くり審査基準

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あやかえんの
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1 208 年月 TG/20/ に準拠マカロニコムギ亜種 Durum Wheat (Triticum turgidum L. subsp. durum (Desf.) Husn.)

2 マカロニコムギ亜種審査基準 Ⅰ. 審査基準の対象 (Subject of these Guidelines) この審査基準はイネ科 (Poaceae) コムギ属 (Triticum L.) のマカロニコムギ亜種 ( デュラム小麦 )(Triticum turgidum L. subsp. durum (Desf.) Husn.) の全ての品種に適用する Ⅱ. 提出種苗 (Material Required) ⅰ) 種苗の形態種子 ⅱ) 提出時期審査当局が指定する時期 ⅲ) 数量 00g さらに当局の要請があった場合は穂を 00 本以上提出する提出する種子は発芽率純度含水量等保存に適したものであること ⅳ) 提出する種苗は重要な病害虫に汚染されていない十分に健全なものであること ⅴ) 提出種苗は審査当局が指示した場合を除き薬剤その他の処理をしていないものであることもし処理が行われている場合はその処理の詳細について記載すること Ⅲ. 試験の実施 (Conduct of Tests) ⅰ) 栽培条件特性の確認が十分にできる正常な生育が可能な条件下で実施する ⅱ) 最低供試個体数 2,000 個体 (2 反復以上 ) 穂列試験の場合 00 穂まき性試験の場合 00 個体 ⅲ) 栽培期間 2 生育周期 ⅳ) 調査方法調査個体数特に指示がない限り植物体 20 個体又は各個体から採取した部分 20 個とするなお交雑品種については植物体 200 個体以上を調査する調査時期特に指示がない限り特性表の調査方法欄に記載した十進コードの時期に行う ⅴ) 特別な試験特別な条件下でのみ発現する特性があり出願者が試験方法を添えて申告し審査当局がそれに同意した場合は実施することがある Ⅳ. 判定基準 (Standards for decisions) 判定は登録出願品種審査要領の区別性均一性及び安定性 (DUS) 審査のための一般基準に基づくものとするが均一性の判定については以下のとおりとするが付されている形質については 2000 個体で均一性を判定する供試個体数が 2000 の場合許容される異型個体数はである (0.% の母集団標準 (population standard) において 9% の受容確率 (acceptance probability) を適用する ) が付されている形質については 00 個体で均一性を判定する供試個体部分又は穂列数が 00 の場合許容される異型個体又は穂列数はである (% の母集団標準 (population standard) において 9% の受容確率 (acceptance probability) を適用する ) が付されている形質については形質番号を除いて均一性の評価は 2 段階で - -

3 行うことができる第段階では植物体 20 個体又は各個体から採取した部分 20 個をし異型個体がされない場合は均一性があると判断する以上の異型個体が認められた場合は均一性がないと判断する ~ の異型個体が認められた場合は植物体 80 個体又は各個体から採取した部分 80 個を追加して調査する Ⅴ. グループ分けに使用する形質 (Grouping of Varieties) ⅰ) 出穂期 ( 形質 4) ⅱ) 草丈 ( 形質 ) ⅲ) 護穎の外側表面の毛の有無 ( 形質 2) ⅳ) 穂首直下の節間の髄の厚さ ( 形質 22) ⅴ) 芒の色 ( 形質 2) ⅵ) 穂の着色 ( 形質 2) ⅶ) 原麦粒のフェノール反応による着色 ( 形質 2) ⅷ) まき性 ( 形質 4) Ⅵ. 特性表で使用する記号の説明 (Legend) G: グループ分けに使用する形質 : 品種記載の国際調和のための必須調査形質 QL: 質的形質 QN: 量的形質 PQ: 擬似の質的形質 :Ⅷ. に特性表の説明図等を示す MG: 区別性判定のため植物体又は植物体の部分をグループで計測 MS: 区別性判定のため個々の植物体又は植物体の部分を計測 : 区別性判定のため植物体又は植物体の部分をグループで VS: 区別性判定のため個々の植物体又は植物体の部分を : 植物体 00 個体を調査 : 植物体 2,000 個体を調査 C : 関連性を調べるための追加的な調査網掛け ( 特性表のピンク色の部分 ): 願書に添付する説明書 ( 種苗法施行規則第条別記様式第 2 号 ) に出願者が記載する特性及び階級値状態区分質的形質及び擬似の質的形質の場合全ての状態が特性表に記載してあるしかし階級以上の状態がある量的形質の場合省略した状態が用いられることがある例えば 9 階級の状態による量的形質の場合審査基準の状態は以下のとおりに略されることがある - 2 -

4 状態階級 (State) (Note) ( 日本語 ) (English) 小 small 中大 large しかし以下の9 階級の状態を品種の記述として使用できるがその場合には適切に使用するよう留意する状態階級 (State) (Note) ( 日本語 ) (English) 極小 very small かなり小 very small to small 2 小 small やや小 small to 4 中やや大 to large 6 大 large かなり大 large to very large 8 極大 very large 9 - -

5 Ⅶ. 特性表 (Table of Characteristics) 形質番号UPOV 記号形質階状態 (Characteristics) 調査定義 (State) 級方法 ( 日本語 ) (English) ( 日本語 ) (English) 標準品種 (Ex.Var.) 備考 QN 子葉しょうのアントシアニンの着色 Coleoptile: anthocyanin coloration 本葉が出始めた時の子葉しょうのアントシアニン着色の強弱 2 2 QN 草姿 Plant: growth habit 第 ~ 分げつ期の株の姿 QN 反曲した止め葉 Plant: frequency of 反曲した止め葉を持つを持つ個体の出 plants with recurved 個体の出現頻度現頻度 flag leaves 4 4 QN 出穂期 Time of ear 有効茎数の 0% の穂の emergence 第小穂が見えた期日 G 09- C 測定月日 MG 無又は極弱弱中強直立半直立開張半ほふくほふく無又は極低低中高極早かなり早早やや早中やや晩晩かなり晩極晩 absent or very weak weak strong erect semi-erect intermediate semi-prostrate prostrate absent or very low low high very early very early to early early early to to late late late to very late very late Mv-Makaroni Produra Produra Latino - 4 -

6 号UPOV 記号形質階状態 (Characteristics) 調査定義 (State) 級方法 ( 日本語 ) (English) ( 日本語 ) (English) 標準品種 (Ex.Var.) 備考 QN 止め葉の葉耳のアントシアニンの着色 Flag leaf:anthocyanin coloration of auricles 止め葉の葉耳のアントシアニン着色の強弱 -9 無又は極弱弱中強 absent or very weak weak strong 形6 6 QN QN 8 8 QN 止め葉の葉しょうの白粉止め葉の白粉稈の最上部の節に着生する毛 Flag leaf: glaucosity of sheath Flag leaf: glaucosity of lower side of leafblade Culm:density of hairiness of uppermost node 止め葉の葉鞘の白粉の強弱止め葉の葉身裏面の白粉の強弱稈の最上部の節に着生する毛の粗密無又は極弱弱中強無又は極弱弱中強無又は極粗粗中密 absent or very weak weak strong absent or very weak weak strong absent or very weak weak strong 9 9 QN 0 0 QN 穂首の白粉 Culm: glaucosity of neck 穂首の白粉の強弱穂の白粉 Ear: glaucosity 穂の白粉の強弱無又は極弱弱中強無又は極弱弱中強 absent or very weak weak strong absent or very weak weak strong

7 号UPOV 記号形質階状態 (Characteristics) 調査定義 (State) 級方法 ( 日本語 ) (English) ( 日本語 ) (English) 標準品種 (Ex.Var.) 備考形 QN 草丈 Plant: length 植物体の先端までの高さ G 2 QN 稈の長さ Stem:length 地際部から穂の最下部までの長さ 2 PQ 穂の芒の着生状 Ear: distribution of 穂の芒の着生状態態 awns 測定cm MG -92 測定cm MG 低中高短中長芒なし穂の先に着生穂の半分に着生全体に着生 short long short long awnless tip awned half awned fully awned 4 QN 穂の先端の芒の長さ Ear: length of awns or scurs at tip of ear 穂の先端の長芒又は短芒の長さ測定mm MS -92 短中長 short long QN 芒の長さ Ear: length of awns at tip relative to length of ear 穂と比較した芒の長さ穂より短い同等穂より長い shorter equal longer

8 号UPOV 記号形質階状態 (Characteristics) 調査定義 (State) 級方法 ( 日本語 ) (English) ( 日本語 ) (English) 標準品種 (Ex.Var.) 備考形6 4 PQ PQ 8 6 QN 護穎の形 Lower glume: shape 護穎の形護穎の肩部の形 Lower glume: shape 穂の中央部の小穂の護 of shoulder 穎の肩部の形護穎の肩部の幅 Lower glume: width of shoulder 穂の中央部の小穂の護穎の肩部の幅卵形楕円形狭楕円形下降やや下降水平上昇第 2のくちばしあり狭中広 ovoid oblong narrow oblong sloping rounded straight elevated elevated with a 2 nd beak narrow broad 9 QN 護穎のくちばしの長さ Lower glume: length of beak 穂の中央部の小穂の護穎の先端くちばしの長さ短中長 short long 20 8 QN G 護穎のくちばしの曲がり方 Lower glume: curvature of beak 穂の中央部の小穂の護穎のくちばしの曲がり方無弱中強 absent weak moderate strong

9 号UPOV 記号形質階状態 (Characteristics) 調査定義 (State) 級方法 ( 日本語 ) (English) ( 日本語 ) (English) 標準品種 (Ex.Var.) 備考 2 9 QL 護穎の外側表面の毛の有無 Lower glume: hairiness of external surface. 穂の中央部の小穂の護穎の外側表面の毛 (0 倍程度のルーペを使用して ) 無有 absent present QN G 穂首直下の節間の髄の厚さ Straw: pith in cross section 穂首節直下の節間の中央部の横断面の髄の厚さ薄中厚 thin thick 2 2 PQ G 芒の色 wn: color 芒の色白淡褐紫濃紫 white light brown purple dark purple 形24 22 QN 2 2 PQ G 穂の長さ Ear: length (excluding awns) 芒を含まない穂の長さ測定cm MS 穂の着色 Ear: coloration 穂の着色短中長白淡い濃い short long white slightly colored strongly colored

10 号UPOV 記号形質階状態 (Characteristics) 調査定義 (State) 級方法 ( 日本語 ) (English) ( 日本語 ) (English) 標準品種 (Ex.Var.) 備考形26 QN 成熟期 Time of maturity 全穂数の 80% の穂首部が黄化し粒の硬さが MG ろう程度になった日 PQ 稃の色 Glume: color 完熟期の稃の色早中晩淡黄黄黄褐褐赤褐赤赤紫紫濃紫 early late light yellow yellow yellowish brown brown reddish brown red reddish purple purple deep purple QN 穂の粒着の粗密 Ear: density 穂の粒着の粗密 / 測定 / MS 92 粗中密 lax dense 29 2 QN 原麦粒の刷毛の長さ Grain: length of brush hair 原麦粒の刷毛の長さ 92 短中長 short long

11 号UPOV 記号形質階状態 (Characteristics) 調査定義 (State) 級方法 ( 日本語 ) (English) ( 日本語 ) (English) 標準品種 (Ex.Var.) 備考形0 26 QN 原麦粒の形 Grain: shape 原麦粒の形 / 測定 / MS 92 PQ 原麦粒の色 Grain: color 原麦粒の色 QN 原麦粒のフェノ Grain: coloration 原麦粒のフェノール反ール反応による with phenol 応による着色着色 92 G C QN 千粒重 000 grain weight 原麦粒の千粒の重さ測定 g MG PQ まき性 Plant: seasonal type まき性 C G やや細長い細長いかなり細長い白赤無又は極淡淡中濃小中大秋まき型中間型春まき型 slightly elongated moderately elongated strongly elongated white red absent or very light light dark low high winter type alternative type spring type Produra

12 号UPOV 記号形質階状態 (Characteristics) 調査定義 (State) 級方法 ( 日本語 ) (English) ( 日本語 ) (English) 標準品種 (Ex.Var.) 備考形質番電気泳動法を用いる形質 (-6) Characteristics derived by using Electrophoresis ( グルテニン組成 Glutenin composition) - - 検定 QL 6 QL Glu- 遺伝子座にある対立遺伝子の発現 Glu- 遺伝子座にある対立遺伝子の発現 llele expression at locus Glu- llele expression at locus Glu- Glu- 遺伝子座にある対立遺伝子の発現 Glu- 遺伝子座にある対立遺伝子の発現バンドバンド 2 バンド無しバンド 6+8 バンド +8 バンド +9 バンドバンド +6 バンド 4+ バンド +8 バンド 20 バンド band band 2 no band bands 6+8 bands +8 bands +9 bands bands +6 bands 4+ bands +8 bands 20 bands 6.+22

13 Ⅷ. 特性表の説明 (Explanations on the Table of Characteristics) 形質子葉しょうのアントシアニンの着色 Char. Coleoptile: anthocyanin coloration アントシアニン着色程度の調査方法供試粒数 00 粒粒の準備休眠していない粒をシャーレ内の湿潤ろ紙上に置床し発芽させる試験場所実験室又は温室内光条件子葉しょうが約 cm になるまでは暗黒条件下でその後 ~4 日,000Lux の連続光条件下温度 ~20 調査時期子葉しょうが十分に生育した時期 ( 約週間 ) 生育コード表の 09- 階級値調査特性表の形質参照注区別性の試験には判定の指標として少なくとも2 以上の標準品種を含めること Method for the Determination of nthocyanin Coloration Number of grains per test: 00 grains Preparation of grains: Set up non-dormant grains on moistened filter paper covered with a Petri dish lid during germination Place: Laboratory or greenhouse Light: fter the coleoptiles have reached a length of about cm in darkness, they are placed in artificial light (daylight equivalent), at,000 lux continuously for - 4 days Temperature: to 20 C Time of recording: Coleoptiles fully developed (about week) at stage 09- Scale of recording: See characteristic in the Table of Characteristics Note: t least two of the example varieties should be included as a control when testing for distinctness. 形質 2 草姿 Char.2 Plant: growth habit 直立 erect 半直立 semi-erect 開張 intermediate 半ほふく semi-prostrate 9 ほふく prostrate 草姿は葉と分げつの状態のによる外側の葉と分げつが仮想の垂直軸と作る角度を用いる The growth habit should be assessed visually from the attitude of the leaves and tillers. The angle formed by the outer leaves and the tillers with an imaginary vertical axis should be used. 2

14 形質 8 稈の最上部の節に着生する毛 Char.8 Culm:density of hairiness of uppermost node 粗中密形質草丈 Char. Plant: length 草丈は植物体の地際から最も高い芒の先端までを測定する Plant length should be measured including stem, ear and awn. The length is taken from the base of the plant to the tip of the highest awn. 形質穂の芒の着生状態 Char. Ear: distribution of awns 2 4 芒なし穂の先に着生穂の半分に着生全体に着生

15 形質芒の長さ Char. Ear: length of awns at tip relative to length of ear 2 穂より短い同等穂より長い形質 6 護穎の形 Char.6 Lower glume: shape 2 卵形楕円形狭楕円形形質護穎の肩部の形 Char. Lower glume: shape of shoulder 2 4 下降やや下降水平上昇第 2 のくちばしあり 4

16 形質 8 護穎の肩部の幅 Char.8 Lower glume: shoulder width 狭中広形質 20 護穎のくちばしの曲がり方 Char.20 Lower glume:curvature of beak 無弱中強形質 22 穂首直下の節間の髄の厚さ Char.22 Straw: pith in cross section 薄中厚穂首直下の節間の髄の厚さを The pith in cross section should be observed half way between base of ear and stem node below.

形質 28 穂の粒着の粗密 Char.28 Ear: density 粗中密粒着粗密は小穂の数 / 穂の長さの割合で決定する高い割合は高い密度を示す Ear density can be determined by counting the number of spikelets and then dividing the number by the ear length.

17 形質 28 穂の粒着の粗密 Char.28 Ear: density 粗中密粒着粗密は小穂の数 / 穂の長さの割合で決定する高い割合は高い密度を示す Ear density can be determined by counting the number of spikelets and then dividing the number by the ear length. The higher ratio will indicate a higher density. 形質 29 原麦粒の刷毛の長さ Char.29 Grain: length of brush hair 短中長 0 倍程度のルーペを使用し原麦粒の背側から先端を Observations should be made with a hand lens (x0 magnification). rush hair length is viewed from the top of the grain on the dorsal side and can be described in the following ways: 形質 0 原麦粒の形 Char.0 Grain: shape 2 やや細長い細長いかなり細長い 6

18 形質 2 原麦粒のフェノール反応による着色 Char.2 Grain: coloration with phenol フェノール反応の方法供試粒数 00 粒 ( 無処理の粒を使用すること ) 調整 6-20 時間流水に浸した後表面の水を除去し縦溝を下にして蓋付きシャーレ ( 直径 9cm 程度 ) に置床試薬の作成 % フェノール溶液 ( 試験ごとに作成 ) 試薬の量粒のおおむね /4 を浸す試験場所実験室光条件直射の当たらない自然光下温度 8-20 調査時期浸漬後 4 時間階級値調査特性表の形質 2 を参照注着色ありの判定の指標として普通小麦の農林 6 号を中として比較することができる Method for Determination of Phenol Reaction Number of grains per test Equipment Preparation of grains Concentration of solution 00 grains for distinctness and uniformity. The grains should not have been treated chemically. Petri dishes (approx. 9 cm diameter). Soak in tap water for 6 to 20 hours, drain and remove surface water, place the grains with crease downwards, cover dish with lid. per cent Phenol-solution (freshly made up). The grains should be about /4 covered. Laboratory Daylight - out of direct sunshine. mount of solution Place Light Temperature 8 to 20 o C. Time of recording 4 hours (after adding solution). Scale of recording See characteristic 2 in the Table of Characteristics. 形質 4 まき性 Char.4 Plant: seasonal type 調査のため標準品種を加えて全ての品種を春まきする最も遅い春まき品種が完全に成熟した時期 ( 十進コード表のステージ 9/92 に達したとき ) に供試した各品種の状態を調査する各タイプの状態は以下に示す秋まき型中間型春まき型最大で十進コード表のステージ 4( 穂ばらみ期 ) に達していない十進コード表のステージ 4 を超えて原則としてステージ以上になりステージ 90 を超えない十進コード表のステージ 90 を超える The seasonal type should be assessed on one or several plots sown in springtime. t the time when the latest spring type variety is fully mature (growth stage 9/92 of the

19 Zadoks decimal code), the growth stage reached by the respective variety should be assessed. The states of expression are defined as follows: Winter type: The plants have not exceeded stage 4 of the Zadoks decimal code (boots swollen). lternative type: The plants have exceeded stage 4 of the Zadoks decimal code --- as a rule they have exceeded stage --- and have not exceeded stage 90. Spring type: The plants have exceeded stage 90 of the Zadoks decimal code. 形質 -6 電気泳動法の説明. 器具と設備 ( 略 ) Char.-6 Description of the method to be used 2. 試薬アクリルアミド ( 電気泳動用に特別に精製したもの ) ビスアクリルアミド ( 同上 ) TRIS( トリスヒドロキシメチルアミノメタン ) SDS( ドデシル硫酸ナトリウム ) PS( 過硫酸アンモニウム ) メルカプトエタノール TEMED( テトラメチルサイレンジアミン ) TC( クエン酸 ) 塩酸氷酢酸グリシンブタノールピロニン Y( または G) グリセリンメタノールまたはエタノールクマシーブリリアントブルー R-20 クマシーブリリアントブルー G-20.2 電気泳動 ( 通電 ) 用緩衝液保存液グリシン 4.g と TRIS 0.0g SDS 0.0g に蒸留水を加えて l とする使用直前に保存液を蒸留水で :0 に希釈する保存緩衝液は室温で 2 か月保存が可能である希釈緩衝液は週間以上おかないこと緩衝液の ph は 8. 近くとする. ゲル調製液.. 分解用ゲルの保存緩衝液 (M TRIS 塩酸 ph 8.8) TRIS 2.4g と塩酸 (d=.9) 20ml に蒸留水を加えて l とするこの緩衝液は 4 で 2 か月保存が可能である..2 スタッキングゲル保存緩衝液 (M TRIS 塩酸 ph 6.8) TRIS 2.4g と塩酸 8ml に蒸留水を加えて l とするこの緩衝液は 4 で 2 か月保存が可能である.. 0%(w/v) ドデシル硫酸ナトリウム液 SDS 0g を蒸留水に溶かして 00ml とするこの保存液は 4 で 2 か月保存が可能である使用に先立って SDS が結晶化していたら撹拌してゆるやかに温めて SDS を溶解させる 8

20 ..4 %(w/v) 過硫酸アンモニウム液 PS g を蒸留水に溶かして 00ml とするこの溶液は使用直前に作る.. アクリルアミド保存液アクリルアミド 40.02g に蒸留水を加えて 00ml とする..6 ビスアクリルアミド保存液ビスアクリルアミド 0.98g に蒸留水を加えて 0ml とする.4 染色液.4. クマシーブリリアントブルー G g とクマシーブルリリアントブルー R-200.g に蒸留水を加えて 00ml とする.4.2 TC g と氷酢酸 6ml メタノールまたはエタノール 80ml.4. 液 2ml に蒸留水を加えて l とする 4. 方法 4. 蛋白質の抽出 4.. グルテニンのみの抽出種子をハンマー ( 他の道具でも可 ) で粉砕する粉と希釈した試料抽出緩衝液 (..) をねじ蓋か密閉蓋のついた ml 容量のポリエチレン製血液遠心分離用チューブの中に入れて混ぜる粉と抽出緩衝液の割合は 9mg/0.ml とする試料抽出は室温で 2 時間かかるその間に数回ボルテックスミキサーにかけて撹拌しそののち沸騰させた湯煎器で 0 分間温存させて冷却するチューブを 8000g で分間遠心分離する 4..2 グリアジンに引き続くグルテニンの抽出グルテニンとグリアジンを同じ麦粒から分析できるグリアジン抽出のためはじめに粉砕粉 ( 粒または半粒 ) と液 (..2) 0.2ml をミクロ滴定板かミクロ遠沈管に入れて室温で一晩培養する次にグルテニン抽出のために粉砕粉に液 (..2) 0.ml を加えて室温で一晩培養する泳動しようとする抽出物の量はゲルの厚さや泳動槽の大きさによって異なる一般には 0μl ないし 2μl あれば十分である 4.2 ゲルの準備用いる装置のデザインに従って清潔で十分に乾燥したゲルカセットを組み立てるカセットのシールにテープを用いるときはテープがなれてよく着くよう少なくとも使用する日前に装置を組み立てるとよい 4.2. 分解用ゲル (0% アクリルアミド ph 8.8) 二枚垂直型ゲル (80mm 60mm.mm) を作成するためアクリルアミド保存液 (..) 20ml とビスアクリルアミド保存液 (..6) 26ml ゲル保存液 (..) 0ml を室温で混合する混合液は 00ml のブフナーフラスコ内で 2 分ないし分かけて空気抜きするこれに PS(..4) 2ml と SDS(...) 0.8ml TEMED 40μl( 瓶から直接用いる ) を加える次に空気泡を立てないようにゲルを注意深く注入して室温に置いて重合させるゲルカセットは満杯にせず cm ないし 4cm のスタッキングゲルのために空きを残しておくゲルの表面にはピペットを用いてブタノール ( または蒸留水 ) で注意深く覆う 0 分ほどで重合が終わるのでゲル表面を蒸留水で注意深くすすぎろ紙で乾かす 9

21 4.2.2 分解用ゲル (% アクリルアミド ph 8.8) サブユニット 2 および 2* を調製するため % 濃度のアクリルアミドが必要である二枚垂直型ゲル (80mm 60mm.mm) を作製するためアクリルアミド保存液 (..) 4ml と蒸留水 6ml ビスアクリルアミド保存液 (..6) 26ml ゲル保存液 (..) 0ml を室温で混合する混合液は 00ml のブフナーフラスコ内で 2 分ないし分かけてガス抜きするこれに PS(..4) 2ml と SDS(...) 0.8ml TEMED 40μl( 瓶から直接用いる ) を加える次に空気泡を立てないようにゲルを注意深く注入して室温に置いて重合させるゲルカセットは満杯にせずスタッキングゲルのために cm ないし 4cm の空きを残しておくゲルの表面にはピペットを用いてブタノール ( または蒸留水 ) で注意深く覆う 0 分ほどで重合が終わるのでゲル表面を蒸留水で注意深くすすぎろ紙で乾かす 4.2. スタッキングゲル (% のアクリクアミド ph 6.8) 0ml のブフナーフラスコにアクリルアミド保存液 (..).0ml とビスアクリクアミド保存液 (..6) 2.ml ゲル緩衝保存液 (..2) 2.0ml の蒸留水.ml を入れて混合する空気抜きののちこれに PS(..4) 0.ml との SDS(..) 0.2ml TEMED μl( 瓶から直接入れる ) を加えるこれを注意深く混合したら直ちにスタッキングゲルをゲルカセットの上端まで注ぎいれる空気泡を立てないようにサンプルコウムを挿入して室温で 2 時間重合させるそののちコウムをゲルカセットから静かに抜いて希釈泳動緩衝液 (.2) で泳動槽をすすぐ 4. 電気泳動タンクに適量の通電用緩衝液 (.2) を満たしに冷却する試料投入ののちピロニン Y/G がスタッキングゲルを動き出すまで 8m/cm 2 ( 差し渡し部分 ) の定常電流で電気泳動を行いさらにマーカーがゲルの下端に達するまで 6m/cm 2 ( 最大電圧 00V) で泳動を続ける温度は常にを維持する 4.4 固定および染色ゲルカセットをタンクから取り出して開きゲルを %(w/v)tc 20ml の液内で少なくとも 0 分間固定させるゲルを蒸留水ですすぎ染色液 (.4.2) 20ml を用いて室温で一晩染色する脱色は必ずしも必要ないがゲルはポリエチレン袋に密閉保存する前に蒸留水で洗う他の染色法も利用できる ( たとえばコマシーブリリアントブルー G や同濃度の TC のみで ) ゲルの調製染色のための最終的な品質調節条件はゲルに現れた標準品種を解析して決めるとよい標準バンドの分離と電気泳動の相対移動度 ( 分子量 ) が十分満足できるほどに明瞭でなければならないグルテニン対立遺伝子の識別この表は上記の対立遺伝子を説明できるようにまた異なるバンドを識別する際に手助けとなるように構成してあるここには品種 Courtot に見られる対立遺伝子と比較して各遺伝子座にあるすべてのグルテニンバンドの位置と分子量が描かれているまた Payne の命名によるバンド数とともに Payne Lawrence (98) に基づく各対立遺伝子に与えられる文字もつけられている 20

22 形質 Glu- 遺伝子座にある対立遺伝子の発現 Char. llele expression at locus Glu- 2

23 形質 6 Glu- 遺伝子座にある対立遺伝子の発現 Char.6 llele expression at locus Glu- 22

24 穀物の生育ステージに関する十進コード表 The descriptions of the growth stages of the Zadoks decimal code for cereals (Zadoks et al., 94) Zadoks 説明 Decimal code 00 乾燥種子 Dry seed 0 吸水開始 Start of imbibition 0 吸水完了 Imbibition complete 0 種子から幼根の出現 Radicle emerged from seed 0 種子から鞘葉の出現 Coleoptile emerged from seed 09 鞘葉先端に葉がのぞく Leaf just at coleoptile tip 0 鞘葉から第葉が出現 First leaf through coleoptile 第葉の展開 First leaf unfolded 2 第 2 葉の展開 2 leaves unfolded 第葉の展開 leaves unfolded 4 第 4 葉の展開 4 leaves unfolded 第葉の展開 leaves unfolded 6 第 6 葉の展開 6 leaves unfolded 第葉の展開 leaves unfolded 8 第 8 葉の展開 8 leaves unfolded 9 第 9 葉の展開 9 or more leaves unfolded 20 主茎のみ Main shoot only 2 主茎及び第分げつ Main shoot and tiller 22 主茎及び第 2 分げつ Main shoot and 2 tillers 2 主茎及び第分げつ Main shoot and tillers 24 主茎及び第 4 分げつ Main shoot and 4 tillers 主茎及び第分げつ 2 Main shoot and tillers 26 主茎及び第 6 分げつ Main shoot and 6 tillers 2 主茎及び第分げつ Main shoot and tillers 28 主茎及び第 8 分げつ Main shoot and 8 tillers 主茎及び第 9 又はそれ以上の分 29 げつ Main shoot and 9 or more tillers 0 偽茎の立ち上がり Pseudo stem erection 第節が認められる st node detectable 2 第 2 節が認められる 2nd node detectable 第節が認められる rd node detectable 4 第 4 節が認められる 4th node detectable 第節が認められる th node detectable 6 第 6 節が認められる 6th node detectable 止め葉が認められる Flag leaf just visible 9 Flag leaf ligule/collar just visible 40-4 止め葉の鞘葉の伸展 Flag leaf sheath extending 4 穂ばらみ oots just swollen 4 止め葉の鞘葉の開裂 Flag leaf sheath opening 49 最初の芒が認められる First awns visible 第小穂が認められる 0 First spikelet of inflorescence visible 穂の /4 出穂 /4 of inflorescence emerged 穂の /2 出穂 /2 of inflorescence emerged 穂の /4 出穂 /4 of inflorescence emerged 2

25 出穂完了期 9 Emergence of inflorescence completed 60 開花始め eginning on anthesis 6 半分開花 nthesis half-way 69 開花完了 nthesis completed 0 - 頴果に水分が満ちる Kernel watery ripe 乳熟初期 Early milk 乳熟中期 Medium milk 乳熟後期 Late milk 80-8 糊熟前期 Early dough 8 糊熟中期 Soft dough 8 糊熟後期 Hard dough 90 - 穎果が硬化 ( 親指の爪で割るこ 9 とが困難 ) Kernel hard (difficult to divide with thumbnail) 穎果が硬化 ( 親指の爪で窪みが 92 つかない ) Kernel hard (no longer dented with thumbnail) 9 穎が日中緩む Kernel loosening in daytime 過熟茎の枯れ上がり及び倒伏 94 Overripe, straw dead and collapsing 9 種子の休眠 Seed dormant 完熟種子の発芽力が 0% 96 Viable seed giving 0% germination 9 種子休眠がとける Seed not dormant 98 2 次休眠の誘発 Secondary dormancy induced 99 2 次休眠の消失 Secondary dormancy lost 24

26 - 2 -

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<4D F736F F D D497DE385F A20834F A8EED8AEE8F802E646F63> 0 年 4 月フェスツカグラウカ種 Blue Fescue (Festuca glauca Vill.) フェスツカグラウカ種審査基準 Ⅰ. 審査基準の対象 (Subject of these Guidelines) この審査基準はイネ科 (Poaceae) フェスツカ属 (Festuca L.) のグラウカ種 (F. glauca Vill.) のうち栄養繁殖性の全ての品種に適用する Ⅱ.