コバヤシ小 ケンイチ 林謙一 共同研究者 Filip Braet ( シドニー大学准教授オーストラリア顕微鏡微量解析センター ( Australian Centre for Microscopy & Microanalysis) 副センター長 ) 略歴 2002 年 3 月京都大学大学院農学研究科応
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- ちえこ みやくぼ
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1 コバヤシ小 ケンイチ 林謙一 共同研究者 Filip Braet ( シドニー大学准教授オーストラリア顕微鏡微量解析センター ( Australian Centre for Microscopy & Microanalysis) 副センター長 ) 略歴 2002 年 3 月京都大学大学院農学研究科応用生命科学専攻修士課程修了 2005 年 4 月日本学術振興会特別研究員 ( D C 2 )( 京都大学 ) 2006 年 3 月京都大学大学院農学研究科食品生物科学専攻博士後期課程修了 2005 年 4 月日本学術振興会特別研究員 (PD) ( 青山学院大学 ) 2006 年 4 月東京農業大学応用生物科学部生物応用化学科助教 ( 現在に至る ) 2011 年 5 月シドニー大学オーストラリア顕微鏡微量解析センター客員研究員 ( 年 3 月まで ) CLEM 法を用いた蛍光標識ポリフェノールの細胞内動態解析 Kinetic analysis of intracellular fluorescence labeling polyphenol by CLEM method Corrlative light and electron microscopy (CLEM) is an approach that integrates two informations from light and electron microscopy, which is used as powerful imaging tool in the field of medical and pharmaceutical sciences. We thought that CLEM can be applied to a tool not only for pharmacokinetics but also Nutrakinetics (kinetics of functional food constituents). Oleuropein and hydroxytyrosol, the major polyphenols present in olive leaf and oil, are known to possess a high antioxidant and anticancer capacity. However, the details of anticancer activity of these polyphenols and the uptake and localization of hydroxytyrosol in cancer cells are unknown. The aim of this study was to investigate the effect of hydroxytyrosol on cell viability of colorectal cancer cell (Caco-2) and to analyze the localization of hydroxytyrosol conjugated to fluorescein isothiocyanate (FITC) in Caco-2 using CLEM method. Caco-2 cell was treated with hydroxytyrosol, and then cell viability was identified by MTT assay. As a result, hydroxytyrosol induced cell death which may result from apoptosis and autophagy. Furthermore, hydroxytyrosol was conjugated with FITC via the alcoholic hydroxyl group. Caco-2 cells were cultured on glass bottom dishes, and then incubated with 250 µm FITC conjugated hydroxytyrosol (FITC-HT) for 24 hours and subsequently labelled with LysoTracker 1
2 Red (Lysosome marker) and Hoechst (Nuclei marker) before imaging on the Olympus FV1200 Laser confocal microscope. As a result, FITC hydroxytyrosol was detected in the lysosome but not in the nuclei of Caco-2. Additionally, CLEM was performed using Caco-2 cells treated with FITC-HT and LysoTracker. As a result, primitive imaging data was obtained In this study, we concluded that cellular imaging using fluorescent labeled food compounds is a powerful tool to evaluate the effect of functional food constituents. はじめに CLEM 法とは Corelative Light and Electron Microscopy の略で 日本語で言うと光学 電子 線相関顕微鏡解析法といい 同一の細胞を光学 蛍光 顕微鏡と電子顕微鏡の 2 種類の顕微鏡で観 察して 最終的には重ね合わせた像を得て解析する方法である それによって 特定分子の細胞内挙 動や細胞内での超構造変化を詳細に捉えることが可能であることから 医学 薬学分野を中心に進歩 を遂げてきた しかし これまでCLEM 法は 操作過程の段階で細胞構造が変化することから 両画像 の再配置をすることが非常に難しい方法で かつコストがかかる方法であった Kobayashiらは これま でに簡便でかつ低コストで実施できるCLEM 法を確立してきた 1 また 抗癌剤であるシスプラチンを蛍 光物質で標識し 実際にこの方法に供した結果 リソソームに蛍光標識されたシスプラチンがリソソーム に取り込まれている画像を得ることにも成功した また 三次元電子顕微鏡画像 トモグラフィー 画像の 取得をおこない シスプラチンが取り込まれたリソソームの膜構造およびその近傍の細胞内小器官の膜 構造の立体的イメージングに成功した 1 2 この方法論は 薬物動態の解析手法のみならず 機能性 食品成分の細胞内動態の追跡する為のツールとして応用できると考えられる そこで 本研究では 機能性食品成分としてオリーブ葉ポリフェノールであるオレウロペインとその分解 産物であるヒドロキシチロソールに着目した オリーブ Olea europea は 古来より地中海世界の食生 活の中心的な食品素材として利用されてきた しかし 利用されるのはもっぱら実の部分であり 葉部は ほとんど利用されることがなかった 近年 このオリーブ葉が 食品素材として注目を集めている それは オリーブ葉の抽出エキスに 血糖降下作用 3 抗高血圧作用 4 抗酸化作用 5 など生体における機能 性が報告され始めてきたからである 加えて kobayashiらは 爆砕オリーブ葉粉末に 脂質の吸収およ び胆汁酸の再吸収促進作用があることを見出している 6 7 また オリーブ葉よりポリフェノールであるオ レウロペインが発見され それが機能性の本体であると考えられている 加えて オレウロペインが 褐色 脂肪細胞における熱産生を亢進させる機能を有する8 ことも明らかとなっている また 近年 オレウロペ インが細胞内へ取り込まれず 代謝産物であるヒドロキシチロソールが取り込まれて 機能を発揮してい るとの報告もある しかし いずれの分子についても 細胞内の取り込みについて詳細なことは不明であ る 一方 多くのポリフェノール類が 大腸癌細胞の抗癌様作用が最近多く報告されたことから オリー ブ葉ポリフェノールにも類似の効果を有するものと推察される しかし そのことを明らかにした研究は現 在のところない そこで本研究課題では オリーブ葉ポリフェノールが大腸癌モデル細胞の細胞死に及ぼす影響を検 討するとともに CLEM 法による細胞内での動態の解析を行うことと目的とした 2
3 実験方法 1) 大腸癌モデル細胞を用いた細胞生存及び細胞死機構の解析オリーブ葉ポリフェノールであるヒドキシチロソールが大腸癌モデル細胞 Caco-2 細胞の細胞生存に及ぼす影響を検討する目的で MTT Assay 法を用いて検討を行った 2) 蛍光標識オリーブ葉ポリフェノールの蛍光顕微鏡を用いた細胞内動態解析 Caco-2をFITC-HT で処理後 細胞内小器官マーカー ( 核マーカー (Hoechst 33342) リソソームマーカー (LysoTracker Red) と反応させ 細胞内に取り込まれたヒドロキシチロソールの細胞内局在性について検討した 3)CLEM 法細胞の位置を容易に確認可能なカーボンコーティングディッシュに Caco-2を播種して 培養した後に FITC-HT で 24 時間処理後 リソソームマーカー (LysoTracker Red) と反応させた 生細胞イメージングを行った その後 直ちに電子顕微鏡用の固定および包埋を行い 観察部位のみの透過型電子顕微鏡観察を実施し 生細胞イメージング画像と電子顕微鏡画像の重ね合わせを行い CLEM 画像の取得をおこなった 結果と考察 1) ヒドロキシチロソールが大腸癌モデル細胞における細胞生存に及ぼす影響ヒドロキシチロソールに関しても オレウロペイン同様に 24 時間反応させた場合 500μM 以上で濃度依存的に細胞生存率が減少していた また 48 時間反応させた場合では 250μM 以上で 濃度依存的に細胞生存率が減少していた (Fig. 1) 上記の結果より ヒドロキシチロソールには 大腸癌細胞死を誘導する効果があることが確認された そのメカニズムとして アポトーシスとオートファジーの両機構が関与している可能性を想定しており 継続した検討を実施中である Fig.1 MTT Assayを用いた細胞生存率の測定 Caco-2 細胞にヒドロキシチロソールを μM 添加し 24 時間後 48 時間反応後 MTT Assayによって細胞生存率を測定した ( 異符号間で有意差あり p<0.01 n=6) 3
4 2 蛍光標識オリーブ葉ポリフェノールを用いた細胞内動態解析 本研究ではオリーブ葉ポリフェノールの蛍光標識化に着手した まず オレウロペインの蛍光標識化に 着手しようと試みたが 化学構造の複雑さと水酸基の数の多さなどから断念した しかし ヒドロキシチ ロソールは オレウロペインの代謝産物であり オレウロペインと同等それ以上の機能活性を有するという こと 化学構造が単純でフェノール系水酸基の他 カルボキシル基も存在し蛍光標識が容易であると 考えた そこで HT のアルコール性水酸基をフルオロセインイソシアネート 以下 FITC で標識した FITC-HT の作製に着手した Fig. 2 この FITC-HT の薬理活性を検討したところ 残念ながら細 胞生存率の顕著な現象を認めるには至 らず HTと同様の薬理活性を保持して いないことが明らかとなった データは示 さず FITC-HT の Caco-2 細胞における 細胞内局在性を検討した結果 FITCHT を 250μM の濃度で処理すると Caco-2 細胞に取り込まれること 核には 局在せず リソソームにおいて一部局在 Fig.2 標識ヒドロキシチロソール FITC-HT の化学構造 することが確認された Fig. 3 しかし リソソームに局在していた FITC-HT は 一部にとどまっていた結果を踏まえると 他の細胞内小器官への局在も考えられ るので 今後検討していく予定である H a n らは F I T C で 標 識し た epigallocatechin-3-o-gallateを作製 FITC-EGCG し L929 細胞に反応 させた結果 FITC-EGCG が核内に移 行することを見出している 9 この知見 と本結果を合わせて考えると FITC 標 識化合物は 標識された物質によって Fig.3 FITC-HT の細胞内局在性の検討 リソソームへの局在性 細胞内局在性が異なることを示唆してお り 本来の物質の細胞内局在性を反映 Caco-2 細胞に FITC-HT を 0 250µM 添加し 24 時間反 応後 Lyso Tracker 赤色 及び Hoechst33342 青色 で染色し 共焦点レーザー顕微鏡で観察した していることは十分考えられる 3 CLEM 法による蛍光標識オリーブ葉ポリフェノールの細胞内追跡 本結果より得られた FITC-HT のリソソームへの局在が リソソームの内側に局在しているのか 外側の部分に局在しているのかを判別することはできない それは 光学顕微鏡観察では 解像度が 200μm であることから考えると 正確に区別することはできないためである また 光学顕微鏡レベルで の 染色技法では リソソーム以外の小器官も染めてしまうアーチファクトも考えられ 電子顕微鏡観察に よって構造的にリソソームと判定することが最も確実である そこで CLEM 法での観察を試みた その 4
5 結果 完全に精細な画像とは言えないが リソソームに局在している FITC-HT の画像を得ることが できた ただ まだ予備的結果にとどまっているので より詳細な条件検討を行いつつ 精細な画像化に努め ていきたいと考えている 結 語 本研究の最大の目的は 同一細胞を用いて光学顕微鏡観察と透過型電子顕微鏡観察を組み合わ せて観察する光学 - 電子線相関顕微観察法 Correlative Light Electron Microscopy CLEM 法 で 食品の機能性成分の細胞内動態解析を行うことができるようにすること である 具体的には オリーブ葉ポリフェノールであるヒドロキシチロソールに着目し 大腸癌由来培養細胞であ るCaco-2 細胞に及ぼす影響を検討するとともに 蛍光標識化したヒドロキシチロソールを用い 細胞内 動態の追跡を試みた その結果 ヒドロキシチロソールが Caco-2 細胞の細胞死を誘導すること そのメカニズムがアポトー シス オートファジーの両機構が関与している可能性を見出した また ヒドロキシチロソールの蛍光標識 化に着手し 合成に成功した この分子の Caco-2細胞内での局在性を検討したところ 一部リソソーム に局在することを見出した また プリミティブな画像ながら CLEM 画像の取得にも成功した 近年 質量分析技術が飛躍的に進展し 質量顕微鏡なども登場し 特定分子の挙動を追跡すること は可能になってきたものの 解像度の問題や 生細胞のモニタリングはできないなどの欠点がある この ことを踏まえると 蛍光標識機能性食品成分を用いた CLEM 法は 生細胞での動的挙動を追跡するこ とも可能であり 機能性食品成分の新規機能性を評価するうえで 有用であると考えている 本結果は このことを証明する端緒を開いたものと考える 謝 辞 本研究を遂行するにあたり 公益財団法人アサヒグループ学術振興財団の助成を賜りましたことを 深謝いたします 引用文献 1 Kobayashi K, Cheng D, Huynh M, Ratinac KR, Thordarson P, Braet F. Imaging fluorescently labeled complexes by means of multidimensional correlative light and transmission electron microscopy: a practical approach. Methods Cell Biol, 111, 1-20 (2012) 2 K.A. Jahn, D.A. Barton, K. Kobayashi, K.R. Ratinac, R.L. Overall, F. Braet. Correlative microscopy: providing new understanding in the biomedical and plant sciences. Micron, 43, (2012) 5
6 3) Al-Azzawie HF, Alhamdani MS., Hypoglycemic and antioxidant effect of oleuropein in alloxan-diabetic rabbits. Life Sci.,78 (12): (2006) 4) Zarzuelo A, Duarte J, Jiménez J, González M, Utrilla MP., Vasodilator effect of olive leaf. Planta Med. 57: (1991) 5) Somova LI, Shode FO, Ramnanan P, Nadar A., Antihypertensive, antiatherosclerotic and antioxidant activity of triterpenoids isolated from Olea europaea, subspecies africana leaves., J Ethnopharmacol. 84: (2003) 6) 小林謙一 : 新しいアプローチから見た食品機能性成分の動態研究, 日本食生活学会誌 (2010) 7) 小林謙一 夏川大 尾形明日美 高田恭輔 室田友紀子 綿谷鮎子 寺本明子 牧恒雄 山本祐司 田所忠弘 : 爆砕処理オリーブ葉粉末による脂肪吸収および胆汁酸再吸収の促進効果, 日本食生活学会誌, 20, (2009) 8) Oi-Kano Y, Kawada T, Watanabe T, Koyama F, Watanabe K, Senbongi R, Iwai K; Oleuropein, a phenolic compound in extra virgin olive oil, increases uncoupling protein 1 content in brown adipose tissue and enhances noradrenaline and adrenaline secretions in rats. J Nutr Sci Vitaminol (Tokyo). 54(5): (2008) 9) Han DW, Matsumura K, Kim B, Hyon SH, Time-dependent intracellular trafficking of FITCconjugated epigallocatechin-3-o-gallate in L-929 cells. Bioorg Med Chem. 16(22): (2008) 6
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日本消化器外科学会雑誌第29巻第9号
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106(18) 原 使 用 した 測 定 部 位 は 期 門 穴相 当部 位 の 表 皮 上 及 び 真 皮 下 と し, 表 皮上 で は 艾 柱 の 直 下 に 熱 電 対 先 端 を露 出 し固 定 した 真 皮 下 で は施 灸部 より10mm 下 方 を切 開 剥 離 し, 施 灸 部 直
106(18) 原 使 用 した 測 定 部 位 は 期 門 穴相 当部 位 の 表 皮 上 及 び 真 皮 下 と し, 表 皮上 で は 艾 柱 の 直 下 に 熱 電 対 先 端 を露 出 し固 定 した 真 皮 下 で は施 灸部 より10mm 下 方 を切 開 剥 離 し, 施 灸 部 直 下 に 熱 電 対 先端 が 届 くよ うに挿 入 した 熱 電 対 の 出 力 は 温 度 モ ジュ
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Arts and Sciences X The formulation of femoral heard measurement corrected enlargement ratio using hip joints X-ray Imaging 1 2 1 1 1 2 Key words: Bipolar Hip Arthroplasty (BHA) Preoperative planning Enlargement
29 jjencode JavaScript
Kochi University of Technology Aca Title jjencode で難読化された JavaScript の検知 Author(s) 中村, 弘亮 Citation Date of 2018-03 issue URL http://hdl.handle.net/10173/1975 Rights Text version author Kochi, JAPAN http://kutarr.lib.kochi-tech.ac.jp/dspa
II
No. 19 January 19 2013 19 Regionalism at the 19 th National Assembly Elections Focusing on the Yeongnam and Honam Region Yasurou Mori As the biggest issue of contemporary politics at South Korea, there
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Examination of the lecture by the questionnaire of class evaluation -Analysis and proposal of result at the first term of fiscal year - Kazuo MORI, Tukasa FUKUSHIMA, Michio TAKEUCHI, Norihiro UMEDA, Katuya
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ISSN 0916-3328 東京大学アイソトープ総合センター VOL. 37 NO. 4 2007. 3. 26 アイソトープ総合センターの将来展望 40 18 18 20 3 800 1/3 1300 14 18 20 3 19 2 生きた細胞内の分子過程を 時間 空間計測する蛍光プローブの開発 1. はじめに Fura-2 Fura-2 198 1, 2 3, 4 2. 生体脂質分子の機能とその分析
平成１４年度 本態性多種化学物質過敏状態の調査研究 研究報告書
226 227 µ 228 Ω 229 230 0 ppb 2000ppb DG subthreshold (µa) 91 ± 59 86 ± 68 max stim. (µa) 755 ± 287 n=37 678 ± 300 max PS (mv) 8.7 ± 3.9 7.7 ± 4.3 n=61 CA1 subthreshold (µa) 36 ± 26 32 ± 13 max stim. (µa)
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Review The Secret to Healthy Long Life Decrease in Oxidative and Mental Stress My motto is Health is not all. But nothing can be done without health. Health is the most important requisite for all human
原 著 放射線皮膚炎に対する保湿クリームの効果 耳鼻科領域の頭頸部照射の患者に保湿クリームを使用して * 要旨 Gy Key words はじめに 1 70Gy 2 2 QOL
原 著 放射線皮膚炎に対する保湿クリームの効果 耳鼻科領域の頭頸部照射の患者に保湿クリームを使用して * 1 2 1 2 要旨 2011 1 2013 9 33 0 1 6 16 17 60Gy Key words はじめに 1 70Gy 2 2 QOL 3 4 2014 6 16 2015 4 17 連絡先 359 0042 3 2 Phone 04 2995 1511 Fax 04 2995 0633
Web Stamps 96 KJ Stamps Web Vol 8, No 1, 2004
The Journal of the Japan Academy of Nursing Administration and Policies Vol 8, No 1, pp 43 _ 57, 2004 The Literature Review of the Japanese Nurses Job Satisfaction Research Which the Stamps-Ozaki Scale
1) Asa, S. L., et al.: Immunohistochemical localization of neuron-specific enolase in the human hypophysis and pituitary adenoma, Arch. Pathol. Lab. Med., 108: 40 `43, 1984. 2) Chi, B. H. and Kim, R. C.:
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47 Electrical Discharge Truing for Electroplated Diamond Tools Koji Watanabe Hisashi Minami Hatsumi Hiramatsu Kiyonori Masui (211 7 8 ) Electroplated diamond tools are widely used for grinding because
第６号－２／８）最前線（大矢）
最前線 免疫疾患における創薬標的としてのカリウムチャネル 大矢 進 Susumu OHYA 京都薬科大学薬理学分野教授 異なる経路を辿る １つは マイトジェンシグナル 1 はじめに を活性化し 細胞増殖が促進されるシグナル伝達経 路 図１A 右 であり もう１つはカスパーゼやエ 神 経 筋 の よ う な 興 奮 性 細 胞 で は カ リ ウ ム ンドヌクレアーゼ活性を上昇させ アポトーシスが K
創薬に繋がる V-ATPase の構造 機能の解明 Towards structure-based design of novel inhibitors for V-ATPase 京都大学医学研究科 / 理化学研究所 SSBC 村田武士 < 要旨 > V-ATPase は 真核生物の空胞系膜に存在す
創薬に繋がる V-ATPase の構造 機能の解明 Towards structure-based design of novel inhibitors for V-ATPase 京都大学医学研究科 / 理化学研究所 SSBC 村田武士 < 要旨 > V-ATPase は 真核生物の空胞系膜に存在するプロトンポンプである 複雑なサブユニット構造からなる超分子複合体であり 親水性の触媒頭部部分 (V1
鹿大広報149号
No.149 Feb/1999 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 Learned From Japanese Life and Experiences in Kagoshima When I first came to Japan I was really surprised by almost everything, the weather,
EQUIVALENT TRANSFORMATION TECHNIQUE FOR ISLANDING DETECTION METHODS OF SYNCHRONOUS GENERATOR -REACTIVE POWER PERTURBATION METHODS USING AVR OR SVC- Ju
EQUIVALENT TRANSFORMATION TECHNIQUE FOR ISLANDING DETECTION METHODS OF SYNCHRONOUS GENERATOR -REACTIVE POWER PERTURBATION METHODS USING AVR OR SVC- Jun Motohashi, Member, Takashi Ichinose, Member (Tokyo
This paper is going to take up the "Cultural history of dishes" as a part of the "Ancient pulley and the Korean people series II". In the ancient times the pulley was used to make basically dishes for
Isotope News 2017年10月号 No.753
Ishioka Noriko ₁ はじめに RI RI RI RI ₂ 悪性褐色細胞腫と治療の現状 3,000 90 I meta- Iiodo-benzylguanidine I-MIBG 1 ₃ α 線の標的アイソトープ治療 2016 6 223 RaCl2 223 Ra 223 Ra 14 表 1 α 線と β 線の違い -decay (42%) Eα = 5.9 MeV At 7.2 h EC
[2] 1. 2. 2 2. 1, [3] 2. 2 [4] 2. 3 BABOK BABOK(Business Analysis Body of Knowledge) BABOK IIBA(International Institute of Business Analysis) BABOK 7
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32 (2015 ) [2] Projects of the short term increase at present. In order to let projects complete without rework and delays, it is important that request for proposals (RFP) are written by reflecting precisely
浜松医科大学紀要
On the Statistical Bias Found in the Horse Racing Data (1) Akio NODA Mathematics Abstract: The purpose of the present paper is to report what type of statistical bias the author has found in the horse
抑制することが知られている 今回はヒト子宮内膜におけるコレステロール硫酸のプロテ アーゼ活性に対する効果を検討することとした コレステロール硫酸の着床期特異的な発現の機序を解明するために 合成酵素であるコ レステロール硫酸基転移酵素 (SULT2B1b) に着目した ヒト子宮内膜は排卵後 脱落膜 化
論文の内容の要旨 論文題目 着床期ヒト子宮内膜におけるコレステロール硫酸の発現調節機序及び機能の解析 指導教員武谷雄二教授 東京大学大学院医学系研究科 平成 15 年 4 月入学 医学博士課程 生殖 発達 加齢医学専攻 清末美奈子 緒言 着床とは 受精卵が分割し形成された胚盤胞が子宮内膜上皮へ接着 貫通し 子 宮内膜間質を浸潤して絨毛構造を形成するまでの一連の現象をいう 胚盤胞から分化した トロフォブラストが浸潤していく過程で
Microsoft Word - 00_1_表紙.doc
7 20 20089 002 005 019 015 029 038 041 042 047 051 071 085 088 14 5 120 50cm 700 150 Abstract This ecological project was conducted for the purpose of understanding the present and the biological diversity
( 続紙 1 ) 京都大学 博士 ( 薬学 ) 氏名 大西正俊 論文題目 出血性脳障害におけるミクログリアおよびMAPキナーゼ経路の役割に関する研究 ( 論文内容の要旨 ) 脳内出血は 高血圧などの原因により脳血管が破綻し 脳実質へ出血した病態をいう 漏出する血液中の種々の因子の中でも 血液凝固に関
Title 出血性脳障害におけるミクログリアおよびMAPキナーゼ経路の役割に関する研究 ( Abstract_ 要旨 ) Author(s) 大西, 正俊 Citation Kyoto University ( 京都大学 ) Issue Date 2010-03-23 URL http://hdl.handle.net/2433/120523 Right Type Thesis or Dissertation
untitled
ORYZA POLYAMINE ORYZA POLYAMINE -P -PC -LC 1. Ver.1.0 MM ver. 1.0MM 1) Roseeuw D.I. et al., Epidermal keratinocytes actively maintain their intracellular polyamine levels. Cell Tissue Kinet. 16, 493-504
研究成果報告書(基金分)
様式 C-19 F-19 Z-19 CK-19( 共通 ) 1. 研究開始当初の背景 (1) 近年 歯科医学において bisufeno-eu-a, diglycidyl metha crylate (bis-gma) から得られるレジンシーラントの添加物として環境ホルモンの bisphenol-a を使用している そのため 生体に及ぼす影響が問題視されている 同様の添加物である Nonylphenol
;~ (Summary) The Study on the Effects of Foot Bathing on Urination Kumiko Toyoda School of Human Nursing, University of Shiga Prefecture Background Foot bathing is one of the important nursing care for
2 14 The Bulletin of Meiji University of Integrative Medicine 7 8 V ,15 16,17 18,19 20,21 22 Visual analogue scale VAS Advanced trai
14 1-11 2015 20 23 2 Visual analogue scale 15 10 P 0.001 P 0.01 Key words acupuncture static visual acuity dynamic visual acuity Advanced trail making test fliker fusion frequency Received October 30;
Mikio Yamamoto: Dynamical Measurement of the E-effect in Iron-Cobalt Alloys. The AE-effect (change in Young's modulus of elasticity with magnetization
Mikio Yamamoto: Dynamical Measurement of the E-effect in Iron-Cobalt Alloys. The AE-effect (change in Young's modulus of elasticity with magnetization) in the annealed state of iron-cobalt alloys has been
No160金澤.indd
金澤成行 大阪大学大学院医学系研究科形成外科学博士課程 ( 現大阪大学大学院医学系研究科形成外科学助教 ) 活性酸素 フリーラジカルは生命を維持するために必要であるが 様々な物質に対して非特異的な化学反応をもたらすために その有害性が近年指摘されている 細胞内の酵素で分解しきれない余分な活性酸素は癌や生活習慣病など様々な病気の原因であるといわれている また 活性酸素の増加が 細胞を傷つけ癌を増加させるのみでなく
Hiroshi OSAWA A Study of Nutrition and Behavior With Particular Reference to Functional Hypoglycemia In order to understand causes of various kinds of problem behavior in the present time, it is assumed
Physical and Psychological Effects of Stressors in Female College Students Reizou Mita*1, Konosuke Tomabechi*1, Isao Yamaguchi*1, Naoko Soeno*1, Shuhe
Physical and Psychological Effects of Stressors in Female College Students Reizou Mita*1, Konosuke Tomabechi*1, Isao Yamaguchi*1, Naoko Soeno*1, Shuhei Kobayashi*2, Mamoru Nishimuta*2, Michiyuki Shimizu*3,
189 2015 1 80
189 2015 1 A Design and Implementation of the Digital Annotation Basis on an Image Resource for a Touch Operation TSUDA Mitsuhiro 79 189 2015 1 80 81 189 2015 1 82 83 189 2015 1 84 85 189 2015 1 86 87
ABSTRACT The movement to increase the adult literacy rate in Nepal has been growing since democratization in 1990. In recent years, about 300,000 peop
Case Study Adult Literacy Education as an Entry Point for Community Empowerment The Evolution of Self-Help Group Activities in Rural Nepal Chizu SATO Masamine JIMBA, MD, PhD, MPH Izumi MURAKAMI, MPH Massachusetts
Title 近江湖北の神事をめぐる心理臨床学的研究 Author(s) 井上, 明美 Citation 京都大学大学院教育学研究科紀要 (2009), 55: 267-279 Issue Date 2009-03-31 URL http://hdl.handle.net/2433/72722 Right Type Departmental Bulletin Paper Textversion publisher
320 Nippon Shokuhin Kagaku Kogaku Kaishi Vol. /., No.1, -,* -,/ (,**1) 8 * ** *** * ** *** E#ect of Superheated Steam Treatment on the Preservation an
320 Nippon Shokuhin Kagaku Kogaku Kaishi Vol. /., No.1, -,* -,/ (,**1) 8 * ** *** * ** *** E#ect of Superheated Steam Treatment on the Preservation and Sensory Characteristics of Buckwheat Noodles Kazuhiro
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Kanji Vocabulary Development for Intermediate and Advanced Learners Kano, Chieko In recent Japanese language teaching, a communicative approach based on the functions and needs of actual situations is
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Study on Application of the cos a Method to Neutron Stress Measurement Toshihiko SASAKI*3 and Yukio HIROSE Department of Materials Science and Engineering, Kanazawa University, Kakuma-machi, Kanazawa-shi,
Jpn.J.Leprosy 67, (1998)
Jpn.J.Leprosy 67,287-291(1998) Fig.1. Macroscopic appearance of the cultured slides stained by the Ziehl-Neelsen method. Up to bottom: kept at 4 C, 18 weeks, cultured for 6 weeks, 8 weeks, 10 weeks, 12
関係があると報告もされており 卵巣明細胞腺癌において PI3K 経路は非常に重要であると考えられる PI3K 経路が活性化すると mtor ならびに HIF-1αが活性化することが知られている HIF-1αは様々な癌種における薬理学的な標的の一つであるが 卵巣癌においても同様である そこで 本研究で
( 様式甲 5) 氏 名 髙井雅聡 ( ふりがな ) ( たかいまさあき ) 学 位 の 種 類 博士 ( 医学 ) 学位授与番号 甲 第 号 学位審査年月日 平成 27 年 7 月 8 日 学位授与の要件 学位規則第 4 条第 1 項該当 Crosstalk between PI3K and Ras pathways via 学位論文題名 Protein Phosphatase 2A in human
On the Wireless Beam of Short Electric Waves. (VII) (A New Electric Wave Projector.) By S. UDA, Member (Tohoku Imperial University.) Abstract. A new e
On the Wireless Beam of Short Electric Waves. (VII) (A New Electric Wave Projector.) By S. UDA, Member (Tohoku Imperial University.) Abstract. A new electric wave projector is proposed in this paper. The
箱根の遊園地・観光鉄道創設を誘発した観光特化型“不動産ファンド”
Isao Ogawa / / 1 2 3 1 36.81.1 45 p743 8 20 15 29 3 p54 3 357 18 1 4 45 6 52 11 5 1 23 3 122 2011 spring / No.387 4 5 6 I M40 p439 p48 37 M37.1.1R 6 R 36 39 41 5 42 8 43 6 2 12 15 4 14 41 4 47 53 61 63
Ⅱ 方法と対象 1. 所得段階別保険料に関する情報の収集 ~3 1, 分析手法
67 論文 要旨 : 1507 キーワード : Ⅰ 緒言 65 2014 89 5 2 3 5 6 2 5 6 3 4 3 4 2006 2015 9 9 68 2018. 3 2015 Ⅱ 方法と対象 1. 所得段階別保険料に関する情報の収集 6 2015 7 2016 2 ~3 1,507 2. 分析手法 69 3 3 3 A B C 3 A 4 1 1 2 2 2014 2014 2014 5
０８０１３９１，繊維学会ファイバ１２月号／報文－０１－西川
Pattern Making Method and Evaluation by Dots of Monochrome Shigekazu Nishikawa 1,MarikoYoshizumi 1,andHajime Miyake 2 1 Miyagi University of Education, 149, Aramaki-aza-Aoba, Aoba-ku, Sendai-shi, Miyagi
untitled
() No.4 2006 pp.50-61 1 1 ( 020-0193 152-52) 2004 2004 11 737 364 Yahoo! 35%2004 10% 39% 12%2003 15% 21% 2004 : Victoria(2001) 1989 Loma Prieta ( 2004) (disaster subculture)( 19972000 ) (2004)1997 7 10
外来化学療法を受けるがん患者のケアプログラム試案の作成 患者の困難や苦悩とニーズに焦点を当てて 1 2 2 Abstract A purpose of this study is to develop the tentative care program of cancer out-patients undergoing chemotherapy. We did the literature reviews
Fundamental Study on the SOX Gas Sensor Utilizing Beta-Alumina with Sputtered Praseodymium Oxide Thin Films by Shinya YAO1*, Kenji MIYAGAWA1, Shigeru
Fundamental Study on the SOX Gas Sensor Utilizing Beta-Alumina with Sputtered Praseodymium Oxide Thin Films by Shinya YAO1*, Kenji MIYAGAWA1, Shigeru IIJIMA2 and Zensaku KOZUKA1 1. Faculty of Engineering,
学位論文内容の要旨 Abstract Background This study was aimed to evaluate the expression of T-LAK cell originated protein kinase (TOPK) in the cultured glioma ce
はやしともひで 氏名林智秀 学位の種類博士 ( 医学 ) 学位記番号 富生命博甲第 92 号 学位授与年月日 平成 29 年 9 月 28 日 専攻名認知 情動脳科学専攻 学位授与の要件 富山大学学位規則第 3 条第 3 項該当 学位論文題目 Impact of T-LAK cell originated protein kinase (TOPK) expression on outcome in
G
1 2 47 1992 1996 1997 1999 2003 G 2008 3 4 1960 5 1970 48 1946 1987 1 4 6 7 1993 238 49 1960 50 8 9 1995 1972 51 10 52 1947 1995 11 30 1990 53 11 12 1996 1 2004 10 54 1990 1970 13 1970 1970 1972 55 1970
[PDF] 蛍光タンパク質FRETプローブを用いたアポトーシスのタイムラプス解析
![[PDF] 蛍光タンパク質FRETプローブを用いたアポトーシスのタイムラプス解析](/thumbs/94/118065377.jpg "[PDF] 蛍光タンパク質FRETプローブを用いたアポトーシスのタイムラプス解析")
ApplicationNote Vol. BioStation ID Time-Lapse Analysis of Apototic Cells by FRET-based indicator 蛍光タンパク質 FRET プローブを用いたアポトーシスのタイムラプス解析 サンプル提供 : 理化学研究所脳科学研究センター宮脇敦先生 はじめに Fluorescence Resonance Energy Transfer
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上原記念生命科学財団研究報告集, 25 (2011) 86. 線虫 C. elegans およびマウスをモデル動物とした体細胞レベルで生じる性差の解析 井上英樹 Key words: 性差, ストレス応答,DMRT 立命館大学生命科学部生命医科学科 緒言性差は雌雄の性に分かれた動物にみられ, 生殖能力の違いだけでなく形態, 行動などそれぞれの性の間でみられる様々な差異と定義される. 性差は, 形態や行動だけでなく疾患の発症リスクの男女差といった生理的なレベルの差異も含まれる.
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62 3 2016 253 272 1921 25 : 27 8 19 : 28 6 3 1921 25 1921 25 1952 27 1954 291960 35 1921 25 Ⅰ 0 5 1 5 10 14 21 25 34 36 59 61 6 8 9 11 12 16 1921 25 4 8 1 5 254 62 3 2016 1 1938.8 1926 30 1938.6.23 1939.9
博士学位申請論文内容の要旨
氏 名 とみたりょうこ冨田陵子 学位の種類 博士 ( 薬学 ) 報 告 番 号 乙第 7 号 学位授与の日付 平成 年 月 5 日 学位授与の要件 学位規則第 4 条第 項該当 ( 論文博士 ) 学位論文題目 がん細胞に対するアミノ酸メタボロミクスの開発とその応用 論文審査委員 ( 主査 ) 福岡大学 教授 藤岡稔大 ( 副査 ) 福岡大学 教授 能田均 福岡大学 准教授 吉田秀幸 福岡大学 准教授
生体ナノテク第4回_穴なし
!!!!!!!!!!!! TEM! SEM, AFM! 参考文献 最先端材料システム One Point! イメージング (共立出版) 実験がうまくいく 蛍光 発光試薬の 選び方と使い方! (羊土社) 非侵襲 可視化 技術ハンドブック (NTS) 講義と実習 生細胞蛍光 イメージング (共立出版) よくわかる生物電子 顕微鏡技術 (共立出版) (in vivo) - /! - MRI! - X! in
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29 31 38 2008 31 1) 2) 2) 3) 2) 1) 2008 302008 12 Activities of Daily Living ADL ADL 42 ADL ADL 1990 QOL Quality of Life QOL 1 QOL // 2 Activity of Daily Living ADL Performance Status PS ADL 3 1) 2) 3)
〈論文〉英語学習辞書における二重母音と三重母音の発音表記の異同
Abstract For learners who aim at a clear and logical understanding of the English pronunciation system, phonetic symbols provided in learners' English dictionaries can be a powerful tool if they are properly
By Kenji Kinoshita, I taru Fukuda, Taiji Ota A Study on the Use of Overseas Construction Materials There are not few things which are superior in the price and the aspect of the quality to a domestic
西川町広報誌NETWORKにしかわ2011年1月号
NETWORK 2011 1 No.657 平 成 四 年 四 の 開 校 に 向 け て 家 庭 教 育 を 考 え よ う! Every year around the winter holiday the Japanese custom of cleaning out your office space is performed. Everyone gets together and cleans
1) T. L. Cottrel, A. J. Matheson, Trans. Farad. Soc., 58, 2336(1962). 2) E. N. Chesnokov, V. N. Panfilov, Teor. Eksp. Khimiya, 17, 699(1981). 3) M. Ko
1) T. L. Cottrel, A. J. Matheson, Trans. Farad. Soc., 58, 2336(1962). 2) E. N. Chesnokov, V. N. Panfilov, Teor. Eksp. Khimiya, 17, 699(1981). 3) M. Koshi, M. Yoshimura, K. Koseki, H. Matsui, "Photoacoustic
4.1 % 7.5 %
2018 (412837) 4.1 % 7.5 % Abstract Recently, various methods for improving computial performance have been proposed. One of these various methods is Multi-core. Multi-core can execute processes in parallel