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- としなり わくや
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1 Key words: influenza A virus, rapid diagnosis, ELISA
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3 A型 Fig イ ン フ ル エ ンザ ウ イル ス 迅 速 診断 キ ッ ト Directigen Flu A device showing, positive and negative results Negative Positive 代 し て 細 胞 変 性 効 果 の 認 め ら れ た も の に つ い て, 定 で はA/Yamagata/32/89,A/Kitakyusyu/ 0.5%モ 159/93の 後,血 ル モ ッ ト血 球 を 用 い て 血 球 凝 集 能 を 測 定 球 凝 集 抑 制(HI)試 5.ウ 験 を 行 な い 同 定 し た. A/Yalnagata/32/89(H1N1),A/Kitakyusyu/ を 作 製 し,そ つ い て ま での希釈列 の 希 釈 ウ イル スを 用 い て検 査 キ ッ ト 成 と こ ろ,す 績 Flu Aの 反 応 性 を 調 査 した べ て の 株 で 発 色 を 呈 し,陽 認 め ら れ た.ま た,ブ 性 の反応が タA型(SW/Iowa/15/30), ン フ ル エ ンザ ウ イル ス に つ い て も同 様 に反 応 が 認 め ら れ,今 回 使 用 し たA型 イ ン フ ルエ ンザ ウ イ ル ス の 全 て の 株 が 検 出 可 能 で あ っ た.し か し, B型 イ ン フ ル エ ン ザ ウ イ ル ス,そ で は 発 色 は 認 め ら れ ず,交 た(Table 2.検 ッ トに 使 用 す る125μl中 れ pfu, pfuま の 他 の ウ イル ス 差 反 応 は み られ な か っ で 発 色 を判 別 で き 床 検 体 を 用 い た 細 胞 培 養 との 比 較 Aで イン フ ル エ ン ザ ウ イ ル ス の 抗 原 検 出 を 行 な い,細 胞培 養 に よ る ウ イ ル ス 分 離 と の 比 較 を 行 な っ た.な プ ラ ー ク 定 最 法 の 結 果,A/Yamagata/32/89は 鼻汁 吸 引液 を 検 体 と し た場 合 の検 出 結 果 を 2に 示 し た.45件 中A型 Flu Aで は92,1%,特 は35例(77.8%)が 異 性 は100%で で の 検 出 結 果(Table 3)で 平 成10年8月20日 Aの 検 出限 界 の測 は175件 Flu A陽 い 液 の 検 出 結 果 をTable 108pfu/mlの Flu 度 あ っ た.咽 頭 ぬ ぐ い 液 中A型 インフ 例(6.1%)で,感 性 は89例(50.9%) 異 性 は98.4%で ル ス 分 離 で は47例(48.0%)が ル ス を 用 い たDirectigen 陽 性 で,感 ル エ ン ザ ウ イ ル ス が 分 離 さ れ た の は113例 型 陽 性 に 対 し,Directigen の希釈 ウイ イ ン フル エ ンザ ウ イ ル ス が 分 離 さ れ た の は38例(84.4%),Directigen pfu/ml,A/Kitakyusyu/159/93は2.0 ウ イ ル ス 量 で あ っ た.そ お, た. で 感 度 は77.9%,特 出 限 界 の検 討 Flu 感 度 お よび 特 異 性 は細 胞 培 養 を基 準 と して測 定 し (64.5%),Directigen 1). にそれ ぞ た. Table ト リA型(Duck/CZ/1/56,Turkey/England/1/ 63)イ ウ イ ル ス粒 臨 床 検 体 に つ い てDirectigen イ ン フ ル エ ン ザ ウ イ ル ス18株 に つ い てDirectigen kyusyu/159/93で pfu/mlの 3.臨 異性 の検討 ヒ ト 由 来 のA型 れ ら の ウ イ ル ス 希 釈 液 中 に はA/ 子が 存 在 し,キ の 検 出 限 界 に つ い て 調 査 し た. 1.特 ら れ た.こ 釈 まで 反 応 が 認 め Yamagata/32/89で pfu/ml,A/Kita- イルスの定量 ブ ラ ー ク定 量 法 を 用 い て ウ イル ス量 を測 定 した 159/93(H3N2)に 両 株 と も 原 液 の10-4希 あ っ た.う 4に 示 し た.98件 が 中 ウイ イ ン フ ル エ ン ザA Flu A陽 度 は12.8%,特 性 は わ ず か6 異 性 は100%で
4 Table 1 Reactivity of Directigen Flu A with isolated virus Table 2 Sensitivity and specificity of the Directigen Flu A with nasopharyngeal aspirate specimens(n=45) Table 3 Sensitivity and specificity of the Directigen Flu A with throat swab specimens(n=175) Table 4 Sensitivity and specificity of the Directigen Flu A with gargle specimens =98) (n
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6 type A and adenovirus antigens in clinical specimens. J Clin Microbiol 1982; 15: ) Sarkkinen HK, Halonen PE, Salmi AA: Detec- of influenza A virus by radioimmunoassay tion and enzyme immunoassay from nasopharyn- geal specimens. J Med Virol; 7: ) Waner JL, Todd SJ, Shalaby H, Murphy P, Wall LV: Comparison of Directigen FLU-A with viral isolation and direct immunofluorescence for the rapid detection and identi- fication of influenza A virus. J Clin Microbiol 13) Dominguez EA, Taber LH, Couch RB: Com- parison of rapid diagnostic techniques for respiratory syncytial and influenza A virus respira- tory infections in young children. J Clin Microbiol 1993; 31: ) Daisy JA, Lief FS, Friedman HW: Rapid diagnosis of influenza A infection by direct immunofluorescence of nasopharyngeal aspirates in adults. J Clin Microbiol 1979; 9: ) Shalit I, McKee PA, Beauchamp H, Waner JL: Comparison of polyclonal antiserum versus antibodies for the rapid diagnosis of influenza A virus infections by immunofluorescence in clinical specimens. J Clin Microbiol 1985; 22: ) Harmon MW, Pawlik KM: Enzyme immunoassay for direct detection of influenza 1991; 29: ) Sugaya N, Kusumoto N, Suzuki Y, Nerome R, Nerome K: Large sequential outbreaks caused by influenza A (H3N2) and B viruses in an institution for the mentally handicapped. J Med Virol 1996; 50: ) Hall CB, Dolin R, Gala CL et al: Children with influenza A infection: Treatment with Rimantadine. Pediatr 1987; 80: ) Hayden FG, Osterhaus A, Treanor JJ et al.: Efficacy and safety of the neuraminidase inhibitor zanamivir in the treatment of influenzavirus infections. N Engl J Med 1997; 337:
7 Evaluation of a Rapid Enzyme Immunoassay Membrane Test for Diagnosis of Influenza A Virus Infection Hideaki SHIMIZU1, Sumi WATANABE2), Chiharu KAWAKAMI3) Kazuhiro KIMURA4), Norio SUGAYA5) & Mitsunobu IMAI2), Yoshie HIRAI1, Kawasaki City Institute of Public Health 2)Kanagawa Prefectural Public Health Laborator 3)Yokohama City Institute of Public Health Department of Pediatrics, Isehara Kyodo 4) Hospital Department of Pediatrics, Nippon Kokan Hospital 5) y 1) A rapid enzyme immunoassay membrane test, Directigen Flu A (Becton Dickinson, USA), was evaluated by using virus isolates and clinical specimens. The reference laboratory diagnosis was based on the results of virus isolation. Directigen Flu A was reactive for all subtypes of human influenza A viruses, including reference strains of H1N1, H2N2 and H3N2. Moreover, H5N1 (Hongkong/156/97) was also detected by this kit. No cross reactivity was detected with other respiratory viruses. Directigen Flu A showed positive reaction with the solution containing influenza A virus of 2.4 ~103 pfu/assay. The rapid test demonstrated 77.9% sensitivity and 98.4% specificity for testing of throat swabs from children with respiratory symptoms. It showed higher sensitivity and specificity (92.1% and 100%) for testing of nasopharyngeal aspirates. Directigen Flu A should be useful for the rapid diagnosis of influenza A virus infection.
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