細胞培養・刺激に最適化された製品群

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ひさともほがり
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1 試験研究用 MCS Cell Culture 細胞培養刺激に最適化された製品群研究 MCS Expand www. miltenyibiotec.co.jp

MCS Cell Culture Miltenyi iotec 社の細胞培養関連製品群 MCS MCS

(cell culture grade) primary MCSiead nti-iotin

MCSiead CD3 TT (Treg) nti-iotin MCSieads (cell

vitro P3 MCSiMG TM Separator MCSieads 5 ml, 15 ml, 5

HybriMCS CD / Feed Supplement CHOMCS CD PepTivator

CytoCapture Plate(96/24 well) / Dish / Camber など GMP

2 MCS Cell Culture Miltenyi iotec 社の細胞培養関連製品群 MCS MCS ES/iPS TCR FCM WE MCSieads TM nti-iotin MCSieads (cell culture grade) primary MCSiead nti-iotin nti-iotin MCSiead CD2, CD3, CD28 MCSmix 2 T nti-iotin MCSiead CD3 TT (Treg) nti-iotin MCSieads (cell culture grade) iotin 各種 ctivation / Expansion Kit in vitro P3 MCSiMG TM Separator MCSieads 5 ml, 15 ml, 5 ml.5-2 ml MCS Miltenyi iotecxell G( TeutoCell G) HybriMCS CD / Feed Supplement CHOMCS CD PepTivator ぺプチドプール CMV-pp65 recombinant proteinなど Imaging Plate CytoCapture Plate(96/24 well) / Dish / Camber など GMP サイトカイン培地ファンクショナルグレード抗体 PepTivator などなど詳しくはお問い合わせ下さいさらに詳しい情報はWEから MCS GMP 2

T ctivation/expansion Kit in vitro 1 8 1 8 * * T Cell ctivation / Expansion Kit 4 1 8 Treg Expansion Kit 1 1 7 /2 ml Treg Expansion Kit 4 1 7 Transct T 1 9 T T (Treg) T Cell ctivation / Expansion

CD4 + T, CD8 + T expansion T Figure 1 ヒト T 細胞の増幅曲線 PMCs Pan T Cell Isolation Kit II T T cell ctivation/expansion Kit IL-2 CD4 + T, CD8 + T CD25 Cell number 1 8 1 7 1 6 CD4 + cells CD8 + cells 1 5 1 2

suppression assay TexMCS Medium Figure 4 T regulatory T (HS) T RPMI164 FCS 1% T FoxP3 Figure 2 ヒト Treg 細胞の増幅後の phenotype FoxP3 + 細胞数 [x-fold] 5 4 3 2 1 2 FoxP3 CD4 + CD25 + CD127 dim/- Treg PMCsTreg

3 T ctivation/expansion Kit in vitro * * T Cell ctivation / Expansion Kit Treg Expansion Kit /2 ml Treg Expansion Kit Transct T 1 9 T T (Treg) T Cell ctivation / Expansion Kit, human Figure 1 T Cell ctivation / Expansion Kit, Non-human primates T Cell ctivation / Expansion Kit, mouse nti-iotin MCSieads 4 nti-iotin MCSiead Particles mimicresting T T RPMI164TexMCS IL-2 1 CD4 + T, CD8 + T expansion T Figure 1 ヒト T 細胞の増幅曲線 PMCs Pan T Cell Isolation Kit II T T cell ctivation/expansion Kit IL-2 CD4 + T, CD8 + T CD25 Cell number CD4 + cells CD8 + cells Time in culture (d) CD25 Treg Expansion Kit, human Figure 2 Treg Expansion Kit, mouse Figure 3 FoxP3 + regulatory T nti-cd3 nti-cd28 MCSiead Particles RPMI164TexMCS IL-2 FoxP3 Treg expansion Treg suppression assay TexMCS Medium Figure 4 T regulatory T (HS) T RPMI164 FCS 1% T FoxP3 Figure 2 ヒト Treg 細胞の増幅後の phenotype FoxP3 + 細胞数 [x-fold] FoxP3 CD4 + CD25 + CD127 dim/- Treg PMCsTreg Expansion Kit 14 ()() CD4 + CD25 FoxP3MCSQuant nalyzer Figure 3 マウス Treg 細胞の増幅曲線 CD4 + CD25 + Regulatory T cell Isolation Kit TregTreg Expansion kit day, 7, 13 FoxP Time in culture (d) 14 T Cell Transct Figure 4 T Cell Transct CD3 CD28 T /ctivation/expansion Kit polymeric nanomatrix Viability T GMP Translational reserch Unstimulated Stimulated Relative cell number Relative cell number ¹ 1² 1³ ¹ 1² 1³ CFSE CFSE Figure 4 TexMCS と Transct によるヒト T 細胞刺激 Pan T cell isolation KitT CFSEIL-2TexMCS T Cell Transct 7 ()()Flow cytometry 3

T or T CytoStim, human Figure 5 CytoStim, non-human primates TCR MHC T SE T Concanavalin T Frequency of IFN-γ + cells IFN-γ CD4-FITC CD8-PC nti-ifn-γ-pe nti-ifn-γ-pe Figure 5 CytoStim での PMC 刺激試験 T

タンパク質の一次構造 ( はアミノ酸を示す ) PepTivator Figure 6 PepTivator PepTivator 抗原の一例 Stimulated sample Unstimulated control MGE-1, -3, -4, Melan-/MRT-1, NY-ESO-1, Survivin 1, WT1 dv5, CMV, EV, HPV, Influenza

afzelii CD8 CD8 Desmoglein, Insulin, MP Isoform 1, MP Isoform 5, MOG IFN-γ IFN-γ Figure 7 PepTivator による CMV IE-1 特異的 T 細胞の刺激 CMVPMCs PepTivator-CMV IE-1 (2 μl/ml) 6 Intracellular staining IFN-γ T 各種

4 T or T CytoStim, human Figure 5 CytoStim, non-human primates TCR MHC T SE T Concanavalin T Frequency of IFN-γ + cells IFN-γ CD4-FITC CD8-PC nti-ifn-γ-pe nti-ifn-γ-pe Figure 5 CytoStim での PMC 刺激試験 T 各種 PepTivator Figure 7 PepTivator15 11 Figure 6 CD4 + T CD8 + T MCS Cytokine Secretion ssay Cell Enrichment and Detection Kits T () 2PMC CytoStim CD4 + T IFN-γ + () PMC CytoStim 1IFN-γ Flow cytometry タンパク質の一次構造 ( はアミノ酸を示す ) PepTivator Figure 6 PepTivator PepTivator 抗原の一例 Stimulated sample Unstimulated control MGE-1, -3, -4, Melan-/MRT-1, NY-ESO-1, Survivin 1, WT1 dv5, CMV, EV, HPV, Influenza (H1N1),. fumigatus,. afzelii CD8 CD8 Desmoglein, Insulin, MP Isoform 1, MP Isoform 5, MOG IFN-γ IFN-γ Figure 7 PepTivator による CMV IE-1 特異的 T 細胞の刺激 CMVPMCs PepTivator-CMV IE-1 (2 μl/ml) 6 Intracellular staining IFN-γ T 各種 MCS Cytokines 各種ファンクショナルグレード抗体 T Naive CD4 T cell IL-2 nti-cd3 nti-cd28 Polarizing cytokines ctivating antibodies locking or neutralizing antibodies in vitro WE IL-12 IL-18 IL-27 IFN-γ nti-il-4 IL-4 IL-6 IL-31 IL-23 TSLP IL-25 nti-il-12 nti-ifn-γ TGF-β1 IL-4 nti-ifn-γ TGF-β1 TGF-β1 IL-1β IL-6 IL-21 IL-23 nti-il-2 nti-il-4 nti-ifn-γ IL-6 IL-21 CXCL13 IL-6 TNF-α TH1 cell TH2 cell TH9 cell itreg cell TH17 cell Tfh cell TH22 cell 4

NK /TSuppression NK NK MCS Medium Figure 8 NK MCS Medium NK NK Killing assay NK PMC PMC T NKT Fold NK cell expansion Human IL-2 IS (improved sequence) IL-2 IS (interleukin 2 "Improved Sequence")

5 NK /TSuppression NK NK MCS Medium Figure 8 NK MCS Medium NK NK Killing assay NK PMC PMC T NKT Fold NK cell expansion Human IL-2 IS (improved sequence) IL-2 IS (interleukin 2 "Improved Sequence") aldesleukin / IL-2 NK MCS Cultivation time (days) TexMCS IL-2 WHO IU(international unit) Premium grade IU Co Cell frequency NK MCS TexMCS NK NKT T cells Other Figure 8 NK MCS Medium によるヒト NK 細胞の増殖 NK 5% serum 5 IU/mL IL-2 ISNK MCS Medium N=3 NK MCS MediumPMC14 T CD3 + CD56 - NKT CD3 + CD56 + NK CD56 + CD3 - CD3 - CD56 - NK Cell ctivation / Expansion Kit, human Figure 9 nti-iotin MCSieads CD335 (NKp46) CD2 2 NK cell ctivation/expansion KitIL-2 2NK IL-2 NK Figure 9 ヒト NK 細胞の増幅曲線 PMCsNK cell Isolation Kit NKNK Cell ctivation/ Expantion Kit eads: Cell=1:2 1x1 6 NK cells/ml IL-23 Cell number CD335 (NKp46)/CD2 MCSiead Particles withoutmcsiead Particles Time in culture (d) Treg, MSC Suppression assay Treg Suppression Inspector, human Figure 1 MSC Suppression Inspector, human CD2 CD3 CD28 nti-iotin MCSiead Particles T (Treg) (MSCs) in vitro suppression assay Suppression Inspector CD4 + CD25 - T Treg/MSCT 3 H-thymidine carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE) 3H-thymidine incorporation (cpm) 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1, Stimulated Figure 1 ヒト Treg 細胞の抑制機能試験 Non-stimulated 1: 1:1 :1 1: :1 Ratio CD4 + CD25 versus CD4 + CD25 + cells CD4 + CD25 + Regulatory T Cell Isolation Kit TregCD4 + CD25 responder T cells Responder T cells Treg Suppression Inspector ³H-thymidine 5

(Dendritic cells) DC Monocyte immature Mo-DC mature Mo-DC Cytoox Mo-DC, human GM-CSF IL-4 Mo-DCCo IU international unit Mo-DC GM-CSF +IL-4

Figure 13 CpG(CpG ODNs) DN Th1 CpG ODN -class -class C-class P-class IFN-α secretion/induction ++++ + +++ ++++ cell stimulation + +++ ++

(Resiquimod) TLR-7 TLR-8 with DOTP w/o DOTP with DOTP w/o DOTP ORN R-6 ++++ +/- ++++ + ORN R-2 - - ++ - ORN RN-4 ++ - ++ - ORN R-2336 ++++

ODN 26 ODN 2395 ODN 21798 ODN 2216 Figure 13 各クラス ODN によるヒト PMCs の刺激 ODNs PMCs 24 IL-6, 24 hours [pg/ml] 5 45 4 35 3 25 2 15 1 IL-6 ELIS

25.5 1 ODN concentration[μm] TLR3 agonist Poly (I:C) TLR3 double- single-stranded RN polyinosinic-polycytidylic acid Poly (I:C) RNs

6 (Dendritic cells) DC Monocyte immature Mo-DC mature Mo-DC Cytoox Mo-DC, human GM-CSF IL-4 Mo-DCCo IU international unit Mo-DC GM-CSF +IL-4 Figure 11 単球由来樹状細胞 (Mo-DCs) の誘導 TNF- α or TLR-Ligand GM-CSF IL-4 Mo-DC LPS TLR-LigandTNF- α Mo-DC TLR-ligands TLR TLR9 agonists CpGs Figure 13 CpG(CpG ODNs) DN Th1 CpG ODN -class -class C-class P-class IFN-α secretion/induction cell stimulation IL-6 secretion/induction TLR7/8 agonists - ORNs Figure 14 R848 TLR7 TLR8 TLR7/TLR8 (ORN) ORNs ORN R-2176-dT R848 (Resiquimod) TLR-7 TLR-8 with DOTP w/o DOTP with DOTP w/o DOTP ORN R / ORN R ORN RN ORN R ORN R-2176-dT Figure 12 単球由来樹状細胞 (Mo-DCs) () CD14 CD14 + May-Grünwald/Giemsa () GM-CSF IL-4 Mo-DC May-Grünwald/Giemsa ODN 26 ODN 2395 ODN ODN 2216 Figure 13 各クラス ODN によるヒト PMCs の刺激 ODNs PMCs 24 IL-6, 24 hours [pg/ml] IL-6 ELIS ODN2216=-class, ODN26=-class, ODN2395=C-class, ODN21798=P-class ODN ODN concentration[μm] TLR3 agonist Poly (I:C) TLR3 double- single-stranded RN polyinosinic-polycytidylic acid Poly (I:C) RNs (oligoribonucleotides; ORNs) TLR3 ORN R-6 ORN R-2 ORN RN 4 ORN R-2336 ORN R-2176-dT IFN-α, 24 hours (pg/ml) ODN concentration[μm] Figure 14 各 ORN による PMC の刺激 6 ORN PMC 24 IFN-αELIS

幹細胞 / 神経系細胞のための培地 & サプリメントヒトiPS細胞の培養のために StemMCS ips-rew XF Figure 15 StemMCS Passaging Solution XF StemMCS

効率的に継代培養できる分散溶液をご用意していますまた多能性幹細胞から外胚葉内胚葉中胚葉へ直接分化誘導できる培地セットが発売になりました各種細胞系列への分化誘導に使用できる高品質な低分子化合物もございます

XFを用いてヒトiPS細胞を維持培養し() 2継代後も正常なカリオタイプを維持していることが示されている() C StemMCS MSC Expansion Media Kit XF Figure 16 StemMCS

ヒト骨髄サンプルもしくはその他の組織由来のMSCsの培養増殖に最適化された血清フリーかつXeno-Freeの培地です脂肪骨軟骨細胞への分化培地 (Ready- to-use)も取り扱っております Figure

脂肪細胞() 軟骨細胞(C)への分化能を維持していることが示されたヒトHSC 造血幹細胞の培養のために StemMCS HSC Expansion Media XF StemMCS HSC Expansion

MP GD67 ヒトマウスラットの神経細胞の培養のために Neurorew-21 & Neuro Medium Figure 17 神経系細胞の培養に最適化された培地とサプリメント

+ MCS Neurorew-21+ L-glutamineにPDGF-,およびFGF-2 を加え培養した右 PS-NCM Microeadsで分離後 MCS Neurorew-21 を添加したMCS Neuro

マウス胎児および成体のアストロサイトの培養に最適様々な密度培養で良好な結果が得られます stromcs Separation uffer 1μm 成体のアストロサイトの分離に最適なバッファー試験研究用 Figure

stromcs Mediumで7日間培養した細胞を固定後 nti-glst(緑)とdpi 青で染色した神経科学研究のための製品群 Inspiring technology for creative

gentlemcs MCS 細胞分離従来法より簡便かつ迅速に新生仔あるいは成体脳から生きたまま神経系細胞を分離可能 automcs Pro フローサイトメトリー高性能かつ簡便なフローサイトメーターから

7 幹細胞 / 神経系細胞のための培地 & サプリメントヒトiPS細胞の培養のために StemMCS ips-rew XF Figure 15 StemMCS Passaging Solution XF StemMCS Trilineage Differentiation Kit 各種 StemMCS Small molecules フィーダーフリーでヒト多能性幹細胞の維持増殖を可能にするXeno-Free 異種由来成分不含の培地と効率的に継代培養できる分散溶液をご用意していますまた多能性幹細胞から外胚葉内胚葉中胚葉へ直接分化誘導できる培地セットが発売になりました各種細胞系列への分化誘導に使用できる高品質な低分子化合物もございます詳しくはWEサイトパンフレットをご覧くださいヒトMSCの培養のために Figure 15 StemMCS ips-rew 培地によるヒトiPS細胞の培養増殖マトリゲル上でStemMCS ips-rew XFを用いてヒトiPS細胞を維持培養し() 2継代後も正常なカリオタイプを維持していることが示されている() C StemMCS MSC Expansion Media Kit XF Figure 16 StemMCS dipodiff Media Figure 16 StemMCS ChondroDiff Media Figure 16 StemMCS OsteoDiff Media Figure 16 ヒト骨髄サンプルもしくはその他の組織由来のMSCsの培養増殖に最適化された血清フリーかつXeno-Freeの培地です脂肪骨軟骨細胞への分化培地 (Ready- to-use)も取り扱っております Figure 16 StemMCS MSC 培地によるMSCs の増殖培養後の分化能 StemMCS MSC Expansion Media XF で増殖培養したMSCsを各種分化誘導培地を用いて分化させた結果骨芽細胞脂肪細胞() 軟骨細胞(C)への分化能を維持していることが示されたヒトHSC 造血幹細胞の培養のために StemMCS HSC Expansion Media XF StemMCS HSC Expansion Cocktail 分離精製したCD34+造血幹前駆細胞に最適化された血清フリーかつXeno- Freeの培地をご用意しています HSCの増殖に最適な濃度に調整済みのサイトカインカクテルを組み合わせてご使用いただけます MP GD67 ヒトマウスラットの神経細胞の培養のために Neurorew-21 & Neuro Medium Figure 17 神経系細胞の培養に最適化された培地とサプリメント 27に基づき組成が最適化されたサプリメント MCS Neurorew-21 ロット間差がなく再現性の高い培養 Figure 17 マウス神経系細胞の培養左マウスオリゴデンドロサイトをMCS Neuro Medium + MCS Neurorew-21+ L-glutamineにPDGF-,およびFGF-2 を加え培養した右 PS-NCM Microeadsで分離後 MCS Neurorew-21 を添加したMCS Neuro Medium で7日間培養したマウスニューロン MCS Neuro Mediumと組合せてCNSやPNSの細胞増殖および長期培養生存が可能 stromcs Medium Figure 18 マウス胎児および成体のアストロサイトの培養に最適様々な密度培養で良好な結果が得られます stromcs Separation uffer 1μm 成体のアストロサイトの分離に最適なバッファー試験研究用 Figure 18 マウスアストロサイトの培養幹細胞研究のための製品群 Stem Cell Solutions by Miltenyi iotec ver.1.3 P4マウスからCS-2マイクロビーズキットで分離したアストロサイトを stromcs Mediumで7日間培養した細胞を固定後 nti-glst(緑)とdpi 青で染色した神経科学研究のための製品群 Inspiring technology for creative scientists サンプル調製細胞分離フローサイトメトリー細胞培養分子生物学的解析 MCSサンプル調製 Viabilityよく単細胞懸濁液の調製が可能ヒーター搭載モデルにより完全自動化を実現 gentlemcs MCS 細胞分離従来法より簡便かつ迅速に新生仔あるいは成体脳から生きたまま神経系細胞を分離可能 automcs Pro フローサイトメトリー高性能かつ簡便なフローサイトメーターから特異性の高い抗体まで多彩な製品を展開 MCSQuant nalyzer 細胞培養神経系細胞の培養のための培地およびサプリメントをはじめグロースファクターを展開 MCS Media & Supplement www. miltenyibiotec.co.jp www. miltenyibiotec.co.jp 各製品の詳しい内容につきましては WEサイトまたは詳細パンフレットをご請求ください 7

ル : ーの保存料を含まずフィルター滅菌済 zide-freeで低エンドトキシン濃度 (<.1ng/μg of protein) を保証アイソタイプコントロール抗体も展開 in vitro および in vivo の活性化中和ブロッキング試験に最適ビーのスーーおしておりすーにしすのではください MCSCustom@miltenyibiotec.

18 % CD45R (22) CD45R (22) その他ファンクショナルグレード抗体と機能 Figure 19 nti-mpd

8 ル : ーの保存料を含まずフィルター滅菌済 zide-freeで低エンドトキシン濃度 (<.1ng/μg of protein) を保証アイソタイプコントロール抗体も展開 in vitro および in vivo の活性化中和ブロッキング試験に最適ビーのスーーおしておりすーにしすのではください MCSCustom@miltenyibiotec.jp (9:-17:) nti-mpdc-1 ファンクショナルグレード, マウス (Figure 19) mpdc-1はスplasmacytoid dendritic cells (PDCs) に的にしていす nti-mpdc-1 ースにすにより 24 以にPDCs 的にーすです Figure 19 Ly-6C.85 % Ly-6C.18 % CD45R (22) CD45R (22) その他ファンクショナルグレード抗体と機能 Figure 19 nti-mpdc-1 抗体による PDC の in vivo ディプリーション L/c スに 5μg の nti-mpdc-1 ーいはしての i.p. し 24 のしース nti-mpdc-1 ス用ス用ーー製品ー製品ー製品 CD3 CD28 nti-fcεriα CD335 (NKp46) nti-inkt nti-il-4 nti-il-12 (p4/p7) nti-ifn-γ CD4 CD279 (PD-1) CD3ε (145-2C11) CD28 CD357 (GITR) nti-il-4 nti-il-2 nti-il-17 nti-ifn-γ CD4 CD279 (PD-1) CD252 (OX4L) ー Mouse IgG2b pure ー Mouse IgG2a pure ー Mouse IgG1 pure ー Rat IgG2b pure ー Rat IgG2a pure ー Rat IgG1 pure ーーーーーー CD152 (CTL-4) CD137 (4-1) CD357 (GITR) nti-hl-g nti-h-2kb/siinfekl nti-do11.1 TCR そののスのー用していすの製品スは WE サください MCS は Miltenyi iotec GmbH の登録商標です記載されていない限り Miltenyi iotec 社の製品およびサービスは全て研究用です今すぐ問い合わせを! ミルテニー検索それ以外の目的には使用しないでください販売元取扱店東京都江東区冬木 16-1 NEX 永代ビル5F TEL : ( 代 ) FX : ホームページ macs@miltenyibiotec.jp 学術的なお問い合せ : 機器修理のお問い合せ : 在庫納期のお問い合わせ : M9:~PM5: ( 土日祝日除く ) 21711dEYE3

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