資 料 4-4 木 酢 液 の 検 討 状 況 について 木 酢 液 の 薬 効 薬 害 安 全 性 等 に 係 る 検 討 に 関 し 第 6 回 及 び 第 8 回 合 同 会 合 において 以 下 のとおり 整 理 された 安 全 性 薬 効 薬 害 に 係 る 試 験 の 実 施 ( 論 点 ) 第 6 回 合 同 会 合 において 検 討 した 結 果 変 異 原 性 試 験 ( 復 帰 突 然 変 異 原 性 試 験 )の 結 果 について 指 摘 があった また 1) 木 酢 液 に 含 まれるホルムアルデヒドについては IARC ( 国 際 ガン 研 究 機 関 The International Agency for )での Researc 評 価 が グループ2A から グループ1 に 上 がっていることから ホルムアルデヒドを 含 む 物 質 の 安 全 性 については 慎 重 に 審 議 するべき 2) 原 材 料 や 製 造 方 法 の 違 いにより 成 分 のバラツキが 生 じるので 指 定 する 際 の 条 件 について 事 務 局 で 整 理 すること 3) 薬 効 については 実 際 に 農 家 が 現 場 で 使 用 している 状 況 に 応 じたよ り 多 くのデータを 示 すべき 等 の 意 見 が 出 され 薬 効 安 全 性 について 更 なる 検 討 が 必 要 との 結 論 ( 対 応 ) 1) 第 6 回 合 同 会 合 での 指 摘 を 受 け その 上 位 の 試 験 であるマウスを 用 いた 小 核 試 験 を 実 施 した その 結 果 ベイツガ スギ ヒノキ 蒸 留 木 酢 液 のいずれも 陰 性 であった( 別 紙 ) 2) 指 定 する 際 の 原 材 料 製 造 方 法 等 の 条 件 については 1)の 小 核 試 験 に 関 する 合 同 会 合 の 検 討 結 果 をもとに 今 後 評 価 すべき 木 酢 液 に 関 する 製 造 方 法 等 の 条 件 等 について 関 係 団 体 が 検 討 し 事 務 局 がとりま とめた 上 で 合 同 会 合 に 報 告 することとする これまで 農 林 水 産 省 が 示 した 木 酢 液 の 製 造 条 件 は 以 下 の 通 りであ る (1) 原 材 料 建 築 資 材 家 具 等 の 廃 材 を 除 く 木 質 原 料 ( 木 材 竹 材 オガ 粉 樹 皮 等 )とする (2) 製 造 方 法 原 料 を 炭 化 炉 又 は 乾 留 炉 により 炭 化 する 際 に 生 じる 煙 を 冷 却 して 得 られた 液 体 であって 次 のいずれかに 該 当 するもの - 1 -
1 蒸 留 されたもの 2 炉 の 排 煙 口 における 温 度 が80~ 150 の 排 煙 を 冷 却 して 得 ら れた 液 体 を3ヶ 月 以 上 静 置 し 上 層 の 油 分 と 下 層 の 沈 殿 部 分 を 除 く 中 間 部 分 を 採 取 して 得 られたもの 3) 薬 効 に 関 する 追 加 データ 2)の 木 酢 液 の 原 材 料 製 造 方 法 等 の 条 件 を 明 確 化 した 上 で 実 態 を 確 認 することとする - 2 -
別 紙 農 薬 的 資 材 リスク 情 報 収 集 事 業 について ベイツガ スギ ヒノキ 木 酢 液 :マウスを 用 いた 小 核 試 験 ( 試 験 番 号 IET06-0117 ) スギ 木 酢 液 :マウスを 用 いた 小 核 試 験 ( 試 験 番 号 IET06-0118 ) 蒸 留 木 酢 液 :マウスを 用 いた 小 核 試 験 ( 試 験 番 号 IET06-0117 )
ベイツガ スギ ヒノキ 木 酢 液 :マウスを 用 いた 小 核 試 験 ( 試 験 番 号 IET06-0117 ) 農 薬 GLP 適 合 確 認 施 設 で 実 施 検 体 純 度 :-%( 有 効 成 分 不 明 により 特 定 不 可 ) 供 試 動 物 :ICR 系 マウス(Crlj :CD1) 雄 (7 週 令 体 重 30.3~36.6g) 1 群 雄 5 匹 試 験 方 法 : 検 体 を 純 水 に 溶 解 し 1250 2500 及 び5000 mg/kg の 用 量 で 1 日 1 回 2 日 間 強 制 経 口 投 与 した なお 陰 性 ( 溶 媒 ) 対 照 群 に 純 水 を 同 様 に 投 与 した 最 終 投 与 24 時 間 後 に 動 物 を 屠 殺 し 各 動 物 から 大 腿 骨 の 骨 髄 を 採 取 してスライドグ ラス 上 にメタノールで 固 定 後 3%ギムザ 液 で 染 色 し 骨 髄 標 本 を 作 製 した 陽 性 対 象 群 にはマイトマイシンC10mg/kg を 単 回 強 制 経 口 投 与 して24 時 間 後 に 標 本 を 作 製 した 各 個 体 あたり2000 個 の 多 染 性 赤 血 球 を 観 察 して 小 核 を 有 する 多 染 性 赤 血 球 の 頻 度 を 求 めた また 骨 髄 細 胞 に 対 する 毒 性 を 調 べるため 各 個 体 あたり1000 個 の 赤 血 球 を 観 察 して 全 赤 血 球 に 対 する 多 染 性 赤 血 球 数 を 計 数 した 用 量 設 定 根 拠 :1 群 雄 3 匹 のマウスに2500 5000 及 び10000 mg/kg の 用 量 で 予 備 試 験 を 行 った 結 果 1000 mg/kg 群 に 死 亡 例 がみられたので 5000 mg/kg が 最 大 耐 量 と 考 えられた よって 投 与 量 を1250 2500 及 び5000 mg/kg とした 結 果 : 観 察 結 果 を 表 に 示 した 雄 のICR 系 (Crlj :CD1)マウスを 用 い 骨 髄 細 胞 におけるベイツガ スギ ヒノキ 木 酢 液 の 小 核 試 験 を 実 施 した 被 験 物 資 投 与 群 は1250 2,500 及 び5000 mg/kg の3 用 量 を 設 定 し 1 日 1 回 24 時 間 間 隔 で2 回 の 強 制 経 口 投 与 を 行 った 陰 性 対 照 群 にはマイトマイシン Cを10mg/kg で1 回 強 制 経 口 投 与 した 1 用 量 群 あたり5 匹 の 動 物 に 投 与 し 最 終 投 投 与 24 時 間 後 に 全 ての 動 物 から 骨 髄 塗 抹 標 本 を 作 成 した 標 本 観 察 の 結 果 ベイツガ スギ ヒノキ 木 酢 液 のいずれの 用 量 群 でも 陰 性 対 象 群 と 比 べて 小 核 を 有 する 多 染 性 赤 血 球 の 出 現 頻 度 に 有 意 な 増 加 は 認 められなかった 一 方 陽 性 対 象 群 では 小 核 を 有 する 多 染 性 赤 血 球 の 出 現 頻 度 に 明 らかな 増 加 が 認 められた 以 上 の 結 果 より 本 実 験 条 件 下 では ICR 系 (Crlj :CD1)マウスの 骨 髄 細 胞 におい て ベイツガ スギ ヒノキ 木 酢 液 の 小 核 誘 発 性 は 陰 性 であると 結 論 した
ベイツガ スギ ヒノキ 木 酢 液 :マウスを 用 いた 小 核 試 験 ( 試 験 番 号 IET06-0117 ) 農 薬 GLP 適 合 確 認 施 設 で 実 施 標 本 作 製 時 間 被 験 物 質 用 量 (mg/kg) 動 物 数 小 核 出 現 頻 度 (%) 多 染 性 赤 血 球 の 割 合 (%) 媒 体 0 2 5 0.25 ± 0.06(0.15 ~ 0.30) - 52.6 ± 6.1(43.6 ~ 59.4) - 1250 2 5 0.18 ± 0.15(0.00 ~ 0.35) N.S. 50.3 ± 9.8(36.1 ~ 63.6) N.S. 24 a) ベイツガ スギ ヒノキ 木 酢 液 2500 2 5 0.12 ± 0.06(0.05 ~ 0.20) N.S. 50.2 ± 6.2(39.6 ~ 55.5) N.S. 5000 2 5 0.24 ± 0.09(0.15 ~ 0.35) N.S. 49.0 ± 9.7(34.1 ~ 60.4) N.S. マイトマイシン C 10 1 5 2.15 ± 0.79(1.25 ~ 3.30) 51.5 ± 5.5(47.5 ~ 60.7) N.S. SD 標 準 偏 差 被 験 物 質 処 理 群 は Kastenbaum-Bowman の 数 表 による 検 定,マイトマイシンC 処 理 群 はカイ 二 乗 検 定 Wilcoxon の 順 位 和 検 定 N.S. 有 意 差 なし(p > 0.05) 有 意 差 あり(p < 0.001 ) a) 最 終 投 与 後 24 時 間
スギ 木 酢 液 :マウスを 用 いた 小 核 試 験 ( 試 験 番 号 IET06-0118 ) 農 薬 GLP 適 合 確 認 施 設 で 実 施 検 体 純 度 :-%( 有 効 成 分 不 明 により 特 定 不 可 ) 供 試 動 物 :ICR 系 マウス(Crlj :CD1) 雄 (7 週 令 体 重 31.4~37.9g) 1 群 雄 5 匹 試 験 方 法 : 検 体 を 純 水 に 溶 解 し 2500 5000 及 び10000 mg/kg の 用 量 で 1 日 1 回 2 日 間 強 制 経 口 投 与 した なお 陰 性 ( 溶 媒 ) 対 照 群 に 純 水 を 同 様 に 投 与 した 最 終 投 与 24 時 間 後 に 動 物 を 屠 殺 し 各 動 物 から 大 腿 骨 の 骨 髄 を 採 取 してスライドグ ラス 上 にメタノールで 固 定 後 3%ギムザ 液 で 染 色 し 骨 髄 標 本 を 作 製 した 陽 性 対 象 群 にはマイトマイシンC10mg/kg を 単 回 強 制 経 口 投 与 して24 時 間 後 に 標 本 を 作 製 した 各 個 体 あたり2000 個 の 多 染 性 赤 血 球 を 観 察 して 小 核 を 有 する 多 染 性 赤 血 球 の 頻 度 を 求 めた また 骨 髄 細 胞 に 対 する 毒 性 を 調 べるため 各 個 体 あたり1000 個 の 赤 血 球 を 観 察 して 全 赤 血 球 に 対 する 多 染 性 赤 血 球 数 を 計 数 した 用 量 設 定 根 拠 :1 群 雄 3 匹 のマウスに2500 5000 及 び10000 mg/kg の 用 量 で 予 備 試 験 を 行 った 結 果 いずれの 容 量 群 においても 死 亡 例 がみられなかったので 最 大 耐 量 は10000 mg/kg 以 上 と 考 えられた よって 投 与 量 を2500 5000 及 び10000 mg/kg とした 結 果 : 観 察 結 果 を 表 に 示 した 雄 のICR 系 (Crlj :CD1)マウスを 用 い 骨 髄 細 胞 におけるスギ 木 酢 液 の 小 核 試 験 を 実 施 した 被 験 物 資 投 与 群 は2,500,5000 及 び10000 mg/kg の3 用 量 を 設 定 し 1 日 1 回 24 時 間 間 隔 で2 回 の 強 制 経 口 投 与 を 行 った 陰 性 対 照 群 には 被 験 物 質 投 与 液 の 調 製 に 用 いた 純 水 を2 回 強 制 経 口 投 与 し 陽 性 対 照 群 にはマイトマイシンCを10mg/kg で1 回 強 制 経 口 投 与 し た 1 用 量 群 あたり5 匹 の 動 物 に 投 与 し 最 終 投 与 24 時 間 後 に 全 ての 動 物 から 骨 髄 塗 抹 標 本 を 作 成 した 標 本 観 察 の 結 果 スギ 木 酢 液 のいずれの 用 量 群 でも 陰 性 対 象 群 と 比 べて 小 核 を 有 する 多 染 性 赤 血 球 の 出 現 頻 度 に 有 意 な 増 加 は 認 められなかった 一 方 陽 性 対 象 群 では 小 核 を 有 する 多 染 性 赤 血 球 の 出 現 頻 度 に 明 らかな 増 加 が 認 められた 以 上 の 結 果 より 本 実 験 条 件 下 では ICR 系 (Crlj :CD1)マウスの 骨 髄 細 胞 におい て スギ 木 酢 液 の 小 核 誘 発 性 は 陰 性 であると 結 論 した
スギ 木 酢 液 :マウスを 用 いた 小 核 試 験 ( 試 験 番 号 IET06-0118 ) 農 薬 GLP 適 合 確 認 施 設 で 実 施 標 本 作 製 時 間 被 験 物 質 用 量 (mg/kg) 動 物 数 小 核 出 現 頻 度 (%) 多 染 性 赤 血 球 の 割 合 (%) 媒 体 ( 純 水 ) 0 2 5 0.20 ± 0.11(0.05 ~ 0.35) - 52.2 ± 9.4(42.0 ~ 60.9) - 2500 2 5 0.16 ± 0.04(0.10 ~ 0.20) N.S. 52.4 ± 8.1(42.3 ~ 62.6) N.S. 24 a) スギ 木 酢 液 5000 2 5 0.22 ± 0.04(0.15 ~ 0.25) N.S. 51.4 ± 6.8(41.7 ~ 57.4) N.S. 10000 2 5 0.26 ± 0.08(0.15 ~ 0.35) N.S. 56.3 ± 4.6(50.0 ~ 61.7) N.S. マイトマイシン C 10 1 5 4.35 ± 1.91(2.55 ~ 7.05) 44.1 ± 5.9(37.8 ~ 53.7) N.S. SD 標 準 偏 差 被 験 物 質 処 理 群 は Kastenbaum-Bowman の 数 表 による 検 定,マイトマイシンC 処 理 群 はカイ 二 乗 検 定 Wilcoxon の 順 位 和 検 定 N.S. 有 意 差 なし(p > 0.05) 有 意 差 あり(p < 0.001 ) a) 最 終 投 与 後 24 時 間
蒸 留 木 酢 液 :マウスを 用 いた 小 核 試 験 ( 試 験 番 号 IET06-0117 ) GLP 対 応 検 体 純 度 :-%( 有 効 成 分 不 明 により 特 定 不 可 ) 供 試 動 物 :ICR 系 マウス(Crlj :CD1) 雄 (7 週 令 体 重 29.8~36.7g) 1 群 雄 5 匹 試 験 方 法 : 検 体 を 純 水 に 溶 解 し 2500 5000 及 び10000 mg/kg の 用 量 で 1 日 1 回 2 日 間 強 制 経 口 投 与 した なお 陰 性 ( 溶 媒 ) 対 照 群 に 純 水 を 同 様 に 投 与 した 最 終 投 与 24 時 間 後 に 動 物 を 屠 殺 し 各 動 物 から 大 腿 骨 の 骨 髄 を 採 取 してスライドグ ラス 上 にメタノールで 固 定 後 3%ギムザ 液 で 染 色 し 骨 髄 標 本 を 作 製 した 陽 性 対 象 群 にはマイトマイシンC10mg/kg を 単 回 強 制 経 口 投 与 して24 時 間 後 に 標 本 を 作 製 した 各 個 体 あたり2000 個 の 多 染 性 赤 血 球 を 観 察 して 小 核 を 有 する 多 染 性 赤 血 球 の 頻 度 を 求 めた また 骨 髄 細 胞 に 対 する 毒 性 を 調 べるため 各 個 体 あたり1000 個 の 赤 血 球 を 観 察 して 全 赤 血 球 に 対 する 多 染 性 赤 血 球 数 を 計 数 した 用 量 設 定 根 拠 :1 群 雄 3 匹 のマウスに2500 5000 及 び10000 mg/kg の 用 量 で 予 備 試 験 を 行 った 結 果 いずれの 容 量 群 においても 死 亡 例 がみられなかったので 最 大 耐 量 は10000 mg/kg 以 上 と 考 えられた よって 投 与 量 を2500 5000 及 び10000 mg/kg とした 結 果 : 観 察 結 果 を 表 に 示 した 雄 のICR 系 (Crlj :CD1)マウスを 用 い 骨 髄 細 胞 における 蒸 留 木 酢 液 の 小 核 試 験 を 実 施 した 被 験 物 資 投 与 群 は2,500 5000 及 び10000 mg/kg の3 用 量 を 設 定 し 1 日 1 回 24 時 間 間 隔 で2 回 の 強 制 経 口 投 与 を 行 った 陰 性 対 照 群 には 被 験 物 質 投 与 液 の 調 製 に 用 いた 純 水 を2 回 強 制 経 口 投 与 し 陽 性 対 照 群 にはマイトマイシンCを10mg/kg で1 回 強 制 経 口 投 与 し た 1 用 量 群 あたり5 匹 の 動 物 に 投 与 し 最 終 投 与 24 時 間 後 に 全 ての 動 物 から 骨 髄 塗 抹 標 本 を 作 成 した 標 本 観 察 の 結 果 蒸 留 木 酢 液 のいずれの 用 量 群 でも 陰 性 対 象 群 と 比 べて 小 核 を 有 する 多 染 性 赤 血 球 の 出 現 頻 度 に 有 意 な 増 加 は 認 められなかった 一 方 陽 性 対 象 群 では 小 核 を 有 する 多 染 性 赤 血 球 の 出 現 頻 度 に 明 らかな 増 加 が 認 められた 以 上 の 結 果 より 本 実 験 条 件 下 では ICR 系 (Crlj :CD1)マウスの 骨 髄 細 胞 におい て 蒸 留 木 酢 液 の 小 核 誘 発 性 は 陰 性 であると 結 論 した
蒸 留 木 酢 液 :マウスを 用 いた 小 核 試 験 ( 試 験 番 号 IET06-0119 ) 農 薬 GLP 適 合 確 認 施 設 で 実 施 標 本 作 製 時 間 被 験 物 質 用 量 (mg/kg) 動 物 数 小 核 出 現 頻 度 (%) 多 染 性 赤 血 球 の 割 合 (%) 媒 体 ( 純 水 ) 0 2 5 0.15 ± 0.09(0.05 ~ 0.30) - 50.1 ± 4.7(43.2 ~ 55.4) - 24 a) 2500 2 5 0.20 ± 0.06(0.15 ~ 0.30) N.S. 45.4 ± 7.7(37.3 ~ 53.1) N.S. 蒸 留 木 酢 液 5000 2 5 0.15 ± 0.08(0.05 ~ 0.25) N.S. 49.6 ± 9.8(35.1 ~ 62.0) N.S. 10000 2 5 0.16 ± 0.09(0.05 ~ 0.30) N.S. 43.9 ± 10.9(30.6 ~ 54.1) N.S. マイトマイシン C 10 1 5 1.52 ± 1.59(1.00 ~ 5.05) 50.0 ± 13.0(28.1 ~ 60.8) N.S. SD 標 準 偏 差 被 験 物 質 処 理 群 は Kastenbaum-Bowman の 数 表 による 検 定,マイトマイシンC 処 理 群 はカイ 二 乗 検 定 Wilcoxon の 順 位 和 検 定 N.S. 有 意 差 なし(p > 0.05) 有 意 差 あり(p < 0.001 ) a) 最 終 投 与 後 24 時 間