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- がんま もてぎ
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1 PCRM-PCR PCR MPCR Dualreal PCR PCR (M-PCR) PCR (M-PCR) Q & A PCR DNA DNA PCR 1 PCR (MPCR) MBI PCR 1 MPCR 1 MPCR DNA 1 PCR 510
2 DNA (US patent 5, 582, 989) 1 DNA ( 1) MPCR GC MBI MPCR PCR DNA
3 2 MBI MPCR RNA mrna mrna mrna Real-Time PCR Real-Time PCR MPCR MPCR MPCR PCR (Fig.2) MPCR PCR Table1 MBI MPCR MPCR 3 MPCR mrna MBI MPCR cdna
4 MPCR 3 1 Short Hand on Time MBI MPCR () 4 MBI 3 MPCR MBI MBI MPCR ( 5)MPCR MPCR
5 PCR DNA PCR mrna MPCR PCR
6 MBI PCR MPCR SNP 1. HPV MPCR MPCR MPCR (HPV) 2 40 HPV HPV in vitro (HPV1618) (HPV3133) (HPV611) MBI HPV MPCR (Fig6)MBI HPV MPCR Dr. Chudzio MBI HPV MPCR HPV
7 2. : MPCR MBI Linden (Factor II) G20210A MPCR Figure7 Factor V G1961A (Arg506 Gln) 1994 Bertina prothrombin (factorii) G A (20210) ASA PCR PCR factor IX PCR Figure7 DNA MBI Factor V Linden G20210A MPCR Kaiser Permanent North Regional Laboratory Blood Bank
8 (DMD/BMD) X DMD/BMD DMD 3 DMD 70 DMD 60% Beggs Chamberlain MBI DMD/BMD MPCR 98% MPCR 1. /Toll-Like Receptors
9 CD14 TLR-4 (Toll-like receptor-4) TLR MBI MPCR (MP-70190) Toll-like receptor (Cao) CD14 TLR-4 (0.03mM) (1.2mM) TLR-4 CD14 631bp 203bp GAPDH 8 MPCR semi-quantitate 2. Dr. Ruediger Salowsky (Agilent Technologies Deutschland GmbH) RT-MPCR microfluidic amplicon end-point 11 Dr. Salowsky ( 9) RT-MPCR ( 9 Dr. Ruediger Salowsky Rainer Wittig ) MBI MPCR Agilent 2100 Bioanalyzer Agilent 2100 Bioanalyzer
10 MPCR 2 PCR PCR MPCR 10 cdna MPRCR 2 1) MPCR PCR 2) 5ng total RNA (10 ) intensity 50ng (25 ) 1/10 (28 ) MPCR
11 MPCR MPCR 3 MPCR PCR PCR PCR MPCR MPCR MPCR PCR ( 11) MPCR PCR PCR MPCR MPCR PCR PCR
12 PCR Dualreal PCR MPCR Real PCRDual quantitative PCR Real Time PCR MPCR Real-Time PCR MBI Dual Quantitative PCR MBI Dual Quantitative PCR
13 Quantitative PCR Dual Quantitative PCR PCR 13 A 5 cdna Real-Time PCR Dual Quantitative PCR B B MBI Real-Time PCR MBI Dual quantitative PCR MBI GAPDH (G) 18S (S)T-Transferin Receptor (T)P-Phospholipase A2 (P) L32 (L) Dual quantitative PCR Real-Time PCR
14 Dualreal PCR MPCR Real PCRDual quantitative PCR Real Time PCR MPCR Real-Time PCR MBI Dual Quantitative PCR MBI Dual Quantitative PCR Quantitative PCR Dual Quantitative PCR PCR 13 A 5 cdna Real-Time PCR Dual Quantitative PCR B B MBI Real-Time PCR MBI Dual quantitative PCR MBI GAPDH (G) 18S (S)T-Transferin Receptor (T)P-Phospholipase A2 (P) L32 (L) Dual quantitative PCR Real-Time PCR
15
16 PCR (M-PCR) PCR MPCR I. PCR () II. PCR cdna 1. PCR cdna 2. PCR cdna 3. cdna PCR
17 III. 1. (2) PCR cdna PCR DNA PCR /cdna Taq polymerase Taq dntp dntp 20 Note / V "hot-start" 2.
18 (2) (5uL ) Taq polymerase V "hot-start" 3. DNA PCR PCR DNA PCR DNA 4. Taq polymerase () Perkin-Elmer AmpliTaq (AmpliTaq Gold Perkin-Elmer )
19 Gibco-BRL ( 2 ) BMB 5. 2 PCR 3 PCR PCR cdna 6. Perkin-Elme III. cdna cdna PCR cdna PCR 1. DNA DNA dntp. Taq polymerase
20 cdna 2. cdna DNA RNA/DNA DNA dutp/udg DNA RNA RNase-free Dnase cdna MPCR cdna 3. cdna PCR PCR DNA ladder PCR PCR DNA ladder cdna DNA RNA RNase-free Dnase
21 4. PCR PCR DNA RT cdna PCR 5. cdna cdna mrna mrna cdna cdna RNA cdna RNA cdna RNA Human/mouse/rat/ DNA RNA Human/mouse/rat/ cdna RNA. Hot start Hot start PCR Hot start 60 Hot start Hot start 60
22 AmpliTaq Taq polymerase Ampliwax Perkin-Elmer 3 polymerase temperature-sensitive Clontech Taq antibody PCR (M-PCR) Q & A PCR MPCR Q1. MPCR PCR A1. PCR 1 MPCR 1 PCR PCR DNA Q2. MPCR PCR A2. MPCR Taq polymerase (Additive) MPCR DNA MPCR PCR Q3. MPCR DNA A3. MPCR PCR
23 Q4. MPCR A4. mrna Q5. MPCR A5. Q6. 2 PCR 3 PCR A6. PCR 94/1min.40-60/2-5min. 70/2-5min. 3 PCR 2 PCR 94/1min. / 60-70/2-5min.Taq polymerase 722 PCR PCR 2 PCR MPCR Q7. MBI PCR PCR A7. RT-PCR cdna RT-PCR MBI Q8. MPCR ampli-taq Gold A8. Taq Gold Q9. MBI
24 A9. MBI MPCR MPCR PCR Q10. MBI? A10. Tm 2-5 Taq polymerase Q11. A11. 2 Taq polymerase PCR Q12.? A12. 2
25 Q13. MPCR RNA A (RNA) 100uL - cdna RNA 5uL 50uL 1:20 PCR cdna 1uL - 1: RNA 1: total RNA Maxim Multiplex PCR Kit cdna
(2) (2) (3) (3) (5) ABI PRISM 7700 (5) Roche LightCycler TM (7) BioFlux LineGene (9) 1 RT-PCR (10) (12) (13) F. Hoffmann-La Roche Ltd. Roche Molecular
05-8 SYBR Green Realtime PCR Master Mix (Code No. QPK-201, QPK-201T) TOYOBO CO., LTD. Life Science Department OSAKA JAPAN A3314K (2) (2) (3) (3) (5) ABI PRISM 7700 (5) Roche LightCycler TM (7) BioFlux
(2) (2) (3) (3) (4) ABI PRISM 7700 TaqMan (4) Roche LightCycler TM (5) BioFlux LineGene TaqMan (6) 1 RT-PCR (7) (9) (10) F. Hoffmann-La Roche Ltd. Roc
05-8 Realtime PCR Master Mix (Code No. QPK-101, QPK-101T) TOYOBO CO., LTD. Life Science Department OSAKA JAPAN A3313K (2) (2) (3) (3) (4) ABI PRISM 7700 TaqMan (4) Roche LightCycler TM (5) BioFlux LineGene
(2) (3) (3) (4) (5) ABI PRISM 7700 (5) Roche LightCycler TM (7) BioFlux LineGene (9) (10) (12) F. Hoffmann-La Roche Ltd. Roche Molecular Systems Inc.
06-08 SYBR Green Realtime PCR Master Mix -Plus- (Code No. QPK-211, 211T) TOYOBO CO., LTD. Life Science Department OSAKA JAPAN (2) (3) (3) (4) (5) ABI PRISM 7700 (5) Roche LightCycler TM (7) BioFlux LineGene
Type-it Mutation Detect PCR プロトコールとトラブルシューティング (2301449 11/2008)
June 2008 Type-it Mutation Detect PCR PCR SNPs 2 3 QIAxcel Agilent 2100 Bioanalyzer 8 13 17 Sample & Assay Technologies MSDS material safety data sheet Operon Biotechnologies www.operon.com TE 100 µm 20
17-05 THUNDERBIRD SYBR qpcr Mix (Code No. QPS-201, QPS-201T) TOYOBO CO., LTD. Life Science Department OSAKA JAPAN A4196K
17-05 THUNDERBIRD SYBR qpcr Mix (Code No. QPS-201, QPS-201T) TOYOBO CO., LTD. Life Science Department OSAKA JAPAN A4196K - 18 - [1] 1 [2] 2 [3] 3 [4] 5 [5] : RNA cdna 13 [6] 14 [7] 17 LightCycler TM Idaho
■リアルタイムPCR実践編
リアルタイム PCR 実践編 - SYBR Green I によるリアルタイム RT-PCR - 1. プライマー設計 (1)Perfect Real Time サポートシステムを利用し 設計済みのものを購入する ヒト マウス ラットの RefSeq 配列の大部分については Perfect Real Time サポートシステムが利用できます 目的の遺伝子を検索して購入してください (2) カスタム設計サービスを利用する
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ッ ー ー ー() () 2.5 () () 21 1) -1 2) -2 10 m 5 7 23 6 1)2) 3) -1-2 H23.4.25 -15-20 4 75 5 1) -1 (5) (3) (3) (2) (1) (1) (1) (1) (1) (1) (1) (1) (1) (1) (1) (1) 1) ( 23 6 8 ) 2) 22 3)
AS LMD Sampling Manual
AS LMD Application Solutions LaserMicrodissection System LMD SamplingManual 2005 1 AS LMD Sampling Manual -------------------------------------------------------------2 --------------------------------------
AriaMx PCR AriaMx PCR PCR AriaMx PCR 0.2 ml 96 6 PCR Ct SYBR Green I PCR Tm TaqMan PCR DNA HRM TaqMan AriaMx 8 Multiple Experiment Analysis PDF RDML P
AriaMx PCR See Deeper. Reach Further. AriaMx PCR AriaMx PCR PCR AriaMx PCR 0.2 ml 96 6 PCR Ct SYBR Green I PCR Tm TaqMan PCR DNA HRM TaqMan AriaMx 8 Multiple Experiment Analysis PDF RDML PCR ROX Rn MIQE
- 2 -
- 2 - - 3 - (1) (2) (3) (1) - 4 - ~ - 5 - (2) - 6 - (1) (1) - 7 - - 8 - (i) (ii) (iii) (ii) (iii) (ii) 10 - 9 - (3) - 10 - (3) - 11 - - 12 - (1) - 13 - - 14 - (2) - 15 - - 16 - (3) - 17 - - 18 - (4) -
2 1980 8 4 4 4 4 4 3 4 2 4 4 2 4 6 0 0 6 4 2 4 1 2 2 1 4 4 4 2 3 3 3 4 3 4 4 4 4 2 5 5 2 4 4 4 0 3 3 0 9 10 10 9 1 1
1 1979 6 24 3 4 4 4 4 3 4 4 2 3 4 4 6 0 0 6 2 4 4 4 3 0 0 3 3 3 4 3 2 4 3? 4 3 4 3 4 4 4 4 3 3 4 4 4 4 2 1 1 2 15 4 4 15 0 1 2 1980 8 4 4 4 4 4 3 4 2 4 4 2 4 6 0 0 6 4 2 4 1 2 2 1 4 4 4 2 3 3 3 4 3 4 4
1 (1) (2)
1 2 (1) (2) (3) 3-78 - 1 (1) (2) - 79 - i) ii) iii) (3) (4) (5) (6) - 80 - (7) (8) (9) (10) 2 (1) (2) (3) (4) i) - 81 - ii) (a) (b) 3 (1) (2) - 82 - - 83 - - 84 - - 85 - - 86 - (1) (2) (3) (4) (5) (6)
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PCR Enzymes & Instruments PCR Stratagene Gradient Cycler Problem PCRDNA Polymerase Solution Stratagene Gradient Cycler PCRQuikChange 3 Stratagene Gradient Cycler 96 96 Fast 384 3 3 0.4 0.1 12 96 Fast 384
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Real -Time RT-PCR icycler iq Bio Rad RT-PCR RT-PCR 1 icycler iq Bio Rad icycler iq 30 2 Ready-To-Go T-Primed First-Strand Kit (amersham pharmacia biotech) Ready-To-Go T-Primed First-Strand Kit QuantiTect
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Vol.7November 216 3 DNA QIAamp DNA Mini Kit QIAcube QIAamp DNA Mini Kit 2 M Lung Kidney Liver Skin and muscle Whole blood Buffy coat Lymphocytes M QIAcube DNA 48.5 kb QIAamp DNA Mini Kit (5) 5134 25, QIAamp
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cm H.11.3 P.13 2 3-106-
H11.3 H.11.3 P.4-105- cm H.11.3 P.13 2 3-106- 2 H.11.3 P.47 H.11.3 P.27 i vl1 vl2-107- 3 h vl l1 l2 1 2 0 ii H.11.3 P.49 2 iii i 2 vl1 vl2-108- H.11.3 P.50 ii 2 H.11.3 P.52 cm -109- H.11.3 P.44 S S H.11.3
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プリント
Stratagene Products Mx3000P/Mx3005P PCR Mx3000P/Mx3005P Mx3000P PCR 5FRET Mx3005P PCR 401403 Mx3000P PCR 401449 Mx3005P PCR SYBR Green I TaqMan PCR PCRThreshold line ROX TM Tm 12Multiple Experimental Analysis)
steponeplus_bro_f-1124.indd
PCR StepOnePlus /StepOne PCR PCR PCR StepOnePlus StepOne PCR PCR Features At A Glance StepOne StepOnePlus / 48 96 FAM /SYBR Green dyes VIC /JOE dyes ROX dyes 1. NED /TAMRA dyes VeriFlex Block StepOnePlus
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NGS_KAPA RNA HyperPrep Kit
シークエンシングワークフロー ライブラリー調製 サンプル 調製 末端修復 エンドポイントライブラリー増幅 A-TAILING アダプター ライゲーション サイズセレクション & サイズ確認 または リアルタイムライブラリー増幅 ライブラリー 定量 クラスター 増幅 KAPA RNA HyperPrep Kit illumina社用ライブラリー調製キット KAPA RNA HyperPrep Kit
3 1 2
Agilent 4200 TapeStation Agilent 4200 TapeStation 3 1 2 2 3 ScreenTape 3 Agilent 4200 TapeStation QC Agilent 4200 TapeStation Ready-to-use ScreenTape 8 PCR 96-well plate 1 96 1 qrt-pcr DNA RNA DNA / RNA
PCR 3 Mature mirna PCR 7 miscript mirna PCR Array C T 12 Mature mirna cdna 15 miscript mirna QC PCR Array miscript mirna PCR Array 10/2011
October 2011 miscript mirna PCR Array miscript II RT Kit miscript SYBR Green PCR Kit miscript mirna PCR Arrays miscript mirna QC PCR Array Pathway-Focused mirna PCR Array mirnome miscript mirna PCR Array
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steponeplus_bro_f-0912.indd
StepOnePlus /StepOne PCR PCR PCR StepOnePlus StepOne PCR PCR Features At A Glance StepOne StepOnePlus / 48 96 FAM /SYBR Green dyes VIC /JOE dyes ROX dyes 1. NED /TAMRA dyes VeriFlex Block StepOnePlus StepOne
44 4 I (1) ( ) (10 15 ) ( 17 ) ( 3 1 ) (2)
(1) I 44 II 45 III 47 IV 52 44 4 I (1) ( ) 1945 8 9 (10 15 ) ( 17 ) ( 3 1 ) (2) 45 II 1 (3) 511 ( 451 1 ) ( ) 365 1 2 512 1 2 365 1 2 363 2 ( ) 3 ( ) ( 451 2 ( 314 1 ) ( 339 1 4 ) 337 2 3 ) 363 (4) 46
リアルタイムRT-PCR実験法
1. 逆転写反応 ツーステップ RT-PCR とワンステップ RT-PCR RT-PCR による遺伝子発現解析では まず 逆転写反応により RNA から cdna を合成し この cdna を鋳型として PCR を行う これらの反応は ツーステップまたはワンステップで行う ツーステップ RT-PCR では ランダムプライマー オリゴ dt プライマーまたは遺伝子特異的プライマーを用いて逆転写反応を行い
SC-85X2取説
I II III IV V VI .................. VII VIII IX X 1-1 1-2 1-3 1-4 ( ) 1-5 1-6 2-1 2-2 3-1 3-2 3-3 8 3-4 3-5 3-6 3-7 ) ) - - 3-8 3-9 4-1 4-2 4-3 4-4 4-5 4-6 5-1 5-2 5-3 5-4 5-5 5-6 5-7 5-8 5-9 5-10 5-11
MightyAmp™ DNA Polymerase Ver.3
研究用 MightyAmp DNA Polymerase Ver.3 説明書 v201805da MightyAmp DNA Polymerase は 究極の反応性を追求して開発された PCR 酵素であり 通常の PCR 酵素では増幅が困難な PCR 阻害物質を多く含むクルードな生体粗抽出液を用いる場合にも その強力な増幅能により良好な反応性を示します MightyAmp DNA Polymerase
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C08036 C08037 C08038 C08039 C08040 1. 1 2. 1 2.1 1 2.2 1 3. 1 3.1 2 4. 2 5. 3 5.1 3 5.2 3 6. 4 7. 5 8. 6 9. 7 10. 7 11. 8 C08036 8 C08037 9 C08038 10 C08039 11 C08040 12 8 2-1 2-2 T.P. 1 1 3-1 34 9 28
<4D6963726F736F667420506F776572506F696E74202D208376838C835B83938365815B835683878393312E707074205B8CDD8AB78382815B83685D>
i i vi ii iii iv v vi vii viii ix 2 3 4 5 6 7 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60
i ii i iii iv 1 3 3 10 14 17 17 18 22 23 28 29 31 36 37 39 40 43 48 59 70 75 75 77 90 95 102 107 109 110 118 125 128 130 132 134 48 43 43 51 52 61 61 64 62 124 70 58 3 10 17 29 78 82 85 102 95 109 iii
IonTorrentPGM_appnote_0319.indd
Ion PGM Heterogeneity * 1 * 1 * 2 * 2 * 2 * 2 * 2 * 1 *1 * 2 DNA DNA DNA ArcturusXT LCM Laser Capture Microdissection LCM A Workflow for Cancer Profiling Applied Biosystems ViiA7 PCR qpcr QC Assay Ion
幕末期の貨幣供給:万延二分金・銭貨を中心に
1858 67 1 1860 61 2 1862 65 3 1866 67 83 E-mail: [email protected] / /2016.4 67 1. 1859 6 1867 3 1868 4 4 1860 1978, 1980 1987 1988 1863 3 1976 1981 2004 1875 8 1963 1858 5 69 2 2.5 2 68 /2016.4
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Discover Life Science Products and Services 2019 4 19 2019 6 28 P2 4 P5 6 P7 P8 P9 P10 12 PCRP13 16 PCRP16 21 P22 23 &P24 26 P27 30 P31 18! 18 ProLong Glass / SlowFade 30% OFF Invitrogen Molecular Probes
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(EQP) (DQ) (IQ) (OQ) OQ (RQ) IQ OQ IQ OQ (ACE) OQ EQP EQP Adobe (i) Q & A (ii) Agilent Compliance Engine (ACE) - 21 CFR Part11 (iii) EE 1.76 EQR 3 PDF
Equipment Qualification Plan (EQP) GC Agilent 7890/7820 (CTC ) Agilent 6890/6850/5890 GC EQP : Agilent_Recommended_EQP_GC (EQP) (DQ) (IQ) (OQ) OQ (RQ) IQ OQ IQ OQ (ACE) OQ EQP EQP Adobe (i) Q & A (ii)
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5-1 PCR TUBES 5-2 PCR TUBES / 0.2 PLATES PIPETTE TIPS PIPETTES RESERVOIRS MICRO TUBES PCR TUBES / TEST TUBES TEST / DEEP GLOVES TISSUE CHEMICAL PCR CULTURE PRODUCTS www.bmbio.com/ 03-6666-5902 PCR TUBES
i ii ( ) ( ) ( ) 462,891 525,032 502,164 230,636 CD CD 1 1 2 2 3 3 4 4 5 5 6 6 7 7 8 8 9 9 10 10 11 10 12 11 13 11 14 12 15 12 16 13 16 14 17 15 18 15 18 16 19 17 20 17 18 19
IFN Response Watcher(for RNAi experiment)
IFN Response Watcher (for RNAi experiment) 説明書 v201111 哺乳動物細胞などでは 長い二本鎖 RNA(dsRNA) がインターフェロン応答を誘導し 図 1 に示す二つの経路が活性化されることで非特異的な転写の抑制が起こることが知られていました RNAi 実験に用いられる sirna(short interfering RNA) は短い dsrna を使用することにより
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COLAK Mehmed 11000 305 305 180 10000 9000 8000 160 140 120 7000 100 6000 1990 1991 1992 1993 1994 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 80 GH IGF-1 GH GH 5 4 3 2 1 0 2 3 4 5
QIAquick Spin プロトコールとトラブルシューティング ( /2008)
March 2008 QIAquick Spin QIAquick PCR Purification Kit PCR 100 bp 10 kb QIAquick Nucleotide Removal Kit 17 40mer DNA 40 bp 10 kb QIAquick Gel Extraction Kit DNA 70 bp 10 kb Sample & Assay Technologies
これわかWord2010_第1部_100710.indd
i 1 1 2 3 6 6 7 8 10 10 11 12 12 12 13 2 15 15 16 17 17 18 19 20 20 21 ii CONTENTS 25 26 26 28 28 29 30 30 31 32 35 35 35 36 37 40 42 44 44 45 46 49 50 50 51 iii 52 52 52 53 55 56 56 57 58 58 60 60 iv
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i 1 1 2 2 3 3 4 4 4 5 7 8 8 9 9 10 11 13 14 15 16 17 19 ii CONTENTS 2 21 21 22 25 26 32 37 38 39 39 41 41 43 43 43 44 45 46 47 47 49 52 54 56 56 iii 57 59 62 64 64 66 67 68 71 72 72 73 74 74 77 79 81 84
これでわかるAccess2010
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はじめてのリアルタイムPCR
はじめてのリアルタイム PCR 1. はじめにリアルタイム PCR 法は PCR 増幅産物の増加をリアルタイムでモニタリングし 解析する技術です エンドポイントで PCR 増幅産物を確認する従来の PCR 法に比べて 1DNA や RNA の正確な定量ができること 2 電気泳動が不要なので迅速かつ簡便に解析できコンタミネーションの危険性も小さいことなど多くの利点があります 今や 遺伝子発現解析や SNP
平成18年版 男女共同参画白書
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