荒 j132 表1.新 良 な乳 牛 で,乳 鮮 胚 の 全 頭 受 胎 例(61,6.9移 量8,000kg以 上,乳 脂 肪3.5%以 木 武 紀 植) 上,肢 受 胎 の た め の治 療 処 置 が 行 わ れ て い た, 蹄 強 健 で 搾 乳 速 度 良好 な もの を,受 胚 牛 は

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1 Journal of Reproduction and Development, Vol. 40, No. 6, 1994 Silent heat, Estimation of estrus, Repeat breeders, Embryo transfer (Journal of Reproduction and Development, 40 : j131-j136, 1994)

2 荒 j132 表1.新 良 な乳 牛 で,乳 鮮 胚 の 全 頭 受 胎 例(61,6.9移 量8,000kg以 上,乳 脂 肪3.5%以 木 武 紀 植) 上,肢 受 胎 の た め の治 療 処 置 が 行 わ れ て い た, 蹄 強 健 で 搾 乳 速 度 良好 な もの を,受 胚 牛 は 各 酪 農 家 の 供 移 植 牛 の選 定 基 準:発 情 明 瞭 牛,出 血 牛,検 診 時 に 発情 胚 牛 以 外 の乳 牛 を 用 い た. 出 現 後1 3日 過 剰 排 卵 処 置:黄 ル モ ン(FSH,乳 体 期 の9 14日 牛 に は28mg,和 間 減 量 方 式 で 投 与 し(朝 与 開 始 後3日 目 と推 定 した もの は移 植 前 日の 直検 は 行 わ なか った.黄 体 が7日 令 の標 準 の大 き さ(15mm)で, 卵 巣 や 黄 体 に 柔 軟 性 が あ り,子 宮 の 収 縮 弾 力 が適 度 で, 目 の 朝15mg,昼 分 け て 投 与 し発 情 を 誘 起 し た.人 全 て 直検 を行 い移 植 の可 否 を決 定 したが,検 診 時 に 発情 出 現 後4 5日 牛 に は15mg)を4日 と 夕5.5mg4.4mg3.3mg2.2mg), PGF2 30mgをFSH投 10mg,夕5mgに 目 の牛 に卵 胞 刺 激 ホ 目 と推 定 した牛 につ い て は,移 植 前 日に 工授 外 陰 部 の 収 縮 の よい もの に は そ の ま ま移植 を行 った.外 精 は 凍 結 精 液 を 用 い 発 情 の 発 現 し た 日 の 夕 刻 と翌 朝 の2 陰 部 が や や 緊 縮 に欠 け,卵 巣 に中 等 度 の 活 動 性 卵 胞 が 共 回 行 っ た.胚 存 す る もの につ い て は これ を破 砕 し,hCG3.000iuの っ た.潅 の 回 収 は 発 情 日 を0日 流 液 は 修 正PBSを と し そ の7日 目 に行 筋 注 を行 っ た後 に用 い た が,こ の 中 で 子 宮 の 収 縮 弾 力 が 強 用 い た. 受胚 牛 の 発 情 の 確 認 と推 定:明 瞭 な発 情 発 現 牛 につ い て い もの は除 外 した,以 上 の 基 準 を適 用 す る こ とで,移 植 は畜 主 の 稟 告 の み で,ま 可 能 牛 の 割 合 は 自然 発 情 牛 で 約80%,同 期 化 牛 で約 を 発 見 した 牛 につ い て は,早 朝 発 見 の場 合 は2日 前,午 75%,出 な っ た. 後 発 見 の 場 合 は前 日に発 情 あ りと推 定 して,以 後 の 処置 新 鮮 胚 の 移 植:回 を 行 った.ま 下CS)加PBSで2 3回 た発 情 の外 部 徴 候 が な く,出 血 た検 診 時 に黄 体 の大 き さ,子 宮 の 収縮,弾 力 等 で 発 情 後1 6日 人 工 授 精 牛(AI回 と推 定 で きた もの も用 い た.多 回 数4回 以 上)に つ い て も同 様 に 発 情 の 確 認 あ る い は推 定 を行 っ た. 血 牛 で 約70%,推 定 牛 で 約60%と 収 胚 は30%子 牛 血 清(Calf 洗 い,い Serum,以 っ た ん0.25ml容 ス トロ ー に つ め た 後 に 移 植 し た.移 量 の 植容器 はカスーの ミ ニ チ ュ ア シ ー ス に よ っ た. 胚 の 凍 結 と 移 植:胚 の 凍 結 は 回 収 胚 を30%CS加PBSで ま た4回 以 上 の 人 工授 精 で 妊 娠 に至 ら ない 牛 も受 胚 牛 2 3回 と して 用 い た.こ れ らの 多 回人 工 授 精 牛 の多 くは事 前 に で20分 間 平 衝 後20Cか 洗 い5%glycerol(以 で15分 間 保 持 し て 植 氷 させ,そ 下GL)で5分,10%GL ら-5.5Cま で1C/min,-5.5C の 後0.5C/minで-30C ま で 冷 却 し液 体 窒 素 中 に 保 管 し た.融 持 後,25Cの 微 温 湯 中 に 浸 漬 し,ス 解 は 空 中 に8秒 保 テ ップワ イズ法で GLを 除去 して移 植 に供 した. 移 植 牛 の 妊 娠 鑑 定:不 妊 の 場 合 は加 療 を行 い1日 受 胎 に導 く こ とが 酪 農 経 営 上 必 要 で あ る た め,全 も早 く て40 日ま で に行 っ た.早 期 妊 娠 診 断 が 原 因 と考 え られ る流 産 は 皆 無 で あ っ た, 農 家 へ の 普 及:ETの 取 り組 み意 欲 を高 め る た め に,年 に 数 回 生 産 者 を 自宅 に集 めET講 月1回 図1.新 鮮 胚 の 全 頭 受 胎例 か ら え られ た 産 子 はETニ 演 会 を 開催 した り,毎 ュ ー ス を発 行 し,採 卵,移 植,出 生 状 況 や,出 血 牛 や 多 回授 精 牛 に対 して のETで の 受 胎 の可 能

3 牛胚移植技術 の実践 と普 及 (表3).当 j133 初 の2年 間 は 新 鮮 胚 移 植 が 主 体 で あ り,Aラ ン ク胚 か ら優 先 的 に 移 植 し て い た が,そ の後凍結胚移植 を 主 体 と し た た め,新 ン ク胚 の 使 用 を 鮮 胚 移 植 に はBラ 余 儀 な く さ れ 受 胎 率 に や や 低 下 が 見 ら れ た.ま と未 経 産 牛 別 で は,前 後 者 で761頭 者 で2,671頭 中494頭(64.9%)が た経 産 牛 中1,552頭(58.1%), 受 胎 し,未 経産 牛で 高 い受 胎 率 が 得 られ た. 2)発 情 の 外 部 徴候 別 移 植 成 績 出血 牛 と推 定 牛 へ の 移 植 は年 々増 加 し,自 然 発 情 牛 と 同 期 化 牛 へ の 移 植 は 横 ば い 状 態 で あ る,4年 合 は 移 植 頭 数930頭 図2.精 子 処 理(性 判 別)で 生 ま れ た娘 牛 中 出 血 牛 が462頭(49 7%),推 が261頭(28.1%),と した胚 を作 り出 し,こ れ を移 植 して一 度 に多 頭 数 の 雌 牛 を生 ませ,農 家 へ の 信 頼 性 を高 め た(図2). ET産 ョ ウ,品 評 会,県 共 進 会 や 全 国共 進 会等 積 極 的 に 牛 の 出 品 を 図 っ た, 胚0個 剰 排 卵 処 置 し た595頭 の供 胚 牛 で は正 常 が172個(28.8%), が164頭(27.5%),11 15個 (16.2%),16 20個 頭(6.7%)と が97頭 が55頭(9.2%),20個 な り,1 5個,6 10個 以 上 が38 の 占 め る割 合 が 高 か っ た(表2). 移植 成績: 1)年 度 別 移 植 頭 数 と受 胎 率 及 び産 子 数 受 胎 率 は 新 鮮 胚 移 植 で655頭 り,凍 表2.胚 結 胚 で は2,777頭 回 収 成績 明 瞭受 胚 牛 へ の移 植 頭 数 と受 胎 率 然 発 情,同 期 化 発 情)で 730頭(64.8%)が 受 胎 し,発 定 牛)で 中1,316頭(57.1%)が は2,305頭 中434頭(66.3%)と 中1,612頭(58%)が な 受 胎 した 表3.年 は1,127頭 中 情 不 明 瞭 牛(出 然 発 情 牛,出 血 牛,推 受 胎 し た.受 血 牛 の 順 に高 か っ 果 が69頭(11.6%),1 5個 6 10個 然 発 情 牛 は184頭(19.8%),同 割 合 で あ っ た(図3). 胎 率 は 発 情 同 期 化 牛,自 結 胚 回 収 成 績:過 情 明 瞭牛,不 発 情 明瞭 牛(自 また体 形 上 の 改 良 が 即 座 に判 る各 種 の シ ョウ,町 内 の BWシ 期 化 牛 は23頭(2.5%)の 3)発 定牛 な り両 群 合 わ せ て77.7%と,全 体 の 大 部 分 を 占 め,自 性 が 大 きい こ と を例 示 した.ま た精 子 処 置 に よ り性 判 別 度 の移 植割 度 別移 植 頭 数 と受 胎 率 お よ び 産子 数

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