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あゆみいりぐら
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1 平成 2 年度厚生労働科学研究費補助金 ( 循環器疾患等生活習慣病対策総合研究事業 ) 日本人の食事摂取基準を改定するためのエビデンスの構築に関する研究 - 微量栄養素と多量栄養素摂取量のバランスの解明 - 主任研究者柴田克己滋賀県立大学教授 Ⅱ. 主任研究者の報告書 4. 慢性腎臓病患者 (Chronic Kidney Disease:CKD) の栄養調査 - 血中ビタミン濃度と尿中ビタミン排泄量 - 主任研究者柴田克己滋賀県立大学教授研究要旨低蛋白食を指示されている CKD 患者のビタミン栄養状態の把握するための第一歩として, 食事記録によるビタミン摂取量と血中ビタミン量および 24 時間畜尿による尿中ビタミン量を測定したので報告する.

2 A. 目的本研究では, 低蛋白食を指示されている慢性腎不全患者 (CKD) 患者に対し, 食事記録によるビタミン摂取量と血中ビタミン量および 24 時間畜尿による尿中ビタミン量を測定し,CKD 患者のビタミン栄養状態を把握することを目的とした. B. 方法 1. 被験者本研究に対して同意の得られた N 病院と O 病院に通院中の CKD 患者を対象とした. このうち, 低蛋白食事療法を指示されている患者であること, 健康食品やサプリメントなどを服用していないことを満たす患者 36 名 ( 男性 23 名女性 13 名 ) を対象とした. 調査期間は,27 年 2 月 ~28 年 5 月に行った. なお, 本研究は滋賀県立大学倫理審査委員会および名古屋共立病院並びに大野記念病院倫理審査委員会の承認を得て行ったものである. 2. 栄養素摂取量の算定栄養素摂取量調査の方法は, 食事記録法と写真撮影を併用し, さらに, 管理栄養士による聞き取り調査を行ことにより精度を高めた. その後, 五訂増補日本食品標準成分表に基づいた解析プログラムソフトにて栄養素摂取量を算出した時間尿の蓄尿対象者には, 来院日前日の起床後の 2 回目の尿から翌朝起床後の 1 回目の尿までを採尿し,24 時間尿とした. 対象者には, 尿の取りこぼしおよび取り忘れの有無を聞き取った. 24 時間尿の容量を測定し, 測定するまで- 2 で保存した. 4. 分析血中総 VB 1 濃度は, チアミン,TMP,TDP, 1) TTP の合計量とし,HPLC による分析に供した 2). 尿中 VB 1 量も HPLC により測定した 2). 血中総 VB 2 濃度は, リボフラビン,FMN, FAD の合計量とした 3). リボフラビン,FMN, FAD はルミフラビンに光分解し, このルミフラビン量を測定した. 尿中 VB 2 量の測定には, 尿をそのまま試料とし,HPLC による分析に供した 3). 血漿中ピリドキサールリン酸 (PLP) 濃度を HPLC により測定した 4). 尿中 VB 6 量として, ピリドキシン異化代謝産物である 4 ピリドキシン酸 (4-PIC) 量を HPLC により測定した 5). 血中総 Nam 濃度を定量するために, オートクレーブによって補酵素型ナイアシンを Nam に変換し,Nam を HPLC によって測定した 6). 尿中 Nam 代謝産物量は Nam,N 1 メチルニコチンアミド (MNA),N 1 -メチル-2-ピリドン-5-カルボキサミド (2-Py),N 1 -メチル -4-ピリドン-3-カルボキサミド (4-Py) の合計とした. 尿を HPLC 法に供し, 尿中 Nam,2-Py, 4-Py 各含量を測定した 6). 尿中 MNA 含量を HPLC 法で測定した 7). 血漿 FA 濃度の測定には,Lactobacillus plantarum, ATCC 814 を用いた微生物学的定量法に血漿を供した 8). 尿中 FA 量も同様に尿を微生物学的定量法に供した 8). 5. 統計処理数値はすべて平均 ± 標準偏差 (SD) で表した. 計算には GraphPad Software 社 (San Diego, CA, USA) の GraphPad Prism 4 を使用した. C. 結果 1. 対象者の特徴年齢は 64.9 ± 12.2 歳,BMI は 22.5 ± 2.5 kg/

3 m 2 であった. 日本人の GFR 推算式 9) を用いて糸球体ろ過量を算出した. 各病期における GFR は, 病期 3 (n=6)44.4 ± 6. ml/min/1.73 m2, 病期 4 (n=14) 2.3 ± 4. ml/min/1.73 m 2 病期 5 (n=16) 1.1 ± 2.5 ml/min/1.73 m 2, 平均 GFR は 19.8 ± 12.7 ml/min/1.73 m 2 であった. 臨床検査成績は,BUN/Cr 比は 13.4 ± 5.8 で低蛋白食事療法の遵守度は低かった. 血清中の総蛋白質 (TP) は 7.1 ±.4g/dL,Alb は 4.1 ±.3g/dL とたんぱく質の栄養障害は認められなかった. ヘモグロビン (Hb) は 1.9 ± 2. g/dl, ヘマトクリット (Ht) は 33.7 ± 4.4% と貧血の傾向を認めた.24 時間蓄尿から算出した蛋白摂取量は 41.8 ± 14.7 g/day, 食塩摂取量は 6.8 ± 2.9 g/day であった ( 表 1). 2. 食事摂取量調査表 2 に栄養素摂取量を示した. 医師から指示された栄養量は, 標準体重あたりエネルギー 31.7 ± 2.8 kcal/kg/day, たんぱく質.7 ±.1 g/kg/day, 食塩 6~7 g/day と緩やかな食事制限の指示であった. 食事調査から算出した栄養素摂取量は, エネルギー 3 ± 5 kcal/ kg /day, たんぱく質.8 ±.2 g/ kg /day, 食塩 5.7 ± 1.9 g であった. 3. ビタミン摂取量と血中尿中ビタミン排泄量各種ビタミン摂取量と尿中ビタミン排泄量および血中ビタミン濃度の関係を図 1 に示した. D. 健康危機情報特記する情報なし E. 研究発表 1. 発表論文なし 2. 学会発表 15 th international Congress of Dietetics September,8~11,28. F. 知的財産権の出願登録状況 ( 予定を含む ) 1. 特許予定なし 2. 実用新案登録なし 3. その他なし G. 引用文献 1. 科学技術庁資源調査会編. 日本食品成分表の改定に関する調査報告 - 五訂日本食品標準成分表 - 大蔵印刷局, 東京,2. 2. 福渡努, 鈴浦千絵, 佐々木隆造, 柴田克己. 代謝攪乱物質ビスフェノール A のトリプトファン-ニコチンアミド転換経路の攪乱作用部位. 食品衛生学雑誌 (24) 45, Ohkawa H, Ohishi N, Yagi, K. New metabolites of riboflavin appear in human urine. J Biol Chem (1983) 258, Rybak ME, Pfeiffer CM. Clinical analysis of vitamin B6: determination of pyridoxal 5'-phosphate and 4-pyridoxic acid in human serum by reversed-phase high-performance liquid chromatography with chlorite postcolumn derivatization. Anal Biochem (24) 333, Gregory JF 3 rd, Kirk JR. Determination of urinary 4-pyridoxic acid using high

4 performance liquid chromatography. Am J Clin Nutr (1979) 32, Shibata K, Kawada T, Iwai K. Simultaneous micro-determination of nicotinamide and its major metabolites, N 1 -methyl-2-pyridone-5- carboxamide and N 1 -methyl-3-pyridone-4- carboxamide, by high-performance liquid chromatography. J Chromatogr (1988) 424, 柴田克己. 高速液体クロマトグラフィーによる尿中 N 1 -メチルニコチンアミドの超微量定量方法. ビタミン (1987) 61, Aiso K, Tamura T. Trienzyme treatment for food folate analysis. Optimal ph and incubation time for α-amylase and protease treatment. J Nutr Sci Vitaminol (1998) 44, ( 社 ) 日本腎臓学会編,CKD 診療ガイド, 東京医学社,27.

5 表 1. 対象者の特徴性別男性 23 女性 13 年齢 ( 歳 ) 64.9 ± 12.2 身長 (cm) ±8.6 体重 (kg) 56.7 ± 8. BMI (kg/m 2 ) 22.5 ± 2.5 egfr (ml/min/1.73 m 2 ) ± 12.7 病期 ± 6. (n= 6) 病期 ± 4. (n=14) 病期 ± 2.5 (n=16) 1/Cr.4 ±.2 BUN/Cr 13.4 ± 5.8 血中総タンパク (g/dl) 7.1 ±.4 血中アルブミン (g/dl) 4.1 ±.3 Ht (%) 33.7 ± 4.4 Hb (g/dl) 1.9 ± 2. K (meq/l) 4.9 ±.7 Ca (mg/dl) 5.7 ± 2.1 IP (mg/dl) 3.8 ±.8 蛋白摂取量 (g/day) ± 14.7 食塩摂取量 (g/day) ± 2.9 それぞれの値は平均 ± 標準偏差を示す. 1 egfr 男 =194*Scr^-1.94*Age^-.287 女 =GFR( 男 )* 蛋白摂取量 =[ 尿中尿素窒素量 (g/day)+.31 現体重 (kg) ] 6.25) 3 食塩摂取量 (g/day)= 尿中 Na 排泄量 (meq/l) ( 尿量 /17)

6 表 2. 栄養素摂取量エネルギー (kcal/day) 1638 ± 291 エネルギー (kcal/ibw * /day) 3 ± 5 たんぱく質 (g) 43.3 ± 12.1 たんぱく質 (g/kg * /day).8 ±.2 脂質 (g/day) 48. ± 1.7 炭水化物 (g/day) ± 62.2 カリウム (mg/day) 1727 ± 514 カルシウム (mg/day) 352 ± 149 リン (mg/day) 66 ± 182 鉄 (mg/day) 5.4 ± 2.6 ビタミン B 1 (mg/day).6 ±.17 ビタミン B 1 (mg/1 kcal).37 ±.1 ビタミン B 2 (mg/day).72 ±.26 ビタミン B 2 (mg/1 kcal).44 ±.13 ナイアシン当量 (mgne/day) 18 ± 5 ナイアシン (mgne/1 kcal/day) 11 ± 3 ビタミン B 6 (mg/day).8 ±.3 ビタミン B 6 (mg/ たんぱく質 1 g).2 ±.1 葉酸 (μg/day) 229 ± 9 食塩 (g/day) 5.7 ± 1.9 それぞれの値は平均 ± 標準偏差はエネルギー比を示す. * 標準体重

7 B 1 B Urinary B 1 (nmol/day) Blood B 1 (pmol/ml) Intake B 1 (mg/1kcal) Intake B 1 (mg/1kcal) B 2 B Urinary B 2 (nmol/day) Blood B 2 (pmol/ml) Intake B 2 (mg/1kcal) Intake B 2 (mg/1kcal) Niacin Niacin Urinary Niacin (mmol/day) Intake Niacin (mgne/1kcal) Blood Niacin (nmol/ml) Intake Niacin (mgne/1kcal) 次頁へ続く

8 B 6 B Urinary B 6 (mmol/day) Blood B 6 (pmol/ml) Intake B 6 (mg/g protein) Intake B 6 (mg/g protin) Folic acid Folic acid Urinary Folic acid (nmol/day) Intake Folic acid (mg/day) Blood Folic acid (pmol/ml) Intake Folic acid (mg/day) 図 1. ビタミン摂取量と尿中ビタミン排泄量および血中濃度との関係

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<4D F736F F D E8D8297EE8ED E837E AAE90AC2E646F63> 平成 19 年度厚生労働科学研究費補助金 ( 循環器疾患等生活習慣病対策総合研究事業 ) 日本人の食事摂取基準を改定するためのエビデンスの構築に関する研究 - 微量栄養素と多量栄養素摂取量のバランスの解明 - 主任研究者柴田克己滋賀県立大学教授 Ⅱ. 主任研究者の報告書 7. 高齢者における尿中トコフェロール代謝産物排泄量主任研究者柴田克己滋賀県立大学教授研究要旨わが国における高齢者のビタミン