Contents HLA 抗原 抗体試薬の分類 OneLambda HLA 抗原 抗体試薬の分類 4 HLA-DNA タイピングキット マイクロ SSP マイクロ SSP Generic Trays 6 マイクロ SSP High Resolution Trays 6 マイクロ SSP AmbiSt

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1 HLA Analysis APPLICATION CATALOG HLA 関連製品 HLA の基礎 付録付き HLA genotyping and HLA antibody detection A Global Biotechnology Marketing Company

2 Contents HLA 抗原 抗体試薬の分類 OneLambda HLA 抗原 抗体試薬の分類 4 HLA-DNA タイピングキット マイクロ SSP マイクロ SSP Generic Trays 6 マイクロ SSP High Resolution Trays 6 マイクロ SSP AmbiStrips 6 マイクロ SSP Allele Specific Trays 7 マイクロ SSP 専用試薬 9 マイクロ SSP 専用器具 9 マイクロ SSP 専用泳動槽 10 SSP 法を利用した DNA タイピングキット ( サイトカイン B27) 10 HLA-DNA タイピングキット NXType NGS NXType NGS 24 TypeStream 25 ベンチトップ型次世代シーケンサー Ion S5システム Ion S5システム Ion S5 XLシステム 26 NGSサンプル調製の自動化 Ion Chef Ion S5 関連試薬 HLA 抗体検査 LABScreen HLA 抗体検査 LABScreen 28 HLA-DNA タイピングキット Allset Gold SSP LABScreen Mixed 29 LABScreen Multi 29 HLA DNAタイピングキット Allset Gold SSP 11 AmbiSolv Primer Mixs 一般医療機器 LABScan 3Dシステム / LABScanシステム LABScan 3Dシステム 13 LABScanシステム 14 LABScreen PRA 30 LABScreen Single Antigen 30 LABScreen Single Antigen Supplement 31 LABScreen 専用試薬 32 C1qScreen 33 Quantiplex 33 Adsorb Out 34 HLA-DNA タイピングキット LABType HLA-DNAタイピングキット LABType 15 LABType SSO LABType HD LABType SSO Exon 4-7 Supplement HLA 抗体検査 FlowPRA FlowPRA Screening Test 35 FlowPRA Specific Test 36 FlowPRA Single Antigen 37 FlowPRA 専用試薬 38 KIR SSO Genotyping Test 抗 AT1R 抗体検出試薬 AT1R HLA-DNA タイピングキット LABType CWD/XR HLA DNAタイピングキット LABType CWD/XR 18 LABType 専用試薬 20 LABType 専用器具 20 HLA 解析ソフトウェアの紹介 HLA Fusion 21 HLA-DNA タイピングキット SeCore SBT SeCore SBT 22 抗 AT1R 抗体検出試薬 AT1R 39 その他サポート試薬 コントロール血清 40 補体 40 抗原検査関連試薬 40 HL A モノクローナル抗体 HLA モノクローナル抗体 41

3 クロスマッチ関連細胞分離試薬 EasySep 44 EasySep 専用磁石 RosetteSep SepMate RosetteSep & SepMate 46 HL A コミュニティーの案内 HL A コミュニティーのご案内 47 ベリタスサイエンスレターの案内 VERITAS SCIENCE LETTER - HLA & Transplantation 47 HLA の基礎 ( 付録 ) HLA 分子の構造と役割 48 HLA 遺伝子地図 49 HLA 抗原型の種類 50 日本人のHLA 遺伝子頻度表 52 疾患感受性と HLA 53 移植後 HLA 抗体検査の有用性 55

4 HLA 抗原 抗体試薬の分類 One Lambda HLA 抗原 抗体試薬の分類 HLA-DNA タイピング 解像度目安使用機器 / 器具テスト数目安推奨試薬対象分野 8 桁レベル Ion S5 (NGS): P26 ~ 192 NXType NGS: P24 ~ DNA シーケンサー ~ 16 機器依存 SeCore SBT: P22 ~ 4 桁レベル LABScan 3D システム : P13 ~ ~ 96 ~ 384 LABType CWD/XR : P18 ~ LABScan 3D システム : P13 ~ LABScan システム : P14 ~ マイクロ SSP 専用泳動槽 : P10 ~ 96 ~6 LABType HD : P16 ~ Micro SSP Allele Specific : P7 ~ 造血幹細胞移植 がん免疫その他研究 臓器移植 2 桁レベル LABScan 3D システム : P13 ~ LABScan システム : P14 ~ マイクロ SSP 専用泳動槽 : P10 ~ 96 ~3 LABType SSO : P16 ~ Micro SSP Generic : P6 ~ 輸血 HLA 抗体測定 LABScreen FlowPRA 製品名検体処理数時間 スクリーニング 測定の目的 %PRA ( ) 特異性の同定 HNA 抗体の検出 Mixed Multi 2 時間 1 ~ 95 検体 PRA 以内 Single Antigen Screening Test 1 検体 ~ 2 時間 Specific 1 検体 ~ 以内 Single 1 検体 ~ 測定機器 LABScan システム / LABScan 3D システム フローサイトメーター %PRA: % of panel reactive antibody 全パネル数に対して被検血清の反応するパネルの割合 4

5 HLA-DNA タイピングキット マイクロ SSP HLA-DNA タイピングキットマイクロ SSP マイクロ SSP の製品写真 マイクロ SSP は PCR-SSP 法 (Polymerase Chain Reaction Sequence Specific Primer) に基づき HLA タイピングを行う研究用試薬です 原理としては 3 末端にアリル特異的な塩基配列を設定した複数のプライマー ( 合成オリゴヌクレオチド ) を用いて PCR 増幅し ゲル電気泳動により特長的な多型部分が増幅されたか否かを確認し その増幅パターンによりアリルを判定します 判定はプライマーの特性が記された判定表 ( ワークシート ) および専用の解析ソフトウェア HLA Fusion ( P21) を用いて同定します 特長 約 2 時間で HLA 型の判定が可能です アリル特異的な各プライマーは 96 ウェル PCR 反応用トレーの各ウェルに予め分注 凍結乾燥してあります インターナルコントロールが各ウェルに入っています タイピングトレーを解凍後 D-mix(dNTP を含む PCR 反応バッファー ) と検体 DNA を加え AmpliTaq ポリメラーゼ ( 別売 ) を加え 各ウェルに分注するだけで PCR の試薬調製が可能です ゲル電気泳動は専用の泳動槽を用いて 約 3 分で泳動が終了します操作方法 1. D-mix に Taq ポリメラーゼと DNA を添加 4. 専用ゲル泳動槽を用いて 電気泳動 2. DNA と D-mix のミクスチャー溶液を各ウエルに 10µL ずつ分注 ( 陰性コントロールウェルを除く ) 5. 泳動写真を記録 ( データ保存 ) 3. PCR 増幅 6. 解析ソフト HLA Fusion による自動判定 コンポーネント プライマー分注済 96 ウェルトレー D-mix トレーシール キット以外に必要な試薬 Ampli Taq Polymerase*(Thermo Fisher Scientific) SeeKEM LE agarose(lonza) エチジウムブロマイド マイクロ SSP サイズマーカー (SSP-SM) *Ampli Taq Gold は不可 5

6 HLA-DNA タイピングキット マイクロ SSP マイクロ SSP Generic Trays HLA-DNA アリルを HLA 抗原レベル ( 低解像度 ) で HLA 型を判定するマイクロ SSP 製品です マイクロ SSP ABC/DRDQ JPN( 商品コード :SSPJPN) 日本人の HLA タイピング用に開発されたマイクロ SSP 製品で HLA の A,B,C,DR,DQ ローカスを1 回の PCR 反応で同時タイピングが可能です 日本人集団では 99.9% の HLA 型をカバーし また 0.01% 以上の頻度がある HLA 型はアンビギュイティーなく判定します SSPJPN マイクロ SSP ABC/DRDQ JPN 10 tests 冷凍 (-20 ) SSPABDR マイクロ SSP AB/DR 10 tests 冷凍 (-20 ) SSPABDRX マイクロ SSP AB/DR tests 冷凍 (-20 ) SSPML02 マイクロ SSP Generic HLA Class I & II (ABDRDQ) 4 tests 冷凍 (-20 ) SSP1L マイクロ SSP Class I Generic Typing Kit 10 tests 冷凍 (-20 ) SSP1A マイクロ SSP HLA A Typing Kit 12 tests 冷凍 (-20 ) SSP1AB マイクロ SSP HLA AB Typing Kit 10 tests 冷凍 (-20 ) SSP1B マイクロ SSP HLA B Typing Kit 8 tests 冷凍 (-20 ) SSP1C マイクロ SSP HLA C Typing Kit 16 tests 冷凍 (-20 ) SSP2L マイクロ SSP Class II Generic Typing Kit (DRB/DQB) 30 tests 冷凍 (-20 ) SSP2LB マイクロ SSP Class II DRB Only Generic Typing Kit 40 tests 冷凍 (-20 ) SSP2LQB1 マイクロ SSP Generic HLA Class II (DQB only) 24 tests 冷凍 (-20 ) SSPDRQP1 マイクロ SSP Class II Generic Typing Kit (DRB/DQB1/DPB1) 10 tests 冷凍 (-20 ) マイクロ SSP High Resolution Trays HLA-DNA アリルを 1 回の PCR 反応で高解像度な判定が可能なマイクロ SSP 製品です DRB DPA1/DPB1 DQA1 アリル用のタイピングキットがあります SSP2H マイクロ SSP Class II High Res. DRB Typing Kit 10 tests 冷凍 (-20 ) SSP2HDP マイクロ SSP Class II High Res. DPA1/DPB1 Typing Kit 4 tests 冷凍 (-20 ) SSP2HQA1 マイクロ SSP Allele Specific DQA1 8 tests 冷凍 (-20 ) マイクロ SSP AmbiStrips マイクロ SSP AmbiStrip は HLA 遺伝子のタイピング結果で問題となるアンビギュイティーを減らす事を目的 に作製された SSP タイピング試薬です 具体的には B27 の変異を含むアンビギュイティーや HLA-class I class II に一般的な Null アリルなどを判別可能です SSPT1-A1 C0320N - C*03:20N 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPT1-A2 AmB :FMEE, 59:AD / 53:GMWM, 56:23 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPT1-B1 B5111N - B*51:11N 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPT1-B2 AmB15-15:GTCC, 35:FMTY / 35:XX1, 35:XX2 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPT1-B3 AmB :KCXA, 56:HXPW / 18:36, 55:XX1 8 tests 冷凍 (-20 ) 6

7 HLA-DNA タイピングキット マイクロ SSP SSPT1-C1 A2409N - A*24:09N 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPT1-C2 AmB :63, 48:03 / 40:EPTJ, 48:02 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPT1-C3 AmB5619N - 55:GXMA, 55:GMWT / 55:GXMA, 56:19N 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPT1-D1 A0301N - A*03:01:01:02N 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPT1-D2 AmB :HKET, 40:80 / 40:CVR, 81:MN 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPT1-D3 AmB55-37:GNSP, 55:GNUM / 37:13, 56:19N 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPT1-E1 A0101N - A*01:01:01:02N 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPT1-E2 DRB50110N - DRB5*01:10N 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPT1-E3 AmB :GW, 51:01 / 49:GW, 52:01 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPT1-F1 B27+ B81 - B*27 with B*81:01 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPT1-F2 DRB50108N - DRB5*01:08N 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPT1-F3 AmB :HAMH, 45:KBCW / 44:GMVY, 50:01 and 44:KBHE, 45:KBCW / 44:JZSJ, 50:01 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPT1-G1 B27+ B73 - B*27 with B*73:02 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPT1-G2 DRB40103N - DRB4*01:03:01:02N 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPT1-G3 AmB46-15:GUVW, 48:02 / 46:RXE, 48:02 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPT1-H1 Negative Control 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPT1-H2 C0409N - C*04:09N 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPT1-H3 AmB :FXED, 41:WG / 35:63, 35:87 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPT1MX01 B27 Combo - B*27 with B*73:02 & B*27 with B*81:01 8 tests 冷凍 (-20 ) マイクロ SSP Allele Specific Trays マイクロ SSP Generic Tray などで HLA 抗原レベル ( 低解像度 ) で判定した HLA 型の結果を基に さらに高解像度な判定をするためのマイクロ SSP です 調べたい抗原のアリルだけを検査する事ができます SSP1UNL マイクロ SSP Null Allele Class I DNA Typing Tray 6 tests 冷凍 (-20 ) SSP2-NL マイクロ SSP Null Allele Class II DNA Typing Tray 24 tests 冷凍 (-20 ) SSP2H マイクロ SSP Class II High Res. DRB Typing Kit 10 tests 冷凍 (-20 ) SSP2HDP マイクロ SSP Class II High Res. DPA1/DPB1 Typing Kit 4 tests 冷凍 (-20 ) SSP2HQA1 マイクロ SSP Allele Specific DQA1 8 tests 冷凍 (-20 ) SSP2UNL マイクロ SSP Null Allele Class II DNA Typing Tray 6 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-01 マイクロ SSP Allele Specific A*01/36 シンク ルトレー 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-03 マイクロ SSP Allele Specific A*03 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-05 マイクロ SSP Allele Specific B*51/52/78 シンク ルトレー 4 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-07 マイクロ SSP Allele Specific B*07 4 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-08 マイクロ SSP Allele Specific B*08 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-11 マイクロ SSP Allele Specific A*11 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-13 マイクロ SSP Allele Specific B*13 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-14 マイクロ SSP Allele Specific B*14 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-15 マイクロ SSP Allele Specific B*15 4 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-16 マイクロ SSP Allele Specific B*38/39 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-18 マイクロ SSP Allele Specific B*18 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-21 マイクロ SSP Allele Specific B*49/50 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-22 マイクロ SSP Allele Specific B*54/56 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-23 マイクロ SSP Allele Specific A*23 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-24 マイクロ SSP Allele Specific A*24 4 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-25 マイクロ SSP Allele Specific A*25/34/66 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-26 マイクロ SSP Allele Specific A*26 8 tests 冷凍 (-20 ) 7

8 HLA-DNA タイピングキット マイクロ SSP SSPR1-27 マイクロ SSP Allele Specific B*27 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-29 マイクロ SSP Allele Specific A*29 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-30 マイクロ SSP Allele Specific A*30 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-31 マイクロ SSP Allele Specific A*31 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-32 マイクロ SSP Allele Specific A*32 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-33 マイクロ SSP Allele Specific A*33 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-35 マイクロ SSP Allele Specific B*35/53 4 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-37 マイクロ SSP Allele Specific B*37 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-40 マイクロ SSP Allele Specific B*40 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-41 マイクロ SSP Allele Specific B*41 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-42 マイクロ SSP Allele Specific B*42 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-44 マイクロ SSP Allele Specific B*44/45 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-45 マイクロ SSP Allele Specific B*45 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-46 マイクロ SSP Allele Specific B*46/67/81/82 シンク ルトレー 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-47 マイクロ SSP Allele Specific B*47 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-48 マイクロ SSP Allele Specific B*48 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-53 マイクロ SSP Allele Specific B*53 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-57 マイクロ SSP Allele Specific B*57 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-58 マイクロ SSP Allele Specific B*58 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-68 マイクロ SSP Allele Specific A*68 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-74 マイクロ SSP Allele Specific A*74 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-A2 マイクロ SSP Allele Specific A*02 4 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-C01 マイクロ SSP Allele Specific Cw*01 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-C02 マイクロ SSP Allele Specific Cw*02 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-C03 マイクロ SSP Allele Specific Cw*03 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-C04 マイクロ SSP Allele Specific Cw*04 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-C05 マイクロ SSP Allele Specific Cw*05 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-C06 マイクロ SSP Allele Specific Cw*06 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-C07 マイクロ SSP Allele Specific Cw*07 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-C08 マイクロ SSP Allele Specific Cw*08 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-C12 マイクロ SSP Allele Specific Cw*12 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-C14 マイクロ SSP Allele Specific Cw*14 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-C15 マイクロ SSP Allele Specific Cw*15 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR1-C16 マイクロ SSP Allele Specific Cw*16/17/18 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR2-101 マイクロ SSP Allele Specific DRB1*01 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR2-103 マイクロ SSP Allele Specific DRB1*03 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR2-104 マイクロ SSP Allele Specific DRB1*04 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR2-107 マイクロ SSP Allele Specific DRB1*07/09/10 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR2-108 マイクロ SSP Allele Specific DRB1*08 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR2-111 マイクロ SSP Allele Specific DRB1*11 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR2-112 マイクロ SSP Allele Specific DRB1*12 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR2-113 マイクロ SSP Allele Specific DRB1*13 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR2-114 マイクロ SSP Allele Specific DRB1*14 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR2-115 マイクロ SSP Allele Specific DRB1*15 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR2-116 マイクロ SSP Allele Specific DRB1*16 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR2-3 マイクロ SSP Allele Specific DRB3 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR2-4 マイクロ SSP Allele Specific DRB4 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR2-5 マイクロ SSP Allele Specific DRB5 8 tests 冷凍 (-20 ) SSPR2-Q1 マイクロ SSP Allele Specific DQB1 8 tests 冷凍 (-20 ) 8

9 HLA-DNA タイピングキット マイクロ SSP マイクロ SSP 専用試薬 マイクロ SSP を利用する際の試薬類です 商品コード商品名製品説明梱包単位保存温度マイクロ SSP Class I & II 冷凍 SSPWT12 ワイプテスト 100 tests ワイプテスト (-20 ) SSP-SM マイクロ SSP サイズマーカー マイクロ SSP 専用のサイズマーカーで bp に泳動バンドを示します 50 tests DM540-5 マイクロ SSP D-mix 2 test/tray 用マイクロ SSP 専用 D - mix 5 本 DM360-5 マイクロ SSP D-mix 3 test/tray 用マイクロ SSP 専用 D - mix 5 本 DM270-5 マイクロ SSP D-mix 4 test/tray 用マイクロ SSP 専用 D - mix 5 本 DM180-5 マイクロ SSP D-mix 6 test/tray 用マイクロ SSP 専用 D - mix 5 本 DM マイクロ SSP D-mix 1 test/tray 用マイクロ SSP 専用 D - mix 5 本 5XTBE100 5 TB Buffer with Ethidium Bromide マイクロ SSP 専用エチジウムブロマイド入り TBE Buffer 冷凍 (-20 ) 冷凍 (-20 ) 冷凍 (-20 ) 冷凍 (-20 ) 冷凍 (-20 ) 冷凍 (-20 ) 100 ml 室温 マイクロ SSP 専用器具 マイクロ SSP を利用する際の器具類です 商品コード 商品名 製品説明 梱包単位 保存温度 SSPPADGRY マイクロ SSP PCR 用パッド PCR 増幅時に使用するパッド 384 MJ Research 用 MJ Research 用 1 枚 室温 SSPPADTN マイクロ SSP PCR 用パッド PCR 増幅時に使用するパッド PE9700 用 PE9700 用 1 枚 室温 SSPPADTN5 マイクロ SSP PCR 用パッド PCR 増幅時に使用するパッド PE9700 用 PE9700 用 5 枚 室温 9

10 HLA-DNA タイピングキット マイクロ SSP マイクロ SSP 専用泳動槽 マイクロ SSP ゲルシステムは 108 ウェルのマイクロプレート形成のゲルの作製と電気泳動を行う装置です パワーサプライを別途ご用意下さい 特長 用途 108 ウェルマイクロプレート形式のゲルの作製と電気泳動 既存のマイクロプレートと同様のサイズのため マルチチャンネルピペットを用いたサンプルの添加が可能 短時間電気泳動 ( 約 3 分 ) コームを使いやすくまとめたコームホルダー 蛍光性のポジション入りのゲルボックス 紫外線透過性のゲルボックスのため ゲルをボックスから取り出すことなく UV イルミネーターへ設置可能 商品コード 商品名 製品説明 梱包単位 MGS108 マイクロ SSP 用 MGS 泳動槽 マイクロ SSP 専用泳動槽一式 1 台 MGS108-P1 マイクロ SSP 用 MGS9-Cover, マイクロ SSP 用 MGS 泳動槽の電極差し込 Gel Box みつきカバーとゲル作製用トレー 1 セット MGS108-P2 マイクロ SSP 用 MGS9 泳動槽マイクロ SSP 用 MGS 泳動槽のベース ( 水 Base+Combs+Electrodes+Holder 平器付 ) コーム 電極用コーム ホルダー 1 セット MGS-B MGS-BASE マイクロ SSP 用 MGS 泳動槽専用のベース ( 水平器付 ) 1 個 MGS-CH9 マイクロ SSP 用 MGS9 泳動槽用マイクロ SSP 用 MGS 泳動槽専用のコーム Comb Holder ホルダー 1 セット MGS-EC9-2 マイクロ SSP 用 MGS9-Electrode マイクロ SSP 用 MGS 泳動槽専用のコーム Combs (2 本入 ) 1 セット MGS-GB9 マイクロ SSP 用 MGS9 泳動槽マイクロ SSP 用 MGS 泳動槽専用のゲル作用 Gel Box (9 レーン ) 製トレー 1 セット MGS-C MGS-Cover マイクロ SSP 用 MGS 泳動槽の電極差し込みつきカバー 1 個 MGSWC9-3 マイクロ SSP 用 MGS 泳動槽用 Well Combs マイクロ SSP 用 MGS 泳動槽専用のウェルコーム 3 枚 SSP 法を利用した DNA タイピングキット ( サイトカイン B27) マイクロ SSP のシステムを利用して 同一の原理でタイピングします 特長 Cytokine Genotype Tray Cytokine Genotype Primer Pack TGF-beta TNF-alpha IL-10 IL-6 および IFN-gamma 遺伝子にある多型を PCR-SSP 法でタイピングする製品です 詳細につきましては 弊社にお問合せ下さい SSP B27 Primer Set HLA-B27 は 強直性脊椎炎や HLA-B27 抗原関連急性前部ぶどう膜炎などの疾患と関連が報告されているアリルです HLA-B27 の存在を PCR-SSP 法により検出します PCYTGEN Cytokine Genotyping Primer Pack 1 セット 冷凍 (-20 ) CYTGEN Cytokine Genotyping Tray 24 tests 冷凍 (-20 ) BSSPB27C SSP B27 Primer Set Combo 1 本 冷凍 (-20 ) BSSPB2781 SSP B27 Primer Set Combo (B27,81) 1 本 冷凍 (-20 ) BSSPB2773 SSP B27 Primer Set Combo (B27,73) 1 本 冷凍 (-20 ) 10

11 HLA-DNA タイピングキット AllSet Gold SSP HLA-DNA タイピングキット Allset Gold SSP Allset Gold は PCR-SSP 法に基づき HLA のタイピングを行う為の研究用試薬です HLA は Low Resolution High Resolution の二種類があります AllSet Gold SSP Low-Resolution OLI-54310D ALLSET GOLD HLA A LOW RES SSP 20 TESTS 20 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54320D ALLSET GOLD HLA B LOW RES SSP 20 TESTS 20 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54330D ALLSET GOLD HLA C LOW RES SSP 20 TESTS 20 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54340D ALLSET GOLD HLA ABC LOW RES 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54350D ALLSET GOLD HLA ABDR LOW RES 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54360D ALLSET GOLD HLA ABDRDQ LOW RES 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54370D ALLSET GOLD HLA DR LOW RES SSP 20 TESTS 20 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54380D ALLSET GOLD HLA DRDQ LOW RES 20 TESTS 20 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54390D ALLSET GOLD HLA DQ LOW RES SSP 20 TESTS 20 tests 冷蔵 (2-8 ) AllSet Gold SSP High-Resolution OLI-54010D ALLSET GOLD A HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54020D ALLSET GOLD B HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54030D ALLSET GOLD CW HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54040D ALLSET GOLD DRB1 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54050D ALLSET GOLD DQB1 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54060D ALLSET GOLD DQA1 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54070D ALLSET GOLD DPB1 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54080D ALLSET GOLD DRB345 HIGH RES 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54090D ALLSET GOLD DPA1 HIGH RES 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI D ALLSET GOLD A-11 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54110D ALLSET GOLD A*02 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI D ALLSET GOLD A10 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI D ALLSET GOLD B17 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI D ALLSET GOLD A*03 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI D ALLSET GOLD A*01/36 HIGH RES 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI D ALLSET GOLD B*38/39 HIGH RES 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI D ALLSET GOLD B*27 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI D ALLSET GOLD B22 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI D ALLSET GOLD B*08 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI D ALLSET GOLD B*18 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI D ALLSET GOLD B*14 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54120D ALLSET GOLD B15 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI D ALLSET GOLD A*68 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI D ALLSET GOLD B*13 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI D ALLSET GOLD B21 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54130D ALLSET GOLD A19 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54140D ALLSET GOLD B35 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54150D ALLSET GOLD B*44/45 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54160D ALLSET GOLD A*23/24 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54170D ALLSET GOLD B*07 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) 11

12 HLA-DNA タイピングキット AllSet Gold SSP OLI-54180D ALLSET GOLD B*51/52 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54190D ALLSET GOLD B-40 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI D ALLSET GOLD DRB3 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54210D ALLSET GOLD DRB1-01 HIGH RES 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI D ALLSET GOLD DRB4 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI D ALLSET GOLD DRB5 HIGH RES SSP 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI D ALLSET GOLD DQB1-03 HIGH RES 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI D ALLSET GOLD DQB1-05 HIGH RES 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI D ALLSET GOLD DQB1-06 HIGH RES 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54220D ALLSET GOLD DRB1-03 HIGH RES 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54230D ALLSET GOLD DRB1-04 HIGH RES 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54260D ALLSET GOLD DRB1-11 HIGH RES 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54270D ALLSET GOLD DRB1-13 HIGH RES 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) OLI-54280D ALLSET GOLD DRB1-14 HIGH RES 10 TESTS 10 tests 冷蔵 (2-8 ) その他 OLI-54410D KIR Genotyping SSP Kit, dry format 10 tests 冷蔵 (2-8 ) AmbiSolv Primer Mixes アリル特異的なプライマー MIX です HLA タイピングにおけるアンビギュイティ解消の為にお使いいただけます プライマーはカスタム品につき 詳細はお問い合わせください OLI AMBISOLV TUBE FORMAT 40 TESTS EACH 40 tests 冷凍 (-20 ) 12

13 一般医療機器 LABScan3D システム / LABScan システム 一般医療機器 LABScan3D システム / LABScan システム LABScan シリーズは xmap テクノロジーに基づいたマルチプレックスなフロー分析機器です ~ 100 色 ~ 500 色の蛍光ビーズを用いることで 1 ウェルあたり最大 500 項目の測定が可能で 少量のサンプルから多くの情報が高精度で得られます 500 色ビーズ対応の LABScan 3D システムと 100 色ビーズ対応の LABScan システムの 2 種類があります LABScan 3D システム LABScan 3D システムは 500 色のビーズに対応し従来よりもさらに効率的で高解像度なアッセイが可能となりました 従来の LABScan システム用の試薬 (LABType LABScreen) の測定はもちろん 専用の新試薬 LABType CWD/XR の測定が可能です また 2 本のシリンジポンプによる測定時間の短縮によるスループットの向上に加え 試薬リザーバーの拡大による自動キャリブレーションやプローブ高さの自動調整等の操作性が向上した事により日常メンテナンス作業がより簡便になりました 名称 重量 (Kg) 幅 (mm) 高さ (mm) 奥行 (mm) LABScan3D システム 一般的名称 : 遺伝子解析装置 :JMDN コード 一般的名称: 免疫傾向分析装置 :JMDN コード 届出番号 :13B3X

14 一般医療機器 LABScan3D システム / LABScan システム LABScan システム LABScan システムは 100 色ビーズに対応しています LABType(SSO, HD) LABScreen の測定が可能です 名称重量 (Kg) 幅 (mm) 高さ (mm) 奥行 (mm) LABScan システムアナライザー ウェルプレート専用 platform (XYP) 自動溶媒供給装置 (SD) 一般的名称 : 遺伝子解析装置 :JMDN コード 一般的名称 : 免疫蛍光分析装置 :JMDN コード 届出番号 13B3X 機種の性能比較 機種 LABScan3D システム LABScan システム プレックス数 ( ビーズ種類 ) ソフトウェア xponent 4.2 xponent 3.1 キャリブレーション 自動 ( プレート入れ替え不要 ) 自動 ( プレート入れ替え必要 ) 測定時間 (96 ウェル / プレート ) 20 分 40 分 プレートの種類 96 ウェルまたは 384 ウェル 96 ウェル プローブ高さ調節 自動調整 手動調製 商品コード 商品名 梱包単位 備考 LABSCNXS4 LABScan3D システム 1 式 医療機器詳細はお問い合わせください LXF3D-CAL-K25 FLEXMAP 3D Calibration Kit 1 セット LABScan3D システム FLEXMAP 3D Performance LXF3D-PVER-K25 1 セット専用試薬 Verification Kit LABSCNXS3 LABScan システム 1 式 医療機器詳細はお問い合わせください LX200-CAL-K25 Luminex 100/200 Calibration Kit 1 セット LX200-CON-K25 Luminex 100/200 Performance LABScan システム専用試薬 1 セット Verification Kit LabMAP Sheath Fluid 20L LABScan シリーズ共通試薬 14

15 HLA-DNA タイピングキット LABType HLA-DNA タイピングキット LABType LABType は PCR-rSSO(Polymerase chain reaction - reverse sequence specific oligonuclotide) 法により HLA 遺伝子のタイピングを行う試薬です xmap テクノロジーに基づき LABScan システム /LABScan3D システム ( P13) で測定します HLA 遺伝子のうち エクソン 2 等の多型性に富んだ特定の領域を PCR 増幅させ 得られた PCR 産物をアルカリ変性により 1 本鎖にします 1 本鎖にした PCR 産物を HLA アリル特異的配列をもつプローブが固定化されたビーズとハイブリダイゼーションさせます 反応したビーズを蛍光標色物質でラベリングし蛍光強度を測定します 得られた各ビーズの蛍光強度 反応パターン プローブの特異性に基づき 専用解析ソフトウェア HLA Fusion を用いて解析します LABType を行う際には L/T Conjugated Streptavidin( 商品コード :LT-SAPE) を別途ご用意下さい 特長 用途 アメリカ ヨーロッパの骨髄バンクなど 世界で幅広く利用されています 全人種 民族に対応しており 日本人に希少なアリルや外国人のアリルも判別します LABType キットの操作はすべて共通です LABScan システム /LABScan3D システムを使用して最大 96 検体を同時に測定します 専用解析ソフトウェアで 96 検体を 10 分で解析します 操作 ~ 解析までかかる時間はわずか 3 時間です xmap テクノロジーで HLA タイピングを行う試薬の中で 最も高い解像度です 1. DNA サンプルを PCR で増幅 4. 発色反応 2. PCR 産物をアルカリ変性 5. LABScan システム / LABScan3D システムで解析 ~ 解析ソフトウェアで判定 3. LABType ビーズを添加し ハイブリダイゼーション コンポーネント プライマー mix Neutralization buffer D-mix SAPE buffer 各ローカス Beads Hybridization buffer Denaturation Wash buffer buffer 必要な器具 サーマルサイクラー (PE9700,VERITI:ABI) プレート遠心機 (1000 xg 以上 ) LABScan3D システムなど キット以外に必要な試薬 Ampli Taq Polymerase* (Thermo Fisher Scientific) 二次抗体 (LT-SAPE) *Ampli Taq Gold は不可 15

16 HLA-DNA タイピングキット LABType LABType SSO LABType SSO は主に HLA 遺伝子の HLA 型 ( 抗原型 ) を判定するための試薬で 最大 100 色のビーズを使用しています HLA-A B C DRB1 DRB3,4,5 DQA1/DQB1 DPA1/DPB1 ローカス用のキットの他 MICA 用のキットがあります 商品名 商品コード 梱包単位 商品コード 梱包単位 保存温度 LABType SSO HLA A Locus RSSO1A 100 tests RSO1AT 20 tests 冷凍 (-20 ~ -80 ) LABType SSO HLA B Locus RSSO1B 100 tests RSO1BT 20 tests 冷凍 (-20 ~ -80 ) LABType SSO HLA C Locus RSSO1C 100 tests RSO1CT 20 tests 冷凍 (-20 ~ -80 ) LABType SSO HLA DRB1 RSSO2B1 100 tests RSO2B1T 20 tests 冷凍 (-20 ~ -80 ) LABType SSO HLA DRB3,4,5 RSSO tests RSO2345T 20 tests 冷凍 (-20 ~ -80 ) LABType SSO HLA DQA1/DQB1 RSSO2Q 100 tests RSO2QT 20 tests 冷凍 (-20 ~ -80 ) LABType SSO HLA DPA1/DPB1 RSSO2P 100 tests RSO2PT 20 tests 冷凍 (-20 ~ -80 ) LABType SSO MICA RSSOMICA 40 tests 冷凍 (-20 ~ -80 ) LABType HD LABType HD は HLA 遺伝子をアリルレベル (4 桁レベル ) でタイピングするための試薬です 特殊なプローブおよびシステムを用いることで アンビギュイテイーが少なく高精度でのタイピングが可能です DRB1 ローカスの場合 SBT(Sequence based typing) 法で解析したデータより高い解像度を示すものもあります HLA-A B C DRB1 の各ローカス用のキットがあります 商品名 商品コード 梱包単位 商品コード 梱包単位 保存温度 LABType HD HLA A Locus RSSOH1A 100 tests RSOH1AT 20 tests 冷凍 (-20 ~ -80 ) LABType HD HLA B Locus RSSOH1B 100 tests RSOH1BT 20 tests 冷凍 (-20 ~ -80 ) LABType HD HLA C Locus RSSOH1C 100 tests RSOH1CT 20 tests 冷凍 (-20 ~ -80 ) LABType HD HLA DRB1 RSSOH2B1 100 tests RSOH2B1T 20 tests 冷凍 (-20 ~ -80 ) 16

17 HLA-DNA タイピングキット LABType LABType SSO Exon 4-7 Supplement LABType SSO や LABType HD では解析できない HLA Class I のエクソン 4-7 領域をタイピングする LABType SSO タイピングキットです 特長 用途 1 本の反応チューブで A locus B locus および C locus のエクソン 4-7 領域の HLA アリルタイピングを行います 解析ソフト上で LABType SSO や LABType HD の解析結果に情報を追加することで さらに精度が高いアリル判定を行うことができます エクソン 4-7 領域の変異に起因する null アリルの検出などが可能になります RSSO1E47 LABType SSO Class I Exon4-7 Supplement 100 tests 冷凍 (-20 ~ -80 ) RSO1E47T LABType SSO Class I Exon4-7 Supplement 20 tests 冷凍 (-20 ~ -80 ) KIR SSO Genotyping Test KIR SSO Genotyping Test は LABScan3D システムなど ( P13) を使用して KIR(Killer immunoglobulin-like receptor) 遺伝子のタイピングを行うキットです KIR は 19 番染色体にコードされる多型が多い遺伝子として知られており 造血幹細胞移植時には HLA 以外に適合度が重要される要因として注目されています 原理最初に KIR 遺伝子のエクソン 3~5 7~9 をカバーする 3 グループに特異的なプライマーを用いて PCR 増幅させます PCR 産物を 1 本鎖に変性した後 KIR アリル特異的配列をもつプローブとハイブリダイゼーション反応させ 各プローブの特異性と反応パターンから KIR ローカスの有無を判定します 判定可能な KIR ローカス 2DL1 2DS1 3DL1 2DL2 2DS2 3DL2 2DL3 2DS3 3DL3 2DL4 2DS4 3S1 2DL5 2DS5 3DP1 3DP1 コンポーネント プライマー mix D-mix Beads Denaturation buffer Neutralization buffer SAPE buffer Hybridization buffer Wash buffer キット以外に必要な試薬 Ampli Taq Polymerase* (Thermo Fisher Scientific) 二次抗体 (LT-SAPE) *Ampli Taq Gold は不可 RSSOKIR KIR SSO Genotyping Test 40 tests 冷凍 (-20 ~ -80 ) 17

18 HLA-DNA タイピングキット LABType HLA-DNA タイピングキット LABType CWD/XR 本製品は 最新機種 LABScan 3D システム専用の測定試薬です 500 色の蛍光ビーズを使用し 従来法よりさらに高解像度でアンビギュイティが非常に少ないタイピング結果が得られます LABType CWD LABType CWD は CWD アリルをアンビギュイティ無くタイピングする為にデザインされた試薬です CWD (Common and Well-Documented) アリルとは 14 万件の SBT データとハプロタイプ頻度から決定された 415 アリル (Common) 記録に基づいた 707 アリル (Well-Documented) の合計 1,122 アリルです * *Common and well-documented HLA alleles: 2012 update to the CWD catalogue. Tissue Antigens, 2013, 81, *Specialty Probe:One Lambda 独自の技術で Phase Ambiguity を解消する為の Linkage Probe です LABType XR LABType XR は LABType CWD では解決できない さらにレアなアリルのアンビギュイティまで解消できるようにデザインされたキットです Luminex 試薬で最も高解像度であり SBT 試薬に匹敵します LABType 製品のプローブ数比較 LABType XR LABType CWD LABType HD LABType SSO Locus A B C DRB DQB1/DQA1 93 DPB1/DPA1 100 測定機器 LABScan 3D システム ( P13) 〇 〇 〇 〇 LABScan システム ( P14) 〇 〇 プローブ数は製品ロットにより変更される場合があります 18

19 HLA-DNA タイピングキット LABType 他法との比較 手法 LABType LABType XR CWD SBT NGS 測定時間 3-4 時間 3-4 時間 1-2 日 3-5 日 検体数 少 - 多検体処理少 - 多検体処理少 ~ 中数検体多検体幅広く対応幅広く対応 解像度 コスト $$$ $$ $$$$ $$$ LABType XR と LABType CWD の解析結果例 LABType XR A locus LABType CWD A locus 商品名 商品コード 梱包単位 商品コード 梱包単位 LABType XR Class I A Locus RSSOX1A 100 test RSOX1AT 20 test LABType XR Class I B Locus RSSOX1B 100 test RSOX1BT 20 test LABType XR Class I C Locus RSSOX1C 100 test RSOX1CT 20 test LABType XR Class II DRB1 Locus RSSOX2B1 100 test RSOX2B1T 20 test LABType CWD Class I A Locus RSSOW1A 100 test RSOW1AT 20 test LABType CWD Class I B Locus RSSOW1B 100 test RSOW1BT 20 test LABType CWD Class I C Locus RSSOW1C 100 test RSOW1CT 20 test LABType CWD Class II DRB1 Locus RSSOW2B1 100 test RSOW2B1T 20 test 保存温度は全て 冷凍 (-20 ~ -80 ) です 19

20 HLA-DNA タイピングキット LABType LABType 専用試薬 LABType SSO の通常キット以外の試薬類です LTPDMX Primer set D-Mix 100 tests 冷凍 (-20 ~ -80 ) LTPDESOL Denaturation buffer 100 tests 冷凍 (-20 ~ -80 )/ 解凍後室温 LTPNEBUF Neutralization buffer 100 tests 冷凍 (-20 ~ -80 )/ 解凍後室温 LTHYBUF Hybridization buffer 1000 tests 冷凍 (-20 ~ -80 )/ 解凍後室温 LTWABUF Wash buffer 1000 tests 冷凍 (-20 ~ -80 )/ 解凍後室温 LTSABUF SAPE buffer 1000 tests 冷凍 (-20 ~ -80 )/ 解凍後室温 LT-SAPE L/T PE Conjugated Streptavidin 2000 tests 冷蔵 (2-8 ) LABType 専用器具 LABType SSO を使用の際の器具類です PCRTRAC PCR トレー / 専用シール 25 トレー /180 枚 室温 SSPSEA300 マイクロ SSP PCR 用シール 20 枚 x15 パック セット 室温 TASPCR トレーアスピレーター LT (96 ウェル PCR トレー用 ) 1 個 室温 20

21 HLA 解析ソフトウェアの紹介 HLA 解析ソフトウェアの紹介 HLA Fusion One Lambda 社の解析ソフトウェア HLA Fusion は マイクロ SSP LABType LABScreen の解析が行えます HLA Fusion は 上記 3 製品のいずれかを購入された際に配布いたします 特長 日本人に限らず 全ての人種の HLA アリル情報を網羅しています HLA-DNA タイピングおよび HLA 抗体のデータを 同一のソフトウェア上で管理ができます 複数の HLA-DNA タイピングキット (LABType シリーズ マイクロ SSP) の解析結果を合わせることで より細かく精査された HLA アリルタイプを解析します 製品のロット情報が入ったファイルをウェブからダウンロードできるため 新しいロット製品が届いた際には容易にロット情報を更新できます HLA-DNA タイピングのデータ解析時に 表示したいアリルに優先順位がつけられます弊社では 日本人集団に 0.01% 以上の頻度で検出される HLA アリル を優先的に表示可能なファイルを配布しています 解析データ例 マイクロ SSP LABType ゲル電気泳動の結果を画面左に入力後 自動解析により HLA タイプ判定します LABScan システムで取込んだ csv ファイルをインポート後 自動解析により HLA タイプを判定します LABScreen LABScan システムで取込んだ csv ファイルをインポート後 自動解析により HLA 抗体の有無や特異性を表示します 21

22 HLA-DNA タイピングキット SeCore SBT HLA-DNA タイピングキット SeCore SBT SeCore SBT SeCore SBT は サンガ シーケンス法を使用して HLA 遺伝子をタイピングする為の試薬です HLA Class I (A,B,C) HLA Class II(DRB1, DRB3,4,5, DQB1, DPB1) の各ローカス用のキットがあります 解析は専用のソフト HLA Fusion( または utype) を使用します 各キットの増幅 シーケンス領域 Locus A B C DRB1 DQB1 DPB1 PCR 増幅 Exon 1-5 Exon 1-5 Exon 1-7 Exon 2,3 Exon 2-3 Exon 2-4 シーケンス Exon 1-5 Exon 1-5 Exon 1-7 Exon 2,3 Exon 2-3 Exon 2-4 Codon 86 Codon 5,85 Codon 5,85 操作の流れ 1. ターゲット領域を PCR 増幅します (1.5 時間 ) 2. ExoSAP-IT を使用し増幅産物中の残存プライマーや dntp を除去します (40 分 ) 3. BigDye Terminator を使用したシーケンス (1.5 時間 ) 4. エタノール沈殿でシーケンス産物を精製します (45 分 ) 5. 精製シーケンス産物の変性後 シーケンサーへロード 得られたデータは専用解析ソフト HLA Fusion(uTYPE) で解析します 試薬調製 PCR 増幅 ExoSap Sequence 反応 精製 ロード 22

23 HLA-DNA タイピングキット SeCore SBT SeCore SBT 解析結果例 商品コード 製品名 梱包単位 保存温度 OLI SECORE LOC A SEQ KIT RUO 25 TESTS 25 tests 冷凍 (-20 ) OLI D SECORE LOC B SEQ KIT 1AMP RUO 25 TESTS 25 tests 冷凍 (-20 ) OLI SECORE LOC C SEQ KIT RUO 25 TESTS 25 tests 冷凍 (-20 ) OLI SECORE LOC DRB1 SEQ KIT RUO 25 TESTS 25 tests 冷凍 (-20 ) OLI SECORE LOC DRB GRP SEQ KIT RUO 25 TESTS 25 tests 冷凍 (-20 ) OLI D SECORE LOC DQB1 SEQ KIT 2AMP R 25 TESTS 25 tests 冷凍 (-20 ) OLI SECORE LOC DPB1 SEQ KIT 2AMP R 25 TESTS 25 tests 冷凍 (-20 ) 23

24 HLA-DNA タイピングキット NXType NGS HLA-DNA タイピングキット NXType NGS NXType NGS NXType NGS は 次世代シーケンサーの技術を使用し HLA-A, B, C, DPB1, DQB1, DRB1, DRB345, DPA1, DQA1 遺伝子を非常に高解像度にタイピングする為の試薬です マルチプレックス PCR により NXType Class I では HLA-A, B, C を NXType Class II では HLA-DRB1, DRB345, DPB1, DQB1 を同時に増幅させることが可能なため より効率的な試薬調製が可能です 特長 マルチプレックス PCR 法を採用し より効率的なワークフローを実現 Long range PCR により 5'-UTR から3'-UTR までをカバー (Class I) 次世代シーケンサ Ion S5 対応 測定終了後に専用解析ソフト TypeStream が自動解析を開始 サンプル調整 ~ 測定 ~ 解析まで最大 96 サンプルをわずか 2.5 日間でタイピング可能 Ion Chef によるテンプレート調製の自動化にも対応 操作の流れ 1. HLA 領域の増幅 : マルチプレックス PCR 2. ライブラリー調製 : フラグメンテーション バーコードの付加 3. テンプレート調製 :Isothermal Amplification(IA) テンプレート ISPs の濃縮 4. シーケンス反応 :Ion S5 を使用したシーケンス 5. データ解析 : プラグインの解析ソフト TypeStream を用いた自動解析 (1) (2) (3) (4) (5) 増幅可能な遺伝子領域 24 商品名 NXType NGS Class I Typing Test NXType NGS Class II Typing Test NXType NGS Class II DQA1 Typing Test NXType NGS Class II DPA1 Typing Test 遺伝子増幅領域 HLA-A, B, C: 全遺伝子領域 HLA-DRB1, 3, 4, 5:Exon 2-Intron 3 HLA-DQB1:Exon 2 - Intron 3 HLA-DPB1:Exon 2-3 UTR HLA-DQA1: 全遺伝子領域を増幅 HLA-DPA1: 全遺伝子領域を増幅

25 HLA-DNA タイピングキット NXType NGS Class I Typing Test HLA-A, HLA-B, HLA-C Class II DQA1 Typing Test HLA-DQA1 Exon 1 Exon 3 Exon 4 Exon 2 Exon 5 Exon 6 Exon 8 Exon 7 Exon 1 Exon 2 Exon 3 Exon 4 Exon 5 HLA-A: ~ 5 kb, HLA-B: ~ 5 kb, HLA-C: ~ 5 kb ~ 7 kb Class II Typing Test HLA-DRB1, DRB3, DRB4, DRB5 Class II DPA1 Typing Test HLA-DPA1 Exon 1 Exon 2 Exon 3 Exon 4 Exon 5 Exon 6 Exon 1 Exon 2 Exon 3 Exon 4 Exon 5 HLA-DQB1 4 kb ~ 10 kb Exon 1 Exon 2 Exon 3 Exon 4 Exon 5 HLA-DPB1 4 kb Exon 1 Exon 2 Exon 3 Exon 4 Exon 5 Exon 6 7 kb OLI-NXT1ABCX NXType NGS Class I Typing Test 96 tests 冷凍 (-20 ) OLI-NXT2RQP1X NXType NGS Class II Typing Test 96 tests 冷凍 (-20 ) OLI-NXT2QA1X NXType NGS Class II DQA1 Typing Test 24 tests 冷凍 (-20 ) OLI-NXT2PAIX NXType NGS Class II DPA1 Typing Test 24 tests 冷凍 (-20 ) コンポーネント NXType NGS 製品共通試薬 : NXType Polymerase NXType dntps NXType Buffer NXType NGS 製品毎に異なる試薬 : NXType Primer Mix TypeStream TypeStream は NXType NGS 試薬専用の解析ソフトです Ion PGM S5 でのシーケンスが終了後 自動的にデータ解析を開始します 25

26 ベンチトップ型次世代シーケンサー Ion S5 システム ベンチトップ型次世代シーケンサー Ion S5 システム Ion S5 システム Ion S5 XL システム Ion S5 / Ion S5 XL システムは 業界トップレベルのスピードと手軽さを兼ね備え DNA からデータ取得まで最もシンプルな次世代シーケンスワークフローを提供します Ion S5 システム Ion S5 XL システム 製品名 Ion S5 システム Ion S5 XL システム 商品コード OLI-IONS5 OLI-IONS5XL リード数 1,500-2,000 万 スループット 6-8 Gb ランタイム 4 時間 解析時間 17.5 時間 4 時間 Ion S5 XL システムは 外部サーバーのパフォーマンスにより処理速度が Ion S5 システムより向上されます Ion S5 システムの試薬セットアップ 操作の流れ 1. 試薬をセットアップ 2. チップの挿入 3. Run Plate の選択 4. シーケンシング開始 Reagent Cartrige Wash Solution Waste Container Cleaning Solution Ion S5 システムは株式会社ベリタスからお届け致します 製品の詳細はお問合せください 26

27 ベンチトップ型次世代シーケンサー Ion S5 システム NGS サンプル調製の自動化 Ion Chef Ion Chef システムは テンプレート増幅とチップローディングを自動化を可能にし Ion S5 システムのワークフローをシンプル化します 機能 Isothermal Amplification ライブラリーの濃縮 チップローディング 利点 ハンズオンタイムの圧倒的短縮 自動化によるデータの安定化 商品コード商品名梱包単位保存温度 OLI-IONCHEF Ion Chef 1 式室温 Ion S5 関連試薬 ライブラリー調製試薬 OLI-ION-XLIB Ion Xpress Plus Fragment Library Kit 20 tests 冷凍 (-20 ) OLI-ION-XBA1 Ion Xpress Barcode Adaptors 1-16 Kit 160 tests 冷凍 (-20 ) OLI-ION-XBA2 Ion Xpress Barcode Adaptors Kit 160 tests 冷凍 (-20 ) OLI-ION-XBA3 Ion Xpress Barcode Adaptors Kit 160 tests 冷凍 (-20 ) OLI-ION-XBA4 Ion Xpress Barcode Adaptors Kit 160 tests 冷凍 (-20 ) OLI-ION-XBA5 Ion Xpress Barcode Adaptors Kit 160 tests 冷凍 (-20 ) OLI-ION-XBA6 Ion Xpress Barcode Adaptors Kit 160 tests 冷凍 (-20 ) OLI-ION-XBA7 Ion Xpress Barcode Adaptors 1-96 Kit 160 tests 冷凍 (-20 ) テンプレート調製試薬 OLI-IONS5-IA-530 Ion S5/IA/530 Reagent Kit (8 rxn) 8 runs 室温 / 冷凍 (-20 ) OLI-IONCHEF-EXT Ion 520 & 530 ExT Kit - Chef 4 runs 室温 / 冷凍 (-20 ) OLI-IONS5-530C4 Ion 530 Chip Kit 4 runs 室温 27

28 HLA 抗体検査 LABScreen HLA 抗体検査 LABScreen LABScreen のキット LABScreen は 検体血清中に含まれる HLA 抗体をハイスループットに検出するキットです 精製 HLA 抗原がコーティングされた 100 色の蛍光ビーズと検体血清を反応させた後 2 次抗体で標識します LABScan 3D システム ( P13) や LABScan システム ( P14) という分析機を使用して蛍光強度を測定し 解析ソフトウェアを用いて HLA 抗体を検出します LABScreen のご使用の際には 血清のバックグランド補正を行うための LABScreen ネガティブコントロール血清 ( 商品コード :LS-NC) および標識抗体である PE Conjugated Goat-Anti Human IgG( 商品コード :LS-AB2) を別途ご用意下さい 特長 一度に 96 サンプルまで判定することができます すべての LABScreen 製品の操作方法は共通で 同一プレートで異なるビーズを用いた同時測定が可能です ビーズミックスには 陽性コントロールビーズ 陰性コントロールビーズが含まれています 陰性コントロール血清の同時解析によりバックグラウンド補正をし nmfi 値 ( 蛍光値 ) を算出します サンプル調製時間はわずか 90 分で 測定時間を含めても 96 サンプルを 120 分以内に判定できます 原理 操作方法 1. LABScreen ビーズ 5 ml に 20 µl のサンプル血清を添加後 室温でインキュベート 4. 洗浄 2. 洗浄 5. LABScan3D/LABScan システムで検出 HLA Fusion で解析 3. PE 標識 2 次抗体を添加し 室温でインキュベート コンポーネント LABScreen Beads LABScreen Wash Buffer -10X 必要な器具 プレートシェーカー プレート遠心機 LABScan 3D システム キット以外に必要な試薬 LABScreen ネガティブコントロール血清 (LS-NC) PE Conjugated Goat Anti Human IgG (LS-AB2) PBS(-) 28

29 HLA 抗体検査 LABScreen LABScreen Mixed LABScreen Mixed は 血清中の HLA Class I HLA Class II あるいは MICA 抗原と結合する抗体の有無を判定するためのスクリーニングキットです 特長 それぞれのビーズに HLA Class I Class II または MICA の精製抗原がコーティングされています 1ウェル内で 1サンプルの Class I 抗体 Class II 抗体 MICA 抗体の有無を同時に判定することができます ビーズミックスには 陽性コントロールビーズと陰性コントロールビーズ 12 種類の HLA Class I ビーズ 5 種類の HLA Class II ビーズ 2 種類の MICA ビーズを含んでいます LABScreen Mix Class I & II のデータ例 HLA Class I : 陽性 HLA Class II : 陰性の検体例です LSM12 LABScreen Mixed Class I & II 100 tests 冷凍 (-80 ) LABScreen Multi LABScreen Multi は HLA Class I 抗体 HLA Class II 抗体 およびヒト好中球抗原に対する抗体 (HNA 抗体 ) の有無を判定するためのスクリーニングキットです HNA 抗体検出は 移植や輸出関連急性肺障害 (TRALI) 等に対するスクリーニングに有用であると考えられています 特長 用途 それぞれのビーズに HLA Class I HLA Class II または HNA の精製抗原がコーティングされています ビーズミックスには 陽性コントロールビーズと陰性コントロールビーズ 12 種類の HLA Class I ビーズ 5 種類の HLA Class II ビーズ 9 種類の HNA ビーズを含んでいます 血清中の HNA-1(a,b,c) 2 3(a,b) 4a 5(a,b) 抗体の有無が調べられます 1ウェルで 1サンプルの Class I 抗体 Class II 抗体 および HNA 抗体を同時に判定することができます 商品コード商品名梱包単位保存温度 LSMUTR LABScreen Multi 100 tests 冷凍 (-80 ) 29

30 HLA 抗体検査 LABScreen LABScreen PRA LABScreen PRA は HLA 抗体の有無と %PRA と同時におおよその特異性を判定するキットです ビーズ1 種類あたり 1 種類のパネル細胞 (HLA 型が既知の細胞株 ) 分の精製 HLA 抗原がコーティングされています 特長 用途 LABScreen PRA Class I は 55 種類のビーズに精製 HLA 抗原がコーティングされています LABScreen PRA Class II は 35 種類のビーズに精製 HLA 抗原がコーティングされています 1ウェルで 1サンプルの Class I 抗体と Class II 抗体を同時にまたは別々に判定します LABScreen PRA Class I データ例 LS1PRA LABScreen PRA Class I 25 tests 冷凍 (-80 ) LS2PRA LABScreen PRA Class II 25 tests 冷凍 (-80 ) LS12PRA LABScreen PRA Class I & II 25 tests 冷凍 (-80 ) LABScreen Single Antigen LABScreen Single Antigen は 血清中に含まれる HLA 抗体あるいは MICA 抗体の特異性を判定するキットです ビーズ 1 種類あたり アリルが分かっている単一の HLA 抗原がコーティングされています DSA( ドナー特異的抗体 ) の検出が可能です 特長 用途 LABScreen Single Antigen Class I - Group 1 は 31 種類の A ローカス 50 種類の B ローカス 16 種類の C ローカスの単一抗原 * がコーティングされています * Lot010 情報 LABScreen Single Antigen Class II - Group 1 は 36 種類の DR ローカス 28 種類の DQ ローカス 31 種類の DP ローカスの単一抗原 * がコーティングされています * Lot011 情報 LABScreen MICA Single Antigen は 10 種類の MICA の単一抗原がコーティングされています LABScreen Single Antigen Class I のデータ例 LS1A04 LABScreen Single Antigen Class I - Group 1 25 tests 冷凍 (-80 ) LS2A01 LABScreen Single Antigen Class II - Group 1 25 tests 冷凍 (-80 ) LSMICA001 LABScreen MICA Single Antigen 25 tests 冷凍 (-80 ) 30

31 HLA 抗体検査 LABScreen LABScreen Single Antigen Supplement 本試薬は LABScreen Single Antigen シリーズに含まれていない日本人及び外国人の HLA アリルがコートされているビーズです LABScreen Single Antigen ビーズと本試薬を併用することで 日本人に見られる HLA をアリルレベルでほぼ全てを網羅でき さらに高精度な DSA(Donor Specific Antibody) の同定が可能となります 特長 用途 日本人に特徴的な 4 桁 HLA アリルを網羅 DSA のモニタリングが可能 簡便な操作方法 : 測定 解析まで約 2 時間 Luminex(LABScan) を使用したハイスループットな測定 コンポーネント LABScreen Supplement Beads LABScreen Wash Buffer - 10X キット以外に必要な試薬 LABScreen ネガティブコントロール血清 (LS-NC) PE Conjugated Goat Anti Human IgG (LS-AB2) PBS (-) LABScreen Single Antigen Class I 及び Supplement の解析結果例 人種 * 人種 アリル AA AI B C H O P アリル AA AI B C H O P Class Ⅰ C*07:04 A*01:02 C*08:02 A*02:05 C*08:03 A*02:07 C*08:04 A*02:10 C*12:02 A*02:18 C*14:03 A*03:02 C*15:05 A*26:02 C*16:02 A*26:03 C*17:03 B*07:14 C*18:01 B*15:04 Class Ⅱ B*15:06 DRB1*04:06 B*15:07 DRB1*04:07 B*15:17 DRB1*04:10 B*15:18 DRB1*04:11 B*15:20 DRB1*08:02 B*15:21 DRB1*08:03 B*15:24 DRB1*08:07 B*15:27 DRB1*13:02 B*27:04 DRB1*14:03 B*27:06 DRB1*14:04 B*35:02 DRB1*14:05 B*35:03 DRB1*14:06 B*35:08 DRB3*02:01 B*35:12 DRB5*01:02 B*38:02 DQA1*02:01 B*39:02 DQB1*03:19 〇 B*39:04 DQA1*01:01 B*39:05 DQB1*05:03 〇 〇 B*39:06 DPA1*01:03 B*39:13 DPB1*02:02 B*40:03 DPA1*03:01 B*40:04 DPB1*26:01 B*40:05 DPA1*02:01 B*41:02 DPB1*30:01 B*42:02 DPA1*03:01 B*48:02 DPB1*31:01 B*50:02 DPA1*01:05 B*55:02 DPB1*40:01 B*55:04 DPA1*01:03 B*56:03 DPB1*85:01 C*01:03 DPA1*02:01 C*02:10 DPB1*105:01 C*04:03 DPA1*02:01 C*07:01 DPB1*107:01 AA: オーストラリア先住民 AI: アメリカ先住民 B: 黒人 C: 白人 H: ヒスパニック O: 東アジア ( 日本人 ) P: オセアニア LS1ASP01 LABScreen Single Antigen Class I - Supplement Group 1 25 tests 冷凍 (-80 ) LS2ASP01 LABScreen Single Antigen Class II - Supplement Group 1 25 tests 冷凍 (-80 ) LABScreen Single Antigen とのセット製品 LS1A04SP LABScreen Single Antigen Class I + Supplement Class I Group 1 25 tests 冷凍 (-80 ) LS2A01SP LABScreen Single Antigen Class II +Supplement Class II Group 1 25 tests 冷凍 (-80 ) 31

32 HLA 抗体検査 LABScreen LABScreen 専用試薬 LABScreen で HLA 抗体を測定する際に必要な試薬です LS-NC LABScreen ネガティブコントロール血清 400 µl (20 tests) 冷凍 (-20 ) LS-AB2 PE Conjugated Goat Anti-Human IgG 1000 tests 冷蔵 (2-8 ) IGM-PCB IgM Positive Control Beads 25 tests 超凍 (-80 ) IGM-PEC1 PE-Conjugated Anti-Human IgM 1000 tests 冷蔵 (2-8 ) LABScreen Single Antigen Supplement 添加の有無と測定可能な日本人アリル頻度の比較 LABSreen Single Sntigen 試薬に LABScreen Single Antigen Supplement 試薬を添加することで 日本人で高頻度で見られる HLA アリルは HLA-A -B -C および -DRB1 いずれも 99% 以上カバー可能です 100 測定可能なアリル (%) A B C DRB1 LABScreen Single Antigen のみ LABScreen Single Antigen + LABScreen Single Antigen Supplement 32

33 HLA 抗体検査 LABScreen C1qScreen C1qScreen は 補体の第一成分のひとつである C1q と PE 標識抗 C1q 抗体のセット製品です LABScreen 検出試薬 (PE Conjugated Goat Anti-Human IgG 商品コード :LS-AB2) の代わりに C1qScreen を使用することで 補体結合性の HLA 抗体を特異的に検出します したがって 通常の LABScreen データとの比較解析から 反応した HLA 抗体が補体結合性であるかどうかを観察することが可能になります 特長 用途 お手持ちの LABScreen ビーズにサンプル血清を添加する前に C1q と反応させ PE 標識抗 C1q 抗体で検出することで補体結合性の HLA 抗体を測定します LABScan システム /LABScan3D システムによるデータ読取方法は 通常の LABScreen と同様です 操作方法 1. サンプル血清の非働化 (56 30 分 ) 2. C1q ストック溶液を HEPES バッファーで希釈 3. 非働化したサンプル血清 希釈した C1q 溶液を混合 4. LABScreen ビーズを添加し インキュベート ( 室温 20 分 ) 5. PE 標識抗 C1q 抗体を添加し インキュベート ( 室温 20 分 ) 6. 洗浄 7. LABScan システム /LABScan3D システムで検出 HLA Fusion で判定 IVIG 治療のモニタリング例 コンポーネント C1q positive control beads C1q PE 標識ヒト C1q 抗体 HEPES バッファーキット以外に必要な試薬 PBS(-) ph7.4 LABScreen 各種製品 ( オプション品 ) 陽性コントロール血清 (C1QS-PC1 C1QS-PC2 オプション ) 陰性コントロール血清 (C1QS-NC オプション) IVIG によるバックグラウンドの影響を低減します (One Lambda Product News 2010 Spring より ) C1Q C1qScreen 25 tests 冷凍 (-80 ) C1QS-PC1 C1q Screen Positive Control Class I 20 tests 冷凍 (-80 ) C1QS-PC2 C1q Screen Positive Control Class II 20 tests 冷凍 (-80 ) C1QS-NC C1q Screen Negative Control Serum 20 tests 冷凍 (-80 ) LABScreen Single Antigen とのセット製品 LS1A04C1Q LABScreen Single Antigen Class I + C1qScreen 25 tests 冷凍 (-80 ) LS2A01C1Q LABScreen Single Antigen Class II + C1qScreen 25 tests 冷凍 (-80 ) 33

34 HLA 抗体検査 FlowPRA Quantiplex PE に近い蛍光がついたマイクロビーズで LABScan システム /LABScan3D システムで得られた Trimmed mean の蛍光強度を SFI(Standard Fluorescent Intensity) に換算します ビーズ固有の SFI 値の例 商品コード商品名梱包単位保存温度 LXQNTPLX Quantiplex Beads 25 tests 冷蔵 (2-8 ) Adsorb Out ラテックスに対する抗体を持つためにバックグラウンドが高くなる検体に対して HLA 抗体の弱陽性反応を妨げる非特異性の結合を取り除きます LABScreen FlowPRA に利用可能です Adsorb Out 処理によるバックグラウンド値の変化 Adsorb Out 処理前 Adsorb Out 処理後 商品コード商品名梱包単位保存温度 ADSORB Adsorb Out 25 tests 冷蔵 (2-8 ) 34

35 HLA 抗体検査 LABScreen HLA 抗体検査 FlowPRA FlowPRA は フローサイトメーターを使用して血清に含まれる HLA 抗体を検出する試薬です 精製 HLA 抗原をコーティングした直径約 2-4µm のマイクロビーズに結合する HLA 抗体を FITC 標識ヒト IgG Fc γ 抗体で蛍光標識してフローサイトメーターで測定します FlowPRA 測定の際には 専用のネガティブコントロール血清 ( 商品コード : FL-NC) およびポジティブコントロール血清 ( 商品コード : FL1-PC FL2-PC) を併せてご用意下さい FlowPRA のキット 特長 1 検体から解析可能です 直径約 2-4µm のマイクロビーズに 精製 HLA 抗原がコーティングされています HLA 抗原がコーティングされた Class II ビーズは PE に近い波長の蛍光物質で標識されています (FlowPRA Class I Screening ビーズには 蛍光標識はされません ) 操作方法 1. 血清とビーズとコントロールビーズを混合し 暗所 で 30 分間インキュベート 2. 洗浄 3. 1 x FITC anti-human IgG をビーズに加え 暗所 で 30 分間インキュベート 4. 洗浄 5. 1 x PBS をチューブに添加後 フローサイトメーターで測定コンポーネント FlowPRA beads FITC 標識ヒト IgG Fc γ Washing Buffer(10 x) FlowPRA Screening Test 血清中の HLA 抗体の有無の確認および %PRA の測定に用いるキットです FlowPRA Class I FlowPRA Class II FlowPRA Class I & II 用の 3 種類を販売しております 特長 FlowPRA Class I ビーズ FlowPRA Class II ビーズいずれも 30 種類のパネル細胞から精製した HLA 抗原をコーティングした 30 種類のビーズの混合物です FlowPRA Class I ビーズは蛍光未標識である一方 FlowPRA Class II ビーズは PE に近い波長をもつ蛍光物質で標識されています フローサイトメーターでビーズの蛍光を識別できるため Class I 抗体と Class II 抗体を別々あるいは同時測定が可能です ビーズに結合した HLA 抗原は すべてのコモン HLA 抗原および多くのレア抗原を網羅しています 35

36 HLA 抗体検査 FlowPRA FlowPRA Screening Test のデータ例 陰性検体 陽性検体 FL1-30 FlowPRA Class I Screening Test (30 抗原 ) 50 tests 冷凍 (-80 ) FL2-30 FlowPRA Class II Screening Test (30 抗原 ) 50 tests 冷凍 (-80 ) FL12-60 FlowPRA Class I & II Screening Test (60 抗原 ) 50 tests 冷凍 (-80 ) FlowPRA Specific Test 血清中に存在する HLA 抗体の特異性の判定および %PRA を測定するキットです パネル細胞より精製された HLA Class I または Class II 抗原をコートしたビーズを用いて HLA 抗体のおおよその特異性を判定します 特長 ビーズ1 種類あたり 1 種類のパネル細胞 (HLA アリルが分かっている細胞 ) より精製した HLA 抗原がコーティングされています FlowPRA Specific Class I ( 商品コード :FL1SP) は 32 種類の細胞株より精製した HLA Class I 抗原をコーティングしたビーズを用いて HLA Class I 抗体の特異性を判定します FlowPRA Specific Class II( 商品コード :FL2SP) は 32 種類の細胞株より精製した HLA Class II 抗原をコーティングしたビーズを用いて HLA Class II 抗体の特異性を判定します ビーズは4 本のバイアルにそれぞれ 8 種類のパネル抗原が結合されています 各バイアルに含まれているビーズは異なる蛍光特異性を持つためフローサイトメーターで識別でき どのパネル血清が反応したかを確認することが可能です FlowPRA Specific Test のデータ例 陰性コントロール陽性コントロール陽性検体 FL1SP FlowPRA Specific Class I (32 抗原 ) 10 tests 冷凍 (-80 ) FL2SP FlowPRA Specific Class II (32 抗原 ) 10 tests 冷凍 (-80 ) 36

37 HLA 抗体検査 FlowPRA FlowPRA Single Antigen 各ビーズに対する反応性から検体血清中の HLA 抗体の特異性を判定します ビーズ 1 種類あたり1 種類の HLA 抗原がコートされています 特長 FlowPRA Screening や FlowPRA Specific Test で同定が難しかった HLA 抗体や 弱抗体を感度良く同定します 1バイアルあたり コントロールビーズを含む 9 種類のビーズから構成されています FlowPRA Class I Single Antigen Supplement は 10 グループあり A locus B locus C locus の抗体をカバーしています FlowPRA Class I Single Antigen( 商品コード :FL1HD) は FlowPRA Class I Single Antigen Supplement Group 1 から Group 4 までのセット製品です FlowPRA Class II Single Antigen Supplement は 5 グループあり DRB1 DR345 DQB1 DPB1 の抗体をカバーしています FlowPRA Class II Single Antigen( 商品コード :FL2HD) は FlowPRA Class II Single Antigen Supplement Group 1 から Group 4 までのセット製品です FlowPRA Single Antigen でコートされている HLA 抗原の種類 HLA Class I グループ 商品コード HLA 抗原の種類 Group 1 FL1HD01 A1 A2 A3 B49 A25 A29 A30 A26 Group 2 FL1HD02 A68 A11 A34 A24 A32 A33 A31 A23 Group 3 FL1HD03 B51 B13 B18 B35 B62 B45 B60 B44 Group 4 FL1HD04 B38 B57 B7 B52 B27 B8 B65 B55 Group 5 FL1HD05 B37 B39 B41 B42 B46 B47 B48 B50 Group 6 FL1HD06 B53 B54 B56 B58 B59 B61 B63 B64 Group 7 FL1HD07 B67 B81 B72 B73 B75 B76 B77 B78 Group 8 FL1HD08 A36 A66 A43 A74 A80 B71 B8201 A69 Group 9 FL1HD09 Cw1 Cw2 Cw10 Cw9 Cw4 Cw5 Cw6 Cw7 Group 10 FL1HD10 Cw8 Cw12 Cw14 Cw15 Cw16 Cw17 Cw18 Cw10 HLA Class II グループ商品コード HLA 抗原の種類 DR4 Group 1 FL2HD01 DR1 DR103 DR7 DR8 (rdr0401) DR12 DR13 DR13 DR15 Group 2 FL2HD02 DR14 (rdr1201) (rdr1301) (rdr1303) (rdr1501) DR1 DR4 Group 3 FL2HD03 DR51 DR52 DR53 (rdr0102) (rdr0404) DR4 (rdr0405) DR10 DR11 DR16 DR17 DR18 DR9 (rdr0901) DR12 (rdr1202) DR15 (rdr1502) Group 4 FL2HD04 DQ2 DQ4 DQ5 DQ6 DQ7 DQ8 DQ9 DP (Mixed) Group 5 FL2HD05 DP1 DP2 DP3 DP4 DP5 DP11 DP13 DP17 37

38 抗 AT1R 抗体検出試薬 AT1R FL1HD FlowPRA Class I Single Antigen 10 tests 冷凍 (-80 ) FL1HD01 FlowPRA Class I Single Antigen Supplement-Group 1 10 tests 冷凍 (-80 ) FL1HD02 FlowPRA Class I Single Antigen Supplement-Group 2 10 tests 冷凍 (-80 ) FL1HD03 FlowPRA Class I Single Antigen Supplement-Group 3 10 tests 冷凍 (-80 ) FL1HD04 FlowPRA Class I Single Antigen Supplement-Group 4 10 tests 冷凍 (-80 ) FL1HD05 FlowPRA Class I Single Antigen Supplement-Group 5 10 tests 冷凍 (-80 ) FL1HD06 FlowPRA Class I Single Antigen Supplement-Group 6 10 tests 冷凍 (-80 ) FL1HD07 FlowPRA Class I Single Antigen Supplement-Group 7 10 tests 冷凍 (-80 ) FL1HD08 FlowPRA Class I Single Antigen Supplement-Group 8 10 tests 冷凍 (-80 ) FL1HD09 FlowPRA Class I Single Antigen Supplement-Group 9 10 tests 冷凍 (-80 ) FL1HD10 FlowPRA Class I Single Antigen Supplement-Group tests 冷凍 (-80 ) FL2HD FlowPRA Class II Single Antigen 10 tests 冷凍 (-80 ) FL2HD01 FlowPRA Class II Single Antigen Supplement-Group 1 10 tests 冷凍 (-80 ) FL2HD02 FlowPRA Class II Single Antigen Supplement-Group 2 10 tests 冷凍 (-80 ) FL2HD03 FlowPRA Class II Single Antigen Supplement-Group 3 10 tests 冷凍 (-80 ) FL2HD04 FlowPRA Class II Single Antigen Supplement-Group 4 10 tests 冷凍 (-80 ) FL2HD05 FlowPRA Class II Single Antigen Supplement-Group 5 10 tests 冷凍 (-80 ) FlowPRA 専用試薬 FlowPRA で HLA 抗体を測定する際に必要な試薬類です 商品コード商品名製品説明梱包単位保存温度 FL1-PC FL2-PC FlowPRA Class I ポジティブコントロール血清 FlowPRA Class II ポジティブコントロール血清 FlowPRA クラス I 専用ポジティブコントロール血清 FlowPRA クラスⅡ 専用ポジティブコントロール血清 10 tests 10 tests FL-BF100 FlowPRA Wash Buffer (10 ) FlowPRA 専用 10 x Wash Buffer 100 ml FLCNTBD FL-NC FL-RP FlowPRA コントロールビーズ FlowPRA Class I & II ネガティブコントロール血清 FlowPRA 試薬パック フロー PRA クラスⅠ & Ⅱ 専用コントロールビーズフロー PRA クラスⅠ & Ⅱ 専用ネガティブコントロール血清 FlowPRA Wash Buffer (10 x) と 100 x FITC conjugated anti- human IgG のセット 50 tests 10 tests 1 セット 冷凍 (-80 ) 冷凍 (-80 ) 冷蔵 (2-8 ) 冷凍 (-80 ) 冷凍 (-80 ) 冷凍 (-80 ) 38

39 HLA 抗体検査 FlowPRA 抗 AT1R 抗体検出試薬 AT1R 血清もしくは血漿サンプル中に存在する AT1R(Angiotensin II Type I Receptors) と結合する抗 AT1R 抗体を検出する試薬です 特長 ELISA 法を利用した簡便な抗 AT1R 抗体の検出 定量が可能です キットにはスタンダードとコントロールが含まれ 信頼性の評価が容易です 操作方法 1. AT1R マイクロプレートにスタンダード コントロール サンプルを加えてインキュベーション (2-8 2 時間 ) 2. 洗浄 3. HRP 標識二次抗体を加えてインキュベーション ( 室温 1 時間 ) 4. 洗浄 5. TMB 基質を加えてインキュベーション ( 室温遮光 20 分 ) 6. プレートリーダーで 450nm における吸光度を測定 7. 専用判定ソフトウェアで解析 コンポーネント AT1R コート済マイクロタイターストリップ 洗浄バッファー 希釈バッファー コンジュゲートバッファー スタンダード ( U/mL) ポジティブコントロール ネガティブコントロール HRP 標識抗ヒト IgG TMG 溶液 ストップソリューション 必要な器機 マイクロプレートシェーカー マイクロプレート ELISA リーダーなど 商品コード商品名梱包単位保存温度 EIA-ATIRX 抗 AT1R 抗体検出キット 40 tests 冷蔵 (2-8 ) 39

40 その他サポート試薬 その他サポート試薬 クロスマッチや HLA 血清学的検査を行うときに使用する試薬類です コントロール血清 HLA タイピングやクロスマッチ向けの細胞毒試験用コントロール血清です NS ネガティブコントロール血清 1 ml 冷凍 (-20 ) ATSMX 抗 T リンパ球抗体 IgM 1 ml 冷凍 (-20 ) ATSM 抗 T リンパ球抗体 IgM 1 ml 冷凍 (-20 ) ATSG 抗 T リンパ球抗体 IgG 1 ml 冷凍 (-20 ) AMSM 抗モノサイト抗体 IgM 1 ml 冷凍 (-20 ) ALSM 抗リンパ球抗体 IgM 1 ml 冷凍 (-20 ) ALSG 抗リンパ球抗体 IgG 1 ml 冷凍 (-20 ) AHG1 ヤギ IgG 抗ヒトカッパー 1 ml 冷凍 (-80 ) AGSM 抗顆粒球抗体 IgM 1 ml 冷凍 (-20 ) ABSM 抗 B リンパ球抗体 IgM 1 ml 冷凍 (-20 ) ABSG 抗 B リンパ球抗体 IgG 1 ml 冷凍 (-20 ) 補体 HLA 血清タイピングやクロスマッチ用の補体です CABC-50 ウサギ補体 ABC 50 ml 冷凍 (-80 ) CDR50 ウサギ補体 DR 50 ml 冷凍 (-80 ) 40 抗原検査関連試薬 HLA 血清タイピングに使用する補助試薬です FQAE500 フルオロクエンチ AE 500 ml 冷蔵 (2-8 ) FQAE2000 フルオロクエンチ AE 500 ml x 4 本 冷蔵 (2-8 ) FQAE100 フルオロクエンチ AE 100 ml 冷蔵 (2-8 ) TIS-250U テラサキインスタシール 250 枚 室温 TIS-1000U テラサキインスタシール 1000 枚 室温 TFS-250U フルオロシール 250 枚 室温 TFS-1000U フルオロシール 1000 枚 室温 SF-500 ステインフィックス 500 ml 冷蔵 (2-8 ) SF-2000 ステインフィックス 500 ml x 4 本 冷蔵 (2-8 ) MO ミネラルオイル 1 ガロン 室温

41 HLA モノクローナル抗体 HLA モノクローナル抗体 HLA モノクローナル抗体 HLA タイピング用に作製された HLA モノクローナル抗体です 本製品はカスタム製品です 詳細はお問合せ下さい HLA モノクローナル抗体 ラベリングされていない HLA モノクローナル抗体は凍結乾燥品としてお届けします 100 µl の蒸留水に溶かして使用します 特異性は NIH 標準法の HLA 細胞障害試験を用いて 1:10 希釈して決定しています フローサイトメーター等で使用する場合は この溶液をストックとして使います ビオチン標識や FITC 標識された HLA モノクローナル抗体もあります 特異性の見方 + : HLA 抗原が存在している場合 強陽性又は陽性を示します - : HLA 抗原が存在していない場合 陰性を示します +/- : 抗原が存在している場合 陽性になる可能性は 50% 以上です -/+ : 抗原が存在している場合 陽性になる可能性が 50% 以下です R-value の値が 1 に近い製品ほど 対象の HLA 抗原に対する特異性が高いとされています 抗原名の後ろに + がついている場合は リストに載っていない他の HLA 特異性を持っている可能性があります 特に CREG(Cross Reaction Group) が含まれる場合があります (P.54 を参照 ) HLA Class I Monoclonal Antibodies 商品コード HLA 特異性 Isotype R-value Form 保存温度 0544HA A1,A11,A26+ IgM 1 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0289HA A1,A36 IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0397HA A2 IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0475HA A2 IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0791HA A2 IgG 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0887HA A2,A3,A29+ IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0138HA A2,A24 IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0578AHA A2,A25,A32+ IgM 1 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0189HA A2,A28+ IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0131HA A2,A69 IgG 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0335HA A2,+/-A69 IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0840AHA A2,B5 IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0543HA A2,B17 IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0580BHA A2,B17 IgM -- 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0141HA A3 IgM 0.9 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0170HA A3 IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0378HA A3 IgM 1 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0341HA A9,A25,A32 IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0549HA A9,A32,B13+ IgM -- 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0553HA A10,A11+ IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0660HA A10,A28,B75+ IgM -- 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0662HA A10,B62,B71+ IgM 0.84 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0284HA A11 IgG 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0041HA A23,A24 IgG2b 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0497HA A23,A24 IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0586AHA A24,A11,A2403+ IgM -- 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0514AHA A25,A26,A34+ IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0136HA A25,A32 IgM 1 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0473HA A25+ IgG 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0102HA A26,A34,B71,B62 IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 41

42 HLA モノクローナル抗体 HLA Class I Monoclonal Antibodies 続き 商品コード HLA 特異性 Isotype R-value Form 保存温度 0334HA A29 IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0273HA A30,A31 IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0361HA A30,A31 IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0612HA A33,B8 IgM -- 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0119HA A34,B71,-/+A26 IgM 0.66 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0070HA B5,B49,B56+ IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0884HA B7,B27,B42+ IgM 0.86 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0059HA B8 IgM 1 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0201HA B8 IgM 1 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0404HA B8 IgM 1 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0332HA B8,B14 IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0735AHA B12,B76+ IgG 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0211BHA B13 IgM 1 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0044HA B13,B62,B15 IgG 1 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0833HA B14+ IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0277HA B14 IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0196HA B17 IgM 1 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0786BHA B17,B35,B44+ IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0495HA B21,B70,B55+ IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0792AHA B27,B44,B47+ IgG 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0789AHA B35,B57,B75,B77+ IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0601HA B44,B75,B17+ IgM -- 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0831HA B48,B60+ IgM 0.74 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0548HA Bw4,A9,A32 IgM 1 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0149AHA Bw6,B77 IgM 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) HLA Class II Monoclonal Antibodies 商品コード HLA 特異性 Isotype R-value Form 保存温度 0260HA DR3,6+ IgM 0.75 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0222HA DR4+ IgM -- 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0757AHA DR7+ IgM 0.74 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0834AHA DR8,12+ IgM 0.9 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0861HA DR8,12+ IgM 0.83 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0399HA DR9+ IgM 0.86 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0845HA DR11 IgG 0.82 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0854HA DR11 IgM 0.9 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0219HA DR3,6 IgG -- 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0258HA DR13+ IgG 0.75 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0218HA DR15,16 IgG 0.7 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0435AHA DR15,16 IgM 0.92 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0356HA DR17,18 IgM 0.9 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0500HA DR17,18 IgM 0.87 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0635HA DR52 IgM 0.84 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0781HA DR52 IgM 0.76 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0275HA DR53+ IgG 0.61 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0265HA DQ1,7 IgM 0.85 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0782HA DQ3+ IgM 0.83 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0736HA DQ4+ IgM 0.84 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0237HA DQ6+ IgM 0.75 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0248HA DQ7 IgM 0.91 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0249AHA DQ7 IgM 0.87 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0267HA DQ7 IgM 0.87 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0280HA DQ7 IgM 0.91 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0769AHA DQ7+ IgM 0.88 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 0778HA DQ7+ IgM 0.88 凍結乾燥品 冷蔵 (2-8 ) 42

43 HLA モノクローナル抗体 Biotinylated Monoclonal Antibodies 商品コード HLA 特異性 Isotype 梱包単位 Form 保存温度 BIH0331 A1,A36 IgM 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) BIH0648 A2 IgM 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) BIH0037 A2,A28 IgG2a 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) BIH0269 A3 IgM 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) BIH0964 A9 IgG2b 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) BIH0084 A11 IgM 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) BIH0155 A29 IgM 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) BIH0087 A30,A31 IgM 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) BIH1453 B7, B27 IgG 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) BIH0209 B5,B7801 IgM 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) BIH0536A B8 IgG2b 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) BIH0261 B13 IgM 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) BIH0129 B13,B15 IgM 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) BIH0507 B15,B57 IgM 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) BIH0243 B57,B58 IgM 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) BIH0007 Bw4 IgG2a 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) BIH0038 Bw6 IgG3 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) BIH0126 DR1,10,103 IgM 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) BIH0453B DR4 IgM 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) BIH0108 DR7 IgM 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) BIH1112 Class I IgG1 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) BIH0002 Class II IgG2a 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) FITC Conjugated Monoclonal Antibodies 商品コード HLA 特異性 Isotype 梱包単位 Form 保存温度 FH0037 A2,A28 IgG2a 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) FH0964 A9 IgG2b 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) FH1453 B7,27 IgG 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) FH0536A B8 IgG2b 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) FH0066 B12 IgG2b 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) FH0007 Bw4 IgG2a 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) FH0038 Bw6 IgG3 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) FH0002 HLA Class II IgG2a 25 tests 液状品,10 µl/test 冷暗所 (2-8 ) 43

44 クロスマッチ関連細胞分離試薬 クロスマッチ関連細胞分離試薬 STEMCELL Technologies 社では 種々の HLA アプリケーションに最適な細胞を調製するための細胞分離試薬を取扱っています 正確で再現性のある結果を出すために 各アプリケーションに必要とされる量の細胞が 高純度 高バイアビリティの状態で得られます HLA 抗体解析用 / クロスマッチ用細胞分離製品として 2つの細胞分離システム EasySep と RosetteSep があります 用途 リンパ球クロスマッチ 未標識の T 細胞と B 細胞が分離できるため ビーズが細胞に影響を及ぼすことがなく 正確でクリアな補体依存性細胞毒性試験 (CDC) の結果を得ることができます また 細胞にビーズがついていないため エオジン染色 蛍光染色のどちらにも使用できます フローサイトクロスマッチ患者血清中にドナー抗体の存在を見つけるための検査 (FCXM) を行う際に リンパ球の純度やバイアビリティーが高い細胞を得ること 細胞膜表面への影響がないことが重要です また 的確な結果を得るためには T 細胞 B 細胞に分離することも重要です EasySep および RosetteSep は FCXM に最適な細胞を得ることができます キメリズム解析キメリズム解析は 移植後の生着あるいは拒絶のモニタリング また移植後の適切な治療を決定するために有用であると言われています キメリズム解析は患者末梢血または骨髄中にドナー白血球の有無を見つけるために信頼性の高い技術を必要とします EasySep RosetteSep は検体間でカラムを共有しないため クロスコンタミネーションの危険性が少なく また小児検体をはじめサンプル量に余裕がないケースに有効です EasySep EasySep は 特異的な抗体と FACS 使用にも対応した極小ナノパーティクルを組み合わせた免疫磁気細胞分離方法です カラムを必要としません Ficoll 調製で得られた単核球から分離するキット 全血からダイレクトに分離するキットの 2 タイプがあります 操作方法 EasySep TM Selection Cocktail を添加 EasySep TM magnetic particles を添加 チューブを磁石にセット (5 分間静置 ) TAC を カクテル中の TAC とターゲット細胞が結合します EasySep TM magnetic particles は 細胞と結合し 介して細胞と結合した磁性ナノビーズにより た TAC と結合します チューブの壁に細胞が引き寄せられます 10 分反応 5 分反応細胞を回収 4 44

45 クロスマッチ関連細胞分離試薬 EasySep 専用磁石 EasySep による細胞分離の専用磁石です EasySep Magnet The Big Easy EasySep Magnet FACSチューブ用 14 mlポリスチレンチューブ用 2.5ｘ108個まで細胞を処理すること が可能です 10 9個まで細胞を処理することが 可能です 商品コード ST-19951HLA ST-19051HLA ST-19954HLA ST-19054HLA ST ST ST ST 商品名 EasySep Neg HLA WB T Cell Kit EasySep Neg HLA T Cell Kit EasySep Neg HLA WB B Cell Kit EasySep Neg HLA Human B Cell Kit EasySep Magnet The Big Easy EasySep Magnet RoboSep Buffer EasySep Buffer 梱包単位 全血 200 ml 用 1 x 10^9 cells 用 全血 200 ml 用 1 x 10^9 cells 用 1個 1個 250 ml 1000 ml 保存温度 冷蔵 2-8 冷蔵 2-8 冷蔵 2-8 冷蔵 2-8 室温 室温 冷蔵 2-8 冷蔵 2-8 * RoboSep Buffer と EasySep Buffer は EasySep による細胞分離に使用します バッファー組成は共通です RosetteSep STEMCELL Technologies 社 の 免 疫 比 重 分 離 試 薬 RosetteSep では Tetrameric Antibody Complex TAC と呼ばれるユニークな抗体複合体を使用します 不要な 細胞にこの TAC を介して血液中の赤血球を結合させ ロ ゼットを作らせます ロゼットにより比重が増した不要 Unwanted Cell Targeted for Depletion な細胞は比重遠心により除去され 目的の細胞はメディ ウムの上部の層から回収できます Tetrameric Antibody Complexes AntiCell AntiGlycophorinA AntiAntiGlycophorinA GlycophorinA SepMate SepMate は全血から細胞分離する為の特殊チューブです 血液サンプルの重層操作が簡便となり さらに比重遠心後 の細胞はデカンテーションで回収できます 45

46 クロスマッチ関連細胞分離試薬 RosetteSep & SepMate RosetteSep と 細胞分離用チューブ SepMate を併用することで 反応時間並びに作業ステップが減らせ 効率良いサンプル処理と高い再現性が実現できます 全血から 30 分以内に目的細胞をネガティブ分離することが可能です カラムも免疫磁気ビーズも使用しない為 細胞に不要な活性化やダメージを与えません 分離した細胞はダイレクトクロスマッチ試験等に使用可能です 推奨バッファー :PBS + 2% FBS(ST-07905) 比重遠心液 :Lymphoprep(ST-07801) RosetteSep + SepMate: 結果例 CD3+ T 細胞 : 純度 99 % CD19+ B 細 : 純度 95% ST SepMate Pack RUO 100 本入 室温 ST SepMate Pack RUO 500 本入 室温 ST SepMate Pack RUO 100 本入 室温 ST SepMate Pack RUO 500 本入 室温 ST-15061HLA RosetteSep HLA Human T Cells 全血 250mL 用 冷蔵 (2-8 ) ST-15081HLA RosetteSep HLA Human T Cells 全血 1000mL 用 冷蔵 (2-8 ) ST-15064HLA RosetteSep HLA Human B Cells 全血 250mL 用 冷蔵 (2-8 ) ST-15084HLA RosetteSep HLA Human B Cells 全血 1000mL 用 冷蔵 (2-8 ) ST-15263HLA RosetteSep HLA Human Total Lymphocyte 全血 250mL 用 冷蔵 (2-8 ) ST-15283HLA RosetteSep HLA Human Total Lymphocyte 全血 1000mL 用 冷蔵 (2-8 ) ST D-PBS with 2% FBS 500mL 冷蔵 (2-8 ) ST Lymphoprep 250mL 室温 46

47 HLA コミュニティーのご案内 ベリタスサイエンスレターのご案内 HLA コミュニティーのご案内 日本国内における HLA 分野のパイオニアである弊社から HLA 製品情報 技術情報を HLA コミュニティー としてウェブ発信しております HLA コミュニティー を通して 最新の技術と情報を日本の HLA 研究者 病院検査現場の先生方にお届け致します コンテンツ例 HLA 製品紹介プレゼンテーョン マイクロ SSP JPN( P6) 製品資料 HLA Fusion( P 21) の解析に必要なファイル類のダウンロード 講習会 ワークショップのご案内... など HLA コミュニティー Go>> 詳しくは HLA コミュニティー ウェブサイトをご覧下さい URL: ベリタスサイエンスレターのご案内 VERITAS SCIENCE LETTER - HLA & Transplantation 弊社では VERITAS SCIENCE LETTER - HLA & Transplantation の名称で HLA の基本情報から移植に関わる HLA 抗体の最新情報 更には論文紹介などによる海外の動向まで幅広い情報提供を致します VERITAS SCIENCE LETTER - HLA & Transplantation バックナンバー Vol 7: 理想的な癌抗原ペプチドとヒト ips 細胞由来の樹状細胞を用いた癌免疫療法の開発熊本大学大学院生命科学研究部 免疫識別学分野西村泰治先生他 Vol 8: 文献紹介 Higher risk of kidney graft failure in the presence of antiangiotensin II type 1 receptor antibodies. Vol 9: 文献紹介移植における抗 HLA 抗体に対する国際コンセンサスガイドライン Vol 10: 移植後に出現する HLA 抗体 DSA(donor-specific antibody) の最新知見 Vol 11: HLA 抗体特異性が 4 桁レベルで乖離した症例 HLA & Transplantation Letter は定期的に配信しております 配信 バックナンバーをご希望の方は弊社ウェブサイトよりお申込下さい URL: 47

48 HLA の基礎 ( 付録 ) HLA の基礎 HLA 分子の構造と役割 HLA 分子は一部が細胞膜に埋め込まれた形で発現し 細胞外ドメイン 細胞膜貫通ドメイン 細胞内ドメインの 3 つに分けらます さらに細胞外ドメインは最も多型性に富み 抗原ペプチドの選択的受容と T 細胞への抗原提示をしています また T 細胞上に発現している抗原と特異的に結合する構造をもっています HLA Class I(HLA-A,B,C など ) 分子は 内在の 9 個のアミノ酸を溝に埋め込んだような形で キラー T 細胞に提示します 感染細胞などで非自己のアミノ酸が提示されると CD8 陽性キラー T 細胞はこういった細胞を破壊します HLA クラスⅡ(HLA-DR,DQ,DP など ) は 食作用などで取り込んだ外来の 15 個前後のアミノ酸を溝に埋め込んだような形で CD4 陽性ヘルパー T 細胞に提示します ヘルパー T 細胞は細胞障害活性をもたず 非自己のアミノ酸を確認すると Th1 サイトカイン Th2 サイトカインを放出します Th1 サイトカインはキラー T 細胞の活性化を促進し Th2 サイトカインは B 細胞の免疫グロブリン産生を促進します HLA 分子の構造 HLA 分子の機能 48

49 HLA の基礎 ( 付録 ) HLA の遺伝子地図 HLA 領域はヒト第 6 染色体短腕部 6p21.31 に位置し,HLA 遺伝子を含む約 4 Mb から構成されています この領域は, ヒトゲノムにて最も多型性に富み, これまでに HLA 遺伝子 6 座 (HLA-A,-B,-C,-DR,-DQ, -DP) にて,15,000 を超える膨大な HLA アリルが同定されています HLA 遺伝子地図 HLA アリル数の増加 アリル数 : 16,251 (2016 年 12 月現在 IMGT/HLA データベース参照 ) HLA Class I: 12,021 HLA Class II: 4,230 HLA Class I HLA Class II Gene A B C DRB1 DQA1 DQB1 DPA1 DPB1 Alleles 3,830 4,647 3, , Proteins 2,703 3,408 2,391 1, Nulls

50 HLA の基礎 ( 付録 ) HLA 抗原型の種類 A locus B locus DR locus DQ locus A1 B5 B51,B5102,B52 B35 DR1 DR103 DQ1 DQ5, DQ6 A2 A203, A210 B51 B5101,B5103 B37 DR2 DR15, DR16 DQ2 A3 B7 B703 B40 B60, B61 DR3 DR17, DR18 DQ3 DQ7, DQ8, DQ9 A23, A9 A24, B8 B41 DR4 DQ4 A2403 A24 A2403 B12 B44, B45 B42 DR5 DR11, DR12 DP locus A11 B13 B46 DR6 DR13, DR14 DPw1 A10 A25, A26, A34, A66 B14 B64, B65 B47 DR14 DR1403, DR1404 DPw2 A29, A30, A19 B62, B63, A31, A32, B15 B75, B76, B77 A33, A74 B48 DR7 DPw3 A28 A68, A69 B16 B38,B39, B53 DR8 DPw4 A36 B39 B3901,B3902 B59 DR9 DPw5 A43 B17 B57, B58 B67 DR10 DPw6 A80 B18 B70 B71, B72 DR51 DR15, DR16 と連鎖 C locus B21 B49, B50, B73 DR52 DR3,DR11,DR12, B4005 DR13,DR14 と連鎖 Cw1 B22 B54, B55, B56 B78 DR53 DR4,DR7,DR9 と連鎖 Cw2 B27 B2708 B81 Cw3 Cw9, Cw10 B82 Cw4 Cw5 Bw4 Bw6 B5, B5102, B5103, B13, B17, B27, B37, B38(16), B44(12), B47, B49(21), B51(5), B52(5), B53, B57(17), B58(17), B59, B63(15), B77(15),A9, A23(9), A24(9), A2403, A25(10), A32(19) B7, B703, B8, B14, B18, B22, B2708, B35, B39(16), B3901, B3902, B40, B4005, B41, B42, B45(12), B46, B48, B50(21), B54(22), B55(22), B56(22), B60(40), B61(40), B62(15), B64(14), B65(14), B67, B70, B71(70), B72(70), B73, B75(15), B76(15), B78, B81, B82 Cw6 Cw7 Cw8 赤文字 : ブロード抗原 橙文字 : スプリット抗原太文字はブロードかつスプリット抗原緑文字 : アソシエート抗原参照 URL: この抗原表は WHO で認定された抗原を基に作成されています 日本組織適合性学会の表記法は下記 URL を参照下さい 参照 URL: 50

51 HLA の基礎 ( 付録 ) HLA ClassII DR 領域の遺伝子地図 日本人における DRB1,3,4,5 - DQA1/B1 の連鎖 51

52 HLA の基礎 ( 付録 ) 日本人の HLA 遺伝子頻度表 A Locus No. アリル 頻度 (%) 抗原型 1 A*24: A24 2 A*02: A2 3 A*02: A2 4 A*11: A11 5 A*31: A31 6 A*33: A33 7 A*26: A26 8 A*02: A2 9 A*26: A26 10 A*26: A26 11 A*24: A24 12 A*01: A1 13 A*03: A3 14 A*02: A A*30: A30 16 A*11: A11 17 A*03: A3 18 A*26: A26 19 A*02: A2 20 A*02: A A*32: A32 22 A*24: A24 23 A*24: A24 24 A*29: A29 25 A*68: A68 26 A*26: A26 27 A*30: A30 28 A*24: A B Locus No. アリル 頻度 (%) 抗原型 1 B*52: B52 2 B*51: B51 3 B*35: B35 4 B*15: B62 5 B*40: B61 6 B*54: B54 7 B*44: B44 8 B*07: B7 9 B*40: B60 10 B*40: B61 11 B*46: B46 12 B*39: B B*48: B48 14 B*55: B55 15 B*59: B59 16 B*15: B71 17 B*13: B13 18 B*67: B67 19 B*15: B75 20 B*56: B56 21 B*58: B58 22 B*15: B62 23 B*37: B37 24 B*44: B44 25 B*40: B61 26 B*39: B B*38: B38 28 B*13: B13 29 B*39: B39 30 B*51: B B*27: B27 32 B*56: B56 33 B*55: B55 34 B*15: B62 35 B*27: B27 36 B*15: B75 37 B*15: B62 38 B*39: B39 39 B*08: B8 40 B*07: B7 41 B*14: B14 42 B*40: B 詳細データや元のデータを知りたい方は下記の URL をご覧ください 造血幹細胞移植情報サービス : 公益財団法人 HLA 研究所 : 遺伝子頻度 0.01% 以上を記載しております C Locus No. アリル GF(%) 抗原型 1 C*01: Cw1 2 C*03: Cw9 3 C*07: Cw7 4 C*03: Cw10 5 C*12: Cw12 6 C*08: Cw8 7 C*14: Cw14 8 C*14: Cw14 9 C*04: Cw4 10 C*15: Cw15 11 C*08: Cw8 12 C*07: Cw7 13 C*06: Cw6 14 C*03: Cw10 15 C*05: Cw5 16 C*01: Cw1 17 C*12: Cw12 18 C*07: Cw7 19 C*02: Cw2 20 C*03: Cw10 21 C*08: Cw8 22 C*15: Cw15 23 C*04: Cw DPB1 No. アリル 頻度 (%) 1 DPB1*05: DPB1*02: DPB1*09: DPB1*04: DPB1*04: DPB1*03: DPB1*02: DPB1*13: DPB1*14: DPB1*19: DPB1*06: DPB1*17: DPB1*36: DPB1*41: DPB1*38: DPB1*01: DPB1*08: DPB1*25: DPB1*47: DRB1 No. アリル 頻度 (%) 抗原型 1 DRB1*09: DR9 2 DRB1*04: DR4 3 DRB1*15: DR15 4 DRB1*08: DR8 5 DRB1*15: DR15 6 DRB1*13: DR13 7 DRB1*01: DR1 8 DRB1*08: DR8 9 DRB1*12: DR12 10 DRB1*14: DR14 11 DRB1*04: DR4 12 DRB1*04: DR4 13 DRB1*11: DR11 14 DRB1*14: DR14 15 DRB1*04: DR4 16 DRB1*12: DR12 17 DRB1*14: DR DRB1*14: DR14 19 DRB1*04: DR4 20 DRB1*16: DR16 21 DRB1*13: DR13 22 DRB1*04: DR4 23 DRB1*10: DR10 24 DRB1*07: DR7 25 DRB1*04: DR4 26 DRB1*03: DR17 27 DRB1*14: DR14 28 DRB1*08: DR8 29 DRB1*14: DR DRB1*14: DR14 31 DRB1*13: DR13 32 DRB1*14: DR DQB1 No. アリル 頻度 (%) 抗原型 1 DQB1*06: DQ6 2 DQB1*03: DQ9 3 DQB1*04: DQ4 4 DQB1*03: DQ7 5 DQB1*03: DQ8 6 DQB1*06: DQ6 7 DQB1*05: DQ5 8 DQB1*06: DQ6 9 DQB1*04: DQ4 10 DQB1*05: DQ5 11 DQB1*05: DQ5 12 DQB1*06: DQ6 13 DQB1*06: DQ6 14 DQB1*02: DQ2 15 DQB1*02: DQ 第一区域と抗原名が異なるアリル 抗原型 B62 日本人 HLA アリル B*15:01 B*15:07 抗原型 Cw10 日本人 HLA アリル C*03:02 C*03:04 B75 B*15:11 Cw9 C*03:03 B71 B*15:18 DQ7 DQB1*03:01 B60 B*40:01 B*40:07 DQ8 DQB1*03:02 B61 B*40:02 B*40:03 B*40:06 DQ9 DQB1*03:03 日本人上位 4 位の A-B-C-DRB1-DQB1 ハプロタイプ 順位 アリル 抗原 1 A*24:02 - B*52:01 - C*12:02 - DRB1*15:02 - DQB1*06:01 A24 - B52 - Cw12 - DR15 - DQ6 2 A*33:03 - B*44:03 - C*14:03 - DRB1*13:02 - DQB1*06:04 A33 - B44 - Cw14 - DR13 - DQ6 3 A*24:02 - B*07:02 - C*07:02 - DRB1*01:01 - DQB1*05:01 A24 - B7 - Cw7 - DR1 - DQ5 4 A*24:02 - B*54:01 - C*01:02 - DRB1*04:05 - DQB1*04:01 A24 - B54 - Cw1 - DR4 - DQ4 稀であるが連鎖不平衡が強いハプロタイプ アリル A*03:01 - B*44:02 - C*05:01 - DRB1*13:01 - DQB1-06:03 A*33:03 - B*58:01 - C*03:02 - DRB1*13:02 - DQB1*06:09 A*11:01 - B*67:01 - C*07:02 - DRB1*16:02 - DQB1*05:02 A*01:01 - B*37:01 - C*06:02 - DRB1*10:01 - DQB1*05:01 抗原 A3 - B44 - Cw5 - DR13 - DQ6 A33 - B58 - Cw10 - DR13 - DQ6 A11 - B67 - Cw16 - DR16 - DQ5 A1 - B37 - Cw6 - DR10 - DQ5 52

53 HLA の基礎 ( 付録 ) 疾患感受性と HLA 疾患 関連 HLA オッズ比 強直性脊椎炎 HLA-B27 > 1,000 ナルコレプシー HLA-DRB1*15:01 > 1,000 HLA-DQB1*06:02 > 1,000 インスリン自己免疫症候群 HLA-DRB1*04:06 > 1,000 ベーチェット病 HLA-B51(B*51:01) 9.3 高安動脈炎 HLA-B52(B*52:01) 3.2 HLA-B*39: 亜急性甲状腺炎 HLA-B*35:01 18 HLA-B*67: HLA-B54(B*54:01) 2.5 バージャー病 HLA-DRB1*15: HLA-DRB1*16: 尋常性乾癬 HLA-Cw6 1.7 HLA-Cw7 1.5 関節リウマチ HLA-DRB1*04: HLA-DQB1*04: HLA-B54(B*54:01) 4.8 糖尿病 Ⅰ 型 HLA-DRB1*04:05 4 HLA-DQB1*04: HLA-DRB1*09: 多発性硬化症 ( 大脳 小脳型 ) HLA-DRB1*15: 多発性硬化症 ( 眼神経 脊髄型 ) HLA-DPB1*05:01 9 グレーヴス病 HLA-A2 2 HLA-DPB1*05: 橋本病 HLA-A2 2.1 HLA-DRw 原発性胆汁性肝硬変 HLA-DR8(DRB1*08:03) 2.2 HLA-DR2(DRB1*16:02) 5.9 全身性エリテマトーデス HLA-B HLA-DR2(DRB1*15:01) 3 クローン病 HLA-DRB1*04:05 2 HLA-DQB1*04:01 2 HLA-B52(B*52:01) 4.1 潰瘍性大腸炎 HLA-DR2(B*15:02) 4.5 HLA-DPB1*09: 混合結合組織病 HLA-DRB1*04:01 5 川崎病 HLA-DPB1*02: オッズ比 10 以上を赤で表示しています 53

54 HLA の基礎 ( 付録 ) HLA アリルの表記法 HLA-DRB1 * 13: 01: 01: 02 N 遺伝子シンボル HLA 特異性 アリル名の特定 臨床上重要 同義置換 コード領域外塩基置換 ヌルアリル 表記レベル Low Resolution High Resolution 第 1 区域 第 2 区域 第 3 区域 第 4 区域 13 } アミノ酸配列に違いがある 13: 01 13: 01: 01 13: 01: 01: 02 N } N は第 3 区域に来ることも多い 抗 HLA 抗体の交差反応 (CREG) 54

55 HLA の基礎 ( 付録 ) 移植後 HLA 抗体検査の有用性 HLA 抗体は移植レシピエントの免疫系に存在する抗体で 感作イベント ( 輸血 過去の移植 または妊娠 ) によってもたらされるものと定義されています 最近になって ドナー特異的 HLA 抗体 (DSA) が移植後に出現するかどうかをモニタリングするという考えが 移植関係者の間で大きな関心となっています ドナー臓器に対する抗体の存在は 移植前 移植後を問わず 臨床的に未治療であれば 移植臓器への免疫攻撃をもたらし 結果的に移植片不全や拒絶反応のリスクが高くなります すなわち ドナー特異的 HLA 抗体 (DSA) は同種移植片の内皮を攻撃し その結果 後に抗体関連型拒絶反応 (AMR) が生じると考えられています 従来のマーカーは臓器移植レシピエントの臨床状態を診断する上で役立つとしても それらは概して非特異的で ほとんどの場合 移植片の損傷が生じた後でしか同定できません HLA 抗体は慢性腎不全の発症の一因となることを示す有力な証拠があり これは同種移植腎不全の主な原因です AMR に伴う臨床的に有害な DSA を早期に同定し除去すれば 同種移植片機能損失を予防できると考えられています One Lambda/ Thermo Fisher Scientific 社は DSA の正確な同定が可能な 高い感度で特異性を検出する LABScreen Single Antigen を提供しており 現在 アメリカ合衆国内のほとんどの移植施設で標準治療の診断検査として用いられています 大規模コホート研究では任意の時点において移植レシピエントの約 25% が抗体を保有していることが示されている さらに腎移植におけるこれまでのデータは拒絶反応が生じた同種移植片の最大 96% が何らかのレベルの検出可能な DSA が生じていることを示している 55