERBIRD SYBR qpcr Mix THUNDERBIRD SYBR qpcr Mix 50 ROX reference dye 1.67ml 3 本 [200 回用, 50 µl 反応 ] 1.67ml 3 本 [200 回用, 50 µl 反応 ] QPS ,000 17,400 QPS ,000 品名 ( セット品 ) 包装 Code No. 通常価格 THUNDERBIRD Probe qpcr / RT Set *1 [ セット販売品 ] 17,400 THUNDERBIRD Probe qpcr / THUNDERBIRD Probe qpcr Mix と QPS101/FSQ201 63,000 RT Set II *2 [ セット販売品 ] ReverTra Ace qpcr RT Master Mix とのセット 37,800 THUNDERBIRD SYBR qpcr / THUNDERBIRD SYBR qpcr Mix と QPS201/FSQ201 63,000 RT Set II *2 [ セット販売品 ] ReverTra Ace qpcr RT Master Mix とのセット 37,800 THUNDERBIRD Probe qpcr / THUNDERBIRD Probe qpcr Mix と ReverTra Ace qpcr RT Kit とのセット QPS101/FSQ101 63,000 37,800 THUNDERBIRD SYBR qpcr / THUNDERBIRD SYBR qpcr Mix と QPS201/FSQ101 63,000 RT Set *1 [ セット販売品 ] ReverTra Ace qpcr RT Kit とのセット 37,800 THUNDERBIRD Probe qpcr Mix と ReverTra Ace RT Set III *3 [ セット販売品 ] qpcr RT Master Mix with gdna QPS101/FSQ301 65,000 Remover とのセット 39,000 THUNDERBIRD SYBR qpcr / THUNDERBIRD SYBR qpcr Mix と ReverTra Ace RT Set III *3 [ セット販売品 ] qpcr RT Master Mix with gdna Remover とのセット QPS201 /FSQ301 65,000 39,000 *1 THUNDERBIRD qpcr Mix (\ 29,000 \16,400) と ReverTra Ace qpcr RT kit (\ 38,000 \21,400) のセット販売品です *2 THUNDERBIRD qpcr Mix (\ 29,000 \16,400) と ReverTra Ace qpcr RT Master Mix (\ 38,000 \21,400) のセット販売品です *3 THUNDERBIRD qpcr Mix (\ 29,000 \16400) と ReverTra Ace qpcr RT Master Mix with gdna Remover (\ 40,000 22,600) のセット販売品です

11 高効率リアルタイム PCR 用マスターミックス KOD SYBR qpcr Mix KOD SYBR qpcr Mix のコンセプト KOD SYBR qpcr Mix は KOD DNA Polymerase の酵素特性 ( 高効率 クルード成分の阻害を受けにくい ) を活かし SYBR Green I アッセイの利便性と汎用性を更に高めることを目指しました 従来の試薬との特性比較 酵素 増幅長 GC 含量の高いターゲットの増幅 阻害物質の影響 従来品 (Taq 使用 ) Taq DNA Polymerase 70 ~ 150 bp ( 最大 :300 bp) 不得意 受けやすい (DNA の精製が必要 ) KOD SYBR qpcr Mix KOD DNA Polymerase [exo(-) mutant] 70 bp ~ 2 kb GC 含量の ( クルードサンプルからの増幅に適している ) 特長 1 長鎖ターゲットの増幅が可能 ( ~ 2kb) M 約 2 kb のターゲットまで定量可能 同一のプライマーを使用 KOD SYBR qpcr Mix 従来品 (Taq 使用 ) 増幅曲線解析 copy 電気泳動解析 M: 1kb Ladder 1: KOD FX Neo 2: KOD FX 3: KOD Plus- Ver copy 特長 2 難配列 (GC リッチ 2 次構造 ) に効果的 CCCGCCCGAGAGAGTGACTCTCACGAGAGCCGCGAGAGTCAGCTTGGCCAATCCGTG CGGTCGGCGGCCGCTCCCTTTATAAGCCGACTCGCCCGGCAGCGCACCGGGTTGCGG AGGGTGGGCCTGGGAGGGGTGGTGGCCATTTTTTGTCTAACCCTAACTGAGAAGGGCG TAGGCGCCGTGCTTTTGCTCCCCGCGCGCTGTTTTTCTCGCTGACTT ターゲット配列 (GC 含量 : 64%, 219 bp) : Homo sapiens telomerase RNA (TR) gene, promoter and complete squence テンプレート : ヒトゲノム DNA プライマー (ChIP 法の論文より引用 ): 上記赤字で示した配列を使用しました KOD SYBR qpcr Mix 従来品 (Taq 使用 ) 増幅曲線解析 融解曲線解析 copy copy 特長 3 クルードサンプルを用いる解析が可能 Wild type (WT) 共通 F Primer CreER knock-in (KI) 融解曲線解析 100 bp 341 bp Temperature( ) 融解曲線解析を用いるワンチューブマウスジェノタイピング (ABI 7500 使用 ) / 予測 Tm 値 : 79 CreER Cre 用 Primer / 予測 Tm 値 : 84 特長 4 様々な機器に対応 WT 用 Primer ターゲット : ターゲティング部位 (Cre ER) 及び前後の配列を含む領域 (WT:100 bp, KI: 341 bp) 鋳型 : マウステールライセート ( アルカリ溶解法 ) Wild type 及び knock-in 特異的増幅産物の増幅長を変えることで増幅産物の Tm 値に差が生じるようにプライマーを設計し エンドポイントでの融解曲線解析を用いてジェノタイピング解析を行いました その結果 ホモ ヘテロともに良好な判定を行うことが可能でした THUNDERBIRD シリーズ同様 ROX 色素が別添付になっており 様々な機器に対応可能です KOD SYBR qpcr Mix KOD SYBR qpcr Mix 50 ROX reference dye 1.67ml 3 本 [200 回用, 50 µl 反応 ] (1.67 ml 3 本 ) 5 [1,000 回用, 50 µl 反応 ] *1 KOD SYBR qpcr Mix [\32,000 \18,080] と ReverTra Ace qpcr RT kit [\ 38,000 \21,400] のセット販売品です *2 KOD SYBR qpcr Mix [\32,000 \18,080] と ReverTra Ace qpcr RT Master Mix [\ 38,000 \21,400] のセット販売品です *3 KOD SYBR qpcr Mix [\32,000 \18,080] と ReverTra Ace qpcr RT Master Mix with gdna Remover [\ 40,000 22,600] のセット販売品です QKD ,000 19,200 QKD-201X5 147,000 品名 ( セット品 ) 包装 Code No. 通常価格 88,200 KOD SYBR qpcr/rt Set *1 KOD SYBR qpcr Mix と ReverTra QKD201/FSQ101 65,800 39,480 Ace qpcr RT Kit とのセット KOD SYBR qpcr/rt Set II *2 KOD SYBR qpcr Mix と ReverTra QKD201/FSQ201 65,800 39,480 Ace qpcr RT Master Mix とのセット KOD SYBR qpcr/rt Set III *3 KOD SYBR qpcr Mix と ReverTra Ace qpcr RT Master Mix with gdna Remover QKD201/FSQ301 67,800 40,680 とのセット

12 高効率リアルタイム PCR 用 cdna 合成キット ReverTra Ace qpcr RT Kit 特長 1 幅広いダイナミックレンジを実現 高効率逆転写酵素 ReverTra Ace を使用 最適化された Primer Mix (Oligo dt と Random Primer) 及び Buffer 組成の改良により RNA を偏りなく安定に逆転写することができます 低コピー域の検出率が向上しており 高い直線性を得ることができます 特長 2 わずか 15 分で逆転写完了 Ct 値 特長 3 レア遺伝子の検出に最適 % % % % 40~50%OFF % TNF-α 遺伝子 ( レア発現 ) の検出における検出率の比較 Ct 値平均 PCR 成功率 34.0 ReverTra Ace A 社キット B 社キット C 社キット D 社キット qpcr RT Kit HeLa 細胞の Total RNA 100ng を各社キットを用いて逆転写した後 反応液の 2% を用いて SYBR Green I アッセイ法によるリアルタイム PCR 解析を行いました ReverTra Ace qpcr RT Master Mix ReverTra Ace qpcr RT Master Mix with gdna Remover ご好評いただいておりました ReverTra Ace qpcr RT Kit を一液化 更に使いやすくなりました 5 プレミックスcDNA 合成試薬 幅広いダイナミックレンジを実現 リアルタイム PCR 試薬との高い適合性 わずか 15 分で逆転写反応完了 no-rt Control を添付 ( コントロール実験を容易に行えます ) ReverTra Ace qpcr RT Master Mix の特長に加え ゲノム DNA (gdna) 除去機能付き 除去反応後そのまま cdna 合成 ゲノム DNA 由来の増幅 RNA サンプル gdna 除去反応 (DNA の分解 ) そのまま! cdna 合成 cdna(gdna-free) リアルタイム PCR ReverTra Ace qpcr RT Kit 5 RT Buffer Enzyme Mix Primer Mix Nuclease-free Water 品名包装 Code No. 通常価格 200 回用 (10μl 反応 ) FSQ ,000 22,800 ReverTra Ace qpcr RT Master Mix 5 RT Master Mix 5 RT Master Mix no-rt Control Nuclease-free Water ReverTra Ace qpcr RT Master Mix with gdna Remover gdna Remover 4 DN Master Mix 5 RT Master Mix Ⅱ 5 RT Master Mix Ⅱ no-rt Control Nuclease-free Water 200 回用 (10μl 反応 ) 200 回用 (10μl 反応 ) FSQ ,000 22,800 FSQ ,000 24,