研究者を笑顔にするウェスタン解析ツール Changing the face of westerns ウェスタンブロッティング解析ワークフロー Complete, innovative western workflow solutions

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Easy! Fast! Clear! Western drama STEP 1 Western done! Separate Slow western STEP 2 Fast western! Transfer Western weary STEP 3 Western wonderful! Detect 2 Life Technologies Western workflow solutions

Bolt & Bolt 6 7 NuPAGE 8 Bolt & iblot 2 10 Bolt 10 iblot 2 ibind Western System 12 12 ibind Western System Life Technologies lifetechnologies.com/western 3

Separate, Transfer, Detect 3 Separate タンパク質の分離 Bolt NuPAGE ph Bolt 2 Transfer タンパク質の転写 iblot 2 7 Bolt Bolt クリアで高品質な分離バンドが得られる Bolt プレキャストゲル & 泳動槽 ( 6 ページ ) わずか 7 分で転写完了! iblot 2 ドライブロッティングシステム ( 10 ページ ) 4 Life Technologies Western workflow solutions

Detect タンパク質の検出 ibind Western System 2.5 抗体反応 & 洗浄ステップを自動化 ibind Western System ( 12 ページ ) Life Technologies lifetechnologies.com/western 5

Separate Bolt Bolt ph Bolt www.lifetechnologies.com/separate Bolt プレキャストゲル : Bolt ph 40 L 10well ph 16 Bolt ミニゲル泳動槽 : 2 Bolt 35 22 2 2 1 MagicMark GST IKKβ EPHB3 HCK MAPK14 FLT1 DDR2 MagicMark GST IKKβ EPHB3 HCK MAPK14 FLT1 DDR2 Bolt システムの詳細はこちら www.lifetechnologies.com/bolt Bolt- ゲル B 社 TX- ゲル ウェスタン解析における Bolt ゲルと他社ゲルのデータ比較 IKK EPHB3 HCK MAPK14 FLT1 DDR2 Bolt Plus B TX Bolt B TX 6 Life Technologies Western workflow solutions

着色済みタンパク質スタンダード MagicMark XP IgG Novex Sharp 20-220 kda 12 SeeBlue Plus2 ph Bolt NuPAGE HiMark 30 460 kda 9 250 kda 3 8% NuPAGE 7% 製品名 製品番号 kda 220 120 100 80 60 50 40 30 20 MagicMark XP LC5602 kda 260 160 110 80 60 50 40 30 20 15 10 3.5 Novex Sharp LC5800 kda 198 98 62 49 38 28 17 14 6 3 SeeBlue Plus2 LC5925 kda 460 268 238 171 117 71 55 41 31 HiMark LC5699 タンパク質スタンダード製品の詳細はこちら www.lifetechnologies.com/proteinstandards MagicMark XP タンパク電気泳動後 ニトロセルロース膜に転写し 化学発光法 (A) または発色法 (B) によりバンドを検出した Life Technologies lifetechnologies.com/western 7

Separate 2 NuPAGE NuPAGE 2 NuPAGE NuPAGE NuPAGE www.lifetechnologies.com/separate NuPAGE ゲルシステム : Bolt 6 ph NuPAGE ゲル用泳動槽 XCell SureLock Mini-Cell NuPAGE 8x8cm 2 ph 12 スマイリング の無い きれいな泳動像が得られます (A) NuPAGE ゲル (B) トリス - グリシンゲル 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 XCell4 SureLock Midi-Cell NuPAGE 8x13cm 1 4 100 NuPAGE ゲルと従来のトリス - グリシンゲルのタンパク質分離の比較 A NuPAGE 4-12 Bis-Tris B 4-20 - Lanes1, 6, 7, 10 Mark12 Unstained Protein Standard Lane2 High Protein Load 4 proteins-6 g /protein Lane3 Broad Range Standard Lanes 4,5 E. coli extract Lane 8 SeeBlueR Pre-Stained Protein Standard Lane 9 MultiMarkR Multi-colored Protein Standard NuPAGE ゲル製品の詳細はこちら www.lifetechnologies.com/proteingels SureLock 泳動槽の詳細はこちら www.lifetechnologies.com/surelock 8 Life Technologies Western workflow solutions

タンパク質分離用ゲル Bolt 6 NuPAGE 8 & タンパク質分離用ゲルの詳細はこちら www.lifetechnologies.com/proteingels Life Technologies lifetechnologies.com/western 9

Transfer PVDF 7 www.lifetechnologies.com/transfer 7 iblot 2 ドライブロッティングシステム : 7 7 1 Bolt ブロットモジュール : Bolt Bolt 2 Blot 2 Bolt 2 60 iblot 製品の詳細はこちら www.lifetechnologies.com/ibolt Bolt 製品の詳細はこちら www.lifetechnologies.com/bolt 10 Life Technologies Western workflow solutions

iblot 2 システムと他の転写法との作業時間の比較 iblot 2 バッファー準備 0 分 30 分 30 分 準備 ゲルの前処理 0 分 20 分 0 分 サンドイッチの作製 2 分 10 分 10 分 反応 トランスファー ( 転写時間 ) 7 分 45-90 分 1-3 時間 片付け 洗浄 - 乾燥 0 分 10 分 10 分 9 1 55 2 40 1 50 3 50 タンパク質転写用製品セレクションガイド 時間短縮を図りたい ( スピード ) 実験者誤差を解消したい ( 再現性 ) 時間をかけてじっくり確実に転写したい 時間よりもコストを抑えて実施したい ドライ式ウェット式 ( タンク式 ) iblot 2 ドライブロッティングシステム (IB21001) Bolt ブロットモジュール (B1000) Xcell SureLock ブロットモジュール (E19051) 7 分 30-60 分 1-3 時間 必要なし 250mL 700 ml 必要なし 必要あり 必要あり 14 8.5 cm 8 8 cm 8 8 cm Life Technologies lifetechnologies.com/western 11

SEPARATE TRANSFER DETECT Detect AP HRP 3,500 1,000 ibind Western System www.lifetechnologies.com/detect ibind Western System: 2 Sequential Lateral Flow SLF ibind Western System 2.5 S/N ウェスタンブロット用抗体 : 1,000 HRP- AP- 全抗体製品の情報はこちら www.lifetechnologies.com/ibolt ibind システム操作フローの動画はこちら www.lifetechnologies.com/ibind 12 Life Technologies Western workflow solutions

SEPARATE TRANSFER DETECT ibind システムの操作の流れ i Bind Device ibind Card 4 2.5 AP HRP メンブレン ibind カード ウェルカバー 12 1 2 9 1011 3 8 4 7 6 5 1. 1 次抗体 3. 2 次抗体 2. ibind Solution 4. ibind Solution Phospho-Akt A ibind システム B マニュアル法 ibind Phospho-Akt: リン酸化 Akt に対してウェスタンブロットを実施 ( 左レーンより 30μg 500ng の細 胞抽出物を泳動 ) ibind および抗体メーカー規定のプロトコールに従い検出した ( 抗 phospho-akt[thr308][c31e5e] モノクローナル一次抗体 ;HRP コンジュゲート 抗ウサギ二次抗体 ) マニュアル法 ( B) ではリン酸化 Akt が 4μg の細胞抽出物中で検出さ れたのに対し ibind システム (A) では 500ng の細胞抽出物中でも検出できた CREB C ibind システム D マニュアル法 CREB : CREBを発現する細胞溶解液を用いてウェスタンブロットを実施 ( 左レーンより 30μg 1μg 細胞溶解液を泳動 ) ibind Systemおよび抗体メーカー規定のプロトコールに従い検出した ( 抗 CREBポリクローナル一次抗体 ;HRPコンジュゲート抗ウサギ二次抗体) マニュアル法 ( D) ではCREBの検出に10μg の細胞溶解液が必要なのに対し ibind システム (C) では6μg の細胞溶解液中でCREBを検出した A-D の全てのブロットは Bolt 電気泳動システム (6 ページ ) を用いてタンパク質を分離し わずか 7 分で転写可能な iblot システム (10 ページ ) を用いて PVDF 膜へ転写を行なった Life Technologies lifetechnologies.com/western 13

Ordering information "Separate" 製品名サイズ製品番号価格 Bolt Welcome Pack A(4-12% 10well)* 1 kit B0412A 68,000 Bolt Welcome Pack B(4-12% 15well)* 1 kit B0412B 68,000 Bolt プレキャストゲル 10 枚 / 箱 下表 1を参照 21,500 Bolt ミニゲル泳動槽 1 台 B4477599 58,000 NuPAGE ミニゲル 10 枚 / 箱 下表 2を参照 21,500 NuPAGE ミディゲル 10 枚 / 箱 下表 3を参照 31,000 NuPAGE MOPS SDS ランニングバッファー ( ビス トリス用 )(20X) 500 ml NP0001 10,000 NuPAGE MES SDS ランニングバッファー ( ビス トリス用 ) (20X) 500 ml NP0002 10,000 NuPAGE Buffer and Reagent Kit サンプルサイズ 1 kit SPNP1000 12,000 X Cell SureLock Mini-Cell(NuPAGE ミニゲル用 ) 1 台 EI001 22,700 X Cell4 SureLock Midi-Cell(NuPAGE ミディゲル用 ) 1 台 WR0100 117,800 MagicMark XP Western Protein Standard 250 µl LC5602 32,500 SeeBlue Plus2 Pre-stained Protein Standard 500 µl LC5925 21,500 Novex Sharp Unstained Protein Standard 2 x 250 µl LC5801 21,000 HiMark Pre-stained Protein Standard 250 µl LC5699 27,600 *Bolt システムを初めてご使用いただく場合は Welcome Pack がお奨めです Bolt プレキャストゲル Bolt 泳動槽 バッファー サンプル調製用試薬 タンパク質スタンダードのセットです 1 Bolt プレキャストゲル ( 8 8.3cm :10 枚入 / 箱 ) 価格 : 21,500 10 wells 12 wells 15 wells 17 wells Bolt 8% ビス トリス Plus BG00080BOX BG00082BOX BG00085BOX BG00087BOX Bolt 10% ビス トリス Plus BG00100BOX BG00102BOX BG00105BOX BG00107BOX Bolt 12% ビス トリス Plus BG00120BOX BG00122BOX BG00125BOX BG00127BOX Bolt 4-12% ビス トリス Plus BG04120BOX BG04120BOX BG04125BOX BG04127BOX 2 NuPAGE ミニゲル *(8x8cm 10 枚入 / 箱 ) 価格 : 21,500 1.0 mm 1.5 mm 10 wells 12 wells 15 wells 17 wells 2D well IPG well 10 wells 15 wells 2D well ビス トリス 10% NP0301BOX NP0302BOX NP0303BOX NP0306BOX NP0315BOX NP0316BOX NP0317BOX ビス トリス 12% NP0341BOX NP0342BOX NP0343BOX NP0349BOX NP0346BOX ビス トリス 4 12% NP0321BOX NP0322BOX NP0323BOX NP0329BOX NP0326BOX NP0330BOX NP0335BOX NP0336BOX NP0337BOX トリス アセテート 7% EA0355BOX EA03552BOX EA03555BOX EA0358BOX EA03585BOX トリス アセテート 3 8% EA0375BOX EA03752BOX EA03755BOX EA0376BOX EA0378BOX EA03785BOX * 専用電気泳動槽 XCell SureLock Mini-Cell(EI001) を使用します 3 NuPAGE ミディゲル *(8x13cm 10 枚入 / 箱 ) 価格 : 31,000 Midi Gel 12+2 wells 20 wells 26 wells ビス トリス 8% WG1001BOX WG1002BOX WG1003BOX ビス トリス 10% WG1201BOX WG1202BOX WG1203BOX ビス トリス 4 12% WG1401BOX WG1402BOX WG1403BOX トリス アセテート 3 8% WG1601BOX WG1602BOX WG1603BOX * 専用電気泳動槽 XCell 4 SureLock Midi-Cell(WR0100) を使用します 14 Life Technologies Western workflow solutions

"Transfer" 製品名 サイズ 製品番号 価格 iblot 2 Gel Transfer Device 1 台 IB21001 198,000 iblot 2 Transfer Stacks, Nitrocellulose, Regular size 10 パック IB23001 22,100 iblot 2 Transfer Stacks, Nitrocellulose, Mini size 10 パック IB23002 17,400 iblot 2 Transfer Stacks, PVDF, Regular size 10 パック IB24001 24,200 iblot 2 Transfer Stacks, PVDF, Mini size 10 パック IB24002 19,000 Bolt Mini Blot Module 1 unit B1000 48,000 Bolt Western Pack A(Nitrocellulose)* 1 kit B1000A 95,000 Bolt Western Pack B(PVDF)* 1 kit B1000B 95,000 Separate & transfer Bolt Welcome Pack + iblot 2システム 1 セット B0412AIB2 248,000 Bolt Tank and Blot Module Combo 1 kit B2000 112,000 * Western Pack A および Pack Bは Boltシステムでウェット式転写を行なうためのパッケージ製品です Bolt Mini Blot Module Bolt Transfer Buffer Bolt Antioxidant メンブレンのセットです "Detect" 製品名 サイズ 製品番号 価格 ibind Western Starter Kit* 1 セット SLF1000S 168,000 ibind Western Device 1 台 SLF1000 158,000 ibind Cards 10 枚 / 箱 SLF1010 17,000 ibind Solution Kit 1 キット (10 反応分 ) SLF1020 8,000 一次抗体 Over 3,500 Varies - ウェスタンブロット用二次抗体 Over 1,000 Varies - * ibind システムを初めてご使用いただく場合は Starter Kitがお奨めです ibind Western Device ibind Cards ibind Solution Kitのセットです Life Technologies lifetechnologies.com/western 15

ウェスタンブロット解析の詳細はこちら www.lifetechnologies.com/western 詳最新の価格および在庫数は 弊社ホームページ右上の 製品価格と在庫の検索 でご確認いただけます 公式 Facebook ページ & Twitter もチェック! facebook.com/lifetechnologiesjapan @LifetechJPN 研究用にのみ使用できます 診断目的およびその手続き上での使用は出来ません 記載の社名および製品名は 弊社または各社の商標または登録商標です 標準販売条件はこちらをご覧ください www.lifetechnologies.com/tc 最新の価格および在庫数は 弊社ホームページ右上の 製品価格と在庫の検索 でご確認いただけます For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures. 2014 Thermo Fisher Scientific Inc. All rights reserved. All trademarks are the property of Thermo Fisher Scientific and its subsidiaries unless otherwise specified. Bio-Rad is a registered trademark and TGX is a trademark of Bio-Rad Laboratories, Inc. Printed in Japan. PA016-A1407OB ライフテクノロジーズジャパン株式会社 本社 : 108-0023 東京都港区芝浦 4-2-8 大阪 : 564-0052 大阪府吹田市広芝町 10-28 TEL.03(6832)9300 FAX. 03(6832)9580 TEL.06(6389)1201 FAX. 06(6389)1206 www.lifetechnologies.com