挨拶 巻頭言 豚繁殖 呼吸障害症候群 (Porcine reproductive and respiratory syndrome ; PRRS) ウイルスの流行は 現在では潜在化し 養豚産業において大きな問題となっている 石崎良太郎 ( 2 ) 獣医病理学研修会 第 46 回 No.926 イヌの胃壁腫瘤 北里大学獣医病理学研究室 ( 3 ) 第 46 回 No.927 イヌの精巣 宮崎大学獣医病理学教室 ( 4 ) レビュー ドリーからスナッピーへ 李柄千 ( 5 ) ミニブタ及びイヌにおける生殖工学技術の開発とモデル動物の作出 島津美樹 (10) お知らせ 新人紹介 (12) http://nibs.lin.go.jp/
2 62 豚繁殖 呼吸障害症候群 (Porcine reproductive and respiratory syndrome; PRRS) ウイルスの流行は 現在では潜在化し 養豚産業において大きな問題となっている 石崎良太郎 PRRS 1993 1987 Equine arteritis virus;eav 1957 1 RNA Nido Arteri Arteri EAV 45 60nm 25 35nm 12.7 15.7kb 1 RNA PRRS ph RNA mrna RNA mrna Nido 5' 3' mrna 5' ORF EAV 12 mrna Nido nest= mrna nest 1989 1992 PRRS ( 1) 2 PRRS EAV EAV PRRS ELISA RT PCR
53 6 2007 3 63 イヌの胃壁腫瘤 北里大学獣医病理学研究室第 46 回獣医病理学研修会標本 No. 926 動物 7 5 臨床事項 2005 2 7 2005 5 6 7 21 8 26 9 13 12 剖検所見 6 6 5 cm 組織所見 1 high power field HPF 40 50 102 1 2.02 2 3 SMA 4 c kit myofilament 5 pinocytotic vesicle Dense body GIST 診断 考察 SMA c kit GIST myofilament pinocytotic vesicle HE
4 64 イヌの精巣 宮崎大学獣医病理学教室第 46 回獣医病理学研修会標本 No. 927 動物 1996 4 1 9 9 臨床事項 2005 7 17 2 3 cm 7 10 10 cm 13 18 8 7 組織所見 a b HE 40 400 HHF35 Actin 2 3 CD3 HLA DR Lysozyme BLA 1 anti trypsin 診断 考察 参考文献 1. Kumar, P.V. et al., Br. J. Urol. 59:282 1987.
53 6 2007 5 65 レビュー ドリーからスナッピーへ 李柄千 ( ソウル国立大学獣医学部教授 ) 1. 体細胞クローン動物の作出 Somatic Cell Nuclear Transfer;SCNT SCNT 2 1 SCNT 1 8 16 SCNT G0 G1 SCNT 100% McGrath, J. Solter, D. 1997 2 Wilmut, I. SCNT 2003 6 SCNT 2. 体細胞を用いた核移植の手法 1
6 66 図 1 体細胞を用いた核移植の手法 2. 1. イヌ 2. 1. 1. 体細胞を用いた核移植のためのドナー細胞の準備 1 DPBS 3 37 0.25% 1 mm EDTA DMEM 1 300 g 2 DPBS 1 100 mm 39 5% CO 2 95% Air 8 10 1 mm 25 mm 1% Minimal essential medium 1% Non essential amino acid solution DMEM+10% FBS 3 5 1 0.1% 1 mm EDTA 80% DMEM 10% DMSO 10% FBS 3 4 1 SCNT 2 8 2. 1. 2. 排卵卵子の回収 3 cm
53 6 2007 7 67 24 G 2 mm 5 mg/ml BSA Medium 199 Hepes+10% FBS 8 ml 2. 1. 3. 除核, マイクロインジェクション, 融合, 活性化及び胚培養 0.1% CR2 Hepes 1% Non essential amino acids 5 g/ml bis Benzimide H 33342 5 200 1% Non essential amino acids CR2 Hepes +10% FBS 5 g/ml cytochalasin B bis Benzimide H 33342 Medium 199 Hepes+10% FBS 1% Non essential amino acids 100 g/ml phytohemagglutinin CR2 Hepes 1 phytohemagglutinin 260 mm mannitol 0.1 mm 0.5 mm Hepes 0.05% BSA Cell fusion chamber 1 25 l msof 5 6 39 5%O 2 5% CO 2 90% N 2 2. 1. 4. 移植 2 4 2% 3.5 Fr Tom cat catheter 23 2. 2. ウシとブタ 2. 2. 1. レシピエント卵子 30 35 2 8 3 6 mm 18 G 10 ml 3 199 medium 500 l 30 40 50 39 5% CO 2 95% Air vivo 2. 2. 2. ドナー細胞と核移植 40 0.1% 1 mm EDTA 1 2 300 g 10 DPBS 1 100 mm
8 68 37 39 5% CO 2 95% Air 6 8 DMEM+10% FBS 5 7 5 0.1% 1 mm EDTA 2 80% 3 4 FBS 0.5% DMEM 3 30 SCNT SCNT cytochalasin B CR2 Hepes cytochalasin B NCSU 23 Hepes 5 g/ml bis Benzimide H 33342 5 SCNT 1 260 mm mannitol 0.1 mm 0.1 mm 0.5 mm Hepes 4 Cell fusion chamber 25 l msof 5 6 25 l NCSU 23 5%O 2 5% CO 2 90% N 2 2. 2. 3. リプログラミング 2. 2. 4. 再構築胚の発生培養と移植 Cell block SCNT DNA X DNA DNA 3. クローン技術の展開と可能性 SCNT 5 7 39
53 6 2007 9 69 4. 初めて作出に成功したクローン犬 スナッピー 4. 1. 結果 2005 8 4 8 24 530 g Snuppy SNU puppy 3 4 Nature 436 7051 2005 1 3 1 1 560 g 3 3 2 DNA 2002 8 4. 3. 今後の展開 5. まとめ 2 2 SCNT 写真 1 左 : 体細胞供与犬 タイ, 右 : クローン犬 スナッピー 4. 2. 研究成果の意義 SCNT 2 写真 2 クローンオオカミ 1,095 123
10 70 レビュー ミニブタ及びイヌにおける生殖工学技術の開発とモデル動物の作出 島津美樹 ( 研究員 ) 1. はじめに 9 2. ゲッチンゲン系ミニブタを用いた研究 6 90 kg 300 kg 1 6 1967 1975 7 7 1998 14,000 3 2001 3,371 1994 2000 1 8 9 10 11 12 13 写真 1 8 ヶ月齢のゲッチンゲン系ミニブタ ( 雌 ) 3. イヌを用いた研究
53 6 2007 11 71 Cooper 14 Kornegay 15 X Golden retriever muscular dystrophy;grmd Canine X linked muscular dystrophy in Japan;CXMD J 16 CXMD J 2; 17 16, 17 Kornegay 15 Valentine 18, 19 GRMD 20, 21 22 写真 2 12 ヶ月齢の CXMD J ( 参考文献 17 より引用 ) 側頭筋の萎縮, 関節の拘縮等が認められる 4. おわりに 1 Bustad LK, et al.:swine in Biomedical Research, Bustad LK and McClellan RO eds 1966 pp. 769 774. 2 England DC, et al.: Growth 1954 17:207 214. 3 Glodek P : Swine in Biomedical Research, Tumbleson ME eds 1986 pp. 23 28. 4 Haring F, et al. :Swine in Biomedical Research, Bustad LK and McClellan RO eds 1966 pp. 789 796. 5 Rempel WE and Dettmers AE : Swine in Biomedical Research, Bustad LK and McClellan RO eds 1966 pp. 781 787. 6 Tumbleson ME, et al. : Swine in Biomedical Research, Tumbleson ME eds 1986 pp. 597 609. 7 : 1999 11:4 11. 8 : 1986. 9) : 2000. 10) Shimatsu Y, et al.:exp Anim 2002 51:143 147. 11) Shimatsu Y, et al. : Theriogenology 2000 53:1013 1022. 12) Shimatsu Y, et al.:vet Rec 2004 155:633 635. 13) Uchida M, et al. :Transgenic Res 2001 10 : 577 582. 14) Cooper BJ, et al.:nature 1988 334:154 156. 15) Kornegay JN, et al. : Muscle Ner ve 1988 11:1056 1064. 16) Shimatsu Y, et al.:exp Anim 2003 52:93 97. 17) Shimatsu Y, et al. :Acta Myol 2005 24 : 145 154. 18) Valentine BA, et al. : Acta Neuropathol Berl 1986 71:301 310. 19) Valentine BA, et al. :J Neurol Sci 1988 88:69 81. 20) Shimatsu Y, et al.:j Reprod Dev 2000 46:315 318. 21) Shimatsu Y, et al.:vet Rec 2003 153:369. 22) Shimatsu Y, et al.:reprod Dom Anim in press.
12 72 新人紹介 生命の 共生 調和 を理念とし, 生命体の豊かな明日と, 研究の永続性を願う気持ちを心よいリズムに整え, 視覚化したものです カラーは生命の源, 水を表す 青 としています 稕 日生研たより昭和 30 年 9 月 1 日創刊 ( 隔月 1 回発行 ) ( 通巻 547 号 ) 平成 19 年 10 月 25 日印刷平成 19 年 11 月 1 日発行 ( 第 53 巻第 6 号 ) 発行所財団法人日本生物科学研究所 198-0024 東京都青梅市新町 9 丁目 2221 番地の 1 TEL:0428(33)1056( 企画学術部 ) FAX:0428(31)6166 発行人長井伸也編集室委員 / 小山智洋 ( 委員長 ), 中村圭吾, 川原史也事務 / 企画学術部印刷所株式会社精案社 ( 無断転載を禁ず )