蛍光ウェスタンブロッティングがもたらすメリット これまでウェスタンブロッティングの検出には 高感度検出が可能な化学発光法が一般的に用いられてきました しかし 近年ウェスタンブロッティング法を用いた実験では 複数のタンパク質を評価することが求められるようになっており 必ずしも化学発光法による検出が有効

電気泳動 & ブロッティング & イメージング Application Insights 蛍光ウェスタンブロッティング

蛍光ウェスタンブロッティングがもたらすメリット これまでウェスタンブロッティングの検出には 高感度検出が可能な化学発光法が一般的に用いられてきました しかし 近年ウェスタンブロッティング法を用いた実験では 複数のタンパク質を評価することが求められるようになっており 必ずしも化学発光法による検出が有効な方法とはかぎりません というのも化学発光法を用い複数ターゲットを検出する場合 別々のメンブレンを用意する メンブレンをカットする ストリッピングやリプロービングの操作を行うなどの方法が用いられ いずれも 操作の煩雑さ 再現性 定量性 時間 コスト等の問題があるためです その代替法として 複数のターゲットタンパク質を同時に検出することができる蛍光ウェスタンブロッティング法が認知されるようになりました 蛍光ウェスタンブロッティング検出例 (3-Plex) 蛍光ウェスタンブロッティングは こんなお客様に最適です 同一サンプルから複数のターゲットタンパク質を検出している 定量解析を行っている リン酸化タンパク質の検出を行っている ランニングコストを抑えたい Total p44/42 MAPK(ERK1/2) phospho-p44/42 MAPK (ERK1/2) GAPDH バイオ ラッドの新しい蛍光ウェスタンブロッティング 蛍光によるウェスタンブロッティングは極めて有効なツールですが 従来の蛍光検出は 化学発光法に比べ十分な検出感度が得られないという課題があります バイオ ラッドはこの問題点を克服する 検出装置 ChemiDoc Touch MP イメージングシステム および蛍光検出試薬 StarBright Blue シリーズをご提供しております これにより 高感度なマルチプレックス蛍光ウェスタンブロッティングを可能にします ウェスタンブロッティングにおける各検出法の比較 複数ターゲットの同時検出 クロストーク 検出感度 定量性 ランニングコスト 化学発光法 ( フィルム ) ー 化学発光法 (CCD カメラ ) ー 従来の蛍光法 バイオ ラッドの蛍光法 蛍光標識抗体 StarBright Blue シリーズ StarBright Blue は バイオ ラッドの独自技術により開発された 超高感度な検出が可能な蛍光色素です 蛍光色素内では複数の機能性ユニットがコンパクトに配列しており 効率的なエネルギー伝達により 一般的な蛍光色素に比べ高い蛍光強度を得ることが可能です ChemiDoc Touch MP イメージングシステムとの組み合わせにより 最適条件下での高感度検出を実現します 特長 高感度検出 短時間検出 高い安定性 超高感度化学発光検出試薬と同等以上 通常の場合 秒から1 分程度の露光時間 退色が起きにくく イメージングを繰り返しても安定 多重染色に対応 低バックグラウンド StarBright Blue 5 (em:5 nm) および 700 (em: 700 nm) がラインアップされ クロストークを最小限に抑えた多重検出が可能 蛍光分子表面の特殊加工により非特異的なタンパク質やメンブレンの吸着を最小限にします 励起波長と蛍光波長を大きく離すことで メンブレンの自家蛍光を最小限に抑制 470 nm Excitation Energy transfer Emission 700 nm ATG7, StarBright B700 (Exposure 11.0 sec) Light-absorbing monomer Energy transfer monomer Light-emitting monomer Linker monomer for functionalization Tubulin, hfab Rhodamine (Exposure 4.0 sec) Light-absorbing monomer が 470 nm 付近の光 ( 青色 ) のエネルギーを吸収し そのエネルギーを Energy transfer monomer に受け渡します Energy transfer monomer はこのエネルギーを非常に効率的に Light-emitting monomer に伝え 最終的に 700 nm 付近の蛍光 ( 遠赤 近赤外付近 ) を発します StarBright Blue 700 標識抗体の模式図 サンプル : Hela Cell lysate (25,, 2.5 μg) AKR1C2, StarBright B5 (Exposure 3.8 sec) 2 蛍光ウェスタンブロッティング

浄ChemiDoc Touch MPイメージングシステム洗 化学発光と蛍光 ( マルチプレックス ) 検出のプロトコール ブロッキング 1 次抗体反応 2 次抗体との反応基質との反応撮影 化学発光法 蛍光法 ターゲットタンパク質に対する抗体を混合し反応させます その際 各ターゲットに対する抗体はそれぞれ異なるホスト動物の抗体を選択します 1 次抗体で使用したホスト動物に対する2 次抗体を混合し 反応させます 2 次抗体には蛍光のかぶりの無い 異なる蛍光色素でラベルされているものを選択します 2 次抗体で使用した蛍光色素を検出する条件で連続撮影します バイオ ラッドのおすすめ製品 1xTBS/1% カゼイン 低蛍光 PVDF メンブレン 洗浄 PrecisionAb 抗体 洗浄洗浄 StarBright Blue シリーズ HKP hfab Rhodamine シリーズ 洗浄 ChemiDoc Touch MP バイオ ラッドの ChemiDoc Touch MP イメージングシステムは 超高感度な化学発光検出のみならず 様々な蛍光検出にフレキシブルに対応し 高感度かつ高解像度検出を両立するハイエンドモデルです 高感度検出 バイオ ラッドの ChemiDoc Touch MP イメージングシステムは 最新式の CCD センサーを採用し 独立した 5 種類の LED 光源および最適化された検出フィルターを搭載し より高感度な蛍光検出を可能にします 高解像度検出 ChemiDoc Touch MP イメージングシステムは 600 万画素の超高感度 CCD センサーを搭載しており 鮮明かつ高感度な画像撮影が可能です タンパク質の検出において 翻訳後修飾等により微妙なタンパク質の移動度の違いを検出する場合にも最適です 遠赤 近赤外領域の蛍光検出に対応 蛍光ウェスタンブロッティングではメンブレンの持つ自家蛍光を最小限に抑えるため 遠赤 近赤外の長波長領域で検出することは有効な手法です しかしながら 長波長領域の検出は 蛍光自体の光が弱く 一般的な CCD カメラを用いた検出装置では十分な検出感度が得られないことがほとんどです ChemiDoc Touch MP イメージングシステムでは 長波長領域においても十分な検出感度で撮影できるよう 機器の最適化が行われており レーザータイプのスキャナーと同等レベルの検出感度でありながら 短時間での撮影が可能です 様々な蛍光色素に対応 5 種類のLED 光源を搭載し 幅広い蛍光色素の検出を可能にします Bio-Rad ChemiDoc MP Fluorescence Scanner Near Infrared 400 Wavelength, nm 900 DyLight 488 488 Cy2 StarBright 5 DyLight 550 546 Cy3 Rhodamine DyLight 650 647 Cy5 SYPRO Ruby StarBright 700 DyLight 680 680 Cy5.5 IRDye 680 DyLight 800 790 Cy7 IRDye800 洗浄Blue Green Red Far Red 駆動式カメラによる高解像度検出 CCD カメラを用いた検出装置の多くは より高感度な検出を実現するためにズームレンズではなく単焦点レンズが用いられています 単焦点レンズにはズーム機能が無いため 撮影エリアの変更は カメラとサンプル間の距離を変えることで行われており 一般的な撮影装置ではトレイの高さの変更で行われています この方法ではサンプルサイズに最適な大きさに調整することが困難であり サンプル以外のエリアも撮影されるため 本来カメラの持つ解像度を無駄にしています また 蛍光検出で用いられる LED 光源の照射角度は 最下端のトレイ位置で最適化されていることが多く トレイの高さによって光の照射ムラが生じ 定量性の低い画像となります これらの問題を解決するために ChemiDoc Touch MP イメージングシステムは トレイの高さの変更ではなく カメラを自動駆動させる方式を採用しています これにより サンプルサイズに最適な撮影エリアで LED 光源の照射ムラのない 高解像度かつ高い定量性を両立した撮影が可能です 蛍光ウェスタンブロッティング 3

光量0.00,000,000.00,000,000.00 30,000,000.00 40,000,000.00 50,000,000.00 60,000,000.00 光量0.00 1,000,000.00 2,000,000.00 3,000,000.00 4,000,000.00 5,000,000.00 6,000,000.00 7,000,000.00 バイオ ラッドの新しい蛍光ウェスタンブロッティング Point1 マルチプレックス検出 Point2 高感度な蛍光検出 蛍光ウェスタンブロッティングでは ストリッピング / リプロービングや メンブレンをカットすることなく 同一メンブレンから複数のタンパク質を同時検出することが可能です これによりデータ精度の向上が期待されると同時に 大幅な時間や労力の削減が可能です バイオ ラッドの ChemiDoc Touch MPとStarBright Blueシリーズを組み合わせることで 超高感度検出を実現します 各検出試薬の感度比較 ( 撮影装置 :ChemiDoc Touch MP) マルチプレックス検出の特長 ストリッピング / リプロービング操作不要 データクオリティの向上 大幅な時間の短縮 ランニングコストの低減 1 2 3 4 5 6 StarBright Blue 700 の場合 ( 露光時間 : 秒 ) 1 2 3 4 5 6 リン酸化タンパク質の検出にも最適!!! ウェスタンブロッティングを用いたリン酸化タンパク質の検出では ターゲットタンパク質とそのタンパク質のリン酸化部位の両方を検出し 評価することが求められます これらのターゲットタンパク質とリン酸化タンパク質は ゲル上での移動度の違いが僅かなため 化学発光法でこの差を明確に見分けることは 極めて難しいのが現状です 一方 蛍光法を用いた場合 ターゲットタンパク質とそのリン酸化タンパク質を異なる蛍光色素で検出することで その差を明確に捉えることが可能です また ストリッピングやリプロービングをすることなく同時検出が可能なため 化学発光法と比べ適切に評価し 解析することが可能になります 近赤外蛍光色素の場合 ( 露光時間 :300 秒 ) (IR800) 1 2 3 4 5 6 超高感度化学発光検出の場合 (Low-fgレベル)( 露光時間 :8 秒 ) (Clarity MAX) StarBright Blueは一般的な近赤外蛍光色素と比べた場合 短時間の露光時間で 2-4 倍程度の高感度検出を可能にします また 超高感度化学発光検出試薬と比較した場合 同等の露光時間で同等以上の感度での検出が可能です Point3 定量性 ( 直線性 ) Point4 高解像度 化学発光は 基質を反応させた後 光量はある一定時間後に極大をむかえ その後徐々に減衰していきます 一方 蛍光は常に一定の光を発するため より定量的な解析に適した方法と言えます 蛍光検出と化学発光法の継時的な光量変化 ( イメージ図 ) 蛍光法化学発光法 化学発光法を用いた検出では その検出方法の特性上 バンドの輪郭が滲んだ画像が検出される傾向にあります そのため 近接したバンドの検出には 場合によって正確に違いを検出できないことがあります 一方 蛍光検出ではシャープなバンドイメージを検出することができ より高精度な画像撮影が可能です 以下は近接したバンドを蛍光法 および化学発光法を用いてそれぞれ検出した一例です 近接バンドを蛍光および化学発光で検出した場合の画像比較 ( 撮影装置 :ChemiDoc Touch MP) 1 2 3 4 5 Time Time 蛍光検出と化学発光検出の直線性比較 蛍光検出の場合 (StarBright Blue 700) 蛍光検出の場合 (StarBright Blue700) 35 StarBright Blue700) 30 化学発光検出の場合 (Clarity Western ECL Substrate) 35 (Clarity Western ECL Substrate) 30 1 2 3 4 5 25 25 Conc conc 15 Conc 15 化学発光検出の場合 (Clarity Western ECL Substrate) 5 5 0 intensity intensity 0 intensity 4 蛍光ウェスタンブロッティング

6 つのポイント Point5 低コスト Point6 ハウスキーピングタンパク質 (HKP) と総タンパク質のデータ補正に対応 蛍光ウェスタンブロッティングは バックグラウンドを抑えるために低蛍光のメンブレンを使用し また 蛍光標識の 2 次抗体を用いる必要があるため メンブレン 抗体に要するコストが若干上がります しかしながら 化学発光用の基質を必要としないため メンブレン 1 枚当たり最大で 5,000 程度のコストダウンを可能にします 8,000 6,000 4,000 2,000 0 メンブレン 1 枚当たりのコスト ( 概算 ) 3,450 2,000 50 1,400 化学発光 1,900 0 1,700 蛍光 ターゲット数 1 5,500 4,000 0 1,400 化学発光 2,0 400 1,700 蛍光 ターゲット数 2 7,550 6,000 150 1,400 化学発光 発光試薬 2 次抗体 メンブレン 2,300 600 1,700 蛍光 ターゲット数 3 ウェスタンブロッティングのデータを定量的解析をする場合 目的タンパク質を検出するだけでなく ハウスキーピングタンパク質 (HKP) 等を同様に検出し データの信頼度を示すことが一般的に行われます 昨今 これまで用いられてきた HKPの発現量の安定性が問題視されるようになり メンブレン上の総タンパク質を検出し 補正用データとして用いる代替法が認知されるようになりました バイオ ラッドの蛍光ウェスタンブロッティングでは 従来のHKPを用いた補正法と 独自の Stain-Free 技術を応用した総タンパク質補正法の両方に対応することが可能です HKP 補正の場合 :HKPとして一般的に用いられている アクチン チューブリン GAPDHに対するRhodamine 標識抗体を用意しております 本製品はバイオ ラッド独自の HuCAL 技術を用いて開発されたFc 領域を持たない特異性の高いモノクローナル抗体です 総タンパク質補正の場合 : メンブレン上の総タンパク質を検出する方法として Ponceau SやCBBなどの方法が一般的に用いられておりますが 感度や高バックグラウンド 抗原抗体反応への影響等の問題もあり バイオ ラッドでは独自のStain-Free 技術を用いた定量ウェスタン V3ワークフローを提案しております HKP および総タンパク質をそれぞれマルチプレックス蛍光検出した例 ATG7 (MW 78kDa) Tubulin AKR1C2 (MW 36kDa) HKP(Tubulin) および 2-Plex 検出例 ATG7 (MW 78kDa) AKR1C2 (MW 36kDa) 複数の青いバンド総タンパク質 (Stain-Free) 総タンパク質 (Stain-Free) および2-Plex 検出例 良くあるご質問 Q. 蛍光ウェスタンブロッティングを検出するためには どのような装置が必要ですか? A. 使用する蛍光色素の検出が可能な光源および検出用フィルターが搭載された撮影装置が必要です バイオ ラッドの ChemiDoc Touch MPはStarBrightシリーズや DyLight800などをはじめ様々な蛍光色素を高感度に検出することが可能です Q. 1 次抗体を選ぶ際のポイントは何ですか? A. 蛍光検出では 複数のターゲット分子に対する1 次抗体を混合し 同時に反応させます その後 それぞれのターゲット分子に対する1 次抗体は 異なる蛍光色素で標識された2 次抗体で識別する必要があります そのため 1 次抗体はそれぞれ異なるホスト動物由来の抗体を選択する必要があります (3ページ上図参照) Q. 2 次抗体を選ぶ際のポイントは何ですか? また推奨の組み合わせはありますか? A. 1 次抗体で使用したホスト動物種に対応した蛍光標識 2 次抗体を選択します また 蛍光色素はそれぞれクロストークの無い蛍光色素を選択する必要があります 複数のターゲットを同時検出する際の推奨組み合わせ ターゲットタンパク質 ターゲット検出 1 データ補正用 2 次抗体蛍光標識 1 種類 StarBright Blue 700 2 種類 (1 種類 + データ補正用 ) 3 種類 (2 種類 + データ補正用 ) StarBright Blue 700 Rhodamine StarBright Blue 700( ターゲット 1) 2 StarBright Blue 5( ターゲット 2) 標識抗 HKP 抗体またはStain-Freeゲル Rhodamine 標識抗 HKP 抗体またはStain-Freeゲル 1 ChemiDoc Touch MP システム以外でご利用の場合 適切な光源 フィルターが必要です 撮影感度やクロストークに注意願います 2 感度に差がある場合は 薄いターゲットを StarBright Blue 700 で検出します Q. StarBright Blue シリーズおよび hfab Rhodamine 標識 HKP 抗体の希釈倍率はどの程度ですか? A. StarBright Blue シリーズの推奨希釈倍率は 2,500-5,000 です また hfab Rhodamine 標識 HKP 抗体の推奨希釈倍率は 1,000-,000 です Q. 蛍光ウェスタンブロッティングを行う上で注意すべき点は何ですか? A. 以下の点にご注意ください メンブレン高感度な蛍光検出を行うためには メンブレンのバックグラウンドを最小限に抑えることが重要です PVDFメンブレンを用いる場合 : 一般的なPVDFメンブレンは 蛍光検出する場合には高バックグラウンドになるため適しません 蛍光検出専用の低蛍光 PVDFメンブレンの使用を推奨いたします ニトロセルロースメンブレンを用いる場合 : そのままご使用いただけます 2 次抗体 HRP 標識抗体から蛍光標識抗体へ変更する必要があります StarBright Blueシリーズを用い低蛍光 PVDFメンブレンを用いる場合 2 次抗体の希釈バッファーに 0.02%SDSを加えることで より低バックグラウンドな高感度検出が可能になります 分子量スタンダード有色スタンダードを用いる場合には バイオ ラッドのプレシジョン Plus ブルースタンダードを 1ウェルあたり 2-3 μlをアプライすることを推奨いたします 赤やピンク色のバンドが含まれるスタンダードは 検出時に強い光を発し データに影響を与える可能性があるため 使用をお控えください 洗浄蛍光検出法は化学発光法と比べ バックグラウンドの影響を受けやすい検出方法です 場合によって洗浄回数を増やしたり 洗浄バッファー中の Tween- 濃度を検討するなどの変更が必要です 遮光蛍光退色を防ぐため 2 次抗体の反応ステップからアルミホイル等で遮光する必要があります Q. 撮影後のメンブレンの保存はできますか? A. メンブレンをドライアップし 遮光状態で保存可能です 蛍光ウェスタンブロッティング 5

Ordering Information プレキャストゲル TGX シリーズは 高効率で転写を可能にするウェスタンブロッティングに最適なプレキャストゲルです また Stain-Free ゲルは ウェスタンブロッティングの総タンパク質を用いたデータ補正に最適です ミニプロティアンTGX Stain-Freeゲル Criterion TGX Stain-Freeゲル ウェル容量 :well (30 μl) well Deep (50 μl) 12well ( μl) 15well (15 μl) ウェル容量 :12+2well (45 μl) 18well (30 μl) 26well (15 μl) 価格 枚パック,600 価格 4 枚パック 12,000 枚パック 28,500 ゲル濃度 well 枚 well Deep 枚 12well 枚 15well 枚 保存 ゲル濃度 12+2well 枚 18well 枚 26well 枚 保存 7.5% 4568023 4568024 4568025 4568026 4 7.5% 5678023J 5678024J 5678025J 4 % 4568033 4568034 4568035 4568036 4 % 5678033J 5678034J 5678035J 4 12% 4568043 4568044 4568045 4568046 4 12% 5678043J 5678044J 5678045J 4 4-15% 4568083 4568084 4568085 4568086 4 4-15% 5678083J 5678084J 5678085J 4 4-% 4568093 4568094 4568095 4568096 4 4-% 5678093J 5678094J 5678095J 4 8-16% 45683 45684 45685 45686 4 8-16% 56783J 56784J 56785J 4 Any kd 4568123 4568124 4568125 4568126 4 Any kd 5678123J 5678124J 5678125J 4 ミニプロティアンゲルをカセットから取り出す際には 別売の TGX オープニングレバー 4560000 ( 500) が必要となります 4 枚パックはカタログ番号の末尾を J04 に変更してください ミニプロティアンTGXゲル Criterion TGXゲル ウェル容量 :well (30 μl) well Deep (50 μl) 12well ( μl) 15well (15 μl) ウェル容量 :12+2well (45 μl) 18well (30 μl) 26well (15 μl) 価格 枚パック 19,600 30 枚パック 55,800 50 枚パック 88,000 価格 4 枚パック 11,0 枚パック 26,600 ゲル濃度 well 枚 well Deep 枚 12well 枚 15well 枚 保存 ゲル濃度 12+2well 枚 18well 枚 26well 枚 保存 7.5% 45623 45624 45625 45626 4 7.5% 56723J 56724J 56725J 4 % 45633 45634 45635 45636 4 % 56733J 56734J 56735J 4 12% 45643 45644 45645 45646 4 12% 56743J 56744J 56745J 4 4 15% 45683 45684 45685 45686 4 4 15% 56783J 56784J 56785J 4 4 % 45693 45694 45695 45696 4 4 % 56793J 56794J 56795J 4 8-16% 45613 45614 45615 45616 4 8 16% 56713J 56714J 56715J 4 Any kd 4569033 4569034 4569035 4569036 4 Any kd 5671123J 5671124J 5671125J 4 30 枚のご注文は 456XXXXB03( 末尾に B03 を付加 ) 50 枚のご注文は 456XXXXB05( 末尾に B05 を付加 ) にてお願いいたします ミニプロティアンゲルをカセットから取り出す際には 別売の TGX オープニングレバー 4560000 ( 500) が必要となります 自作用ゲル作成試薬 4 枚パックはカタログ番号の末尾を J04 に変更してください TGX FastCastアクリルアミドキットは TGXプレキャストゲルと同性能のゲルを自作することができる自作用キットです FastCastアクリルアミドキット カタログ番号 品名 ( 各ミニゲル約 60 枚 ) 価格 カタログ番号 品名 ( 各ミニゲル約 60 枚 ) 価格 16171 TGX FastCast アクリルアミドキット 7.5% 21,000 16181 TGX Stain-Free FastCast アクリルアミドキット 7.5% 23,000 16173 TGX FastCast アクリルアミドキット % 21,000 16183 TGX Stain-Free FastCast アクリルアミドキット % 23,000 16175 TGX FastCast アクリルアミドキット 12% 21,000 16185 TGX Stain-Free FastCast アクリルアミドキット 12% 23,000 泳動槽関連 ミニプロティアンTetraセル カタログ番号 品名 価格 1658005JA ミニプロティアン Tetra レディーゲルセル 2 枚用 42,000 構成内容 : 下部バッファー槽 ケーブル付フタ 電極アッセンブリ バッファーダム 1658004JA ミニプロティアン Tetra レディーゲルセル 4 枚用構成内容 : 下部バッファー槽 ケーブル付フタ 電極アッセンブリ コンパニオンランニングモジュール バッファーダム 67,000 ミニプロティアンTetraセル 2 枚用は コンパニオンランニングモジュールを追加することで 4 枚用にすることが可能です Criterionセル カタログ番号 品名 価格 1656001 Criterionセル 構成内容 : 下部バッファー槽 パワーケーブル付フタ サンプルローディングガイド 60,000 転写装置 トランスブロット Turbo は 電源装置内蔵の高効率かつ高速に転写を行えるブロッティングシステムです トランスブロットTurboシステム転写パック付 トランスブロットTurboシステムRTA 転写キット付 カタログ番号 品名 ( 構成 : 本体 いずれかの転写パック ) 価格 カタログ番号 品名 ( 構成 : 本体 いずれかのRTA 転写キット ) 価格 1704150J2 トランスブロットTurbo with NC( ミニ ) 280,000 1704270J1 トランスブロットTurbo w/rta NC( ミニ ) 306,000 1704150J8 トランスブロットTurbo with NC( ミディ ) 285,000 1704274J1 トランスブロットTurbo w/rta 低蛍光 PVDF( ミニ ) 313,000 1704271J1 トランスブロットTurbo w/rta NC( ミディ ) 324,000 1704275J1 トランスブロットTurbo w/rta 低蛍光 PVDF( ミディ ) 335,000 トランスブロット Turbo 専用消耗品 トランスブロットTurbo 転写パックメンブレンやろ紙が予め特殊な転写溶液で平衡化されたパックです 電気泳動後すぐにトランスブロット Turbo に設置し 高効率かつ高速での転写を可能にします トランスブロットTurbo RTA 転写キット転写パックで使用されているメンブレン ろ紙 転写バッファーがキット化されており ランニングコストを抑えたいお客様に最適です カタログ番号品名 (パック) 価格 カタログ番号品名 ( 構成 : メンブレン (40 枚 ) ろ紙(80セット) 5X 転写バッファー ) 価格 1704158 トランスブロットTurbo 転写パック NC( ミニ ) 7x8.4 cm 16,800 1704270 トランスブロットTurbo 用 RTA 転写キットNC( ミニ ) 46,000 1704159 トランスブロットTurbo 転写パック NC( ミディ ) 8.5x13.5 cm 23,600 1704274 トランスブロットTurbo 用 RTA 転写キット低蛍光 PVDF( ミニ ) 54,000 1704271 トランスブロットTurbo 用 RTA 転写キットNC( ミディ ) 66,000 1704275 トランスブロットTurbo 用 RTA 転写キット低蛍光 PVDF( ミディ ) 78,000 6 蛍光ウェスタンブロッティング

蛍光検出用メンブレン 蛍光 / ケミルミウェスタン対応低蛍光 PVDF メンブレン 蛍光 / ケミルミウェスタン対応ニトロセルロースメンブレン カタログ番号品名 価格 保存 カタログ番号品名 価格 保存 16260 低蛍光 PVDFメンブレン / フィルターペーパーセット 7 8.4 cm, セット 17,500 室温 16146 ニトロセルロースメンブレン (0.2 μm)7 8.4 cm, セット 8,000 室温 16261 低蛍光 PVDFメンブレン / フィルターペーパーセット 7 8.4 cm, セット 32,500 室温 16168 ニトロセルロースメンブレン (0.2 μm)8.5 3.5 cm, セット 14,500 室温 16262 低蛍光 PVDFメンブレン / フィルターペーパーセット 8.5 13.5 cm, セット 26,500 室温 16112 ニトロセルロースメンブレン (0.2 μm)30 350 cm, 1ロール 55,000 室温 16263 低蛍光 PVDFメンブレン / フィルターペーパーセット 8.5 13.5 cm, セット 47,500 室温 16264 低蛍光 PVDFメンブレン 28 380 cm, 1ロール 171,000 室温 蛍光標識 2 次抗体 超高感度な蛍光検出を可能にする StarBright Blue シリーズ 低バックグラウンド検出を可能にする DyLight800 シリーズがラインアップされています StarBright Blue 5/700 標識 2 次抗体 DyLight 800 標識 2 次抗体 カタログ番号品名 価格 保存 カタログ番号 品名 価格 保存 5866 ヤギ抗マウスIgG StarBright Blue 5(400 μl),000 4 STAR36D800GA Sheep anti Rabbit IgG:Dylight 800 0.1 mg 21,600 4 5867 ヤギ抗マウスIgG StarBright Blue 5(80 μl),000 4 STAR117D800GA Goat anti Mouse IgG (H/L): 21,300 4 5869 ヤギ抗ウサギIgG StarBright Blue 5(400 μl),000 4 DyLight 800 (Multi Species Adsorbed)0.1 mg 5870 ヤギ抗ウサギIgG StarBright Blue 5(80 μl),000 4 STAR71D800GA Goat anti Rat IgG: 21,900 4 4158 ヤギ抗マウスIgG StarBright Blue 700(400 μl),000 4 Dylight 800 (Mouse Adsorbed)0.1 mg 4159 ヤギ抗マウスIgG StarBright Blue 700(80 μl),000 4 4161 ヤギ抗ウサギIgG StarBright Blue 700(400 μl),000 4 4162 ヤギ抗ウサギIgG StarBright Blue 700(80 μl),000 4 Rhodamine 標識ハウスキーピング用抗体 Rhodamine 標識ハウスキーピング用抗体 ( 交差性 : ヒト マウス ラット ) カタログ番号 品名 価格 保存 カタログ番号 品名 価格 保存 4163 抗アクチン hfab Rhodamine 0 μl 36,000-4166 抗チューブリン hfab Rhodamine 40 μl 18,000-4164 抗アクチン hfab Rhodamine 40 μl 18,000-4167 抗 GAPDH hfab Rhodamine 0 μl 36,000-4165 抗チューブリン hfab Rhodamine 0 μl 36,000-4168 抗 GAPDH hfab Rhodamine 40 μl 18,000 - 検出装置 高感度 かつ高解像度で蛍光および化学発光検出を可能にする撮影装置です 本装置はバイオ ラッドの StarBright Blue シリーズや DyLight800 などの蛍光検出試薬や Stain-Free の検出に最適化され 幅広い蛍光検出を可能にします カタログ番号 品名 価格 17001402JA ChemiDoc Touch MPイメージングシステム ( ケミルミ 蛍光対応 ) ChemiDoc Touch MPイメージングシステムの詳細や仕様 その他システムについては 装置カタログをご参照ください 7,900,000 ブロッキング剤 バッファー関連 カタログ番号 品名 価格 カタログ番号 品名 価格 16782 1xTBS/1% カゼイン 1L 26,000 16781 EIAグレード % Tween- 1L 8,500 1706435 xtbs 1L 7,000 16416 % SDS 溶液 250 ml 14,500 お薦めの関連製品 PrecisionAb TM 抗体 抗体性能は最大 12 細胞株により検証済 検証用に使用したプロトコール付で安心 トライアルサイズ ( μl) はポジティブコントロール付 ウェスタンブロット検証済み抗体 対象ラインアップ随時拡大中!!! 製品リストは bio-rad-antibody.jp からご確認ください 検証例 : プロット全体のデータを開示しているため 特異性や内在性タンパク質への反応性を確認できます A Bio-Rad PrecisionAb Vendor S Vendor C kd 75 50 37 kd 75 50 37 kd 75 50 37 B Relative intensity (x 6 ) 8 6 4 2 Bio-Rad PrecisionAb Vendor S Vendor C 比較データ : Jurkat セルライセート中の BCL-2 タンパク質検出を各社抗体を用いて行った A: ウェスタン検出シグナル ( 左 ) と Stain-Free イメージ ( 右 分子量スタンダードと総タンパク質 ) B: ウェスタン検出シグナル定量結果 ( 総タンパク量で補正済 ) 同等または高い希釈率で他社製抗体よりも強いシグナルが得られている 0 Ordering Information カタログ番号 品名 価格 保存 V PrecisionAb 抗体 0 μl ( 回分 ) 50,000 4 VKT PrecisionAb 抗体 μl (2 回分 )+ コントロールライセート 24,000 - 蛍光ウェスタンブロッティング 7

お試し用サンプル受付中!!! バイオ ラッドではウェスタンブロッティング関連製品のお試し用サンプル品をご提供しております ご希望のお客様は 下記のURLよりお申込みいただきますようお願いいたします なお サンプル品の内容は予告なしに変更されることがございます 予めご了承いただきますようお願いいたします URL https://info.bio-rad.com/wb-sample-request.html ご請求いただける製品一覧 ゲル関連 ミニプロティアン /Criterion TGX Stain-Freeゲルウェスタンブロッティングの総タンパク質補正に対応 ミニプロティアン /Criterion TGX ゲル転写効率の高いウェスタンブロッティングに最適 TGX FastCastアクリルアミド溶液キット TGXの性能を自作ゲルへ メンブレン関連 低蛍光 PVDF メンブレン ニトロセルロースメンブレン蛍光ウェスタンブロッティングに最適なメンブレン 化学発光検出試薬 Clarity Western ECL Substrate Clarity Max Western ECL Substrate 感度 コストパフォーマンス 使い易さの 3 つの要素を兼ね備えた発光試薬高感度から超高感度まで幅広くケミルミ検出をカバー ウェスタンブロッティング検証済み抗体 PrecisionAb 抗体シリーズウェスタンブロッティングによる検証済み抗体で安心!!! ラインアップ随時拡大中! 蛍光標識抗体 StarBright Blue 標識抗体高感度な蛍光検出を実現する新しい蛍光標識抗体 DyLight800 標識抗体低バックグラウンドな蛍光標識抗体 Rhodamine 標識ハウスキーピング用抗体ワンステップで HKP 検出に対応 免疫沈降関連製品 SureBeadsシリーズ磁気ビーズを採用した 迅速 かつ効率的に免疫沈降を行うためのビーズおよび専用ラック TidyBlot 変性 IgGの重鎖と軽鎖を認識しない免疫沈降後のサンプル検出に最適なHRP 標識二次抗体 関連アプリケーション : 総タンパク質を用いたデータ補正 ウェスタンブロッティングのデータを定量的解析をする場合 目的タンパク質を検出するだけでなく 同様に検出されたハウスキーピングタンパク質 (HKP) を用いデータ補正することで データの信頼度を担保することが求められております HKP を用いたデータ補正は古くから用いられてきた方法ですが その安定性が問題視されるようになり 新しいガイドラインでは HKP の発現量が用いられた実験系で変動していないことをエビデンスとして示すことが求められるようになりつつあります しかしながら そのエビデンスを示すことは容易でなく その代替法として メンブレン上の総タンパク質を検出し 補正用データとして用いる方法が認知されるようになりました バイオ ラッドでは 独自の Stain-Free 技術を用いた総タンパク質を用いた定量ウェスタン V3 ワークフローを提案しております Revised guidelines for authors from The Journal of Biological Chemistry : http://jbcmission.asbmb.org/collecting-and-presenting-data 定量ウェスタン V3 ワークフロー 定量ウェスタン V3ワークフローはこんなお客様に最適です HKPの発現量が安定しない 簡便にデータ補正を行いたい コストダウンをしたい 新しいガイドラインに対応したい 定量ウェスタンV3ワークフローの詳細は http://www.bio-rad.com/v3 をご参照ください DyLight is a trademark of Thermo Fisher Scientific Inc. ECL is a trademark of GE Healthcare. HuCAL is a trademark of MorphoSys AG. IRDye is a trademark of LI-COR, Inc. Tween is a trademark of ICI Americas Inc. Clarity Max Western ECL Substrate is manufactured by Cyanagen Srl and is the subject of patent application numbers US7855287, EP19507, US9040252, AU112658, CA27425, US8129136, and EP19695, together with other equivalent granted patents and patent applications in other countries like CN2313732. Precision Plus Protein Standards are sold under license from Life Technologies Corporation, Carlsbad, CA for use only by the buyer of the product. The buyer is not authorized to sell or resell this product or its components. バイオ ラッドラボラトリーズ株式会社 取扱店 ライフサイエンス www.bio-rad.com 本 社 140-0002 東京都品川区東品川 2-2-24 TEL:03-6361-7000 大阪営業所 532-0025 大阪市淀川区新北野 1-14-11 TEL:06-6308-6568 福岡営業所 812-0013 福岡市博多区博多駅東 2-5-28 TEL:092-475-4856 学術的お問い合わせは TEL:03-6404-0331 価格 ( 税抜き ) 仕様は18 年 4 月現在のもので 予告なく変更することがあります 本カタログに記載されている会社名 商品名は各社の商標または登録商標です C11577L 1803a