Table 1 Plasmid profiles, drugs resistant and phage types of S. Enteritidis food poisoning and egg solution *: in Kumamoto City.
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- たしろう ぜんじゅう
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1 Key words: Salmonella Enteritidis, tetracycline resistance
2 Table 1 Plasmid profiles, drugs resistant and phage types of S. Enteritidis food poisoning and egg solution *: in Kumamoto City.
3 1354 Table 本 田 れ い子 他 2 types Plasmid profiles, and colony drugs hybridization sporadic cases resistant, phage of S. Enteritidis with diarrhea *: On isolation resistant, after harboring five months both patients 9kb they, these strains 3kb s. and changed to TC were TC However, sensitive, は 耐 性 の ま ま で あ っ た.そ こ で,こ れ らの株 の profileを 比 較 した と こ ろ,TC感 はTC耐 midを 性 株 が 保 有 し て い た 約9と3kbのplas- にTC耐 れ ら の 脱 落 し たの lysateを こ で,こ のTC耐 抽 出 し,TC感 itidisとe.colik12 性 株 か らcleared 受 性 と な っ たS.EnterC600のtransformation実 験 を 行 い,TC耐 性 と な っ たtransformantsのplas調 べ た.そ profileを のTC耐 と9kbのを の 結 果,TC感 を 保 有 し,TC耐 性 と な っ た(Fig.3).し midがtc耐 性 遺 伝 子 を 保 持 し,大 の 実 験 か ら約9kbのplas腸 菌 にお い て も 形 質 発 現 で き る こ と が わ か っ た.ま TCr た, 約9kbの れ ら の2つ of S. Enteritidis 約60 保 有 し て い た(Fig.2).ま た が っ て,こ profiles 受 性S 性transformantsは E.coliK12C600のtransformantsも いずれか mid Enteritidis株 between の 性 遺 伝 子 が 保 持 さ れ て い る こ と が 強 く示 唆 さ れ た.そ Comparison 受性 株 脱 落 し て い る こ とが 判 っ た(Fig.1).こ こ とか ら,こ Fig. 1 losing of s. and た,こ TO derivative 1:LN marker A Hind 1 2:ccc marker pbr 322 (4.4kb) 3:ccc marker M13mp18(7.3kb) 4:ccc marker M13KU(8.3kb) 5:TErstrain.of S.Enteritidis(strain no.40) 6:TCs derivative (strain no.40d) 7:ccc marker 11156(with90,60 and 1.4kb ) LN: Linear CCC: covalently closed circular 感 染 症 学 雑誌 第68巻 第11号 の
4 S.EnteritidisのTC耐 Fig. 2 To Transformation determine Enteritidis itidis which recipients (strain of 9kb were 1355 性Plasmid carries with TCs S. Enteritidis a gene transformed encoding TC with the cleared no. 40), and the profiles strains resistance, lysate TO S. of TC' S. Enter- of the TC` transformants were analyzed. 1:LN marker i Hind :TC' transformants 13-14:TC' S.Enteritidis recipients (strain no.40d) 15:TC` S.Enteritidis parent strain, which was for transformation. (strain no. 40) Fig. 3 To determine recipients Transformation which was transformed 40), and the of 9kb carries with cleared profiles with TCs E. coli strain a gene encoding lysate TC resistance, of the TC' transformants were 1:LN 2-14: marker ƒé E.coli 16:TCr S.Enteritidis of TCr recipient which for Stability parent transformation. marker (strain Z Hind profileは4種 類 の タ イ プ に 分 類 さ れ,タ 類 さ れ た.こ の う ち タ イ プ1の8株 で,約60kbの み を 保 有 し,約9kbのは プ3の い た.こ イ プ2と3は ン 加LB broth保 存 菌 液 に つ い て 調 べ た と こ ろ, 平 板 に 発 育 し た 集 落 数 は 総 集 落 数 と比 較 し て10-2か ら10-3の 割 合 で 減 少 し て い た(Table し た が っ て,通 3). 常 の 遺 伝 子 保 持 の た め に 用 い られ た.タ イ プ4に で,残 た が,約9kbのは たS.Enteritidis37株 profile,phage型 平成6年11月20日 の 薬 剤 感 受 性, 別 に つ い てTable2に 示 し た. は7a型 はTC耐 であっ 性 で,約 保 有 し て い な か っ た. 保 有 し,TC耐 1に 示 し た.北 は1 保 有 して い は 型 別 出 来 な か っ た.し のplaSlnidを れ たS.Enteritidisに の散 発 事 例 か ら分 離 され り の1株 分 類 さ れ た1株 以 外 で 発 生 し た 食 中 毒3事 熊 本 市 で 発 生 し た37件 保 有 して れ ら の タ イ プ に 属 す る 株 のphage型 の 脱 落 が 生 じ る こ とが わ か っ た. 侵淫状況 の うちタイ 株 は さ ら に 約3kbのも 事 例 由 来 株 の 約76%(28/37)を 性の 保 あっ 性 で,約60及 200,60,2.5,2,1.5kbのを phage型 受性 は3,4,6,8で 保 有 し て い た.そ て い る 保 存 法 に お い て も か な り の 頻 度 で 2)TC耐 が分 はTC感 い ず れ もTC耐 株 を 除 く27株 が1型 TC加 no.40) II は 各 々8株,13株,15株,1株 び9kbのを リセ リ イ プ1 4に た.タ 安 定 性 に つ い て,-80 20%グ strain, was 有 し て い な か っ た.phage型 の no. Hind III 15:TCs 17:LN 3 (strain analyzed. TCrtransformants Table TCs E. coli of TCr S. Enteritidis た が っ て,約9kb 性 で あ っ た株 は散 発 占 め て い た.熊 本 例 及 び 液 卵 か ら検 出 さ つ い て の 調 査 結 果 をTable 九 州,福 岡,千 葉,で 発 生 した食 中 毒 事 例 由 来 株 と 液 卵 由 来 株 の prpfileは 各 々 タ イ ブ3,タ イ プ2で, イ プ1,タ イ プ2,タ
5 1356 本 田れ い 子 他 福 岡 株 を 除 い て い ず れ もSM,TC耐 型 は1で 性 で,phage 性 を 示 し た も の が25株,陰 あ っ た. 今 回,散 発 事 例 か ら 分 離 さ れ た 株 のTC耐 我 々 が 集 団 事 例 か ら 確 認 し たTC耐 性 と 性 性transformantsのTC耐 性plasrnidをagar- ら抽 出 し た も の をprobeと し,ジ ゴ キ シ ゲ ニ ン で ラ ベ ル 後,colonyhybridizationを た(Table2とFig.4).散 TC耐 性 の29株 行 っ 発 事 例 か ら分 離 さ れ た の う ちcolonyhybridizationで onyhybridizationで 30)に と の 関 係 を 調 べ る た め に,SEnteritidisのTC耐 osegelか 性 が4株 離 当 初,約9kbのを 陽 で あ っ た.分 保 有 し て い た が,col陰 性 だ っ た3株(no.21,27, つ い て 再 度profileとTC耐 性 を確 認 し た 結 果,い ず れ も既 に陰 性 に変 化 して い る こ とが 判 っ た.残 り の1株 はTC耐 こ の サ イ ズ のを で あ っ た.実 性 で あ っ た が, も た な い タ イ プ4の 験 に 使 用 し た こ れ ら の37株 リ セ リ ン加LBbrothで.80 に5カ た 株 で あ っ た.約9kbのを イ プ1と タ イ プ4の9株 Colony hybridization sporadic 9kb TCr Each Table number test of S. Enteritidis cases with diarrhea hybridization陽 indicates the strain number in 2. 性 で あ っ た. 性 で あ っ た.こ の こ と か ら散 発 事 kbのは 保 有 す る 約9 集 団 事 例 のSEnteritidisか 分 離 さ れ たTC耐 性と が 強 く示 唆 さ れ た.そ ernhybridizationを の 可 能 性 を さ らに じprobeを 用 い てSouth- 行 っ た(Fig.5).散 受 性3株,耐 ら 無 作 為 に 選 ん だ6株 保 有 し な い タ イ プ4の1株) と,北 九 州,福 岡,千 葉 で発 生 した 食 中 毒 由 来 の 各1株 及 び 液 卵 由 来1株 か ら 抽 出 し た に つ い て 調 べ た.positivecontrolと EnteritidisのTC耐 約9kbのは Southern hybridization patients with diarrhea Each number indicates with s of S. Enteritidis in sporadic and outbreak the strain number in Table し てS 性transformantに の 結 果,約9kbのの 強 く反 応 し た.し Fig. 5 発事例 か 性7株(約9kbの を 保 有 す る タ イ プ2と3か と こ のplasrnidを ら 同 じで あ る こ と こ で,こ 詳 し く調 べ る た め に,同 調 べ た.そ 性 の 有 す る株 の み が 例 か ら 分 離 さ れ た.S.Enteritidisが ら のTC感 月程保 存 し に つ い て は,TC耐 す な わ ち 約9kbの保 was used as a probe. は20%グ 保有 しないタ 有 無 に か か わ ら ずhybridization陰 Fig. 4 株 た が っ て,こ っい て も バ ン ドが れ ら の株 が 有 す る 集 団 事 例 か ら分 離 さ れ たTC 1 and 2. 感 染 症学 雑 誌 第68巻 第11号
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7 8) Lederberg, E. M. & Cohen, S. N.: Transformation of Salmonella typhimurium by deoxyribonucleic acid. J. Bacteriol., 119: 1072 Tetracycline-Resistant Plasmid of Salmonella Enteritidis Isolated in Kumamoto City Reiko HONDA Kumamoto Municipal Institute of Public Health Hatsumi TANIGUCHI Department of Microbiology, University of Occupational and Environmental Health We Salmonella choleraesuis subsp. choleraesuis serovar. Enteritidis (S. Enteritidis) a mass of cases which broke out in September, 1991 in Kumamoto City. The isolates were shown to hold s on which a tetracycline (TC)-resistant gene was located. The, about 9 kb in size, was capable of expressing the gene in Escherichia coli, unstable in S. Enteritidis and Escherichia coli. Thus in order to investigate the creeping prevalence of the TC-resistant in Kumamoto City and its spreading in other areas, the strains, a total of 41, including 37 isolates sporadic cases with diarrhea in Kumamoto City, 3 isolates 3 cases of food poisoning in Kitakyushu, Fukuoka and Chiba, and one strain egg solution in Kumamoto City, were examined by the hybridization test with this as a probe, as well as for their drug sensitivity and profile. As a result, 28 strains of 37 tested the sporadic cases, the strains food poisoning in Kitakyushu, Chiba and the one egg solution, all harbored the same 9 kb TC-resistant. From the above observations, it was assured that, at the time of investigation, July to September in 1992, the prevalence of S. Enteritidis in Kumamoto City was Predominated by its strain carrying the TC-resistant. Furthermore, considering the fact that the strain harboring this was also found in the food poisoning in Kitakyushu and Chiba, it was suggested that spreading of this strain was not restricted to localities and was also associated with Chicken eggs according to its detection the egg solution.
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