札 幌 市 衛 研 年 報 4,42-47(213) 健 康 食 品 中 医 薬 品 成 分 の 分 析 痩 身 系 健 康 食 品 からのセンノシド 検 出 事 例 *1 小 金 澤 望 戸 田 史 明 *1 上 井 大 司 *2 徳 田 美 穂 子 牧 里 江 宮 本 啓 二 宮 田 淳 *3 三 ツ 屋 文 秀 要 旨 平 成 24 年 度 に 実 施 された 札 幌 市 保 健 所 のいわゆる 健 康 食 品 ( 以 下 健 康 食 品 という ) 買 上 げ 検 査 において 強 壮 系 及 び 痩 身 系 健 康 食 品 1 検 体 の 分 析 依 頼 をうけ 医 薬 品 2 成 分 の 検 査 を 実 施 した この 買 上 げ 品 のうち 痩 身 系 健 康 食 品 1 検 体 から 医 薬 品 センナ 葉 の 有 効 成 分 であるセンノシド A 及 び センノシド B が 検 出 されたので 報 告 する 1. 緒 言 近 年 強 壮 作 用 や 痩 身 効 果 を 標 榜 した 健 康 食 品 に 医 薬 品 成 分 が 添 加 され 健 康 被 害 が 出 るケースが 相 次 いでいる 医 薬 品 成 分 を 含 む 健 康 食 品 は 無 承 認 無 許 可 医 薬 品 に 該 当 し 薬 事 法 規 制 の 対 象 となる 札 幌 市 保 健 所 では 平 成 19 年 度 から 健 康 食 品 の 買 上 げ 検 査 を 実 施 しており 平 成 22 年 度 よりその 成 分 分 析 を 札 幌 市 衛 生 研 究 所 にて 実 施 している 違 法 に 添 加 される 医 薬 品 成 分 は 構 造 を 変 えつつ 種 類 を 増 やしているため 検 査 にあたっては 最 新 の 情 報 収 集 に 努 め 効 率 的 に 分 析 可 能 な 医 薬 品 成 分 を 増 加 させ ていく 必 要 がある 平 成 22 年 度 ( 開 始 年 度 )は 9 成 分 23 年 度 には 17 成 分 の 分 析 を 可 能 とし 平 成 22 年 度 に 違 反 品 1 検 体 を 検 出 している しかし 近 年 はインターネットを 経 由 し MD ク リニックダイエット ホスピタルダイエット な どと 称 され 国 内 未 承 認 の 医 薬 品 成 分 を 含 有 してい る 製 品 が 個 人 輸 入 されており 死 亡 事 例 を 含 む 健 康 被 害 が 多 数 報 告 されている 1) これまで 札 幌 市 では 店 頭 による 買 上 げ 検 査 を 行 ってきたが この 状 況 を 受 け 平 成 24 年 度 には 初 めてインターネットによ る 検 体 購 入 を 実 施 し 2 成 分 について 分 析 を 行 っ た このうち 痩 身 系 健 康 食 品 の 1 つから 医 薬 品 成 分 センナ 葉 の 有 効 成 分 であるセンノシドを 検 出 した ため 本 稿 ではその 詳 細 について 報 告 する 2. 対 象 と 検 査 項 目 2-1 標 準 試 薬 シルデナフィル(クエン 酸 塩 ) バルデナフィル タダラフィル キサントアントラフィル ホンデナ フィル チオキナピペリフィル フェンフルラミン N-ニトロソフェンフルラミン オリスタットについ ては 国 立 医 薬 品 食 品 衛 生 研 究 所 より 標 品 として 配 布 されたものを 使 用 した ヒドロキシホモシルデナ フィル アミノタダラフィル クロロプレタダラフ ィル チオデナフィル メチソシルデナフィルにつ いては( 株 ) 関 東 化 学 より ヨヒンビン フェノール フタレイン センノシド A センノシド B について は 和 光 純 薬 ( 株 )より シブトラミン マジンドール については SIGMA より 入 手 した センノシド A セ ンノシド B は 1 炭 酸 水 素 ナトリウム 溶 液 に 他 は メタノールにそれぞれ ~4ppm になるよう 溶 *1 保 健 福 祉 局 保 健 所 医 療 政 策 課 *2 手 稲 区 保 健 福 祉 部 健 康 子 ども 課 *3 中 央 区 保 健 福 祉 部 健 康 子 ども 課 -42-
HPLC-PDA 使 用 機 器 移 動 相 表 1 分 析 条 件 Agilent 1 A: 5mM 1-ヘキサンスルホン 酸 Na 含 有.1リン 酸 B: アセトニトリル A:B=(82:18) 25min. (54:46) 19min. (19:81) 5min. (19:81) 1min. (82:18) カラム: 流 速 : 注 入 量 : PDA 条 件 : Mightysil RP18-GP 4.6x15mm, 5µm 1mL/min. 1μL 19-42nm 観 測 波 長 21nm 29nm 36nm 39nm LC-MS/MS 強 壮 系 医 薬 品 成 分 痩 身 系 医 薬 品 成 分 使 用 機 器 移 動 相 カラム: 流 速 : 注 入 量 : イオン 化 条 件 : Waters UPLC-Quattro Premier XE A: 2mM ギ 酸 アンモニウム 含 有.2ギ 酸 B: アセトニトリル A:B=(8:2) 6min. (6:4) 1min. (3:7) (5:95) 1min. (5:95) (8:2) Acquity UPLC BEH C 18 2.1xmm, 1.2µm.5mL/min. 5μL ESI positive Source temp. 12 Desolvation temp. 45 Desolvation gas 9L/hr Cone gas 5L/hr Waters UPLC-Quattro Premier XE A: 1mM ギ 酸 アンモニウム 含 有.1ギ 酸 B: アセトニトリル A:B=(9:1) 1min. (8:2) 3min. (1:9) (2:98) 3min. (2:98) (9:1) Acquity UPLC HSS T3 2.1 mm, 1.2µm.3mL/min. 5μL ESI positive / negative Source temp. 12 Desolvation temp. 3 Desolvation gas 6L/hr Cone gas 5L/hr メチソシルデナフ ィル(MSF) チオキナピペリフ ィル(TPF) 解 し 標 準 溶 液 とした 2-2 分 析 用 試 料 の 調 製 既 報 2) に 従 って 抽 出 調 製 した 2-3 分 析 条 件 表 2 LC-MS/MS イオン 条 件 Precursor Product Cone Collision 489 71 99 113 449 91 186 24 ヨヒンビン(YOH) 355 117 144 212 シブトラミン(Sib) 28 125 139 153 マジンドール (Maz) フェンフルラミン (Fen) N-ニトロソフェンフ ルラミン(N-fen) オリスタット (Orl) フェノールフタレイ ン(Phe) センノシド A B (SenA SenB) 285 51 12 13 232 19 119 159 261 83 19 159 497 114 16 319 319 115 141 225 861 224 386 57 46 34 28 36 82 36 22 45 46 24 24 24 3 14 14 45 68 56 46 36 38 5 26 27 56 38 26 48 28 12 16 41 49 39 19-32 -46-24 フ ォ ト ダ イ オ ー ド ア レ イ 検 出 器 付 き HPLC (HPLC-PDA) 及 び LC-MS/MS を 使 用 した HPLC-PDA 及 び LC-MS/MS の 分 析 条 件 を 表 1 に メチソシルデナ フィル チオキナピペリフィル ヨヒンビン シブ トラミン マジンドール フェンフルラミン N-ニ トロソフェンフルラミン オリスタット フェノー ルフタレイン センノシド A センノシド B の LC-MS/MS イオン 条 件 を 表 2 に 示 す シルデナフィル (クエン 酸 塩 ) バルデナフィル タダラフィル キ サントアントラフィル ホンデナフィル ヒドロキ シホモシルデナフィル アミノタダラフィル クロ ロプレタダラフィル チオデナフィルの LC-MS/MS 2) 条 件 は 既 報 に 従 った 定 量 下 限 値 は 各 物 質 の 1 回 摂 取 量 につき.5mg とした 3. 結 果 平 成 22 年 度 に 分 析 対 象 であったシルデナフィル バルデナフィル タダラフィル キサントアントラ フィル ホンデナフィル チオデナフィル ヒドロ キシホモシルデナフィル アミノタダラフィル ク ロロプレタダラフィルに 加 え 強 壮 系 医 薬 品 成 分 3 成 分 (メチソシルデナフィル ヨヒンビン チオキ ナピペリフィル) 及 び 痩 身 系 医 薬 品 として 検 出 例 の 多 い 8 成 分 (シブトラミン マジンドール フェン -43-
2.556 XAF 1.357 TPF 23.862 thdf 1.778 YOH 11.752 VDF 12.614 Maz 13.486 HDF 15.774 HSF 16.74 SLF 17.15 ATF 17.266 MSF 2.134 TDF 3.695 CTF 4.579 SenB 6.516 SenA 14.249 Fen 17.989 Phe 21.991 Sib 31.747 N-Fen 図 1 HPLC-PDA PDA クロマトグラム 図 2 SenA 及 び SenB の 構 造 式 SenA SenB MW=862.74 フルラミン N-ニトロソフェンフルラミン オリス タット フェノールフタレイン センノシド A セ ンノシド B)を 新 たに 分 析 対 象 に 追 加 した 2) 成 分 の 定 性 及 び 定 量 を 確 実 にするために 既 報 同 様 HPLC-PDA 及 び LC-MS/MS を 使 用 した 混 合 標 準 品 の HPLC-PDA 分 析 クロマトグラムを 図 1 に 示 す オリ スタット(Orl)については HPLC-PDA でのピーク 検 出 が 極 めて 微 弱 なため 定 量 は LC-MS/MS でのみ 行 うこととした LC-MS/MS 分 析 については 分 析 対 象 成 分 数 が 増 加 したため 選 択 性 及 び 感 度 を 考 慮 し 強 壮 系 痩 身 系 の 成 分 をそれぞれ 別 途 測 定 することとした( 表 1) センノシド A(SenA)およびセンノシド B(SenB)の 構 -44-
造 は 図 2 に 示 すように 互 いに 立 体 異 性 体 (ジアステ 表 3 各 物 質 の LC-MS/MS 分 析 における RT 強 壮 系 医 薬 品 成 分 ヨヒンビン (YOH) チオキナピペリフィル (TPF) ホンデナフィル (HDF) バルデナフィル (VDF) ヒドロキシホモシルデ ナフィル(HSF) シルデナフィル (SLF) アミノタダラフィル (ATF) メチソシルデナフィル (MSF) キサントアントラフィ ル(XAF) 痩 身 系 医 薬 品 成 分.89 センノシド B (SenB) 1.8 センノシド A (SenA) 1.89 マジンドール (Maz) 2.4 フェンフルラミン (Fen) 2.42 フェノールフタレイ ン(Phe) 2.49 シブトラミン (Sib) 2.75 N-ニトロソフェンフ ルラミン(N-fen) 2.87 オリスタット (Orl) 3.53 タダラフィル(TDF) 3.55 チオデナフィル (thdf) クロロプレタダラフィ ル(CTF) 5.25 6.54 2.36 2.52 3.1 3.21 3.64 3.96 4.68 6.66 ( 単 位 : 分 ) レオマー)であり SenA 及 び SenB の Precursor 及 び Product イオンは 同 一 である( 表 2) このため LC-MS/MS による 両 者 の 分 別 はリテンションタイム (RT)の 違 いによってのみ 可 能 である SenA と SenB は 比 較 的 高 極 性 であり 従 前 LC-MS/MS 分 析 に 使 用 し ていた Acquity UPLC BEH C 18 では 分 離 が 不 十 分 であ った このため SenA 及 び SenB を 含 む 痩 身 系 成 分 の 分 析 においては 豊 成 らの 方 法 3) を 参 考 として 分 析 カラム 及 び 移 動 相 を 変 更 した LC-MS/MS 分 析 におけ る 各 々の 物 質 のリテンションタイム(RT)を 表 3 に 示 す 平 成 24 年 度 の 買 上 げ 検 査 は 札 幌 市 として 初 めて インターネットによる 購 入 で 実 施 され 買 上 げ 品 の 内 訳 は 錠 剤 4 検 体 カプセル 5 検 体 茶 1 検 体 の 計 1 検 体 であった 搬 入 された 1 検 体 を 先 述 の 分 析 用 試 料 調 製 法 に 従 い 抽 出 し HPLC-PDA で 分 析 実 施 し たところ 検 体 No.1( 商 品 名 :ヤーヤ ダイエッ a b 標 準 品 861>386 No.1 861>386 a: RT=4.593 b: RT=6.536 SenB 2.43 SenA 2.59 2.43 2.51 2.59 min. 2.4 2.6 2.4 2.6 a b 861>224 861>224 SenB SenA 2 3 4 2 3 4 2.4 2.6 2.4 2.6 図 3 検 体 No.1 HPLC-PDA PDA クロマトグラム 及 び PDA スペクトル 図 4 検 体 No.1 及 びセンノシド 標 準 品 の LC-MS/MS クロマトグラム -45-
1 2 成分表記 包装写真及び内容物(カプセル) 3 4 服用法 包装上記載 和訳 用法 成人 2 カプセル 1 日 1 回 便秘時就寝前に服用 成分表記拡大図 (和訳) 1 カプセル 薬品粉末正味 19mg 中の成分 センナ葉 76mg ナンバンサイカチ果肉 76mg クローブ 19mg センナ莢 19mg 5 製品に内包の日本語による説明書(抜粋) 図 5 検体 No.1 ヤーヤ ダイエットカプセル 写真 No.1 ヤーヤ ダイエットカプセル 写真 トカプセル から RT が SenA 及び SenB とそれぞれ一 検体 No.1 は痩身効果を謳う健康食品で 商品に 致するピークが検出され それぞれの PDA スペクト は日本語の表記がなく 英語及びタイ語で表示がな ルは a が SenB b が SenA と類似していた 図 3 されていた(図 5-1 5-2) 検体 No.1 について調査 さらに LC-MS/MS による分析結果において RT 及び したところ 当該製品はタイで製造され輸入された Product イオンの比率が一致したため(図 4) 検体 ものであり 成分表記には英語表記及びタイ語の双 No.1 より SenA 及び SenB 検出と断定した 検出濃 方で センナ葉 の記載があることが翻訳により判 度は 1 カプセルあたり.71 (SenA)及び 1.51 明した(図 5-3) センナ葉は厚生労働省通知 4)中 専 (SenB)であった ら医薬品として使用される成分本質 原材料 リス ト に掲載されており 本質的に専ら医薬品とみな 4. 考 察 される センノシド A B は共にセンナ葉に含有され -46-
る 成 分 であり そのカルシウム 塩 は 薬 局 製 造 販 売 医 薬 品 として 緩 下 剤 に 含 有 される(センノシド 製 剤 ) 5) 保 健 所 では 本 分 析 結 果 をもって 検 体 No.1 に 医 薬 品 成 分 センナ 葉 の 使 用 が 確 認 されたとし 当 該 製 品 に ついて 報 道 機 関 に 情 報 提 供 を 行 うと 共 に 輸 入 者 の 所 在 地 である 大 阪 市 に 通 報 した 当 該 製 品 の 包 装 にはタイ 語 及 び 英 語 で 1 日 2 カ プセルを 服 用 するように 記 述 されていた( 図 5-4)が 同 梱 の 日 本 語 の 注 意 書 きには 1 日 2~6 カプセルを 服 用 するように 記 述 されていた( 図 5-5) 仮 に 6 カプ セルを 服 用 した 場 合 摂 取 するセンノシド 量 は 13.32mg となり これは 国 内 で 便 秘 の 解 消 を 目 的 と して 通 常 処 方 される 1 日 量 (12~24mg)と 同 程 度 の 量 となり 健 康 被 害 の 可 能 性 を 十 分 想 定 できる 含 有 量 であると 考 えられる No.1 の LC-MS/MS スペクトルにおいて SenA 及 び SenB のピーク 間 に RT=2.51 のピークが 検 出 された ( 図 4) このピークは 試 験 溶 液 の 保 管 期 間 が 長 期 に 及 ぶほど 大 きくなる 傾 向 にあることから 高 橋 ら 6) の 報 告 にあるように SenA 及 び SenB の 分 解 物 である と 考 えられる ト などと 称 されるタイ 製 の 向 精 神 薬 等 を 含 有 する 無 承 認 無 許 可 医 薬 品 による 健 康 被 害 事 例 に つ い て http://www.mhlw.go.jp/kinkyu/diet /jirei/392-1.html (2) 小 金 澤 望 鎌 倉 浩 之 最 所 和 宏 合 田 幸 広 武 口 裕 水 嶋 好 清 三 觜 雄 平 成 22 年 度 健 康 食 品 買 上 げ 検 査 結 果 について 札 幌 市 衛 生 研 究 所 年 報 38, 42-47 (211) (3) 豊 成 美 香 三 宅 崇 仁 無 承 認 無 許 可 医 薬 品 及 び 指 定 薬 物 の 一 斉 分 析 法 の 検 討 徳 島 県 立 保 健 製 薬 環 境 センタ- 年 報 1, 27-29 (211) (4) 昭 和 46 年 6 月 1 日 薬 発 第 476 号 無 承 認 無 許 可 医 薬 品 の 指 導 取 締 りについて 別 添 2 専 ら 医 薬 品 として 使 用 される 成 分 本 質 ( 原 材 料 )リス ト (5) 植 物 性 緩 下 剤 セネバクール R 錠 12mg 添 付 文 書 213 年 1 月 改 訂 ( 第 7 版 ) (6) 髙 橋 美 津 子 桜 井 克 斉 藤 貢 一 センノシド 標 準 溶 液 の 安 定 性 の 検 討 及 び 分 解 物 の 解 析 分 析 化 学 61(4),341-346(212) 5. 結 語 平 成 24 年 度 の 保 健 所 による 健 康 食 品 買 上 げ 検 査 において 2 医 薬 品 成 分 を 対 象 に 検 査 を 行 い 1 検 体 中 1 検 体 から 医 薬 品 成 分 センナ 葉 の 成 分 である センノシド A 及 びセンノシド B を 検 出 した 保 健 所 では 当 該 製 品 について 輸 入 者 の 所 在 地 である 大 阪 市 に 通 報 した 本 事 例 は 札 幌 市 においてインターネ ットで 試 買 された 健 康 食 品 から 痩 身 系 の 医 薬 品 成 分 を 検 出 した 初 めての 事 例 である 国 内 で 医 薬 品 とし て 承 認 を 受 けていない 製 品 を 個 人 輸 入 などで 安 易 に 購 入 服 用 することは 大 変 危 険 な 行 為 であり 今 後 ともインターネットによる 買 上 げ 検 査 を 継 続 してい く 必 要 がある 6. 文 献 (1) 厚 生 労 働 省 ホームページ ホスピタルダイエッ -47-