306 B 群レンサ球菌スクリーニング検査におけるポアメディア ViGBS 寒天培地の有用性 金田光稔 1) 長崎広美 1) 田﨑恵 1) 神山清志 1) 浦和医師会メディカルセンター 1) 目的 B 群レンサ球菌は, 膣内および腸管系の常在菌であるが,GBS は新生児敗血症の起炎菌でもあり, 感染

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1 306 B 群レンサ球菌スクリーニング検査におけるポアメディア ViGBS 寒天培地の有用性 金田光稔 1) 長崎広美 1) 田﨑恵 1) 神山清志 1) 浦和医師会メディカルセンター 1) 目的 B 群レンサ球菌は, 膣内および腸管系の常在菌であるが,GBS は新生児敗血症の起炎菌でもあり, 感染予防のためには妊婦の GBS 膣内保菌検査が重要である. 既報でわれわれは発色基質を含有しないポアメディア GBS 寒天培地の検討結果を報告した. 今回は, 新たに開発された発色基質を含有したポアメディア ViGBS 寒天培地 ( 栄研化学株式会社 ) を用いた検討を実施したので報告する. 方法 当センター細菌検査室に GBS 検査目的で提出された膣, 尿の 197 検体を検討対象とした.GBS の検出は, 検体をポアメディア ViGBS 寒天培地に培養する直接培養法により実施した. 培養は,35~37,22~24 時間, 好気環境にて実施した. 培養後発育した赤紫色のコロニーを陽性と判定した.GBS の確認はセロアイデンストレプトキット ( 栄研化学株式会社 ) を用いた. 対照にはニッスイ分画プレート羊血液寒天 / ドリガルスキー培地 ( 日水製薬株式会社 ) を使用した. 結果 GBS の検出数はポアメディア ViGBS 寒天培地では 32/197 検体 (16.2%) であった. 対照のニッスイ分画 プレート羊血液寒天 / ドリガルスキー培地では 29/197 検体 (14.7%) であった. ポアメディア ViGBS 寒天培地のみに GBS の発育が認められた検体は 4 検体 (2.0%) であった. ニッスイ分画プレート羊血液寒天 / ドリガルスキー培地のみに GBS の発育が認められた検体が 1 検体あった. 今回の供試検体からは, 主に大腸菌, 緑膿菌,CNS, 黄色フ ト ウ球菌, クレブシエラ属が検出されたが, ポアメディア ViGBS 寒天培地には全く発育を認めなかった. ポアメディア ViGBS 寒天培地には GBS 以外に腸球菌, 酵母様真菌などの発育が認められた. 考察 臨床検体を用いた検討でのポアメディア ViGBS 寒天培地で発育した GBS コロニーは,24 時間培養後に明瞭な赤紫色の着色があるため, 鑑別は容易であった. ポアメディア ViGBS 寒天培地には GBS 以外に腸球菌, 酵母様真菌の発育が認められたが, コロニーの着色はないため鑑別は容易であった. 今回の検討でのポアメディア ViGBS 寒天培地の選択性は良好であった. 連絡先 ;

2 307 ESBL 選択培地を用いたカルバペネム耐性腸内細菌科細菌スクリーニングの検討 長田ゆかり 1) 嶋岡菜美 1) 三田直美 1) 大藏照子 1) 藤田絢子 1) 松本祐之 1) 松下正 1) 八木哲也 2) 国立大学法人名古屋大学医学部附属病院 1) 名古屋大学大学院医学系研究科臨床感染統御学分野 2) 目的 カルバペネム耐性腸内細菌科細菌(CRE) は 臨床上で分離頻度が増加傾向にあり その制御は極めて重要な課題となっている 当院では 海外医療曝露歴を有する患者の入院時や集中治療室入室時に便を用いた CRE のスクリーニングを Centers for Disease Control and Prevention(CDC) が推奨する方法 ( 以下 CDC 法 ) で行っている しかし この方法には判定までに時間を要し 偽陽性が多い欠点がある 今回 我々は ESBL 選択培地を用いた方法 ( 以下 新法 ) との比較検討を行ったので報告する 材料 方法 名古屋大学医学部附属病院において 2014 年 10 月から 11 月の間に耐性菌スクリーニング目的に提出された便検体 53 件を対象とし それぞれの方法で検査を行い 発育したコロニーに同定 感受性検査を実施した CRE は感染症法に準じて判定した また コロニー発育までにかかる 1 検体あたりのコストをそれぞれ算出した CDC 法 :<1 日目 > メロペネム 10μg 含有ディスク 1 枚を添加したトリプケースソイブイヨン (TSB)5mL に便を入れ撹拌し 35 で一晩培養 <2 日目 >TSB100μL を MacConkey 培 地に塗布し 35 で一晩培養 <3 日目 > 同定感受性検査施行 <4 日目 > 判定新法 : <1 日目 > クロモアガー ESBL 培地 ( 関東化学 ) に便を塗布し 35 で 24 時間培養 <2 日目 > 同定感受性検査施行 <3 日目 > 判定 結果 CDC 法 :10 件 (13 株 ) 新法:16 件 (22 株 ) の発育を認めた CRE は CDC 法 :3 件 (3 株 ) 新法:4 件 (4 株 ) と新法で 1 株多く検出された 第 3 世代以降のセファロスポリン系抗菌薬に耐性の腸内細菌科細菌は CDC 法 :2 件 (2 株 ) 新法 :8 件 (9 株 ) で検出された CDC 法では感受性良好な腸内細菌科細菌の 新法ではブドウ糖非発酵菌の偽陽性が多い傾向があった コストは 1 検体あたり CDC 法 :180 円 新法 :310 円であった 考察 新法は CDC 法と同等以上の CRE 検出力を示したのに加え 接触感染予防策が適用される ESBL AmpC 産生腸内細菌科細菌も検出が可能であった コストの問題はあるものの 結果報告までの時間も短縮できることから 新法は CDC 法の代替検査法として有望と思われた

3 308 臨床材料を用いたバイタルメディア ESBL スクリーニング培地の検討 岡本裕也 1) 大石博一 2) 水阪隆 2) 三村拓郎 2) 湯浅朋恵 2) 衣笠愛二 2) 社会医療法人製鉄記念広畑病院 1) 西播磨地区微生物ネットワーク 2) はじめに ESBLs 産生菌は 院内感染対策や治療薬選択において見逃せない耐性菌のひとつであり 近年の著しい増加に伴い 迅速で感度の高い検査法の確立が必要不可欠である 今回我々はバイタルメディア ESBL スクリーニング培地を用い 臨床材料からの ESBLs 産生菌スクリーニング検査としての有用性について検討を行った 対象および方法 2014 年 11 月 13 日 ~12 月 6 日に兵庫県西播磨地区の医療施設 9 施設において 感染症を疑う目的で提出された各種臨床材料 ( 喀痰 257 検体 尿 329 検体 血液 31 検体 )617 検体を対象とした 喀痰 血液は 10μL 尿は 1μL をバイタルメディア ESBL スクリーニング培地 ( 極東製薬 以下 ESBL 培地 ) に塗布し 35 18~20 時間好気培養して菌の発育を観察した 発育した全ての菌に対して 同定および感受性検査を実施し CLSI の判定に準じた方法で ESBLs 産生菌の確認を行った 結果 ESBL 培地に発育が認められた検体は 172/617(28%) であり 陽性となった検体での ESBLs 産生菌を検出した割合は 58/172(34%) 全検体での ESBLs 産生菌の陽性率は 58/617(9%) となった ESBLs 産生菌を検出した 58 検体の材料別内訳は 喀痰 14 検体 尿 41 検体 血液 3 検体であった ESBLs 産生菌以外で最も多く培地に発育した菌種は Pseudomonas 属であった まとめ 今回の検討で Pseudomonas 属はコロニー性状により鑑別は容易であったが A. hydrophila は E. coli と同様の発育形態を示すため鑑別が困難であった ESBL スクリーニング培地を日常検査に組み込むことで培養翌日に ESBLs 産生菌の存在を推測することができ 院内感染対策や適正な治療薬選択に有用であると考えられた また ESBL 培地を用いアクティブサーベイランスを行うことで ESBLs 産生菌の保菌者の早期検索にも活用出来ると示唆される 製鉄記念広畑病院 :

4 309 乳癌患者に発症した Streptococcus canis による敗血症の 1 例 黒沢未希 1) 大栁忠智 1) 積田奈津希 1) 高橋儀行 1) 高木妙子 1) 山﨑哲 1) 國島広之 2) 聖マリアンナ医科大学病院 1) 聖マリアンナ医科大学総合診療内科 2) はじめに Streptococcus canis は動物の口腔内常在細菌叢の 1 種で Lancefield の分類 G 群に属するグラム陽性連鎖球菌である 犬や猫などによる咬傷からヒトへ感染する動物由来感染症の原因菌として知られている 今回 咬傷以外の侵入門戸から感染したと推測される S. canis による敗血症の症例を経験したので報告する 症例 57 歳 女性 2011 年に乳癌と診断され 化学療法を開始 2012 年に左乳房切除術 腋窩リンパ節郭清を施行 2013 年に再発し当院乳腺内分泌外科にて治療中であった 2014 年 8 月強い呼吸苦を認め来院 胸部 X 線にて左大量胸水 右浸潤影を認め癌性胸水が疑われたため即日入院となった 入院第 14 病日目に 39 の発熱を認め血液培養を施行し 本菌が検出された 細菌学的検査 血液培養のグラム染色ではグラム陽性の連鎖球菌が観察された 血液培養液から抽出し MALDI Biotyper(BRUKER) にて同定を行ったところ Score で S. canis となった 翌日 ヒツジ血液寒天培地 ( 日本 BD) に β 溶血コロニーの発育が認められた ストレプ トコッカス群別キット ユニブルー ( 関東化学 ) では G 群ラテックス試薬に凝集し ラピッド ID32 ストレップアピ ( シスメックス ビオメリュー ) にて S. canis と同定された また コロニーから行った MALDI Biotyper での同定と 16S rrna 遺伝子の配列解析でも同様の結果となった まとめ S. canis による感染症の国内報告例は少ない 菌名同定後の聞き取りにより 本症例の患者は犬の飼育歴があることがわかった 動物由来菌が検出された場合には患者背景も考慮する必要があると考えられる また 本菌は Lancefield の分類 G 群に属し Streptococcus dysgalactiae subsp. equisimilis などと酷似したコロニーを形成するため 同定キットなどを用い菌種同定を行わないと区別ができない 質量分析器による菌名同定が普及してきているが 未経験の菌種が同定された際にはその菌の生化学的性状や遺伝子検査などから 同定結果の妥当性を見極めることが求められている 連絡先 : ( 内線 3830)

5 310 Streptococcus bovis group を起因菌とする稀な小児髄膜炎の一症例 鈴木勤 1) 関根進 1) 松尾千賀子 1) 松村敬依子 1) 下田麻衣子 1) 吉元美知子 1) 三橋知明 2) 埼玉医科大学総合医療センター 1) 埼玉医科大学総合医療センタ - 2) はじめに Streptococcus bovis group ( 以下 S.bovis ) は Lancefield 血清型の D 群に属するグラム陽性双球菌で 健常者腸管フローラとして数十 % の人が保有している S.bovis は髄液培養検査および血液培養ボトルより検出された際には疾患との関係性が高いことが報告されている 当センターにおいても小児髄膜炎にて S.bovis が検出された稀な症例を経験したので呈示する 症例 生後 1 か月男児周産期歴は在胎 40 週 4 日経膣分娩 仮死なしで生まれ 羊水混濁が認められた 12/27 早朝不機嫌が目立ち 正午頃発熱を呈し 12/28 当センタ- 小児科を受診した 入院後の検査にて CRP9.5mg/dL 髄液一般検査白濁(+) 細胞数 19692/3 と高値を認め 提出された髄液グラム染色よりグラム陽性双球菌を確認したため髄膜炎と診断されエンピリックに ABPC 800mg/day CTX 390mg/day にて治療が開始され治癒退院した 微生物学的検査 髄液のグラム染色像で 肺炎球菌に比べ小さく Sharp なグラム陽性双球菌を認めた チョコレ-ト寒天培地 (BD) 羊血液寒天培地 (BD) を 35 5% 炭酸ガス培養にて 24 時間培養をした 自動分析器 WalkAway (SIEMENS) の結果は S.bovis と同定された rapid ID 32 STREP( 日本ビオメリュ- ) および質量分析器 MALDI-TOF/MS(BRUKER)2 法 (ON-PLATE 法と抽出法 ) にて検査したが 正確な菌種同定には至らなかった 今後遺伝学的検査を行う予定である 考察 S.bovis による小児髄膜炎の稀な症例を経験した 通常の施設においては詳細な同定は行われていないが 髄膜炎など致死率 後遺症を有する症例については正確な菌種同定の必要性があると考え さらなるデ-タベ-スの up-grade を期待する 問い合わせ 049(228)3501( 直通 )

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